乙型肝炎病毒S基因变异与临床

变异是生物界普遍存在的现象，是物种适应生存压力的结果。乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)与其它DNA病毒相比具有很高的变异率。随着研究的深入，表明乙型肝炎病毒S基因变异与乙肝疫苗预防接种失败、HBIG预防移植后肝脏再感染、HBsAg(-)的HBV感染及疾病严重性等均有密切关系。本文就HBV S基因变异及其在临床中的意义作一综述。     

三种基因亚型乙型肝炎病毒感染者的临床资料与病毒学指标差异分析

目的 调查HBV Ba、C1和C2三种基因亚型在临床致病性方面的差异,同时检测并分析三种基因亚型毒株在前C和C基因启动子区发生变异的模式.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对来自广东地区151例慢性HBV感染者血清进行HBV基因亚型分析,同时测定所有标本前C及C基因启动子区的序列.结果 151份样本中Ba亚型占53.0%(80/151),C1亚型占33.8%(51/151),C2亚型占13.2%(20/151).三种亚型的患者在年龄和性别构成比无差异的情况下,其HBeAg阳性率以及多项肝功能指标差异均无统计学意义,但在前C及C基因启动子区的变异模式上存在明显差异:Ba亚型易发生A1896终止密码变异,T1762/A1764变异的发生概率较低;C1亚型易发生T1762/A1764变异,A1896变异发生概率较低;C2亚型发生T1762/A1764和A1896变异的概率介于Ba和C1亚型之间.结论 三种HBV基因亚型毒株可能采取不同的变异模式形成HBeAg阴性HBV感染.     

贵阳地区乙型肝炎病毒YMDD变异与基因分型

本研究旨在了解贵阳地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布，探讨YMDD耐药变异株与基因型的关系。     

乙型肝炎病毒C/D重组体毒株的三种鉴定方法

目的针对HBV C/D重组体在我国西部地区尤其是藏族人群中广泛流行,基因分型时易被错分为D基因型等问题,建立相对准确的鉴定C/D重组体的方法。方法以来自西部地区的25例HBV感染者为例,分别通过PCR片段长度法、S和前C/C基因序列进化树分析法、全基因序列精细分析法对C/D重组体进行鉴定比较。结果 D基因型存在33 bp缺失,在S基因区酶切或测序的基础上,通过跨缺失区段的PCR产物长度可区分D与C/D重组体,该法简单易操作,适于大样本初筛;S和前C/C基因序列进化树分析法可明确鉴定C/D重组体,准确度高;全基因序列精细分析法可对重组类型和重组位点进行精确分析,结果最为可靠。结论根据研究目的不同,应综合考虑运用几种C/D重组体鉴定方法,提高研究的效率和结果的可靠性。     

三种检测乙型肝炎病毒YMDD自然变异方法的比较

目的筛选一种特异性及灵敏性较高的检测乙型肝炎病毒YMDD自然变异的方法。方法通过分子克隆的方法,构建YMDD、YVDD及YIDD三种质粒;通过检测不同比例混合的质粒,比较PCR产物直接测序法、单探针特异性荧光PCR技术及引物特异性荧光PCR技术三种检测方法。结果经酶切鉴定及直接测序鉴定,显示三种质粒构建成功;当待测模板占总模板的比例大于20%时,直接测序法才能准确检测;当突变株占总毒株的比例占50/51时,单探针特异性荧光PCR法才能判定该样品为YMDD变异型;当突变株占总毒株的比例高于1/11时,引物特异性荧光PCR技术非特异结合的影响可忽略,具有很好的特异性,同时具有较高的灵敏性,检测突变株占总毒株的最低比例可达到1/11。结论引物特异性荧光PCR技术特异性及灵敏性较高,适合用于乙型肝炎病毒YMDD自然突变株的检测。     

135例乙型肝炎病毒感染者基因分型及其临床分布

目的研究乙型肝炎病毒（HBV）感染者中HBV基因分型及其临床分布情况。方法应用基因型和亚型特异性引物聚合酶链反应（PCR）法,对鲁西地区135例HBV感染者血清进行HBV基因型及亚型分型。结果未分型11例,已分型124例。其中C型111例（C2基因亚型87例、非C1／C2亚型24例）;B型11例,其中Ba型8例、Bj型3例;B／C混合型2例均为BaC2亚型混和感染。在肝硬化和重度慢性乙型肝炎中C型所占比例较高,分别为100％、88％;无症状携带者中B型所占比例较高为8．51％;HBV基因型分型与性别无关。结论鲁西地区HBV感染者以C基因型为主,其中C2亚型占优势。     

乙型肝炎病毒的基因型及临床意义

自1988年首次提出乙型肝炎病毒(hepatitis B virus.HBV)基因型以来。关于HBV基因型的研究不断深入,发现不同基因型感染后,临床的病情进展和治疗反应有所差异。虽然各研究结果间有的观点相同,有的观点不同.但这些初步研究结果都为进一步明确HBV基因型的确切临床意义奠定了必要的基础。已知1b型和4型丙型肝炎病毒感染人体后对干扰素治疗的敏感性低于其他基因型;6型和11型人乳头瘤病毒感染常常引起尖锐湿疣。而16、18型则与宫颈癌前病变有关。提示病毒基因型与临床之间确切的关系依病毒不同而有区别。要明确HBV基因型与临床的确切关系,还有待传染病学工作者不断努力,去伪存真,用科学的方法     

HBV基因分型的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个影响全球的健康问题.HBV有8种基因型,呈地域性分布.研究表明HBV基因型对慢性HBV感染的自然病程、临床结局、抗病毒治疗等具有影响.A基因型与C基因型与严重的肝损害相关;A基因型与B基因型对干扰素的应答率分别较D基因型与C基因型均更高;有研究发现HBV的基因型可能影响HBV的传播途径.然而,目前大多数临床资料来自亚洲及对B、C基因型的相关研究,基于基因型的地域性分布,对HBV基因型的全面认识,还有待进一步的国际化合作.     

拉米夫定治疗乙型肝炎病毒B、C基因型疗效比较

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)基因型对拉米夫定抗病毒疗效的影响。 方法 回顾调查235例拉米夫定治疗组和对照组患者的临床资料。 结果 135例患者接受拉米夫定抗病毒治疗,对照组100例。HBV优势基因型是B型和C型,拉米夫定治疗组有效率分别为92.9％和75.9％(x2=6.628,P<0.05),对照组有效率分别为9.8％和8.5％(P>0.05);YMDD变异发生率治疗组为3.6％和16.5％(x2=5.508.P<0.01)。结果发现,B基因型、丙氨酸氨基转移酶升高、HBV DNA低水平是抗病毒应答预测因素。 结论B基因氆HBV对拉米夫定的应答率优于C型,YMDD变异发生率低于C型,基因型是影响拉米夫定疗效和决定变异的重要因素之一。     

黄石地区慢性无症状乙型肝炎病毒携带者的基因型分布

目的：了解湖北黄石地区慢性无症状乙型肝炎病毒（HBV）携带者HBV基因型的分布，及其与病毒复制水平、HBeAg表达的相关性。方法：选择黄石地区168例慢性无症状HBV携带者作为研究对象，HBV基因型采用PCR微板核酸杂交．ELISA方法检测；血清HBVDNA复制水平采用荧光定量PCR检测；HBV—M采用ELISA法检测。结果：168例慢性无症状HBV携带者中HBVDNA阳性者为114例（阳性率为67．9％），其基因型分布为B、C、D型以及这3种基因型组成的混合型，而未发现A、E、F基因型。其中以B型、C型为主，所占比例为62．6％和36．8％，D型及混合型比例均为5．3％。C基因型患者中，HBV DNA呈现高水平复制（10^7～10^8 Copies／ml）的患者比例为26．2％（11／42），B基因型为13．3％（8／60）（P〈0．05）。C基因型患者血清抗-HBe阳性率（40．5％）显著高于B基因型（15．0％）（P〈0．01）。结论：黄石地区存在HBV的B、C、D基因型，以及由它们组成的混合基因型；B基因型为优势基因型；C基因型与HBV高复制水平，以及基因变异相关。     

乙型肝炎病毒基因分型及其临床意义

目的了解慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV基因分型及其对慢性肝病的影响,为制定针对不同HBV基因型抗病毒的个体化方案提供分子病毒学依据。方法临床确诊的慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化及肝癌患者314例,采用RDB法对HBV进行基因分型检测。结果山西地区的200例慢性乙型肝炎患者所感染的HBV均为B和C基因型,分别占56%、26%,并存在混合感染(17%);C与B基因型患者相比,血清病毒载量高、肝脏损伤严重;混合感染的患者与单一基因型感染者相比病毒载量更高、肝损伤更严重;肝硬化患者感染的HBV主要为C基因型及B、C混合感染,且肝损害严重、病毒复制率高;肝癌患者中C基因型感染占42.19%,B、C混合感染占37.5%,B基因型感染可能与年轻患者肝癌的发生有关。结论B基因型HBV感染与C基因型及混合感染相比,病毒载量低、肝损害轻,但年轻患者应监测肝癌的发生;C基因型及混合感染的患者预后较差,肝硬化、肝癌发生率高,应进行积极有效的治疗,防止严重肝病发生。     

乙型肝炎病毒基因型(A-F)多引物PCR分型法的初步建立

目的：建立一种简便易行的乙型肝炎病毒基因分型方法（只需PCR）。方法:对GenBank中查获的114例HBV全序列进行比较分析，找出每种基因型相对于其他5种基因型的独特序列，并根据这些独特序列设计出6对分别针对A－F基因型的特异引物。用这6对引物分别对标本进行PCR，根据阳性结果判断出标本的基因型。进一步简化该方法，用多引物对PCR法（PCR with several primer sets in a single tube,Multiplex PCR)将B，C，D3种基因型的特异引物混合进行PCR，根据扩增片断的大小判断基因型。用此方法对已鉴定的B，C，D型标本进行比较和验证。结果：单引物对PCR与多引物对PCR的分型结果一致，且与以前用PCR－RFLP法的分型结果一致。结论：用多引物对PCR分型法准确易行，灵敏性高，便于推广应用。     

厦门市乙型肝炎病毒亚基因型分布的初步研究

目的探讨厦门地区乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布情况。方法应用混合性型特异性引物聚合酶链反应法结合琼脂糖电泳，根据PCR产物片段大小直接判定HBV基因型；应用PCR扩增全S基因序列-DNA测序-生物信息学分析方法确定部分样本的亚基因型，并探讨前前S区编码的流行情况。结果在217例可以通过混合性型特异性引物聚合酶链反应法确定基因型的感染者中，B型83例（38．2％）、C型71例（32．7％），B／C混合型63例（29．0％）。HBeAg阳性患者中感染B基因型占50％，B／C型混合感染占22％；抗-HBe阳性患者中B／C型混合感染36％，B型38％；在慢性乙型肝炎患者中，以B基因型多见（46％），在肝硬化和肝癌患者中，以C（41％和42％）或B／C混合基因型（38％和33％）感染为主；20例患者血清经过DNA测序-生物信息学分析方法确定了亚基因型，其中B2亚型2例，C2亚型18例，其中混合性型特异性引物聚合酶链反应判断为B型的4例经过测序分析为C2亚型。B2亚型不编码前前S区，18例C2亚型均编码前前S区。结论本研究提示厦门地区乙型肝炎患者群的HBV基因型B、C型的感染率大致相同，亚基因型分析提示C2亚基因型占90％，可能是B／C基因型重组的结果。C2亚基因型病毒株均编码前前S区，提示前前S区的编码可能具有亚基因型特异性。     

慢性乙型肝炎患者HBV基因型和哑型分布调查

目的研究慢性乙型肝炎患者HBV基因型和亚型流行情况。方法应用HBV基因型和亚型特异性引物PCR法对北京、长春、大连、西安、石家庄、郑州和合肥7个城市660份HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者血清进行基因型和亚型分析。结果在660份HBV DNA阳性血清中,B基因型、C基因型和B／C混合感染分别为16．67％（110／660）、74．54％（492／660）和8．79％（58／660）;在C基因型中,C1亚型6例（1．22％）、C2亚型473例（96．14％）、C1／C2混合基因亚型13例（2．64％）;B基因型均为Ba亚型,B基因型和C基因型混合感染者均为Ba与C2亚型混合感染,未发现其他基因型和基因亚型;不同基因型感染患者HBeAg阳性率差异无统计学意义（P=0．153）;B基因型和C基因型患者之间血清HBV DNA水平差异无统计学意义（6．37±1．62lg copies／ml对6．29±1．76lg copies／ml）,但均高于B和C基因型混合感染患者（5．25±1．65lg copies／ml）。结论这7个城市慢性乙型肝炎患者以B基因型和C基因型感染为主,有部分B／C基因型混合感染。HBV亚型以Ba和C2亚型占优势。     

Detection of hepatitis B virus genotypes using oligonucleotide chip among hepatitis B virus carriers in Eastern China

AIM： TO determine the genotype distribution of hepatitis B virus （HBV） with a newly oligonucleotide chip assay among the HBV carriers in Eastern China. METHODS： An assay using oligonucleotide chip was developed for detection of HBV genotypes in serum samples from HBV DNA-positive patients in Eastern China. This method is based on the principle of reverse hybridization with Cy5-labeled amplicons hybridizing to type-specific oligonucleotide probes that are immobilized on slides. The results of 80 randomly chosen sera were confirmed by direct sequencing. RESULTS： HBV genotype B, C and mixed genotype were detected in 400 serum samples, accounting for 8.3% （n = 33）, 83.2% （n = 333）, and 8.5% （n = 34）, respectively. The evaluation of the oligonucleotide assay showed 100% concordance with the amplicon phylogenetic analysis except 9 mixed genotype infections undetected by sequencing. CONCLUSION： The study indicates that HBV genotype C and B prevail in the Eastern China. It is suggested that the oligonucleotide chip is a reliable and convenient tool for the detection of HBV genotyping.     

新疆地区汉族人群乙型肝炎病毒基因型的分布及其与临床类型的关系

本研究旨在通过型特异性引物巢式聚合酶链反应（PCR）的方法检测新疆地区汉族人群乙型肝炎病毒（HBV）患者HBV基因型并探讨与临床类型的关系，现将结果报道如下。     

Hepatitis B virus genotyping by enzyme-linked immunosorbent assay in Taiwan

Purpose  

Restriction fragment length polymorphism (RFLP) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with monoclonal antibodies (mAbs) were used in this study to detect genotypes of HBV, and the efficiency and precision of ELISA using the mAbs for HBV genotype detection were also estimated.     

Preliminary report of hepatitis B virus genotype prevalence in Iran

AIM: To determine the prevalence of hepatitis B virus (HBV) genotypes in Iranian hepatitis B surface antigen (HBsAg) carriers, chronic hepatitis B and cirrhotic patients. METHODS: A total of 109 HBsAg-positive patients were included in this study. HBV genotypes were determined by using INNO-LiPA methodology which is based on the reverse hybridization principle. RESULTS: The distribution of patients with different stages of liver disease was as follows: 95 (86.4%) chronic hepatitis, 11 (10%) liver cirrhosis, and 3 (2.7%) inactive carrier. Of the chronic hepatitis and liver cirrhosis patients, 26.4% were HBeAg-positive while 70% were HBeAg-negative. Genotype D was the only detected type found in all patients. CONCLUSION: Classifying HBV into genotypes has to be cost-effective and clinically relevant. Our study indicates that HBV genotype D prevails in the Mediterranean area, Near and Middle East, and South Asia. Continued efforts for understanding HBV genotype through international co-operation will reveal further virological differences of the genotypes and their clinical relevance.