血红蛋白H（HbH）病3种检测方法比较

[目的]探讨HbH病3种检测方法的准确性，提高实验诊断率。[方法]同时采用电泳法、iHPLC（阳离子交换色谱法）、wHPLC（弱阳离子交换色谱法）对50例HbH病患者进行检测。[结果]50例HbH病患者采用电泳、iHPLC和wHPLC3种方法检出率分别为86％、70％和98％，经统计学分析，具有显著差异（P〈0．01）。wHPLC对HbH病检出率明显高于电泳法和iHPLC法。[结论]联合应用电泳法和多聚阳离子交换色谱法（wHPLC）两种方法，能提高HbH病和异常血红蛋白病诊断的准确性和敏感性。     

两种方法检测糖化血红蛋白比较分析

目的对免疫比浊法与高效液相色谱法(HPLC)检测糖化血红蛋白进行方法学比较。方法采用免疫比浊法与高效液相色谱法测定100例糖尿病患者糖化血红蛋白,分别进行精密度、线性范围及相关性分析。结果免疫比浊法与HPLC法的线性范围分别为3.1%～14.8%和4.0%～18.1%,批内、批间变异系数(CV)均小于5%,两种方法测定糖化血红蛋白的结果差异无统计学意义(P>0.05),相关性好,回归方程为Y=1.016 X+0.336%(r=0.977 8)。结论两种检测方法均能较好地满足临床需求。     

血红蛋白H病的高效液相色谱与血液学特点分析

目的分析血红蛋白H病(HbH病)在高效液相色谱及临床血液学表现的特点并探讨其原因。方法运用高效液相色谱技术(HPLC)对广东地区49例缺失型或血红蛋白Constant Spring(HbCS)复合HbH病进行诊断,详细记录其临床资料并测定其相关的血液学指标。结果①缺失型HbH病患儿可见一HbH峰,HbCS复合HbH病患儿既可见-HbH峰,又可见-HbCS峰。49例HbH病患儿中,缺失型HbH病38例(77.7%),HbCS复合HbH病11例(22.3%);②与缺失型HbH病患儿相比,HbCS复合HbH病患儿有明显的脾肿大,发育障碍及严重的贫血,其平均红细胞体积(MCV)增大,HbH包涵体含量增高。结论①HbH病以缺失型为主,HbCS复合HbH病在HPLC中可出现特异的HbCS峰。②高HbH包涵体含量以及αCS链在红细胞膜上的聚集是造成HbCS复合HbH病患儿临床表现比缺失型HbH病患儿严重的原因。     

两种糖化血红蛋白分析仪的临床应用

目的根据糖化血红蛋白检测方法的不同对其进行比较和评析。方法根据卫生部临床检验标准化委员会和卫生部临床检验中心推荐的美国临床实验室标准化研究所（CLSI）文件要求进行精密度、线性、抗干扰的实验。结果HLC-723 G7型糖化血红蛋白仪各种指标远优于电泳法,HLC-723 G7型批内变异系数（CV）〈0．4％,批间CV〈0．6％,实验总不精密度CV〈1％,相关系数（r）=0．993。而电泳法CV〈4％,r=0．985。结论两种方法均符合卫生部临床检验中心室间质量评价可接受标准糖化血红蛋白总不精密度不超过5％。但HLC-723 G7型糖化血红蛋白仪具有更快速、准确、简便等优点各种指标远优于电泳法。     

不同基因型血红蛋白H病的血红蛋白电泳和红细胞参数分析

目的对不同基因型血红蛋白H病(HbH病)的血红蛋白电泳和红细胞参数进行分析。方法采用全自动血细胞分析仪获得相关的红细胞参数,同时进行血红蛋白电泳分析和基因型分析,并对不同基因型的红细胞参数和HbH含量分组进行统计学分析比较。结果所有HbH病患者的相关红细胞参数均呈现不同程度的降低,大部分的HbH病患者在电泳分析中呈现HbH带,-SEA/-αC-S型的各项参数(血红蛋白、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白含量及HbH含量)与-SEA/-α3.7型或-SEA/-α4.2型的相比较,均有明显的统计学差异,HbH含量的差异尤为显著,而-SEA/-α3.7的各项参数与-SEA/-α4.2比较,无明显统计学差异。结论该研究丰富了HbH病患者的分子遗传学和血液学的科学资料,对HbH病患者的遗传指导具有重要的意义。     

142例血红蛋白H病患者血液学与分子生物学检测结果分析

目的分析α-珠蛋白生成障碍性贫血（地贫）血红蛋白H病（HbH病）在临床血液学参数分析及分子生物学检测中的特点并探讨其原因。方法回顾性分析南宁市农村地区142例用分子生物学诊断为HbH病患者的CE结果和相关的血液学指标。结果142例HbH病患者中,缺失型HbH病89例,占62．68％,非缺失型HbH病53例,占37．32％;缺失型HbH病CE可见HbH峰,HbCS复合HbH病既可见HbH峰,又可见HbCS峰。血红蛋白电泳及血液学分析显示非缺失型HbH病患者的HbH水平及贫血程度高于缺失型HbH病（P＜0．05）。结论南宁市农村地区HbH病基因突变类型多样,以缺失型为主;HbCS复合HbH病在CE中可出现特异的HbCS峰;高HbH含量以及CS链在红细胞膜上的聚集是造成HbCS复合HbH病患者临床表现比缺失型HbH病患者严重的主要原因。     

毛细管电泳法检测糖化血红蛋白的分析性能评估

目的评估毛细管电泳(CE)法检测糖化血红蛋白(Hb A1c)的精密度、正确度、线性和抗干扰性,并与高效液相色谱法(HPLC)进行比对。方法根据不同的评估内容,收集相应样本,分别使用SEBIA CAPILLARYSTM2 Flex Piercing毛细管电泳仪(毛细管电泳法)、ARKRAY HA-8160全自动Hb A1c分析仪(HPLC)和IFCC参考方法检测Hb A1c。采用SPSS 19.0软件进行统计描述及线性回归模型分析。结果毛细管电泳法检测Hb A1c在常见浓度(4.91%~9.67%)下的不精密度均2%;与IFCC参考方法,相关程度较好(R2=0.993);当Hb A1c浓度为5.0%~17.6%时,毛细管电泳法具有良好的线性(R2=0.995),对氨甲酰化血红蛋白、不稳定Hb A1c、胆红素、乳糜微粒等具有较好的抗干扰能力(绝对偏倚≤0.5%)。毛细管电泳法Hb A1c的测定值与HPLC具有较好的相关性(R2=0.993)。结论毛细管电泳法的精密度、正确度、线性和抗干扰性等分析性能均符合临床实验室常规检测Hb A1c的要求。     

两种糖化血红蛋白检测方法的应用评价

目的探讨离子交换高效液相色谱法(HPLC)与胶乳凝集法检测糖化血红蛋白的可比性及结果一致性。方法使用离子交换高效液相色谱法与胶乳凝集法分别测定糖化血红蛋白,对结果进行分析比较。结果 HPLC法与胶乳凝集法的结果差异无统计学意义(P>0.05),两种方法批内及批间变异系数(CV)均小于3%,两种方法相关性良好(r=0.985)。结论 HPLC和胶乳凝集法两种检测方法的结果具有可比性,均能满足临床需要。     

变异血红蛋白对2种基于HPLC原理的糖化血红蛋白检测系统的影响

目的 比较亲和层析-高效液相色谱(AC-HPLC)系统和离子交换-高效液相色谱(IE-HPLC)系统测定血红蛋白(Hb)结构不同的血液样本中HbAlc的结果 ,评价变异Hb对2种检测系统的影响.方法 分别用2种HPLC系统同时检测HbA1c含量在5%～11%、Hb结构正常的血液样本和含有不同浓度胎儿Hb(HbF)的血液样本以及α-地中海贫血(α-MA)和β-地中海贫血(β-MA)患者血液样本中的HbA1c浓度.结果 对于Hb结构正常、HbA1c含量在5%～11%的血液样本,2种HPLC检测系统的测定结果 差异无统计学意义(P>0.05).AC-HPLC法不受血液样本中HbF的干扰;若血液样本中HbF的含量超过8.8%,IE-HPLC法测定结果 存在一定的偏倚,当HbF含量达70% 时甚至无法测出结果 .对于α-MA和轻型β-MA患者的血液样本,IE-HPLC法的结果 明显高于AC-HPLC法(P<0.01、P<0.05),而重型β-MA患者的样本用IE-HPLC法甚至无法测得结果 .结论 用IE-HPLC法检测含变异Hb、HbF的样本中的HbA1c,结果 可能受干扰;而用AC-HPLC法则不受干扰.     

变异血红蛋白对2种基于HPLC原理的糖化血红蛋白检测系统的影响

目的比较亲和层析-高效液相色谱(AC-HPLC)系统和离子交换-高效液相色谱(IE-HPLC)系统测定血红蛋白(Hb)结构不同的血液样本中HbAlc的结果,评价变异Hb对2种检测系统的影响。方法分别用2种HPLC系统同时检测HbA1c含量在5%~11%、Hb结构正常的血液样本和含有不同浓度胎儿Hb(HbF)的血液样本以及α-地中海贫血(α-MA)和β-地中海贫血(β-MA)患者血液样本中的HbA1c浓度。结果对于Hb结构正常、HbA1c含量在5%~11%的血液样本,2种HPLC检测系统的测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。AC-HPLC法不受血液样本中HbF的干扰;若血液样本中HbF的含量超过8.8%,IE-HPLC法测定结果存在一定的偏倚,当HbF含量达70%时甚至无法测出结果。对于α-MA和轻型β-MA患者的血液样本,IE-HPLC法的结果明显高于AC-HPLC法(P<0.01、P<0.05),而重型β-MA患者的样本用IE-HPLC法甚至无法测得结果。结论用IE-HPLC法检测含变异Hb、HbF的样本中的HbA1c,结果可能受干扰;而用AC-HPLC法则不受干扰。     

毛细管电泳与血红蛋白分析仪在血红蛋白病检测中的比较

摘要：目的：比较毛细管电泳和血红蛋白分析仪在血红蛋白病检测中的应用。 方法：用毛细管电泳仪检测8 691例一般就诊患者和可疑血红蛋白病119例患者标本, 对确定为血红蛋白变异体的标本,用血红蛋白分析仪再次检测。对所有可疑的地中海贫血或者血红蛋白变异体样本进行基因分析及测序验证。 结果：119例可疑患者标本中经毛细管电泳检测出4例Hb H、6例Hb CS、5例Hb Bart′s、5例Hb E。而血红蛋白分析仪仅检出5例Hb E。8 691例一般就诊患者标本中,毛细管电泳检出16例Hb J、2例Hb D-Punjab、1例Hb O-Arab、162例Hb CS和43例Hb E,而血红蛋白分析仪仅检出43例Hb E,两种方法均未检出Hb S。地中海贫血或者血红蛋白变异体经过基因分析或DNA测序均得到验证。 结论：毛细管电泳检测血红蛋白病的效果优于血红蛋白分析仪。     

两种方法检测糖化血红蛋白结果的对比分析

目的比较2种方法测定糖化血红蛋白(HbA1c)的结果之间的差异。方法采集糖尿病患者静脉全血标本,使用两种方法,即胶乳增强免疫比浊法在日立7170A全自动生化分析仪上,与高效液相色谱法(HPLC)在全自动糖化血红蛋白仪BIO-RADD10上,同时测定其HbA1c,对结果进行比较分析。结果 HPLC(X)与胶乳增强免疫比浊法(Y)测定结果呈明显正相关(r=0.9682);回归方程:y=1.127x-0.004。但胶乳增强免疫比浊法测定HbA1c的结果值较HPLC法明显偏高(P<0.01),以HPLC法为参照,胶乳增强免疫比浊法结果的相对偏倚为12.65%。结论实验室应尽量采用HPLC法为检测方法,或以其为参考方法对胶乳增强免疫比浊法进行校准或设置相应的参考区间,以提高结果的准确性与可靠性。     

毛细管电泳检测血红蛋白Constant Spring

目的评价Capillarys 2型毛细管电泳仪在检测α非缺失型地中海贫血(地贫)Hb Constant Spring(Hb CS)中的应用价值。方法用Capillarys 2型毛细管电泳仪分别对确诊的67例Hb CS患者、50例非地贫患者和54例健康人进行血红蛋白电泳,提取全血基因组DNA进行PCR扩增及反向斑点杂交试验检测Hb CS。随机选取含量分别为0.1%、0.2%、1.5%、1.6%、2.7%和2.8%的6份Hb CS标本各重复测定5次,以评价仪器的重复性。结果以PCR加反向斑点杂交为金标准,Capillarys2型毛细管电泳仪测定Hb CS的敏感性和特异性分别为94.0%、98.1%,阳性预测值为96.9%,阴性预测值为96.2%,诊断效率为96.5%。Hb CS纯合子的Hb CS含量为(1.82±0.60)%,Hb CS杂合子为(0.55±0.26)%,二者差异有统计学意义(t=9.31,P<0.01)。重复性测定的6份标本值分别为(0.12±0.04)%、(0.18±0.04)%、(1.52±0.04)%、(1.6±0)%、(2.66±0.05)%、(2.8%±0.06)%。结论 Capillarys 2型毛细管电泳仪作为α非缺失型地贫血红蛋白CS的快速检测手段,有较高的敏感性、特异性和较好的重复性。     

中国人群少见血红蛋白H病的分子遗传学特征分析

目的 分析由少见基因类型导致的血红蛋白H病家系的分子遗传学特征.方法 采用标准的血液学分析技术检测先证者及家系成员红细胞参数,包括RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC和RDW,进行表型诊断.利用SPIFE快速自动电泳分析系统检测其血红蛋白组分Hb A、HbA2、Hb F、Hb H和Hb Bart＆#39;s.采用反向斑点杂交技术诊断α-地中海贫血基因非缺失突变,利用gap-PCR扩增特异位点序列并对扩增序列进行克隆测序,明确突变位点.结果 先证者母亲MCV、MCH均降低,Hb A2为2.39％且亨氏小体阳性,基因检测结果为α泰国型缺失杂合子.先证者父亲各红细胞参数正常,但RDB检测结果为携带αCS点突变.先证者及其弟表现为中重度小细胞低色素贫血,蛋白电泳结果显示他们均有Hb H和Hb Bart＆#39;s带,先证者Hb H为1o.8％,Hb Bart＆#39;s为7.51％,其弟Hb H为14.78％,Hb Bar（s为9.11％,基因检测结果证实该姐弟均为HbH病患者,遗传了母亲的α泰国型缺失片段和父亲的αCS点突变,故α地中海贫血型别为THAI/ααcs.结论 首次报道中国人群少见的H病类型THAI/α αcs地贫基因类型是中国人群少见的H病类型,丰富了中国人群α珠蛋白基因突变谱.     

三种相同原理的糖化血红蛋白分析仪检测结果的初步比对

目的比较3种常用的基于离子交换高效液相色谱原理的糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪[TOSOH HLC-723 G7全自动HbA1c分析仪(简称HLC-723 G7)、Bio-Rad D-10全自动HbA1c分析仪(简称D-10)和ArkrayADAMSTMA1c HA-8160全自动HbA1c分析仪(简称HA-8160)]测定商品质控品和临床患者样本的结果,以评价不同仪器测定结果间的偏差。方法于13 d内分别使用3种仪器测定高、低浓度HbA1c质控品,合格后测定58份临床患者新鲜样本。使用Levene’s检验对3种仪器测定质控品和临床样本的结果进行方差齐性检验;认定方差相等后,对其进行单因素方差分析,观察3种仪器结果间的差异;根据临床样本结果,分别作散点图及偏差图用以观察3种仪器之间测定结果的相关性及偏差;分别计算每2个仪器间的线性回归方程,并对患者样本HbA1c结果进行预期偏差估计。结果 3种仪器测定低值质控品的结果差异有统计学意义(P<0.05),测定高值质控品的结果差异无统计学意义(P>0.05)。3种仪器临床样本的测定结果之间相关性较好(P>0.05)。在4.9%～11.4%HbA1c范围内,HA-8160、D-10的线性回归方程为Y=0.963X+0.179,r=0.988,r2=0.976;测定HbA1c的相对偏差为-0.37%～0.72%。HLC-723 G7、D-10的线性回归方程为Y=0.968X+0.523,r=0.991,r2=0.982;测定HbA1c的相对偏差为-0.1%～0.8%。HLC-723 G7、HA-8160的线性回归方程为Y=0.987X+0.480,r=0.984,r2=0.969;测定HbA1c的相对偏差为-0.13%～1.12%。结论在常见的生理及病理范围内,HLC-723G7、D-10和HA-8160 3种仪器的测定结果之间没有明显偏差。     

两种糖化血红蛋白分析方法的评价

目的对离子交换高压液相层析法与金标免疫渗滤法检测糖化血红蛋白进行方法学分析。方法用离子交换高压液相层析法(X)和金标免疫渗滤法(Y)测定糖化血红蛋白进行线性范围、回收率、精密度、干扰因素、相关性及参考范围的分析。结果离子交换高效液相色谱法(HPLC法)与金标免疫渗滤法(金标法)的线性范围分别为4.3%~17.0%和3.6%~12.5%,两种方法的回收率均为101.3%,批内、批间的变异系数(CV)均<5%;10.2%mmol/L三酰甘油、684μmol/L总胆红素和HbF对两种方法均无干扰。金标法测定糖化血红蛋白的结果较HPLC法明显偏低(P<0.01);回归方程Y=0.89X 0.24(r=0.94,P<0.01);HPLC法与金标法的参考范围分别为4.2%~6.7%和4.1%~6.4%。结论金标法与HPLC法相比,糖化血红蛋白检测结果明显偏低。     

两种糖化血红蛋白检测方法的比较

糖尿病的检测方法有很多，糖化血红蛋白作为糖尿病筛选、诊断、疗效考核的有效检测指标，已越来越多地在临床中使用。糖化血红蛋白目前主要的测定方法有3种：(1)离子交换高效液相色谱分析法；(2)硼酸亲和层析法；(3)免疫分析法。本文用免疫抑制比浊法与金标层析法分别检测血标本中的糖化血红蛋白含量，对结果进行统计分析，并对两种方法进行比较。     

异常血红蛋白病患者血液学表型和基因型分析

目的:探讨14例异常血红蛋白(Hb)病患者的血液学和分子生物学特征,为异常Hb病的筛查提供参考数据.方法:应用高效液相色谱技术检测1 029例样本,采用缺口聚合酶链式反应技术和反向点杂交法检测中国人常见的α和β珠蛋白基因突变类型,对筛查出异常谱峰且常见地中海贫血基因阴性者的样本进行α和β珠蛋白基因DNA测序.结果:检测...     

东南亚缺失型α地中海贫血1复合血红蛋白CS家系基因突变检测的方法学探讨

本研究旨在应用PCR与PCR-RFLP（限制性片段长度多态性）相结合的方法,检测东南亚缺失型（South-East Asian,SEA）α地中海贫血1（--^SEA／）和HbCS（Constant Spring血红蛋白）基因突变,并探讨其应用价值。先用PCR方法检测α地中海贫血患儿家庭成员的SEA缺失型基因突变,再用PCR-RFLP方法进行血红蛋白CS（HbCS）点突变的筛查。结果表明：从7个家庭19名成员中检出15人为α-地中海贫血（--^SEA）携带者,2个家庭为合并的α-地中海贫血1与血红蛋白CS的双重杂合（--^SEA／α^csα）家系。结论：PCR结合PCR—RFLP方法可简便、快速、准确地检测基因型为--^SEA／α^csα的HbH病。