盐酸克伦特罗对人类诱导多能干细胞来源心肌细胞的毒性作用

目的:探讨盐酸克伦特罗对人类诱导多能干细胞(iPSC)来源心肌细胞的毒性作用。方法:将人皮肤来源的iPSC成功定向分化为心肌细胞,加入不同浓度盐酸克伦特罗,使之分为对照组(0μg/ml)、1μg/ml组、10μg/ml组、20μg/ml组、50μg/ml组、100μg/ml组等6组(n均=3),相同条件共培养7天后,观察盐酸克伦特罗对心肌细胞形态大小、搏动频率及凋亡率的影响。结果:不同浓度盐酸克伦特罗均可使心肌细胞缩小(P0.05),50-100μg/ml盐酸克伦特罗可致心肌细胞骨架断裂,甚至呈颗粒状。各种浓度盐酸克伦特罗均致心肌细胞搏动频率加快(P0.05),且有浓度越高搏动越快的趋势。10μg/ml组和50μg/ml组所致心肌细胞凋亡率显著高于对照组(P0.05)。结论:盐酸克伦特罗对人类皮肤来源iPSC分化的心肌细胞有毒性作用。     

中成药甘舒胶囊对抗氧化应激诱导的肝细胞损伤

目的探讨中药甘舒胶囊对抗氧化应激损伤的肝细胞保护作用。方法在Chang肝细胞建立氧化应激(H2O2)损伤的实验模型,应用甲氮甲唑蓝(MTT)检测法。PI染色流式细胞仪(FCM)及Hoechst 33258染色法等检测甘舒对抗H2O2诱导Chang肝细胞的细胞毒性及凋亡的细胞保护作用。结果H2O2呈浓度依赖性地降低Chang肝细胞的存活率;在自身不影响Chang肝细胞存活率的浓度(1～100μg/ml)范围内,甘舒呈浓度依赖性地对抗300μmol/L和400μmol/LH2O2对肝细胞存活率的抑制作用;另方面,在0～800μmol/L浓度范围内,H2O2呈浓度依赖性地增加Chang肝细胞的凋亡率;100μg/ml、500μg/ml和1mg/ml的甘舒本身不影响肝细胞的凋亡率,但却能显著地抑制300μmol/LH2O2诱导的肝细胞凋亡。结论中药甘舒胶囊具有抗氧化应激作用,可显著对抗氧化应激(H2O2)诱导的肝细胞损伤。     

雌二醇在体外对脾细胞和胸腺细胞增殖反应的影响

本文研究在体外细胞培养系统中直接加入雌二醇(E_2)对脾细胞和胸腺细胞的作用,发现高剂量(≥5μg/ml)的E_2可直接抑制脾细胞对ConA诱导的增殖反应;但在胸腺细胞的实验中,无论低或高剂量(10~(-2)ng/ml～20μg/ml)的E_2均未发现它对ConA诱导的增殖反应产生明显影响。表明E_2在体外对脾细胞和胸腺细胞的作用存在差异。     

CRP诱导单核细胞表达CD11b和CCR2并影响脂蛋白对CD11b和CCR2表达的观察

目的探讨C反应蛋白(CRP)对单核细胞表达CC趋化因子受体2(CCR2)和CD11b的作用以及与脂蛋白之间的相互作用。方法以不同浓度的CRP和／或脂蛋白处理THP-1单核细胞,应用流式细胞仪检测细胞表面CCR2、CD11b蛋白的表达,并应用半定量RT-PCR方法检测CCR2的mRNA表达,同时检测处理后的单核细胞与内皮细胞的黏附率以及培养液中NO含量。结果CRP以剂量依赖性方式增加单核细胞表达CCR2和CD11b,RT-PCR结果显示CRP在转录水平上诱导CCR2的表达。不同脂蛋白对CCR2和CD11b的表达作用不同:氧化的低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导CCR2和CD11b的表达(P<0．01),而高密度脂蛋白(HDL)抑制此二者的表达(P<0．01),天然低密度脂蛋白(LDL)则对其无显著影响(P<0．01)。CRP抑制OX-LDL所诱导的CCR2(115．7±6．40比99．0±3．65, P<0．01)和CD11b(121．3±4．79比98．5±4．90,P<0．01)的表达增加;但与LDL显著地协同上调CCR2(LDL 50μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg／ml;CRP 10μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg/ml,均P <0．01)和CD11b(LDL 50μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg／ml;CRP 10μg／ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg/ml,均P<0．01)的表达;CRP削弱HDL对CCR2和CD11b表达的抑制作用。培养液中的NO含量与CCR2和CD11b密切相关。结论CRP诱导单核细胞表达CCR2和CD11b,并调节脂蛋白对CCR2和CD11b的作用;NO可能是此过程中的信使之一。     

虫草素对胶质瘤细胞的增殖及侵袭作用的影响及机制研究

目的:探讨虫草素对胶质瘤细胞增殖及侵袭作用的影响,并初步探讨其机制。方法:将虫草素配置成不同浓度(100、200和400μg/ml)作用于胶质瘤细胞,对照组不加入药物。使用CCK8法检测细胞不同时间点和不同药物浓度增殖情况,采用Transwell实验检测不同药物浓度作用下细胞侵袭情况,通过Western blot和q-PCR法检测Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、Ezrin蛋白和mRNA的表达水平。结果:100μg/ml虫草素对U87细胞增殖和侵袭无明显影响(P 0. 05)。200和400μg/ml虫草素可明显抑制U87细胞增殖,呈剂量和时间依赖性(P0. 05)。200和400μg/ml虫草素可明显抑制U87细胞侵袭,呈剂量依赖性(P0. 05)。U87细胞经不同浓度虫草素(100、200、400μg/ml)处理24 h后,发现200和400μg/ml虫草素处理后Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、Ezrin蛋白和mRNA水平明显降低(P0. 05),100μg/ml虫草素处理后对Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、Ezrin蛋白和mRNA水平的抑制作用不明显(P 0. 05)。结论:虫草素能抑制U87细胞的增殖和侵袭,其机制可能与下调Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、Ezrin的表达有关。     

卡芬尼对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的免疫机制

本文研究了卡芬尼(CCA)治疗大鼠佐剂性关节炎(AA)的免疫调节机制。CCA 能使 AA大鼠低下的脾细胞刀豆素 A(ConA)反应、IL—2产生能力恢复正常,使外周血中减少的 Ts 细胞数目回升到正常水平,使 AA 大鼠腹腔 M(?)升高的 IL—1和 H_2O_2产生水平降至正常范围,还能明显减少 AA 大鼠炎性关节组织中 PGE_(?)的含量.研究 CCA 对体外正常大鼠淋巴细胞与 M(?)以及 AA 大鼠 M(?)功能的影响时发现,CCA 对 ConA 诱导的脾细胞增殖反应呈低浓度(0.1～1μg/ml)增强和高浓度(10μg/ml)抑制的双向作用;CCA(100μg/ml)对常大鼠腹腔 M(?)释放 H_2O_2无明显影响,但能显著减少 AA 大鼠腹腔 M(?)释放 H_2O_2.结果表明,CCA 对 AA 大鼠有明显的免疫调节作用,这种作用有明显的机能和剂量依赖性.CCA 对 AA 大鼠的治疗作用与其调整患鼠异常的免疫功能有关。     

探讨SPC在诱肝癌HepG2细胞凋亡中的作用机制

目的 研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(Silybin-phosphatidylcholine Compound,SPC)诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用及其机制.方法 不同浓度SPC处理肝癌HepG2细胞.通过MTT法、细胞形态学观察、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察SPC时HepG2细胞的生长抑制作用及其细胞凋亡的影响.结果 SPC可抑制HepG2细胞的增殖.其GI50为46.8μg/ml;50μg/ml的SPC作用HepG2细胞24h后,细胞出现早期调亡的形态;75μg/ml、100μg/ml的SPC对HepG2细胞凋亡率分别为(17.22±3.45)%和(25.50±5.72)%;50μg/ml、75μg/ml、100μg/ml的SPC作用于HepG2细胞24h后,细胞内的Ca2+浓度显著升高(P<0.05,P<0.01).结论 SPC能够诱导肝癌细胞系HepG2细胞凋亡,其机制与SPC升高细胞内Ca2+浓度有关.     

在人扁桃体细胞中诱生γ干扰素

本文初步研究了用人扁桃体细胞诱生γ干扰素及其影响因素。试验结果显示:细胞浓度在5×10~7/ml时产生的γ干扰素效价最高;PHA、PWM、ConA等T细胞促分裂剂诱生γ干扰素的适宜浓度范围分别为50～400μg/ml,2.5～40μg/ml,5～80μg/ml;诱生时间均以72小时为宜;2-ME对人γ干扰素的产生没有影响。本文还将人扁桃体细胞和外周血白细胞对4种γ干扰素诱生利(PHA、PWM、ConA、SEA)和3种α干扰素诱生剂(NDV、SPA菌体、CP)的反应进行了比较。     

内毒素对内皮细胞的损伤及黄芩甙的保护作用

本实验利用4～9代和15～20代、纯化牛肺动脉内皮细胞(BPEC),观察了内毒素(ET)对BPEC的直接毒性作用和黄芩甙的保护作用。实验分为:对照组(M-199液含D-Hank's液25μl/ml);ET组(M-199液含ET0.1μg/ml;ET加黄芩甙组(M-199液含ET 0.1μg/ml,黄芩甙0.5μg/ml)。每组再分为0.5h,1h,2h,4h,8h,     

用原位缺口翻译法研究棉酚、雷公藤总甙对DNA的损伤作用

本文报道用原位缺口翻译法,研究男用节育药醋酸棉酚和雷公藤总甙(GTW)对C3H-10 T 1/2小鼠成纤维细胞DNA的作用。结果表明,在较高浓度的醋酸棉酚或GTW(2～3μg/ml)作用4小时,细胞核中显示的银颗粒较多,如阳性对照组的N-甲基-N′-硝基-亚硝基胍(MNNG)组;在中等浓度的(0.5～1μg/ml)作用下,银颗粒显著地少得多;在较低浓度的醋酸棉酚或GTW作用下(0.1～0.3μg/ml),细胞核中呈现的银颗粒与阴性对照组相似。与原位缺口翻译实验相对应,集落形成试验表明,在高浓度醋酸棉酚或GTW作用下,细胞失去繁殖的能力;而在中等或较低浓度的药物作用下,仍有较高的集落形成率。这些观察表明,高浓度的醋酸棉酚或GTW对细胞DNA有严重的损伤作用,而在中等浓度的药物作用下,DNA受到某种程度的损伤,但可修复;低浓度的醋酸棉酚或GTW对细胞DNA无明显的损伤作用,本文对这些结果的意义进行了简要的讨论。     

顺铂的多靶性对癌细胞成分的作用

用昆明种小鼠腹水肝癌细胞3×10~6/ml,给顺铂10μg/ml,分别作用1、2、5、14、24小时。给药组和对照组分别用Rhodamine-phalloidin 10μg/ml标记癌细胞膜下和分离的核内肌动蛋白微丝,吖啶橙10 μg/ml标记分离的核内DNA,FITC 10μg/ml标记分离的核内染色质蛋白,用MPV-2显微分光光度计进行观察和测定含量变化。顺铂作用1小时后,癌细胞膜下肌动蛋白微丝     

内毒素诱导血小板MLCK活化和纤维蛋白原受体显露

本文观察了内毒素(ET)对人血小板20kd蛋白磷酸化,胞浆游离钙[Ca~(2+)]i,~(45)Ca~(2+)摄取以及纤维蛋白原与血小板结合的影响,以探讨ET致血小板聚集的机制。结果显示:250μg/ml的ET在体外可诱导血小板20kd蛋白磷酸化。500μg/ml ET可在15秒钟内使20kd蛋白磷酸化,60秒钟达高峰,放射性强度分别为对照组的139±     

CD4+CD25+Treg细胞对B细胞的作用机制分析

目的研究CD4 CD25 调节性T细胞对B细胞作用机制.方法用尼龙毛柱法分离B细胞,用MACS磁珠分选法从Wistar大鼠脾脏淋巴细胞中分离CD4 CD25 Treg细胞,然后将分离纯化的Wistar大鼠Treg细胞负载SD大鼠抗原.以Trans Well Millcell-PCF分隔培养槽分隔或共培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系,然后向共培养体系中加或不加入Anti-TGF-β1、Anti-CTLA4的阻断方法,培养5天后用ELISA法检测不同组上清中的IgA和IgG分泌水平. 结果分隔培养组上清中的IgG和IgA水平分别为(4.7±1.1)、(10.5±1.7)μg/ml,与阳性对照组中IgG的含量(5.1±1.0)μg/ml以及IgA的(11.2±1.6)μg/ml相比没有显著差异(P＞0.05).而与阳性对照组相比较,共培养组上清中的IgG和IgA水平明显降低(P＜0.01),分别达到了(2.2±0.8)μg/ml和(5.4±0.9) μg/ml.在共培养体系中加入Anti-TGF-β1后,上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.1±0.5)μg/ml和(6.9±0.8)μg/ml;加入Anti-CTLA4后,上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.2±0.6)μg/ml和(7.2±0.9)μg/ml;两种阻断剂同时加入后,上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.5±0.5)μg/ml和(7.4±0.6)μg/ml,三组分泌水平都较共培养组明显升高(P＜0.05),但仍明显低于阳性对照组的水平(P＜0.05). 结论CD4 CD25 Treg通过细胞-细胞间接触机制直接抑制B淋巴细胞反应,在这一过程中TGF-β1和CTLA4都发挥了一定作用.     

人参皂苷Rg1、 Re对大鼠胚胎脑发育及谷胱甘肽过氧化物酶基因表达的影响

目的:观察人参皂苷Rg1、 Re对SD雌性大鼠胚胎脑发育及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)基因表达的影响.方法:选用全胚胎体外培养方法,随机分为对照组、人参皂苷Rg1 (10、 45和90μg/ml)组和Re (10、 45和90μg/ml)组,采用半定量RT-PCR分析人参皂苷Rg1和Re对GPx基因表达的影响.结果:人参皂苷Rg1组(10、 45和90μg/ml)对胚胎中脑和后脑的生长发育检测值差异有统计学意义,而胚胎脑长度和前脑的生长发育检测值差异无统计学意义;与对照组比较,Re (10、 45和90μg/ml)组胚胎脑发育的形态学检测无影响.RT-PCR结果显示,Rg1组(10、 45和90μg/ml) cGPx, pGPx和phGPx mRNAs的表达水平与对照组比较均无统计学意义;Re组(10、 45和90μg/ml) cGPx和phGPx mRNA的表达水平与对照组比较均无统计学意义,而pGPx mRNA的表达水平在3种剂量的人参皂苷Re作用后都增强,且在浓度10和45μg/ml时有统计学意义.结论:一定剂量的Rg1能促进胚胎脑的发育,一定剂量的Re能明显增强胚胎脑pGPx mRNA的表达.     

体外MTT法对灵芝酸抗人乳腺癌细胞株MCF-7作用的评估

目的：初步探讨灵芝酸对乳腺癌的抗肿瘤作用。方法用不同浓度(μg/ml)的灵芝酸溶液分别与MCF-7细胞共育24、48、72h后进行形态学观察,同时MTT法测定灵芝酸的细胞毒作用。结果在100μg/ml时共育72h后,对MCF-7细胞的生长具有显著抑制作用(<0.01)。在200μg/ml时共育24h后,对MCF-7细胞的生长具有明显抑制作用(P<0.05),72h后抑制作用更为显著(<0.01)。随药物浓度增加,对MCF-7的作用呈增长趋势,形态学观察,在400μg/ml和800μg/ml对MCF-7细胞以毒杀作用为主。结论灵芝酸对乳腺癌细胞有明显抗肿瘤作用,且机制复杂。     

头孢三嗪与妥布拉霉素对绿脓杆菌超微结构的影响

1、对照组(未用药组)绿脓杆菌10118呈短棒状。外表光滑、有微小波纹,横隔有凹陷,胞壁壁、细胞外间隙及质膜三层结构清楚,胞浆充满电子致密的核糖体,核质均匀分布于胞浆中。 2、头孢三嗪8μg/ml(2MIC)作用4小时后菌体拉长呈丝状,不见横隔凹陷,末端膨     

CPS-K-脂质体免疫佐剂作用的研究

研究结果表明,CPS-K脂质体有较强的免疫佐剂作用。家兔经两次以不同佐剂载荷的 BSA免疫后,CPS-K-脂质体组血清抗体平均含量为 182μg/ml,与福氏完全佐剂组水平(184μg/ml)相似,明显比单脂质体组(72μg/ml),单 CPS-K组(65μg/ml)以及氢氧化铝组(74μg/ml)高,循环抗体的维持期,CPS-K-脂质体组与单脂质体组似比氢氧化铝组长。 CPS-K-脂质体对A型肉毒类毒素也有类似的强免疫佐剂作用。     

雷公藤总甙对T细胞增殖的抑制作用部分经由cAMP

用0.15μg/mlPHA 诱导 T 细胞活化作模型,发现 TⅡ(5μg/ml)和 Bt_2cAMP(500μm)均能抑制 T 细胞从 Go 相进入 G_1a 相和从 G_1a 进入 G_1b 相,并抑制活化抗原 Tac、Ia、T(?) 和4F2的表达.TⅡ和Bt_2cAMP 还抑制活化 B 细胞在外源性 IL—2诱导下进入 S 相和 G_2/M 相.另外,T Ⅱ和 Bt_2cAMP 还抑制 T细胞在1.5μg/mlPHA 诱导下产生 IL-2。TⅡ和 Bt_2cAMP 的上述作用十分相似.有趣的是,TⅡ和 T细胞一起培养30小时,T 细胞中 cAMP 量明显增多。cAMP 增加程度与 TⅡ剂量正相关。上述结果提示,TⅡ对 T细胞增殖的抑制作用至少部分经由 cAMP.     

阿克拉霉素B,阿霉素和小蘖碱对人外周血NK细胞活性影响的初步研究

本文研究了阿克拉霉素B,阿霉素和小蘖碱对人外周血NK细胞活性的影响。NK细胞活性由测定51cr从NK细胞作用的标记K562细胞的释放率来决定。阿克拉霉素B(0.5和1.0μg/ml),阿霉素(0.5和1.0μg/ml)和小蘖碱(1.0和10μg/ml)作用1小时后,未     

重楼皂甙抗肿瘤作用的研究

本文报告了重楼皂甙对动物移植性肿瘤的影响,供药理实验的重楼皂甙有三批样品为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。从体外实验看,样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均能明显抑制3~H-TdR掺入肿瘤细胞DNA。其中对H_(22)的3~H-TdR掺入抑制IC_(50)样品Ⅰ为5.6μg/ml、Ⅱ为1.5μg/ml、Ⅲ为5μg/ml;对EACⅡ的IC_(50)<1μg/ml,对S_(180) IC_(50)>10μg/ml。选用样品Ⅰ进行了