活化淋巴细胞及其染色质诱导抗体核抗体生成

目的 诱导抗双链ＤＮＡ抗体和其它抗核抗体生成的免疫原是什么？迄今不明。本研研究试图阐明不同原因活化的淋巴细胞是诱导抗核抗体生成的免疫原。方法 用丝裂原（ＣｏｎＡ／ＬＰＳ）或ＩＬ－２活化淋巴细胞及其染色质免疫同系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用ＥＬＩＳＡ测定ＩｇＧ抗ｄｓＤＮＡ抗体,用免疫荧光法检测抗体核型和免疫复合物沉积,用免疫印迹法测定抗Ｓｍ和抗ＲＮＰ等抗核抗体。结果 上述原因活化的淋巴细胞及其活性染色质均能     

活化淋巴细胞及其染色质诱导IgG1亚类抗双链DNA抗体生成

目的：抗双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）抗体的诱生机理不明，试图研究诱导该自身抗体产生的自身抗原。方法：取体外活化的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠脾细胞及其染色质免疫同系小鼠，用ＥＬＩＳＡ方法检测ＩｇＧ类双链ＤＮＡ抗体及其ＩｇＧ亚类。结果：水同原因活化的脾细胞及其染钯质均可诱导ＩｇＧ类抗双链ＤＮＡ抗体产生，且抗体均为ＩｇＧ１亚类。结论：活化淋巴细胞及其活性染色质是诱导双链ＤＮＡ抗体生成的自身免疫原。     

活性染色质诱导抗核抗体生成及肾损伤

系统性红斑狼疮 (SLE )的病因和诱导抗核抗体 (ANA )生成的激发原迄今不明。本实验试图用ConA活化淋巴细胞的染色质免疫同系BALB/c小鼠 ,寻找诱导ANA生成的真正免疫原 ,阐明SLE发生的激发原是自身活化细胞的核成分 ,而且证明它所诱导的ANA具有致病性。从ConA活化的脾细胞中提取染色质 ,然后免疫同系BALB/c小鼠 ,用ELISA方法测定IgG类抗双链DNA (dsDNA )、抗组蛋白抗体 ,用免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物沉积 ,用免疫印迹法测定抗核抗体谱 ,在光镜下检测肾损伤及电镜下检测肾小球沉积物 ,用考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量。结果显示 ,活性染色质能诱导IgG类抗dsDNA、抗组蛋白等多种抗核抗体生成 ,且肾小球有显著免疫复合物沉积和蛋白尿形成。该实验表明 ,活化淋巴细胞的染色质是诱导SLE发生的真正自身免疫原。     

淋巴细胞的活化和抗核抗体的生成

抗核抗体 (ANA )是系统性风湿性疾病的标志性抗体。然而 ,有关ANA产生的启动原目前尚不完全清楚。我们自 90年代初开始了ANA启动原的研究 ,获得了一系列研究结果 ,从而提出以下ANA生成的启动原的新观点 :(1 )自身核抗原的改变是驱动ANA生成的启动原 ;(2 )活化淋巴细胞的核抗原发生量与性质的改变 ,是引起ANA生成的最主要原因 ;(3 )系统性红斑狼疮 (SLE )患者外周血B和T淋巴细胞已被活化 ;(4)在一定条件下活化淋巴细胞才能诱导ANA生成 ;(5 )ANA生成是有规律的 ,先出现少数ANA ,后陆续出现众多ANA ,即表位扩展 ;(6 )SLE反应 (自身免疫性 )在一定条件下可发展成SLE样病 (自身免疫病 )。此观点对临床免疫学和基础免疫学的研究将有重要意义     

活化淋巴细胞及其染色质诱导抗核抗体生成

系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)是自身免疫病的原型 ,其最重要特征是血清中出现以抗双链ＤＮＡ(ｄｓＤＡＮ)、抗Ｓｍ等为主的致病性抗核抗体 (ＡＮＡ)。阐明抗ｄｓＤＮＡ和抗Ｓｍ抗体生成的机制 ,对了解ＳＬＥ发病机制有重要意义。虽然多种假说来解释ＡＮＡ生成的机理 ,但许多证据提示是抗原驱动ＡＮＡ生成。令人困惑不解的是哺乳类动物ｄｓＤＮＡ、组蛋白、核小体等核成分并不具有免疫原性 ,因此启动生成的激发原迄今不明。一、活化的淋巴细胞同系免疫诱导抗核抗体生成1 细菌活化的淋巴细胞 :1 996年 ,我们首次发现经空肠弯曲菌 (ＣＪ- 1 0 1 )…     

组蛋白诱导抗核抗体产生及其对肾脏损害

目的 寻找系统性红斑狼疮中诱导抗核抗体（ANA）生成的真正的自身核成分免疫原。方法 从Con A活化的脾淋巴细胞中提取组蛋白免疫同系BALB／c小鼠,ELISA方法测定IgG类抗组蛋白、抗dsDNA抗体,免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物在肾小球内的沉积,免疫印迹法测定抗可溶性核抗原抗体,考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,光镜下观察肾脏形态变化,电镜下观察肾小球电子致密物。结果 活性组蛋白诱导IgG类抗组蛋白、抗dsDNA等多种抗核抗体生成,且诱发同系小鼠产生SLE样肾脏病理变化。结论 活性组蛋白是诱发抗核抗体生成、造成肾损害的免疫原之一。     

抗钙调素抗体与人淋巴细胞凋亡

钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）是真核细胞中的Ｃａ２＋结合蛋白。Ｃａ２＋／ＣａＭ复合物在多个位点上参与细胞周期调控,促进细胞增殖与分化。抗ＣａＭ抗体可穿入淋巴细胞并干扰其功能,在自身免疫病发病机制中可能起作用［１］。本实验用抗ＣａＭ抗体与人淋巴细胞作用,并以抗Ｓｍ抗体为对照,研究其与细胞凋亡的关系。１　材料和方法１－１　抗体　兔抗ＣａＭ抗体和鼠抗ＣａＭ单抗（自制）。抗ＣａＭ阳性血清、抗Ｓｍ阳性血清分别筛选自甲亢和ＳＬＥ患者。抗ＣａＭ水平设定参照文献［２］进行。１－２　淋巴细胞分离与培养　常…     

间接ELISA检测抗核抗体及其临床应用

用小鼠肝细胞核包被聚苯乙烯反应板建立了间接ＥＬＩＳＡ法检测抗核抗体。通过特异性、精密度试验，达到方法学要求。对临床５１例病人检测，与间接荧光抗体法比较，两种方法检出率无明显差异（ｘ２＝３．６７Ｐ＞０．０５）。可进行半定量分析及大批量操作。     

抗核抗体和抗核抗体谱在系统性红斑狼疮中的价值探讨

目的 探讨检测抗核抗体和抗核抗体谱在诊断系统性红斑狼疮中的应用价值.方法 选取我院风湿免疫科确诊为系统性红斑狼疮(SLE)的患者50人为实验组,其它结缔组织病患者104例,包括干燥综合征(SS)14例、类风湿关节炎(RF)62例、混合性结缔组织病(MCTD)28例和非自身免疫病患者53例为对照组.检测其ANA定量值和A...     

活化淋巴细胞与慢性GVHR诱导的SLE样小鼠模型的比较

目的 :将本室建立的用活化淋巴细胞诱导的系统性红斑狼疮 (SLE)样小鼠模型与国际上公认的用慢性GVHR诱导的SLE样小鼠模型进行比较 ,进一步探索SLE的发病机理。方法 :分别将亲代Balb c小鼠淋巴细胞经静脉和用ConA活化的(Balb c×C5 7BL 6 )F1代小鼠淋巴细胞经皮下途径输入F1代小鼠 ,用ELISA测定IgG类抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体 ,用免疫荧光法检测抗核抗体 (ANA)荧光核型和肾小球内免疫复合物沉积 ,用免疫印迹法检测抗可溶性核抗原 (ENA)抗体。结果 :亲代淋巴细胞免疫F1代小鼠所致的慢性GVHR和活化F1代小鼠淋巴细胞均可诱导F1代小鼠产生高滴度的抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体等ANA ,并且肾脏都有明显的IgG类免疫复合物沉积。但亲代淋巴细胞免疫组ANA核型以颗粒型、核仁型为主 ,ENA多肽谱多在 32、47、6 7kD处显色 ;而活化淋巴细胞免疫组以胞浆型、周边型、均质型为主 ,ENA多肽谱在 2 8、47、6 7kD处显色。结论 :这 2种方法均可诱导出SLE样综合征 ,但其抗核抗体谱有所不同。     

Anticardiolipin,glutamic acid decarboxylase,and antinuclear antibodies in epileptic patients

To explore the hypothesis that raised anticardiolipin antibodies, glutamic acid decarboxylase, and antinuclear antibodies may be associated with epilepsy and/or pharmacoresistance, we studied titers in 74 epileptic patients and 50 controls. Epileptic patients were divided into two groups according to their response to anticonvulsant therapy. Group I included 52 children (30 females and 22 males with a mean age±SD of 7.0±2.4 years) suffering from different types of epilepsy who were treated with various anticonvulsants. Group II included 22 children (10 females and 12 males with a mean age of 6.2±3.6 years) suffering from therapy resistant epilepsy. We found that the prevalence of anticardiolipin antibodies was significantly higher in epileptic patients than in controls, while there was no significant difference between patients who were seizure free and those with uncontrolled epilepsy. No significant difference was found in glutamic acid decarboxylase antibodies between epileptic children and controls, and between patients who were seizure free and those with uncontrolled epilepsy. A significant difference in the incidence of antinuclear antibodies was found between epileptic children and controls, while no difference was found between well-controlled and drug-resistant epilepsy. In conclusion, the prevalence of anticardiolipin and antinuclear antibodies was higher in patients with epilepsy than in controls. There was no significant difference in serum glutamic acid decarboxylase antibodies between epileptic children and controls, and between patients who were seizure free and those with uncontrolled epilepsy. Received: 10 October 2002 / Accepted: 18 February 2003 Correspondence to A. Verrotti     

抗核抗体与抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断上的应用

目的探讨抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)和抗核抗体谱(antinuclear antibodies spectrum,ANAs)联合检测在自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)诊断上的应用方案及价值,从而降低现症及潜在AID患者的漏检率。方法对1 231份本院门诊和住院疑似AID患者的血清标本分别采用间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)和免疫印迹法(immumoblottest,IBT)检测ANA和ANAs,对其中IIF-ANA1∶100(-)/IBT-ANAs(+)标本分别进行1∶10及1∶32稀释后采用IIF检测ANA,最后对上述检测结果进行统计分析。结果 1 231份血清标本中ANA阳性414份,占33.63%,ANAs阳性429份,占34.85%。按不同检测方案进行分组,发现同时检测IIF-ANA与IBT-ANAs的方案对确诊/疑似AID病人检出率最高(43.05%),分别与应用IIF-ANA进行AID的初筛的方案、仅检测IBT-ANAs的方案相比均有统计学意义(χ2=23.12,P<0.05,χ2=17.42,P<0.05)。对116份(9.42%)IIF-ANA 1∶100(-)/IBT-ANAs(+)的标本分别进行1∶32及1∶10稀释后再采用IIF检测ANA,发现其中103份标本ANA荧光结果≥1∶32,10份标本ANA荧光结果<1∶32而≥1∶10,3份标本ANA荧光结果<1∶10;将标本增加1∶32和1∶10稀释度可将AID确诊/疑似病例检出率分别提高8.37%(χ2=20.84,P<0.05)与9.18%(χ2=24.70,P<0.05),但二者之间相比则无统计学意义(χ2=0.17,P>0.5)。结论 IIF-ANA可应用于大范围AID病人初筛以减轻病人经济负担及实验室工作量压力。但是仅检测IIF-ANA或IBT-ANAs均可导致临床上患有AID或潜在的AID病人的漏检。联合检测IIF-ANA和IBT-ANAs,尤其是对临床高度怀疑AID、且ANA荧光结果≥1:32的标本进行IBT-ANAs的检测可显著提高检出率,从而降低现症及潜在AID患者的漏检率。     

D-penicillamine- and quinidine-induced antinuclear antibodies in A.SW (H-2s) mice: similarities with autoantibodies in spontaneous and heavy metal-induced autoimmunity

Ten percent of human lupus syndromes occur in patients as a result of treatment with certain medications. H-2^s mice can produce autoantibodies following treatment with various drugs or heavy metals and they are a potential animal model of drug-induced lupus. We have examined nine anti-chromatin monoclonal antibodies (mAb) from A.SW mice that had been treated with either D -penicillamine or quinidine, two lupus-inducing drugs in humans. These mAb are specific either for DNA or histone-DNA complexes corresponding to nucleosomes or subnucleosome particles. Only one mAb reacts with an unknown chromatin antigen. The V region sequences of six of these mAb were studied and are notable by several features. As previously observed in spontaneous autoantibodies to DNA or histone-DNA complexes, arginine or asparagine residues are found at critical locations throughout the V regions. Many of these residues, potentially important for binding to DNA or DNA-histone complexes, result either from somatic mutations or atypical V_H-D-J_H rearrangements. Another significant characteristic is that the V_H genes of several D -penicillamine- or quinidine-induced mAb are most similar to those of anti-nucleolar mAb obtained from mercury-injected A.SW mice. The implications of these findings for the pathogenesis of spontaneous or induced autoimmunity are discussed.     

87例抗核抗体斑点型阳性患者血清特异性抗核抗体谱分析

目的探讨血清斑点型抗核抗体（ANA）与特异性抗核抗体谱（ANAS）中不同项目阳性组合之间的相关性。方法分析87例斑点型ANA阳性病例的抗ANAS（抗Ul-nRNP、Sm、SS-A、SS—B、Scl-70、Jo-1、SCL-70、PM—Scl、centromereB、nukleosome、PCNA、ds—DNA、histones、ribosomal—Pprotein、AMA-M2抗体）多肽谱类型。结果斑点型ANA的特异性ANAS不同项目阳性组合类型达到23种,除SCL-70、PM—Scl外,其他13种特异性ANAS成分均见阳性。ds—DNA阴性的histone、Sm、nukleosome、PCNA、Rib-P．P单独阳性或合并其他抗体阳性率高达19．5％（17／87）,联合检测这些抗体能提高系统性红斑狼疮（SLE）诊断的敏感性。ANAS阳性率与ANA滴度之间没有绝对关系。结论不能简单地依据荧光核型来推断抗ANAS抗体的具体类型;多项指标联合检测能提高诊断疾病的敏感性和特异性;斑点型ANA低滴度时也应作特异性ANAS检测。