地塞米松对大鼠慢性肺动脉高压血管内皮生长因子表达的影响

低氧时血管内皮生长因子(VEGF)表达明显增加。地塞米松能抑制体外诱导的人动脉平滑肌细胞VEGF mRNA表达。本实验旨在探讨地塞米松对大鼠低氧性肺动脉高压的影响及机制。     

氯化钴体外诱导人胃癌细胞COX-2表达的研究

研究证实,多种恶性肿瘤组织内存在低氧区,其产生与肿瘤生长迅速、肿瘤血管结构异常等有关。而低氧可诱导包括血管内皮生长因子(VEGF)在内的多种促血管生长因子表达,促进肿瘤生长。环氧合酶(COX)是催化花生四烯酸转化为前列腺素类代谢中的限速酶,环氧合酶-2(COX-2)呈诱导性表达,为其同工酶,在多种肿瘤组织中表达升高。多项细胞水平的研究表明,低氧可以刺激多种细胞表达COX-2,还可以诱导多种细胞COX-2、VEGF共表达;     

低氧诱导人VEGF基因表达载体的构建及其蛋白表达检测

目的以人血管内皮细胞生长因子（hVEGF）基因的低氧反应元件（HRE）作为增强子,构建含HRE的真核表达载体,探讨含HRE不同拷贝数的载体对低氧的反应状态。方法将人工合成的HRE串联后与CMV启动子连接,替换pcDNA3.1的启动子部分,构建成低氧诱导真核表达载体;将hVEGF基因重组到此载体中,转染BHK细胞。用免疫组化染色法检测VEGF的表达,用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测低氧前后细胞hVEGF表达的变化。结果成功构建了含HRE的低氧诱导真核表达载体4HRE-pcDNA-VEGF和6HRE-pcDNA-VEGF。转染细胞后进行低氧培养,VEGF的表达均增高,含6HRE的低氧诱导作用高于4HRE。结论在含HRE的真核表达载体中,低氧时可诱导基因的表达,其拷贝数可影响诱导作用的强度。     

血管内皮生长因子和低氧性肺动脉高压

血管内皮生长因子(VEGF)是一重要的有丝分裂原及通透性因子,具有促进内皮细胞增殖,新生血管形成,增加微血管通透性等功能。本文重点介绍了VEGF及其受体的特性以及有在低氧性肺动脉高压形成中的意义和调节,为从基因水平治疗肺动脉高压提供一新的途径。     

血管内皮生长因子基因多态性与2型糖尿病神经病变遗传易感性

糖尿病神经病变(DPN)是重要的糖尿病微血管病变.研究表明遗传因素在糖尿病微血管病起重要作用[1].血管内皮生长因子(VEGF)基因启动子区有18 bp的核苷酸序列称为低氧反应元件(Hypoxia response element,HRE),当低氧发生时,HRE可以使VEGF表达量升高,刺激内皮细胞增殖和新生血管形成,继而引发糖尿病血管病变的发生.     

027 血管内皮生长因子和低氧性肺动脉高压

血管内皮生长因子(VEGF)是一重要的有丝分裂原及通透性因子,具有促进内皮细胞增殖,新生血管形成,增加微血管通透性等功能.本文重点介绍了VEGF及其受体的特性以及在低氧性肺动脉高压形成中的意义和调节,为从基因水平治疗肺动脉高压提供一新的途径.     

低氧诱导因子-1对血管内皮生长因子的调控

低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是1992年由Semenza[1]对经缺氧处理HepG2和Hep3B细胞株的核提取物进行分析时发现的.它是哺乳动物机体功能在缺氧条件下的一个重要的氧依赖转录激活因子,通过与低氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)结合,引发下游诸如促红细胞生长素(EPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等基因的转录,从而影响红细胞生成、血管发生、细胞凋亡和增殖等生理及病理过程,并使机体产生一系列的适应缺氧反应.而VEGF是机体内最主要的血管生长因子,对促进血管新生有着极其重要的作用.     

低氧反应元件对大鼠骨骼肌成肌细胞转染表达血管内皮生长因子基因的调控作用

目的:研究低氧反应元件(HRE)对血管内皮生长因子(VEGF)基因121在原代培养大鼠骨骼肌成肌细胞中转染表达的调控作用。方法:利用分子生物学方法,构建pEGFP-C3-9HRE-CMV-VEGF121载体,通过脂质体介导将其转染到原代培养的大鼠骨骼肌成肌细胞中。在不同低氧浓度及不同缺氧时间下培养,通过RT-PCR、Western-Blot及荧光显微镜检测转基因成肌细胞的基因表达情况。结果:低氧浓度组可见明显目的基因条带,且随着氧浓度的降低及缺氧时间的延长,目的基因表达增强;低氧环境下,转染后的成肌细胞表达VEGF121蛋白产物明显增加;低氧环境下可见报告基因EGFP表达,常氧环境下未见报告基因表达。结论:以多拷贝HRE构建低氧启动子插入VEGF基因上游,可作为控制VEGF基因表达的开关,这对于防止VEGF基因转染的成肌细胞移植后VEGF基因过度表达所引起的安全问题,提高基因治疗的安全性有重要意义。     

反义血管内皮生长因子腺病毒基因感染对类风湿关节炎滑膜细胞VEGF基因转录的影响

目的 观察反义血管内皮生长因子(VEGF)165腺病毒对滑膜细胞VEGF基因转录的影响。方法 将反义VEGF165腺病毒转染滑膜细胞，通过Northern-blot的方法检测其对VEGF的基因转录的影响。结果 Northem杂交结果显示：反义基因转染滑膜细胞3d后，VEGF165基因的转录即受到明显抑制，4d抑制更加明显，5d后几乎检测不出阳性杂交信号。结论 反义VEGF165腺病毒感染滑膜细胞后可以阻断VEGF基因的转录过程，从而抑制VEGF蛋白质的翻译和表达。     

低氧诱导星形胶质细胞血管内皮生长因子表达

目的探讨低氧环境对体外培养的胎鼠大脑星形胶质细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用孕16d的SD胎鼠大脑组织培养星形胶质细胞,实验分为正常组(正常培养,5%CO_2,95%空气,37℃,绝对湿度)和低氧组(低氧培养,5%CO_2,2%O_2,93%N_2,37℃、绝对湿度)。MTT实验观察细胞经2、4、6、8、10h低氧培养后细胞增殖情况,免疫荧光染色观察细胞经4、8、12、24、32h低氧培养后VEGF表达的变化。结果低氧组胶质细胞增殖除6h与正常组无差异外,2、4、8、10h较正常组均明显增高,差异有统计学意义(P0.05);低氧组8、12h VEGF表达明显高于正常组,24、32h VFGF表达明显低于正常组(P0.05)。结论低氧培养短期可促进星形胶质细胞增殖,VEGF表达升高,长期低氧可至星形胶质细胞损伤,VEGF表达下降。     

血管内皮生长因子对培养内皮细胞增殖和移行的影响

目的　研究低氧培养心肌细胞分泌出的血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白对培养内皮细胞增殖和移行的影响。方法　将培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)分为 4组 :正常对照组 ,低氧培养组 ,含VEGF的低氧培养心肌细胞分泌液组 (分泌液组 ) ,分泌液 +低氧培养组。分别采用流式细胞仪、免疫组织化学等方法检测VEGF对HUVECs细胞周期、增殖细胞核抗原表达、氚一亮氨酸掺入量及HUVECs移行的影响。结果　VEGF增加正常培养和低氧培养HUVECs由静止期 DNA合成前期向DNA合成期的转换 ,使DNA合成期及DNA合成后期 分裂期细胞数增加 ,从而促进HUVECs增殖 ,并使常氧和低氧培养HUVECs增殖细胞核抗原的表达、氚一亮氨酸掺入量及移行细胞数目增加。低氧抑制HUVECs的增殖和移行 ,VEGF可拮抗低氧对HUVECs增殖、移行的抑制作用。结论　低氧培养心肌细胞分泌出的VEGF蛋白不仅增加常氧培养HUVECs增殖、移行 ,而且能够拮抗低氧的抑制作用     

血管内皮生长因子用于治疗性血管生成的问题及对策

生理和病理性血管生成中,血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是主要的血管生成因子。VEGF促血管生成的能力在动物和临床中已得到了广泛的研究。然而,越来越多的证据显示新生血管结构需要获得稳定,以避免水肿和形成血管瘤等不良反应。而且VEGF在促进血管生成的同时,也可能促进粥样斑块的生长。通过调节VEGF表达时间和表达量,或联合使用血小板衍生生长因子BB(plateletderivedgrowthfactorBB,PDGFBB)等“成熟”因子,有可能产生成熟的血管。导入不同基因到同一细胞以获得能同时表达“生长”和“成熟”因子的细胞,使细胞介导的基因转移在治疗性血管生成中具有独特价值。另一个可选择的策略是使用可调控多种血管生成因子表达的转录因子。     

间歇低氧对人脐静脉内皮细胞中血管内皮生长因子的影响

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAS)的主要病理生理过程是间歇低氧,即反复短暂缺氧继之再氧合过程,与众多心血管疾病相关.其中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发挥了重要作用.本研究通过建立间歇低氧细胞模型,测定间歇低氧条件下内皮细胞中VEGF含量的变化,探讨OSAS相关心血管疾病的发病机制.     

胰岛素通过激活P13K/mTOR通路诱导人肾小系膜细胞血管内皮细胞生长因子转录

目的 探讨胰岛素诱导人肾小球系膜细胞(HMC)血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转录机制. 方法 (1)用VEGF报告质粒或低氧诱导因子1(HIF-1)结合位点畸变的VEGF mut报告质粒转染HMC,荧光素酶分析法检测其转录活性;(2)应用Real-time PCR、Western blot法分别检测HIF-1α mRNA和蛋白表达. 结果 (1)胰岛素呈剂量依赖性增加VEGF基因转录,在100nmol/L时达高峰,为未刺激组的2.14±0.17倍(P<0.01),但对转染VEGF mut报告质粒的HMC VEGF基因转录无影响;(2)Ly294002和雷帕霉素均可抑制胰岛素诱导的VEGF基因转录(P<0.01);(3)胰岛素呈时间依赖性上调HIF-1α蛋白表达,4h达高峰,为对照组的2.35±0.35倍(P<0.01),但对其mRNA表达无影响. 结论 胰岛素通过激活P13K/mTOR通路和上调HIF-1α蛋白表达诱导HMC VEGF基因转录.     

第21页／黄芪注射液对梗死灶周脑组织HIF—1α和VEGF的影响

目的：观察黄芪注射液对缺血性脑损伤大鼠脑组织低氧诱导因子（HIF-1α）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）影响,探索黄芪注射液对缺血脑组织血管生成的调节作用。     

OSAHS患者血管内皮生长因子和胰岛素样生长因子-1对肺动脉高压形成的影响

目前阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）被公认为是影响健康的常见疾病，而由其引起的肺动脉高压也被逐渐重视，但其发病机制尚无定论。已有动物实验证实，低氧是影响血管内皮生长因子（VEGF）和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因转录的重要因素，而OSAHS的临床特点就是夜间反复发生程度不同、持续时间不等的低氧血症。本研究旨在观察VEGF、IGF-1在OSAHS患者肺动脉高压形成中的作用。     

依泽替米贝抑制大鼠血管平滑肌细胞荷脂

背景和目的治疗性血管新生在缺血性疾病包括对动脉粥样硬化的干预中具有实际意义,我们近年研究发现,生理性微电场可介导血管内皮细胞血管新生样反应,但其机制尚待深入研究。本研究拟探讨微电场影响内皮细胞血管新生相关基因的表达及其机制。方法应用微电场对血管内皮细胞进行刺激;利用显微成像系统及共聚焦显微镜研究内皮细胞的形态与结构;用ELISA法和/或RT-PCR测定内皮细胞血管新生相关基因的表达;用特异抑制剂研究血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体(VEGF/VEGFR)介导的细胞信号通路在内皮细胞血管新生及其基因表达中的作用。结果生理性微电场可刺激血管内皮细胞变长和定向排列,以及细胞定向移动。这些细胞行为在微血管内皮细胞(HMEC-1)和大血管内皮细胞(HUVEC)的反应存在明显差异。微电场刺激血管内皮细胞使VEGF165、VEGF121和白细胞介素8(IL-8)表达上调,而对其他血管新生相关分子如碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β(TGF-β)以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)等mRNA表达影响不明显。VEGFR抑制剂作用于血管内皮细胞后,抑制微电场对内皮细胞VEGF和IL-8的表达及内皮细胞定向排列...     

乙型肝炎病毒X蛋白对肝细胞癌生长因子激活作用的研究

目的研究乙型肝炎病毒Ｘ（hepatitisBvirus,HBx）蛋白对生长因子激活作用,探讨HBx蛋白对肝细胞癌生长的影响。方法构建Ｘ基因真核表达载体,转染入HepG2细胞后,细胞组织化学和免疫印迹法检测胰岛素样生长因子－Ⅰ受体（insulin-likegrowthfactorⅠreceptor,IGF-ⅠR）和血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）表达。结果转染HBx基因HepG2细胞（X细胞）IGF-ⅠR表达阳性率为84%±3%,转染空载体对照细胞（X0细胞）为26%±4%;免疫印迹法检测Ｘ细胞有明显条带。VEGF表达Ｘ细胞阳性率为83%±5%,X0细胞为28%±6%,差异有非常显著意义;Ｘ细胞IGF-ⅠR表达增高近1.5倍。结论HBx蛋白可同时激活IGF-ⅠR和VEGF,在肿瘤恶性生长、转移中起有重要作用。     

低氧对小鼠低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的研究低氧时小鼠肺组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,探讨低氧与血管新生的关系。方法将哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸科2005年4月至6月实验用雄性昆明小鼠,分为低氧组与对照组,低氧仓浓度分别为10%,7%和5%。低氧时间分别为3d,6d和9d。用免疫组织化学技术检测小鼠在低氧条件下肺组织中的HIF-1α和VEGF蛋白表达的变化及微血管密度(MVD),用Western blotting法检测HIF-1α和VEGF的表达。结果低氧组HIF-1α和VEGF蛋白表达均增加,并且随低氧时间的延长及低氧浓度的降低而增强,而对照组HIF-1α无表达,VEGF有少量表达,P<0·05;低氧组的MVD也高于对照组;VEGF、MVD的表达均与HIF-1α表达呈正相关(r分别为0·730与0·691)。结论HIF-1α/VEGF通路在低氧致小鼠肺组织血管新生过程中起重要作用。     

PGE2诱导胃癌细胞株BGC-823HIF-1α、VEGF表达

目的研究前列腺素E2(PGE2)对人胃癌细胞株BGC-823低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的调节作用。方法以不同剂量的PGE2刺激BGC-823细胞24h,应用RT-PCR和Western blot方法检测PGE2能否在常氧下诱导BGC-823细胞HIF-1α、VEGF表达。结果PGE2呈剂量依赖性诱导HIF-1α蛋白表达,但对HIF-1α mRNA表达无影响,PGE2呈剂量依赖性诱导细胞VEGF mRNA和蛋白表达。结论PGE2对VEGF表达的诱导可能通过HIF-1α途径介导．这可能是环氧合酶-2(COX-2)诱导肿瘤血管生成的机制之一。