外源性硫化氢对哮喘大鼠肺Muc5ac表达的影响

目的观察卵白蛋白（ovalbumin,OVA）诱导建立的急性支气管哮喘大鼠模型,探讨气体信号分子硫化氢（H2S）在哮喘发病中的作用。方法选取26只健康SD大鼠,按随机数字表法将其分为哮喘组（n=9）、Naris干预组（n=9）和对照组（n=8）。激发后24h解剖大鼠、取肺,观察大鼠支气管周围炎性细胞浸润程度,并进行评分。采用免疫组化染色法测定外源性硫氢化钠（NaHS）、硫化氢为供体处理后的大鼠肺部黏蛋白基因Muc5ac的表达情况。结果光镜下支气管周围炎性细胞浸润程度评分（中位数表示）,哮喘组为4分,NaHS组为2分,对照组为1分,三组间比较,差异有显著意义（H=13．75,P〈0．05）。哮喘组、NaHS干预组及对照组肺muc5ac蛋白含量（阳性面积表示）分别为（1330．22士662．87）μm^2,（715．88±282．49）μm^2及（501．75±270．58）μm^2,三组间比较,差异有显著意义（F=11．82,P〈O．01）。结论哮喘组大鼠黏蛋白基因Muc5ac表达增加,外源性硫化氢可减轻哮喘气管炎症,对哮喘急性发作起保护作用。     

白细胞介素-13对小鼠肺组织粘蛋白基因Muc5ac及EGFR表达的作用

目的　研究白细胞介素 -13 (IL -13 )对小鼠气道粘蛋白基因Muc5ac和表皮生长因子受体 (EGFR)表达的作用。方法　 2 4只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和不同剂量IL -13 (包括 5 0ng、10 0ng和 2 5 0ng)处理组 ,每组 6只 ,分别用RT -PCR和免疫组化法检测Muc5acmRNA、Muc5ac和EGFR蛋白的表达。结果　Muc5ac和EGFR蛋白阳性表达细胞均主要位于气道上皮 ,细胞胞浆呈棕黄色。与对照组相比 ,IL -13可以剂量依赖性地促进气道Muc5acmRNA、Muc5ac和EGFR蛋白的表达 (P均 <0 0 1)。结论　IL-13是引起气道粘液过度分泌的重要细胞因子 ,它可能通过活化EGFR导致了上述病变。     

铅对大鼠脑组织神经生长因子表达的影响及甲状腺激素的调节作用

目的　研究醋酸铅对大鼠脑组织神经生长因子 (NGF)表达的影响及甲状腺激素的调节作用。方法　对SD大鼠用 2 5、5 0、10 0mg/kg体重的醋酸铅腹腔注射 ;用丙基硫氧嘧啶 (PTU)制作甲状腺机能减退大鼠模型 ,再给予 5 0mg/kg体重的醋酸铅 ,分别以免疫组化测定脑组织中NGF蛋白的表达。以放射免疫方法测定血清中三碘甲状腺原氨酸 (T3 )、甲状腺素 (T4)、促甲状腺激素 (TSH)的含量及脑组织中T3 、T4的含量。结果　中、高剂量组皮层组织NGF平均灰度 (180 .4 9± 10 .33、16 9.72±19 .75 )与对照组 (2 0 0 .75± 3.2 7)相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;各剂量组海马组织NGF面密度 (0 .0 8± 0 .14、0 .12± 0 .0 2、0 .13± 0 .0 4 )与对照组 (0 .0 2 5± 0 .0 15 )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。甲状腺机能减退后再用醋酸铅处理 ,皮层、海马组织NGF面密度和平均灰度未见明显改变。各剂量染铅组大鼠血清中T3 [(0 .6 8± 0 .0 2 )、(0 .5 7± 0 .0 4 )、(0 .5 4± 0 .0 2 ) μg/L]和T4[(2 8.30± 1.83)、(2 7.35± 2 .5 5 )、(2 4 .0 0± 3.0 1) μg/L]含量明显下降 ,而TSH[(6 .34± 1.13)、(7.74± 0 .79)、(9.16± 0 .77)IU]增高 ,与对照组T3 [(0 .97± 0 .14 ) μg/L]、T4[(5 4 .5 0± 3.70 ) μg/L]和TSH     

布地奈德气雾剂吸入对哮喘儿童外周血神经生长因子水平的影响

目的:研究布地奈德气雾剂吸入治疗对支气管哮喘患儿外周血神经生长因子(NGF)水平的影响。方法:选择门诊支气管哮喘患儿52例分为两组,所有病例均在发作缓解期检测外周血神经生长因子及肺功能(FEV1),研究组36例为布地奈德气雾剂吸入治疗组,按06版GINA方案给予布地奈德气雾剂分级吸入预防治疗,对照组16例根据自愿原则未进行布地奈德气雾剂吸入治疗,3个月后再次检测所有患儿外周血神经生长因子水平及肺功能。结果:研究开始前两组患儿血清神经生长因子水平分别为(85.8±21.2)pg/ml和(66.4±15.6)pg/ml,3个月后布地奈德气雾剂吸入治疗组患儿血清神经生长因子浓度降为(45.6±12.2)pg/ml,与研究前差异具有统计学意义(P<0.001),同时FEV1明显提高(P<0.001),而未吸入激素治疗的患儿血清神经生长因子水平为(68.9±14.2)pg/ml,与研究开始前差异无统计学意义(P>0.05),FEV1未显示明显提高(P>0.05)。结论:布地奈德气雾剂吸入治疗能降低支气管哮喘患儿外周血神经生长因子水平。     

布地奈德对哮喘大鼠肺组织病理改变及TRAF2表达的影响

【目的】 观察哮喘大鼠肺组织病理改变和TRAF2表达的水平,探讨布地奈德治疗哮喘的可能作用机制。 【方法】 采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组、对照组和布地奈德组,HE染色观察肺组织炎性改变,免疫组织化学法检测肺组织TRAF2的表达。 【结果】 哮喘组大鼠的毛发、体重、活动度等一般情况改变和肺组织炎性改变较对照组有显著变化,布地奈德能明显减轻上述改变。哮喘组(0.317±0.041 OD值)支气管壁TRAF2的光密度值显著高于对照组(0.220±0.057 OD值)(P＜0.01);布地奈德组支气管壁(0.236±0.033 OD值)TRAF2的光密度值显著低于哮喘组(P＜0.01),与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),但肺组织中其表达水平却显著高于哮喘组。 【结论】 哮喘大鼠TRAF2的表达水平增强,它可能参与了哮喘的气道炎症过程;布地奈德能减轻气道炎症,其机制可能是部分通过TRAF2途经。     

超声对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子蛋白表达的影响

目的研究低强度超声对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子(NGF)蛋白表达的影响。方法以64只成年雌性W istar大白鼠右侧坐骨神经重度钳夹伤为动物模型,应用随机数字表进行随机化,将实验动物均分为超声组与对照组。按取材时间分为术后2、4、6、8周等4个时间段(每组8只)。超声组的造模侧神经损伤处给予超声辐照,对照组相应部位予以未启动治疗系统的假辐照。术后不同时间取紧邻挤压伤部位的远端坐骨神经干,应用免疫组织化学和图像分析的方法研究神经组织中NGF的表达并进行定量分析。结果术后4、6、8周,超声组坐骨神经组织中的NGF蛋白高表达。结论低强度超声能够促进大鼠坐骨神经损伤后神经组织NGF蛋白的表达。     

银杏叶提取物对支气管哮喘大鼠肺组织IL-5 mRNA表达的影响

目的:探讨中药银杏叶拮抗支气管哮喘气道变应性炎症作用的分子机制.方法:采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法半定量地分析了哮喘大鼠肺组织IL-5mRNA表达水平的变化.结果:与模型组比较,各用药组肺组织IL-5 mRNA的表达明显降低(P<0.01或P<0.05),以银杏叶高剂量组更为显著(P<0.01).结论:银杏叶能显著降低支气管哮喘大鼠肺组织IL-5 mRNA的表达,从转录水平降低相关细胞因子含量,有效地改善哮喘气道炎症.     

黏蛋白Muc5ac在大鼠慢性支气管炎、肺气肿模型肺部的表达

目的:探讨香烟对大鼠慢性支气管炎、肺气肿模型的诱导及呼吸道上皮细胞黏液蛋白Muc5ac表达的影响.方法:采用熏香烟法制遣大鼠慢性支气管炎、肺气肿模型,采用免疫组化法测定模型肺组织中黏蛋白Muc5ac的表达.结果:熏香烟组大鼠肺体积较对照组大鼠增大,颜色较苍白,部分肺表面可见多个大小不等的过度充气肺大泡,肺弹性减弱;光镜下纤毛脱落、倒伏,支气管黏膜上皮坏死、脱落,有炎症细胞浸润,肺泡大小不等、肺泡壁变薄,并有不同程度的断裂,部分融合成肺大泡;免疫组化染色结果显示实验组大鼠肺内支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞Muc5ac表达与对照组比较明显增强(P<0.001).结论:熏香烟法可成功诱导大鼠发生慢性支气管炎合并肺气肿模型,并导致肺组织黏蛋白Muc5ac的明显表达.     

早期补充维生素D对幼年哮喘大鼠肺组织炎症因子的影响

目的 研究早期补充不同剂量的1,25二羟基维生素D3[1,25-(OH)2VitD3]对幼年哮喘大鼠气道炎症的作用和对炎症因子的影响.方法 将刚断乳的40只大鼠按随机数字表分为5组:正常组、哮喘组,1,25-(OH)2VitD3低、中和高剂量组,每组8只.低、中和高剂量组每2天腹腔注射1次1,25(OH)2VitD3,直至第25天,低、中和高剂量组注释剂量分别为1、4、10 μg/kg.除正常组外,其他4组大鼠用卵清蛋白激发哮喘模型,干预完成后股动脉取血收集血清,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行细胞计数和分类;ELISA测定血清和BALF中白介素-4(IL-4),白介素-5(IL-5)和γ干扰素(IFN-γ)水平;观察肺组织炎症改变.结果 正常组、哮喘组及低、中、高剂量组大鼠BALF中白细胞总数分别为(5.98±1.67)×105/ml、(25.34±4.28)×105/ml、(17.24±3.3)×105/ml、(9.31±3.37)×105/ml、(45.1±15.75)×105/ml(F=33.453,P<0.01);BALF中嗜酸粒细胞百分比分别为(1.44±0.78)%、(17.81±6.88)%、(15.00±5.70)%、(8.89±3.66)%、(25.88±5.57)%(F=27.299,P<0.01);血清中IL-4含量分别为(0.62±0.54)、(7.57±1.04)、(3.58±0.56)、(2.70±0.78)、(5.27±0.30)pg/ml(F=116.287,P<0.01);血清中IL-5含量分别为(32.20±4.23)、(67.14±18.14)、(37.51±0.47)、(40.69±2.47)、(124.60±36.19)pg/ml(F=23.902,P<0.01);血清中IFN-γ含量分别为(79.71±10.08)、(49.06±4.46)、(59.15±2.51)、(59.27±2.33)、(53.85±1.97)pg/ml(F=39.954,P<0.01); BALF中IL-4含量分别为(0.51±0.30)、(102.92±54.61)、(8.64±4.07)、(3.10±1.28)、(33.67±8.10)pg/ml(F=24.062,P<0.01);BALF中IFN-γ含量分别为(247.37±189.18)、(43.82±13.76)、(81.32±17.07)、(86.50±14.26)、(59.89±34.17)pg/ml(F=7.157,P<0.01);BALF中IL-5含量分别为(38.81±0.60)、(80.48±17.90)、(45.11±1.33)、(43.39±1.11)、(149.60±45.87)pg/ml(F=35.978,P<0.01).哮喘组大鼠的肺组织病理改变明显,低、中剂量组大鼠肺组织较哮喘组病理改变有明显改善,高剂量组病理改变较低、中剂量组加重.结论 早期适量补充维生素D可改善幼年哮喘大鼠肺组织病理改变,缓解炎症因子的作用,而过量则可能加重炎症反应.

Abstract：

Objective To explore the effect of different doses of 1,25-(OH)2VitD3 early supplementation on airway inflammation and lung inflammatory factors in baby rats with asthma.Methods Forty male weaned Wistar rats were divided into normal group,model group,low 1,25-(OH)2VitD3 group,middle 1,25-(OH)2VitD3 group,high 1,25-(OH)2VitD3 group using random number table (8 rats each group).The rats in low,middle and high 1,25-(OH)2VitD3 groups were given 1,4,10 μg/kg of 1,25-(OH)2VitD3 every other day by intraperitoneal injection respectively for 25 days.Except normal group,the rats in other groups were challenged with ovalbumin to establish the asthma model.The pathologic changes of lung tissue,the total white blood cell and classified cell counts in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were measured.The concentrations of IL-4,IL-5 and IFN-γ in serum and BALF were measured by ELISA method.Results The level of total white blood cell counts in BALF were (5.98±1.67)×105/ml,(25.34±4.28)×105/ml,(17.24±3.3)×105/ml,(9.31±3.37)×105/ml,(45.1±15.75)×105/ml,respectively(F=33.453,P<0.01).The percent ratio of EOS in BALF were (1.44±0.78)%,(17.81±6.88)%,(15.00±5.70)%,(8.89±3.66)%,(25.88±5.57)%,respectively(F=27.299,P<0.01).The level of IL-4 in serum of normal,model,low,middle and high-1,25-(OH)2VitD3 groups were (0.62±0.54),(7.57±1.04 ),(3.58±0.56),(2.70±0.78) and (5.27±0.30)pg/ml,respectively(F=116.287,P<0.01);IL-5 in resum were (32.20±4.23),(67.14±18.14),(37.51±0.47),(40.69±2.47) and (124.60±36.19) pg/ml,repectively(F=23.902,P<0.01);IFN-γ in serum were (79.71±10.08),(49.06±4.46),(59.15±2.51),(59.27±2.33) and (53.85±1.97)pg/ml,respectively(F=39.954,P<0.01).Also in BLAF,the IL-4 of all groups were (0.51±0.30),(102.92±54.61),(8.64±4.07),(3.10±1.28) and (33.67±8.1)pg/ml,respectively(F=24.062,P<0.01);the IFN-γ were (247.37±189.18),(43.82±13.76 ),(81.32±17.07),(86.50±14.26) and (59.89±34.17)pg/ml,respectively(F=7.157,P<0.01);the IL-5 in BALF were (38.81±0.60),(80.48±17.90),(45.11±1.33),(43.39±1.11) and (149.60±45.87)pg/ml,respectively(F=35.978,P<0.01).Pathologic changes in lung of asthma rat groups were obvious.The lung pathologic changes in low and middle dose groups showed a significant improvement compared to the asthma group and high dosage group showed more serious pathologic changes compared to the low and middle dose groups.Conclusion Intervention with appropriate dose of 1,25-(OH)2VitD3 in the early life could improve lung pathologic changes and reduce the effect of inflammatory factors in air way of baby rat asthma model.However,overdose might play detrimental effect.     

鼠神经生长因子联合依达拉奉治疗脑出血的疗效及对神经功能的影响

目的探讨鼠神经生长因子联合依达拉奉治疗脑出血的疗效及对神经功能的影响。方法98例脑出血患者随机均分为两组,对照组予以依达拉奉治疗,观察组予以鼠神经生长因子联合依达拉奉治疗。比较两组的临床疗效,NIHSS评分,NSE、S100β蛋白、MBP水平,以及不良反应。结果观察组的总有效率为91.84%,显著高于对照组的77.55%(P<0.05)。治疗后,两组的NIHSS评分较治疗前均显著下降(P<0.01),且观察组显著低于对照组(P<0.01)。治疗后,两组的血清NSE、S100β蛋白及MBP水平较治疗前均显著下降(P<0.01),且观察组显著低于对照组(P<0.01)。两组的不良反应总发生率无统计学差异(P>0.05)。结论鼠神经生长因子联合依达拉奉治疗脑出血患者能明显缓解临床症状,减轻脑损伤,改善神经功能,且安全性高。     

早期触摸和环境刺激对新生鼠脑神经生长因子及酪氨酸激酶受体A的影响

目的探讨早期触摸和环境刺激对新生鼠额皮质、海马神经生长因子（nerve growth factor,NGF）及酪氨酸激酶受体A（tyrosine kinase receptor A,Trk A）的影响。方法60只正常新生鼠被随机分为干预组与对照组。对干预组进行早期触摸14d,随后置于丰富环境14d。其NGF含量及Trk A表达,分别采用ELISA和免疫组织化学方法进行检测。结果在额皮质和海马,干预组大鼠NGF含量分别为（2343.58±133.15）pg/g和（1547.42±65.32）pg/g,Trk A阳性细胞数分别为（80.56±20.12）/HF和（66.42±21.83）/HF;而对照组NGF含量分别为（2174.70±165.21）pg/g和（1475.23±76.72）pg/g,Trk A阳性细胞数分别为（63.50±18.23）/HF和（50.45±17.28）/HF。干预组NGF含量和Trk A阳性细胞数均明显高于对照组（P〈0.05）。结论脑组织内NGF的含量和Trk A表达的提高,可能与早期触摸和环境刺激促进脑发育有关。     

氯化镧对大鼠皮质血管内皮生长因子表达的影响

目的 观察染镧仔鼠的皮质神经元细胞变化以及皮质组织内血管内皮生长因子（VEGF）蛋白含量表达的变化,研究VEGF在镧致大鼠神经毒性中的作用。方法 Wistar雌性大鼠32只随机分成对照组及低、中、高剂量氯化镧（LaCl3）组,每组8只自妊娠开始分别饮用浓度为0.00%、0.25%、0.50%、1.00%的LaCl3溶液,经血液循环对仔鼠染镧,分娩后以母乳喂养的方式染镧,断乳后仔鼠可自行摄入LaCl3溶液进行染镧。仔鼠出生后49 d麻醉处死,取脑组织进行尼氏染色,观察仔鼠皮质神经细胞形态变化。以水迷宫空间探索实验,检测仔鼠学习记忆能力的变化。以western - blot法检测VEGF蛋白的表达水平变化。单因素方差法分析组间的差异,SNK法进行组内的两两比较。结果:与对照组相比,LaCl3组仔鼠皮质中表达尼氏体神经细胞的数量逐渐减少,差异有统计学意义（F = 10.465,P＜0.001）。在空间探索实验中,LaCl3组仔鼠进入目标象限的次数和在目标象限内的时间短于对照组,差异有统计学意义（F = 3.072,P＜0.05）。与对照组相比,LaCl3组仔鼠皮质神经细胞中VEGF蛋白表达降低,差异有统计学意义（F = 133.848,P＜0.001）。结论 镧暴露使VEGF表达水平下降,降低了对神经细胞的保护作用,导致神经细胞损伤。     

1-溴丙烷吸入对大鼠坐骨神经影响

目的 研究1-溴丙烷(1-BP)对大鼠坐骨神经功能和组织形态学的影响.方法 无特定病原体级雄性Wistar大鼠48只按体质量随机分为低、中、高剂量组和对照组4组,每组12只.大鼠均置于动式吸入染毒柜内,低、中、高剂量组分别给予质量浓度为1 250、2 500和5 000 mg/m3 1-BP暴露染毒,对照组给予新鲜空气,每天染毒8h,每周染毒5d,连续4周.染毒结束,采用肌电图仪对所有大鼠进行双侧坐骨神经电生理检测.每组各取3只大鼠灌流固定,取坐骨神经,行苏木精-伊红染色和砂罗铬花青法染色,观察其组织形态学的改变.结果 1-BP各染毒组大鼠双侧坐骨神经运动神经传导速度均低于对照组(P＜0.01),运动末端潜伏期均较对照组延长(P ＜0.05或P＜0.01);1-BP高剂量组大鼠双侧坐骨神经感觉神经传导速度低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),潜伏期较对照组延长(P＜0.05或P＜0.01).病理学观察显示1-BP高剂量组大鼠坐骨神经髓鞘疏松变性、排列杂乱,部分呈现空泡样变,轴索偏移.结论 运动神经传导速度是反映1-BP周围神经损伤的检测指标之一.     

正己烷接触人群神经生长因子mRNA表达水平研究

目的建立一种人神经生长因子(NGF)mRNA荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测方法,探讨接触时间对正己烷接触人群NGF mRNA表达水平的影响。方法以接触正己烷工龄分组。设计引物、探针,检测对照组和接触正己烷各组之间的NGF mRNA水平。结果利用该荧光定量PCR检测结果显示工龄<2年组、2～6年组、>6年组以及对照组的NGF mRNA以10为底的对数分别为(8.88±0.08)、(8.68±0.08)、(8.53±0.11)和(8.90±0.07)copies/L。2～6年组和>6年组的NGF mRNA表达水平均低于对照组。各组内男女之间NGF mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论正己烷的毒性对于NGF mRNA的表达有明显的时间依赖关系,随着接触时间加长,NGF的表达逐渐减弱;所建立的检测方法特异性强,完全符合检测要求。     

Enhancing Effect ofMycoleptodonoides aitchisoniion Synthesis of Nerve Growth Factor and Releasing Dopamine in the Rat Brain

Abstract

The effects of edible mushroom Mycoleptodonoides aitchisonii on the synthesis of nerve growth factor (NGF) and neurotransmitter metabolism in rat brain were examined in Wistar strain rats fed a controlled diet for 14 days. Then each brain was dissected to detect the levels of neurotransmitters and NGF in various regions. Dopamine concentration in the cerebral cortex was 1.5-fold significantly increased in the M. aitchisonii feeding group than the control group. However, NGF concentration of the M. aitchisonii feeding was significantly low. NGF concentration in this remaining area of brain from where the cerebral cortex, striatum, hippocampus, cerebellum, hypothalamus and amygdala were removed was significantly higher in the M. aitchisonii feeding. At the same time, in the striatum, the dopamine metabolite DOPAC was significantly increased in the M. aitchisonii feeding. Thereafter, we measured dopamine release from striatal slices using aqueous extract of M. aitchisonii, there was an enhancing effect on dopamine release. These results suggested that M. aitchisonii has enhancing effect on the synthesis of NGF and catecholamine metabolites in the rat brain.