少突胶质前体细胞移植治疗脊髓损伤

脊髓损伤(spinal cord injuries,SCI)是常见的中枢神经系统损伤,可以造成感觉、运动等神经功能严重丧失。迄今为止,临床上尚无有效方法治疗脊髓损伤。以往研究表明,脊髓损伤后继发性病理生理变化不仅导致神经元丢失及轴突断裂,同时也影响着星形胶质细胞和少突胶质细胞(oligoden     

细胞移植治疗脊髓损伤

细胞移植治疗脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是近来SCI治疗的研究热点，主要是通过细胞移植来促进变性神经元的再生和抑制胶质瘢痕形成，达到修复受损的神经通路和突触连接。细胞移植根据移植物的不同可以大体分为神经细胞和非神经细胞移植，移植物包括周围神经源性神经元、嗅鞘细胞、活化巨噬细胞、骨髓基质细胞、少突胶质细胞前体细胞、胚胎干细胞以及转基因细胞等。这些实验方法已经陆续开始应用于临床，给曾经被认为完全不可治愈的脊髓损伤带来了希望。     

嗅神经髓鞘细胞移植促进大鼠横断脊髓轴突再生的研究

目的;观察嗅神经髓鞘细胞（OECs)对脊髓轴突再生的促进作用。方法：将分离,纯化与体外培养2周的SD大鼠OECs,移植于12只成年SD大鼠第10胸椎横断模型的脊髓两断端;8只对照动物注入DMEM／F12培养基,移植后2周和8周进行神经嗜银染色与髓磷脂碱性蛋白（MBP）组织化学和神经生长因子受体（NGFR）免疫组织化学研究。结果：OECs移植组2周后脊髓两端在形态学上呈现初步愈合现象,组织学观察显示,移植OECs与损伤脊髓组织整合良好,再生轴突长入断端组织,8周时再生轴安全检查明显增多,OECs与再生轴突均呈MBP和NGFR阳性表达。对照组两断端液化坏死,未见再生轴突。结论：OECs移植可保护损伤的脊髓并促进宿主脊髓轴突再生。     

NUMBL在大鼠脊髓损伤过程中的表达变化

[目的]观察NUMBL在大鼠脊髓损伤过程中的表达情况,探讨其在脊髓损伤和修复过程中的生物学功能.[方法]制作脊髓损伤模型,利用western blot、免疫组织化学、免疫荧光等技术观察NUMBL在损伤脊髓中的表达变化、组织分布与细胞定位,在此基础上探讨NUMBL在脊髓损伤后的病理生理意义.[结果]western blot结果显示NUMBL经历了在损伤后8 h和1 d的显著增加后开始下降,直到损伤后2周仍没有明显上调的变化趋势.免疫组化结果显示在脊髓损伤后1 d,NUMBL的表达在临近损伤中心的脊髓中显著增加,而在脊髓损伤后1周,NUMBL的表达较1d时明显降低.免疫荧光结果显示NUMBL与神经元和少突胶质细胞存在共定位,而与星形胶质细胞无明显共定位.[结论]脊髓损伤后脊髓中NUMBL的表达上调参与脊髓损伤的病理过程.     

嗅鞘细胞移植调节星形细胞活性促进急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复

[目的]探讨嗅鞘细胞(OECs)对急性脊髓损伤大鼠星形胶质细胞(AST)激活的影响。[方法]乳鼠嗅球制备嗅鞘细胞,制备急性脊髓损伤模型,随机分为3组,空白组:T_(9-11)椎板去除;对照组:T_(10)脊髓损伤,DMEM/F_(12)移植;实验组:T_(10)脊髓损伤,OEC移植。行BBB评分和体感诱发电位检测评价神经功能,Western Blot检测GFAP、CSPG、bFGF表达变化,观察脊髓损伤后星形胶质细胞激活情况及OEC移植对其影响。[结果](1)脊髓损伤后GFAP阳性细胞数目增加,实验组少于对照组,尼氏染色及NF-200阳性细胞数目实验组多于对照组,差异有统计学意义;(2)Western Blot:脊髓损伤后GFAP、CSPG表达增加,bFGF表达下降,OEC干预后,GFAP、CSPG表达较对照组下降。bFGF表达增加;(3)神经功能:脊髓损伤BBB评分及SEP显示治疗组大鼠神经功能得到改善。[结论]嗅鞘细胞移植可抑制星形胶质细胞增殖,调节因子分泌,促进大鼠脊髓损伤恢复。     

少突胶质细胞在脊髓损伤中的病理反应和作用

长期以来的研究认为少突胶质细胞的主要功能是形成中枢神经系统轴突髓鞘、营养和保护轴突,但近年研究发现少突胶质细胞尚有为中枢神经系统提供多种神经营养因子和生长因子、表达轴突生长抑制因子等作用,从而调节神经元、星形胶质细胞,甚至少突胶质细胞本身的生长、发育和存活.少突胶质细胞的凋亡、再生、髓鞘化和形成胶质瘢痕等反应在脊髓损伤继发性病理过程中扮演极其重要的角色,针对少突胶质细胞这一角色制定继发性脊髓损伤治疗新策略,有望成为解决这一医学难题的新切入点.该文就少突胶质细胞的生物学功能及其在脊髓损伤后的反应的研究进展作一综述.     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的进展

嗅鞘细胞（Olfactory ensheathing cells,OECs）是一种嗅神经的支持细胞,它起源于嗅基底膜,分布在嗅球,嗅神经和嗅中枢,作为一种具有中枢神经系统（CNS）星形胶质细胞,少突胶质细胞和周围神经系统（PNS）雪旺氏细胞特性的特殊细胞类型,它位于中枢和外周神经系统过渡区,其功能极为活跃,嗅鞘细胞移植能降解有关抑制轴突再生分子,分泌不同种类的神经营养因子和支持因子,促进神经轴突和髓鞘的再生,     

细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状与展望

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）治疗的移植物包括组织移植和营养支持细胞移植。组织移植可作为支架桥接损伤间隙，使新生和损伤的轴突沿适当的方向生长，并可刺激有助于轴突生长的蛋白质释放。细胞移植可在脊髓损伤的多个方面起作用，如替代受损细胞如神经元和少突胶质细胞，分泌促进再生的神经营养因子，保护神经元，减轻继发损伤，在脊髓损伤空洞区形成桥接引导神经再生，酶解胶质瘢痕，去除细胞碎片，调节免疫反应，修复脊髓中的非神经组织如血管等。     

脊髓干细胞移植对脊髓损伤后神经功能的影响

目的探讨胚胎脊髓神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的意义。方法160只SD大鼠随机分为空白组,假手术组,脊髓损伤组,细胞移植组,分别在细胞移植后1、2、4周应用斜板实验和Tarlov评分对脊髓损伤后功能恢复进行评价,应用nestin标记观察移植后干细胞的存活情况。结果移植后1周、2周、4周,移植组和对照组斜板试验结果分别为(38．30±0．84)°、(18．50±0．76)°；jm(39．40±0．78)°、(19．70±0．66)°；(45．00±0．81)°、(22．30±0．69)°；Tarlov评分分别为3．37±0．45、2．32±0．34；3．45±0．38、2．41±0．43；3．63±0．47、2．45±0．48；有统计学意义(P＜0．01),免疫组织化学观察可见在损伤的脊髓组织中有神经干细胞的存活。结论胚胎脊髓干细胞移植对脊髓损伤后神经功能恢复有促进作用。     

细胞移植与脊髓再生

脊髓损伤（spinalcordinjury,SCI）后，由于在中枢神经系统（centralnervoussystem,CNS）没有能提供断裂轴突有效再生的微环境而使SCI不能痊愈，给伤者留下严重的躯体功能障碍。人们从外周神经移植后轴突完全再生的成功经验中发现：外周神经系统（peripheralnervoussystem,PNS）之所以能完全再生，主要是由于神经轴突的髓鞘细胞———雪旺细胞（Schwanncell,SC，神经膜细胞）能有效地增殖形成引导通道，并分泌大量神经营养因子和细胞分子，促使轴突有效再生，功能恢复。而在CNS，与SC功能相近的少突胶质细胞却无此类功能，其增生迁…     

三七总皂甙对鼠脊髓损伤早期病理变化影响的观察

Allen氏法250g·cm致伤60只Wistar大鼠T13～L1脊髓节段。伤后30min、2h、4h、第二及第三个24h分别腹腔注射三七总皂甙（PNS）100mg／kg及50mg／kg体重；另设二甲亚砜对照组及空白对照组。伤后30min、2h、6h、24h、1周及6周各取伤区脊髓组织送光、电镜检查。结果显示PNS治疗组脊髓灰质出血坏死较轻，周围白质大部存留，髓鞘残留，大量毛细血管和少突胶质细胞增生。提示PNS可减轻脊髓损伤后的灰质坏死，调节微循环和减轻继发性病理损害，为白质存活创造条件。     

人脐血单个核细胞促进脊髓损伤后的轴突再生

[目的] 讨论人脐血单个核细胞(human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)移植治疗大鼠脊髓损伤后损伤区域轴突再生情况和功能恢复.[方法] 利用 Impactor Model Ⅱ打击器制成30例T10脊髓损伤模型,分组为:实验对照组(DMEM细胞培养基),损伤后3 d HCMNCs移植组,损伤后14 d HCMNCs移植组,每组10例.以HE染色和免疫组化染色以及BDA顺行示踪染色观察脊髓损伤处轴突再生情况,结合对各组实验动物脊髓损伤后肢体功能的恢复情况进行行为学评分(BBB 评分),综合评估脊髓功能恢复程度.[结果] 与对照组比较,HCMNCs移植治疗能够明显促进神经轴突再生,改善功能恢复,损伤后14 d HCMNCs移植组优于损伤后3 d移植组,各组间疗效差异具有统计学意义(P<0.01).[结论] HCMNCs在体内向神经元及神经胶质细胞分化,促进神经轴突再生和功能恢复.损伤后14 d是移植的较为理想的时间.     

骨髓间充质干细胞移植促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响极其可能机制.方法 采集SD大鼠骨髓,分离出MSCs,并培养、纯化,取传至第6代的MSCs,移植前1 d以5溴2脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记,然后用显微注射器将其缓慢注射到脊髓损伤大鼠模型(成年SD大鼠)的受损脊髓中心,以不进行移植的脊髓损伤大鼠模型(损伤组)和假手术组为对照.术后进行运动功能评分以判断神经功能恢复情况,并切取移植区域脊髓组织,应用荧光免疫化学染色检测脊髓损伤灶边周的神经元凋亡情况(TUNEI.与NeuN双标记)以及移植的MSCs的分布和向神经元分化情况(Brdu与NeuN双标记),应用逆转录聚合酶链反应检测损伤灶区域脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA的表达.结果 移植后第3天开始,损伤组和移植组大鼠的BBB运动功能评分明显上升,第14天后进入平台期,但移植组各时间点的.BBB运动功能评分均明显高于损伤组(P<0.05).移植后3 d,在移植组的脊髓组织中可见Brdu标记阳性细胞,少部分Brdu标记阳性细胞同时表达神经元特异性标志物NeuN;移植后第3、7天,损伤组和移植组脊髓组织中的凋亡神经元均显著多于假手术组(P<0.01),凋亡的神经元多存在于损伤周边区,但移植组的凋亡神经元显著少于损伤组(P<0.01);移植后第3、7天,假手术组未检测到BDNF mRNA的表达,损伤组和移植组均可检测到BDNF mRNA的表达,移植组的表达量分别较损伤组高28.6%和39.2%(P<0.05).结论 移植的骨髓MSCs可促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复,其机制除MSCs直接分化为神经元进行修复外,还可能与其改善脊髓损伤区的微环境、上调BDNF、mRNA表达、减少神经细胞凋亡有关.     

胚胎脊髓移植对成鼠损伤脊髓血流量恢复的影响

以往有过不少脊髓损伤移植修复的研究报道，但有关移植后宿主脊髓血流量变化的研究却未见报道。为此，作者将胎鼠脊髓植入成鼠损伤脊髓后，用氢清除法测量了宿主脊髓血流量（Spinalcordbloodflow，SCBF），旨在探讨胚胎脊髓移植对宿主脊髓血流量恢复的影响。材料与方法以成年Wistar大鼠脊髓为移植受体。乌拉坦1．259从g腹腔麻醉后，暴露脊髓腰膨大。半切左侧脊髓，并搅毁局部脊髓组织，尔后用吸引器吸除损毁的脊髓组织。如此在半切脊髓的基础上制造了一个直径约Zmm、深达脊髓腹侧硬脊膜的盲洞、取妊娠14d服鼠颈胸段脊髓，剔除与之相连的…     

胚胎脊髓组织移植促进成年宿主损伤脊髓功能恢复的研究

目的 探讨胚胎脊髓组织移植促进成年宿主损伤脊髓功能恢复的作用。方法 采用成年大鼠脊髓半切洞损伤模型，移植胚胎大鼠脊髓组织，术后进行联合行为计分（CBS)、体感诱发电位(SEP）、运动诱发电位(MEP）和性行为及生育机能检查。结果 移植组CBS与对照组比较相差显著（P＜0.05)，移植术后4周以内两者相差非常显著(P＜0.01）；移植组SEP、MEP早期反应的峰潜伏时恢复优于对照组(P＜0.05)；术后4～12周75%的雌鼠阴道涂片检出精子并能正常生育。结论 胚胎脊髓移植能促进成年宿主损伤脊髓的功能恢复。     

细胞移植治疗脊髓损伤

细胞移植治疗脊髓损伤(spinalcord injury,SCI)是近年来研究热点,主要是通过细胞移植来促进变性神经元的再生和抑制胶质瘢痕形成,达到修复受损的神经通路和突触连接。细胞移植根据移植物的不同大体分为神经细胞和非神经细胞移植,移植物包括周围神经源性神经元、嗅鞘细胞、活化巨噬细胞、骨髓基质细胞、少突胶质细胞前体细胞、胚胎干细胞以及转基因细胞等。这些实验方法已经陆续开始应用于临床,给曾经被认为完全不可治愈的SCI带来了希望。1SCI的机制和治疗策略SCI一般分为两个阶段:①原发性损害:SCI早期,局部脊髓组织的挫伤导致细胞坏…     

不同方法移植胚胎脊髓促进成鼠损伤脊髓功能恢复的研究

目的：研究提供血运的胚胎脊髓移植对成鼠损伤脊髓功能恢复的作用。方法：将成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠作为脊髓半切洞损伤模型,应用单纯胚髓组织、胚胎脊髓＋大网组织、胚社以半切洞损伤的脊髓中,手术后１、２、４、１２周进行联合行为发,感觉诱闰（ＳＥＰ）和运动诱发电位（ＭＥＰ）检查,并与一言堂３组为单纯损伤线比较。结果：联合行为评分,单纯移植级和胚胎脊髓＋大网膜组织移植组优于单纯损伤组,ＳＥＰ和ＭＥＰ潜峰时的恢复,     

嗅鞘细胞与中枢神经损伤修复

中枢神经损伤特别是脊髓损伤的修复，至今仍然是医学界的一个难题。其原因是中枢神经的再生能力低下及外在环境对轴突再生的抑制作用。国内外已进行了大量的实验来研究中枢神经损伤的修复问题。这些研究主要从以下方面入手：拮抗神经生长的抑制性环境；刺激轴突再生；细胞移植。用来移植的细胞类型有：胶质细胞包括雪旺细胞、少突神经胶质细胞或其前体细胞、嗅鞘细胞；     

M2型小胶质细胞移植促进小鼠脊髓损伤修复的实验研究

目的 探讨M2型小胶质细胞（M2 microglia,M2-MG）移植促进小鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）修复的效果。方法 取15只新生2～3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培养48 h（实验组）,通过精氨酸酶1(Arginase 1,Arg-1)、Iba1免疫荧光染色鉴定其是否极化为M2-MG;以正常培养MG作为对照组。另取5只新生1周C57BL/6乳鼠背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）与M2-MG共培养5 d,观测轴突长度;以单纯DRG作为对照。取42只6周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组（n=6）、SCI组（n=18）及SCI+M2-MG组（n=18）。手术暴露脊柱T10节段后,假手术组仅切除椎板,SCI组及SCI+M2-MG组行SCI造模后,SCI+M2-MG组同时注射M2-MG。术后观测各组小鼠存活情况,并于术后当天（0）、3、7、14、21、28 d采用BMS(Basso Mouse Scale)评分评价小鼠运动功能恢复情...     

胚胎脊髓移植联合反应MK—801促进大鼠脊髓损伤后功能恢复

目的 研究胚胎脊髓移植并应用Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗剂ＭＫ－８０１能否促进半切洞脊髓损伤后功能恢复。方法 将成年大鼠分为３组,Ａ组：单纯脊髓半切洞损伤组;Ｂ组：脊髓半切洞损伤＋胚胎脊移植组;Ｃ组：脊髓半切洞损伤＋胚胎脊髓移植＋ＭＫ－８０１组。手术后应用联合行为评分（ＣＢＳ）、感觉诱发电位（ＳＥＰ）、运行诱发电位（ＭＥＰ）检查。结果 ３组ＣＢＳ得分Ａ组〉Ｂ组〉Ｃ组;ＳＥＰ和ＭＥＰ