呼吸道生物被膜菌致肺气虚证大鼠模型的研制

目的：研制大鼠肺气虚证模型,为研究因慢性呼吸道感染导致肺气虚证的诊治提供可靠的实验动物。方法：健康SD大鼠随机分为空白对照组、烟熏对照组,以及高、中、低菌量模型组。模型组采用呼吸道生物被膜菌（bacterialbiofilm,BF）铜绿假单胞菌滴鼻法,辅以寒冷疲劳刺激引起大鼠呼吸道慢性感染,诱导肺气虚证的发生。观察各组证候表现、游泳时间、体重变化、血液流变学指标的改变,以及肺支气管组织器官病理改变。结果：高、中、低菌量模型组大鼠的一般体征均符合肺气虚证,症状较烟熏组稳定。游泳时间和体重增加低于空白对照组,尤以高菌量组为明显（P〈0．05,P〈0．01）。血流变指标提示血液流变性有障碍,肺及支气管炎症明显,炎症的程度和感染菌量有关。结论：将呼吸道生物被膜菌（铜绿假单胞菌）以滴鼻法并辅以寒冷疲劳刺激,可以诱导大鼠肺气虚证模型,相关的指标表明证候表现与中医学理论的病机相符,且该模型具有稳固、易复制、贴近原型的特点。     

呼吸道感染肺气虚证大鼠血气分析IL-8及肺组织病理学改变

目的：研究呼吸道感染肺气虚证大鼠的症候表现和血气指标变化、肺匀浆IL-8及肺组织病理学改变的相关性。方法：用呼吸道生物被膜菌（铜绿假单胞菌）以滴鼻法,辅以寒冷疲劳刺激引起大鼠呼吸道慢性感染,诱导肺气虚证的发生,观察证候表现、检测血气指标、IL-8及肺组织病理学改变。并设一组补肺益气治疗组予以反证。结果：模型组大鼠支气管及周围肺组织慢性炎症明显。pH、PO2、SaO2%下降,PCO2、肺匀浆IL-8升高,与正常对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,补肺益气治疗组支气管炎症不明显,血气指标、肺匀浆IL-8接近正常组（P〉0.05）。结论：呼吸道感染肺气虚证大鼠症候表现和支气管及周围肺组织慢性炎症以及pH、PO2、SaO2%下降,PCO2升高相关,肺匀浆IL-8升高和肺部炎症的发生相关。     

呼吸道感染肺气虚证大鼠血气分析IL-8及肺组织病理学改变

目的:研究呼吸道感染肺气虚证大鼠的症候表现和血气指标变化、肺匀浆IL-8及肺组织病理学改变的相关性。方法:用呼吸道生物被膜菌(铜绿假单胞菌)以滴鼻法,辅以寒冷疲劳刺激引起大鼠呼吸道慢性感染,诱导肺气虚证的发生,观察证候表现、检测血气指标、IL-8及肺组织病理学改变。并设一组补肺益气治疗组予以反证。结果:模型组大鼠支气管及周围肺组织慢性炎症明显。pH、PO2、SaO2%下降,PCO2、肺匀浆IL-8升高,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.01),补肺益气治疗组支气管炎症不明显,血气指标、肺匀浆IL-8接近正常组(P>0.05)。结论:呼吸道感染肺气虚证大鼠症候表现和支气管及周围肺组织慢性炎症以及pH、PO2、SaO2%下降,PCO2升高相关,肺匀浆IL-8升高和肺部炎症的发生相关。     

试论吸氧在肺气虚证治疗中的作用

吸氧是临床上常用的治疗方法,本文应用中西医有关理论探讨了肺气虚与缺氧的关系和吸氧在肺气虚证治疗中具有补益肺气等的作用.     

重组人β防御素4的原核表达、纯化及抗铜绿假单胞菌活性初探

目的制备原核表达的重组人β防御素4(human beta defensin 4,HBD4),初步探讨其对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性.方法将编码HBD4的DNA片段连接到大肠杆菌表达载体pET42a中,构建好的表达质粒pET42a-HBD4转化到表达菌株BL21(DE3)中,0.5 mmol/L IPTG诱导表达4 h,亲和纯化融合蛋白后经Western blot鉴定,再以肠激酶酶切融合蛋白,镍柱亲和层析分离HBD4;采用打孔法初测其抗铜绿假单胞菌活性,并用微量稀释法测定HBD4与3种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),比较其抗铜绿假单胞菌活性并异.结果 GST-HBD4在大肠杆菌中以可溶形式成功表达,纯化的重组HBD4体外对铜绿假单胞菌有抗菌活性,其效能略低于亚胺培南,而高于哌拉和环丙沙星.结论采用基因工程技术成功表达了重组HBD4,其对铜绿假单胞菌有较强的杀菌活性,具有烧伤创面感染治疗的应用前景.     

肺气虚证模型大鼠的影像学表现

目的探讨肺气虚证模型大鼠的影像学变化。方法用两次气管内注入脂多糖(LPS)及熏香烟4周的复合刺激法建立肺气虚证模型大鼠,4周后各组摄片,并观察一般状况、呼吸频率、质量改变情况及病理变化。结果呼吸频率两组相比,差异有高度统计意义(P<0.01);横膈前肋、横膈后肋积分及肋间隙两组相比,差异有高度统计意义(P<0.01)。结论肺气虚证大鼠有明显的肺气肿影像学表现。     

苦参对铜绿假单胞菌生物膜干预作用的体外研究

目的 观察在体外苦参水煎液对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.a)生物膜(Biofilm,BF)的影响及其与左氧氟沙星(Levofloxacin,LFX)的协同杀菌作用.方法 试管二倍稀释法测定药物的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC);将不同浓度苦参水煎液作用于P.a,结晶紫染色法及激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscoPy,CLSM)评价药物对菌株黏附力的影响;苦参水煎液单独或联合LFX作用于BF,采用连续稀释法计数及CLSM对BF进行分析.结果 苦参水煎液能抑制P.a的黏附力;与LFX联合作用后,BF内存活菌数明显减少(P≤0.05).结论 苦参水煎液能抑制P.a生物膜的形成,并可增强LFX对BF内细菌的杀菌作用.     

14、15环-大环内酯类药物在清除铜绿假单胞菌生物膜中的作用

目的研究14、15环-大环内酯类药物及抗铜绿假单胞菌药物对铜绿假单胞菌生物膜的清除作用.方法以硅胶片制备生物膜后,与不同抗生素相互作用一定的时间后,进行硅胶片菌落计数,观察药物对细菌生物膜的清除作用.结果MH空白对照组各时间段的BF内细菌存活率没有显著差异,单加MPM、AMK和MPM、AMK与MDM联合用药处理组的BF内细菌存活率与空白对照组相近.MPM、AMK与AZ或EM组合用药处理组的BF内细菌存活率在各时间段明显下降.结论红霉素、阿奇霉素可增强抗铜绿假单胞菌药物对生物膜的渗透性,对抗铜绿假单胞菌药物杀灭生物膜内细菌有增效作用.     

卡介苗胞壁蛋白增强肺抗铜绿假单胞菌感染防御功能的研究

目的 观察卡介苗胞壁蛋白组分能否提高大鼠肺组织对铜绿假单胞菌的清除率.方法 密度梯度离心和分子筛方法分离卡介苗胞壁蛋白组分.用Northern 杂交和RT-PCR检测卡介苗全菌体及其胞壁蛋白组分对肺上皮SPC-A-1细胞β防御素hBD-1 mRNA表达的刺激作用;腹腔注射卡介苗胞壁蛋白组分48 h后,经气管滴入铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌,24 h后处死大鼠,取肺组织进行菌落计数.结果 卡介苗胞壁蛋白经分子筛层析后主要得到两大组分,Tricine-SDS-PAGE鉴定组分2相对分子质量约为18×103～30×103.Northern杂交显示热灭活卡介苗能提高肺上皮细胞β防御素hBD-1 mRNA表达,RT-PCR显示胞壁蛋白组分2刺激作用明显强于全菌体.经胞壁蛋白组分2治疗的大鼠肺组织铜绿假单胞菌数低于阴性对照组(P＜0.01),而对金黄色葡萄球菌感染无明显抵抗作用.结论 卡介苗胞壁蛋白组分可提高肺组织对铜绿假单胞菌的清除率,增强肺抗感染防御能力.     

肺气肿肺气虚证模型大鼠血液流变学实验研究

目的:观察肺气肿肺气虚证模型大鼠血液流变学的变化,探讨其在肺气肿肺气虚证发病中的作用机制。方法:将90只SD大鼠随机分为对照1个月、2个月、3个月组和模型1个月、2个月、3个月组,采用气管内注入脂多糖(LPS)和烟熏双因素复合制作肺气肿肺气虚证大鼠模型,观察模型大鼠血液流变学的变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠动脉血全血黏度(高切、低切)、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数及纤维蛋白原均升高。结论:肺气肿肺气虚证模型大鼠血液存在高黏、高浓、高聚的流变特性。     

小青龙汤治疗肺气虚寒型变应性鼻炎的疗效分析

目的 观察小青龙汤治疗肺气虚寒型变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的疗效.方法 采用随机对照方法将符合纳入标准的128例肺气虚寒型AR患者,随机分为中药组(小青龙汤)及西药组各64例,各以小青龙汤或是西药阶梯化治疗4周,以视觉模拟量表(VAS)及鼻眼结膜相关生活质量问卷调查量表(RQLQ)衡量患者AR症状及生活质量改善情况.结果 组内对照比较结果显示,各组VAS、RQLQ评分在治疗前及治疗后16周的差异均具有统计学意义(P＜0.05).治疗后16周,组间VAS评分差异无统计学意义(P＞0.05),但RQLQ评分差异具有统计学意义(P＜0.05).两组均无严重不良反应事件发生.结论 小青龙汤和西药的阶梯化治疗均有利于改善AR患者症状及生活质量.临床实践中需根据患者的病情和证型,选用多学科指导下的科学系统序贯的个体化治疗.     

肺气虚证与大脑皮质相关性

从中医的＂肺主气司呼吸＂,大脑皮质功能及其在呼吸运动的作用,以及从神经-内分泌-免疫网络探讨肺气虚证与大脑皮质的相关性。肺气虚证的形成是由于大脑皮质对呼吸运动的调节减弱,或引起自主神经功能紊乱,或引起免疫功能下降。这可为进一步揭示肺气虚证形成机制提供一个新的思路。     

肺气虚证与肺阳虚证大鼠血气分析及血液流变学比较

目的探讨血气分析及血液流变学在肺气虚证和肺阳虚证大鼠中的变化及其作用。方法将雌雄Wistar大鼠30只随机分为对照组、肺气虚组、肺阳虚组,其中肺气虚证组模型单纯烟熏（香烟、锯末,0.5h/d）,肺阳虚证组采用烟熏和寒冷刺激（0-2℃,每次2 h,每日2次）,以上各组连续处理7周后取大鼠腹主动脉血,进行血气分析和血液流变学检测。结果与对照组比较,肺气虚证组和肺阳虚证组大鼠血液pH值降低,动脉氧分压（partial pressure of oxygen,PO2）和血氧饱和度（saturation of blood oxygen,SaO2）显著下降,而二氧化碳分压（partial pressure of carbon dioxide,PCO2）显著升高（P〈0.05,或P〈0.01）;且肺阳虚证组pH、PO2和SaO2显著低于肺气虚证组,PCO2显著高于肺气虚证组（P〈0.05,或P〈0.01）。与对照组比较,肺气虚证组、肺阳虚证组全血黏度高切、中切、低切和血浆黏度均显著增高（P〈0.05,或P〈0.01）。结论血气分析和血液流变学的异常改变为肺气虚证和肺阳虚证提供客观实验依据,且血气分析指标的异常可能是肺阳虚证区别肺气虚证的重要指标之一。     

补肺胶囊对肺气虚大鼠血清及大脑皮质单胺类神经递质的影响

目的观察肺气虚证模型大鼠血清和大脑皮质去甲肾上腺（norepinephrine,NE）、多巴胺（dopa-mine,DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）变化以及补肺胶囊的干预作用,探讨肺气虚证形成机制。方法选用清洁级健康Wistar雄性大鼠18只,将其随机分成对照组、模型组和干预组,每组6只。采用烟雾刺激和木瓜蛋白酶雾化吸入法复制肺气证模型,观察各组大鼠呼吸频率等一般状况,采用高效液相色谱电化学检测方法测定大鼠血清和大脑皮质中NE、DA、5-HT的含量。结果模型复制后2d和干预后14d,模型组呼吸频率显著高于对照组（P〈0.01）;干预后14d,干预组呼吸频率显著低于同时点模型组和模型复制后2d同组（P〈0.01）。与正常组比较,模型组大鼠血清DA、5-HT水平显著升高（P〈0.05）;大脑皮质中NE、5-HT水平显著降低（P〈0.05,或P〈0.01）,DA水平显著升高（P〈0.05）。与模型组比较,干预组大鼠血清NE水平显著升高（P〈0.05）,DA水平显著降低（P〈0.05）;大鼠脑皮质NE、DA和5-HT水平无显著性变化（P〉0.05）。结论肺气虚证大鼠血清和大脑皮质中NE、DA、5-HT存在紊乱现象,补气药有一定的干预作用。     

肝阴虚证大鼠模型的初步研究

艇四氯化碳诱导大鼠慢性损伤的基础上,结合温热中药灌胃制作大鼠慢性四氯化碳肝损伤肝阴虚证动物模型,并从病因、症状、体征、实验指标以及中药治疗反证等方面对模型加以评价。该模型的临床表现及病 理变化与人类肝阴虚证近似。     

黄芪多糖对肾阳虚型糖尿病大鼠肾组织中TGF-β1表达的影响

目的研究黄芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）对肾阳虚型糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达的影响。方法用SD雄性大鼠制作肾阳虚糖尿病大鼠模型；将模型鼠随机分为3组：对照组，苯那普利治疗组，黄芪多糖治疗组。于实验第8周时统一处死各组老鼠，测定大鼠肾脏重量／体重、血糖、血脂；用RT-PCR检测各组大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达。结果APS可明显降低肾脏重量／体重、血糖、血脂，并能使大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达减少。结论APS可能通过改善大鼠血糖、血脂降低TGF-β1 mRNA的表达，进而阻滞糖尿病肾病的发生和发展；APS有可能成为临床治疗肾阳虚型糖尿病的有效药物。     

围绝经期综合征阴虚型患者发病与心理因素的临床研究

目的：探讨围绝经期综合征阴虚型患者发病与心理因素的关系。方法：选择围绝经期综合征阴虚型患者120例，阳虚型患者30例，正常围绝经期妇女30例，对其采用个性心理测试（艾森克个性问卷）及紧张性生活事件量表的调查，结果：围绝经期综合征阴虚型患者具有明显的神经质人格心理倾向，年心理紧张总值高于未发病的围绝经期妇女的分值，提示在对本病的治疗和预防过程中，应重视患者的人格心理特征及社会因素造成的心理刺激对发病的影响，结论：改善此期妇女的心理素质对其生活和工作质量具有重要的作用。     

肝阳虚为当归四逆汤证病机之本

当归四逆汤证的病机当以肝阳虚为根本,兼有寒凝、血虚、血瘀的病理状态。寒凝、血虚、血瘀三者之间相互加重,反过来又影响了肝阳虚。当归四逆汤通过升肝阳、补阴血、温血脉、通瘀血的方法,对肝阳虚、寒凝、血虚、血瘀进行针对性的治疗,打破了这种几种病理因素相互影响的病理状态,使得肝阳充足、升发疏泄功能正常,血液充盈,血脉温通流畅,则阳气通达于外,阴阳相互顺接、平衡,厥逆自然消除。     

两种脾气虚证模型大鼠临床证候特征的比较

目的对比研究复合因素法与利血平皮下注射法所致脾气虚证模型大鼠的临床证候特征。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、复合因素组及利血平组,分别采用两种方式造模后,通过一般体征指标及证候量化评分评价临床证候表现;旷场实验评价大鼠心理及自主活动;检测血清D-木糖含量判断消化吸收能力。结果与正常组相比,两模型组大鼠证候量化评分总积分及各单项均升高(P<0.05,P<0.001),且利血平组各个单项及总积分均高于复合因素组(P<0.05);两组大鼠自主活动均较正常组减少(P<0.05);与复合因素组相比,利血平组穿格次数、中央区停留时间、活动距离下降尤为明显(P<0.001);与正常组相比,两组大鼠血清D-木糖含量均下降(P<0.01),两模型组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论两种造模方式都可造成大鼠脾气虚证候,但其临床证候表现有所不同,实验时应结合需求进行选择。