ZEB1-SCRIB环路与肿瘤转移

0 引言 上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT),是指上皮细胞失去极性,经过细胞骨架重塑,转变成具有迁移能力的间充质表型的过程,发生EMT的细胞主要表现为细胞变梭、伸出丝状伪足并获得侵袭运动能力;在分子生物学方面表现为上皮标志物E-cadherin(E-钙连蛋白)的缺失或减弱,而获得间质标志物,如N-cadherin(N-钙连蛋白)、Vimentin(波形蛋白)、Fibronectin(纤连蛋白)等.学术界已达成广泛共识,EMT过程是多种肿瘤进展的关键事件[1-2].发生EMT的细胞侵袭力更强,进入微血管与淋巴管而转入靶器官中,随后经历间质-上皮的逆向转化(MET)产生与其原发灶结构类似的转移瘤)[3].     

乳腺癌干细胞上皮-间质转化标志物表达变化及意义

目的 探讨乳腺癌干细胞上皮．间质转化标志物表达变化及其临床意义。方法采用无血清悬浮培养法,从MCF-7细胞培养乳腺癌微球体细胞,应用流式细胞仪检测微球体细胞中CD44和CD24的表达,采用Westernblot方法检测微球体细胞中E-钙黏素、N-钙黏素、纤维连接蛋白、波形蛋白的表达水平,体外穿膜实验检测肿瘤细胞的迁移、侵袭能力。结果乳腺微球体富集了CD44＋CD24-的乳腺癌干细胞,并能在含血清培养基中增殖分化。该微球体细胞的上皮标志物E-钙黏素表达水平下调,而间质标志物N-钙黏素、纤维连接蛋白、波形蛋白的表达水平上调,同时乳腺癌干细胞的迁移、侵袭能力显著增强。结论乳腺癌干细胞具有上皮-间质转化的特征,具有显著增强的迁移、侵袭能力。     

胶质母细胞瘤中上皮-间质样转化机制研究进展

上皮-间质转化是一种正常的细胞生理发育过程,主要表现为上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型的细胞,上皮-间质转化在胚胎形成、组织再生、肿瘤进展等过程中发挥重要作用。最新研究表明,胶质母细胞瘤的发生发展（特别是侵袭迁移）中出现了类似上皮-间质转化（又称上皮-间质样转化）的转变过程。本文对上皮-间质样转化在胶质母细胞瘤中分子调控机制,包括主要信号通路及转录因子、miRNA、肿瘤干细胞、缺氧微环境、治疗抵抗等方面的最新进展进行综述。      

上皮-间质转化在非小细胞肺癌侵袭与转移中作用的研究进展

上皮-间质转化（Epithelial—mesenchymal transition,EMT）与恶性肿瘤的侵袭及转移有着密切的关系,是目前研究恶性肿瘤侵袭及转移的热点。有大量研究表明在多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌和非小细胞肺癌的侵袭与转移过程中都有上皮-间质转化现象,并阐述上皮-间质转化的信号通路及其蛋白分子。本文对上皮-间质转化在非小细胞肺癌侵袭与转移的研究成果做一综述。     

姜黄素逆转电离辐射诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化

目的 探讨姜黄素对电离辐射诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化的影响。方法 用电离辐射诱导A549细胞发生上皮间质转化,将其命名为A549R。CCK8法检测细胞增殖;Western blot检测姜黄素对A549R上皮/间质标志物表达的影响;划痕实验及Transwell实验检测姜黄素对A549R细胞迁移能力的影响。结果 A549R细胞经姜黄素处理后,细胞形态由纺锤形转变为椭圆形上皮形态;E-cadherin表达下调,pan-Keratin表达上调,Vimentin、Twist表达显著下调,N-cadherin表达水平无明显变化;划痕愈合面积随姜黄素浓度的升高而显著下降;A549R细胞迁移能力随姜黄素浓度的升高而显著下降。结论 姜黄素通过下调E-cadherin、Vimentin、Twist的表达,并上调Keratin的表达,从而逆转电离辐射诱导A549细胞发生上皮间质转化。     

乳腺癌上皮间质转化与耐药关系的研究进展

肿瘤上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)是指肿瘤在各种因素作用下上皮细胞转变为具有高侵袭、转移能力间质表型的过程。EMT与细胞上皮表型标志物E-钙黏蛋白表达下调、间质表型标志物上调和相关基因表达改变有关。EMT的发生能够促进乳腺癌侵袭、转移和干细胞特性获得,诱导乳腺癌细胞对化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗产生获得性耐药。同时研究发现,乳腺癌耐药细胞能够发生EMT,并获得干细胞表型。因此,针对乳腺癌细胞EMT的相关研究可以帮助人们在肿瘤抗耐药治疗中找到新的策略。本文旨在对EMT与乳腺癌发生获得性耐药之间关系的最新研究进展作一综述。     

间充质干细胞对乳腺癌MCF-7细胞侵袭力的研究

目的探讨人胎盘羊膜来源的间充质干细胞(h AMSCs)向乳腺肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)转化后,对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法选取2017年7月至2018年7月间牡丹江医学院附属红旗医院收住的80例产妇的足月剖腹产胎儿羊膜。MCF-7单独培养或Transwell小室共培养人乳腺癌细胞系MCF-7和MSCs共培养组即试验组,MCF-7细胞MSC培养基组为对照组,MCF-7常规培养组为对照组2。采用RT-qPCR检测共培养后h AM-MSCs向CAFs转化及CAFs相关特征标志物平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)和腱生蛋白-c(tenascin-c)的基因表达。对共培养后的肿瘤细胞进行细胞EMT相关标志及肿瘤特性检测。结果与对照组比较,共培养试验组MCF-7细胞发生上皮间质转化。与MSCs共培养能明显促进乳腺癌细胞的侵袭和迁移。结论人胎盘羊膜来源的间充质干细胞可诱导乳腺癌细胞上皮间质转化。     

LPS诱导宫颈癌上皮间质转化的作用

目的:探讨LPS在宫颈癌细胞株Hela细胞增殖和上皮间质转化中的作用。方法:体外培养Hela细胞,以LPS(10μg/ml)诱导后,利用MTT法检测细胞的增殖情况。qPCR检测上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin的RNA水平上的表达。Western blot检测上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin的蛋白水平上的表达。Transwell检测LPS对Hela细胞迁移能力的影响。结果:在LPS诱导后能够明显的促进Hela细胞的增殖。E-cadherin在RNA和蛋白水平上都明显下降,N-cadherin、Vimentin在RNA和蛋白水平上都明显升高;LPS诱导后,明显促进Hela细胞的迁移能力。结论:LPS能够诱导宫颈癌细胞株Hela细胞的增殖和上皮间质转化。     

EMT与胚胎发育及肿瘤侵袭转移

上皮-间质转化（EMT）是上皮细胞受到细胞外因子刺激后向间质细胞转化的现象。EMT作用于钙粘蛋白,破坏细胞间连接,并受多种生长因子与转录因子调节。在胚胎发育及肿瘤的侵袭与转移起到重要作用。     

浸润性乳腺癌上皮-间质转化1例

0 引言上皮-间质转化( epithelial-mesen chymal transition,EMT)是胚胎发育、组织重建和伤口修复中的基础过程,同时也是肿瘤浸润、转移的一个非常重要的机制.在EMT过程中,上皮细胞之间连接松散,细胞失去基底面至表面的极性排列,形态呈梭形;上皮标志物E-钙黏素表达下降,间质标志物N-钙黏素、波形蛋白等表达增加;细胞侵袭和转移能力增强[1].这些EMT典型变化通常都是在细胞培养或动物移植瘤实验中发现的.     

EMT与胚胎发育及肿瘤侵袭转移

上皮-间质转化(EMT)是上皮细胞受到细胞外因子刺激后向间质细胞转化的现象.EMT作用于钙粘蛋白,破坏细胞间连接,并受多种生长因子与转录因子调节.在胚胎发育及肿瘤的侵袭与转移起到重要作用.     

肺癌上皮间质转化后引发Nrf2介导的多药耐药的研究

目的 探讨肺癌中上皮间质转化通过Nrf2通路导致多药耐药的可能性。方法 TGF-β1诱导肺腺癌细胞发生上皮间质转化, Western blot法检测癌细胞发生上皮间质转化的标志分子和细胞核内Nrf2的表达变化;比色法测定GSH含量及GST活力的变化;MTT实验检测癌细胞发生上皮间质转化前后对顺铂耐药指数的变化。结果 TGF-β1使癌细胞发生了上皮间质转化：细胞失去极性,上皮标志分子E-cadherin表达下降,而间质标志分子Vimentin和Snail表达上升;细胞发生上皮间质转化后细胞核内Nrf2表达显著增加,GSH含量增高及GST活力增强,癌细胞对顺铂的耐药指数是原来的7.7倍。结论 肺癌上皮间质转化后可能通过Nrf2通路介导了癌细胞的多药耐药。     

PAK5通过上皮-间质转化促进人乳腺癌细胞侵袭

目的:探讨p21活化激酶-5（p21-activated kinase 5,PAK5）蛋白对乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:观察PAK5过表达对乳腺癌细胞形态的影响,人乳腺肿瘤细胞MCF-7通过慢病毒感染稳定表达Flag-PAK5。然后提取感染细胞的总蛋白进行蛋白免疫印迹检测上皮-间质转化（EMT）标志物上皮-钙黏蛋白（E-cadherin）,纤维连接蛋白（Fibronectin）和波形蛋白（vimentin）的表达。最后通过Transwell实验检测过表达PAK5对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响。结果:过表达PAK5蛋白能够使细胞形态由鹅卵石样像梭形变化,下调E-cadherin蛋白,促进乳腺癌细胞迁移和侵袭。结论:PAK5可能参与调节乳腺肿瘤细胞发生上皮－间质转化,促进乳腺肿瘤侵袭转移的发生。     

转移性乳腺癌循环肿瘤细胞的上皮间质转化水平对化疗疗效的预测意义

目的 检测转移性乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞（CTCs）不同亚型相关基因的表达,探讨其对化疗疗效的预测意义。方法 应用免疫磁性分选（MACS）技术联合逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）法检测58例转移性乳腺癌患者和10例健康人外周血中CTCs上皮型标志物上皮角蛋白（CK18、CK19）和间质型标志物（波形蛋白、纤连蛋白）mRNA的表达。分析上皮型标志物及间质型标志物表达与不同亚型乳腺癌之间的关系,并分别评估具有不同表型CTCs患者之间疗效的差异。结果 在10例健康志愿者的血液样本中,未检测出CK18、CK19、波形蛋白和纤连蛋白mRNA的表达。在58例转移性乳腺癌患者的血液样本中,检测出36例（62.1％）上皮角蛋白表达,19例（32.8％）间质型标志物表达。Luminal A组和HER-2阳性组的上皮型标志物阳性表达率高于三阴性乳腺癌组（P=0.008）,而间质型标志物阳性表达率则低于三阴性乳腺癌组（P＜0.001）。根据不同标志物的表达情况,将患者分为CKs+／EMT-组、CKs-／EMT-组、CKs+／EMT+组和CKs-／EMT+组,4组有效率依次为76.7％、55.6％、33.3％和15.4％,差异有统计学意义（P=0.002）。间质型标志物阴性者的化疗有效率高于间质型标志物阳性者（71.8% vs. 15.8%,P=0.000）。结论 转移性乳腺癌患者中部分CTCs将发生上皮间质转化而丢失上皮型细胞的表型,获得间质型细胞表型。间质型CTCs因具有更强的抵抗化疗药物的能力而存活,这可能是三阴性乳腺癌疗效不佳的原因之一。     

乏氧环境下HO-1诱导表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移的调控作用研究

目的:研究乏氧对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及迁移能力的影响,并研究血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在这一过程中的作用,初步探讨其作用机制。方法:利用RNA干扰技术,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞中HO-1的表达,得到HO-1表达受干扰的细胞系MDA-MB-231-HO-1△。通过Transwell迁移、侵袭实验分别检测常氧及乏氧条件下MDA-MB-231-NC细胞（HO-1正常表达）和MDA-MB-231-HO-1△细胞（HO-1干扰表达）迁移、侵袭能力的变化,Western blot检测乏氧条件下两组乳腺癌细胞的上皮和间质标记物的表达,检验细胞系是否发生了上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。结果:乏氧培养24小时后,MDA-MB-231-NC 细胞中HO-1蛋白表达水平显著升高,MDA-MB-231-HO-1△细胞中HO-1表达受抑制。乏氧培养后MDA-MB-231-NC细胞的侵袭、迁移能力较常氧培养的细胞明显增强,其差异具有统计学意义(P<0.05);而MDA-MB-231-HO-1△细胞侵袭、迁移能力在乏氧和常氧培养下无显著差异。乏氧条件下,MDA-MB-231-NC细胞的上皮标志物E-cadherin表达显著下调,间质标志物Vimentin表达显著上调,而MDA-MB-231-HO-1△细胞的E-cadherin、Vimentin表达无明显变化。结论:乏氧条件下乳腺癌MDA-MB-231细胞中HO-1可被诱导高表达,促进了细胞的侵袭迁移,其可能机制是促进了乳腺癌细胞上皮-间质转化。     

Twist 对EMT 调控在循环肿瘤细胞监测与抗癌药物评价中的临床意义*

肿瘤细胞的上皮间质可塑性变化包括上皮- 间质化（epithelial-mesenchymal transition ,EMT ）和间质- 上皮转化（mesenchymal-epithelial transition,MET ）的可逆过程,在循环肿瘤细胞（circulating tumor cells ,CTCs）形成、转归及肿瘤转移过程中起到重要作用。Twist在人横纹肌肉瘤、乳腺癌、胃癌等多种肿瘤中过表达,肿瘤细胞中Twist与多种信号通路连接,形成复杂的网状环路参与调控CTCs中EMT/MET的发生并促进肿瘤细胞向远处转移。因此,通过监测CTCs中Twist本身以及所调控的上皮- 间质表型分子标志物的变化,不仅可以增加肿瘤标志物CTCs的检出率,提供肿瘤临床分期及预后评估的直接证据;而且,对于评估多种抗肿瘤药物的疗效及耐药机制均具有重要的临床意义。      

CUEDC2通过上皮-间质转化促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移

目的:探讨CUE结构域2（CUE domain-containing 2,CUEDC2）蛋白对人乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测上皮-间质转化（EMT）标志物上皮-钙黏蛋白（E-cadherin）和转录因子SLUG的表达。结果:过表达CUEDC2蛋白能够下调E-cadherin蛋白和基因的表达,而上调转录因子SLUG基因和蛋白的表达。结论:CUEDC2可能参与调节乳腺肿瘤细胞发生上皮-间质转化,促进乳腺肿瘤侵袭转移的发生,CUEDC2可能是人乳腺肿瘤侵袭转移的治疗靶点。     

乳腺癌细胞上皮间质转化的分子机制及其防治的研究进展

摘 要：上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是恶性肿瘤上皮细胞向间质表型转化的启动过程,可促进恶性肿瘤的侵袭和转移。本文综述了乳腺癌EMT的分子标志物包括表面标志物、支架标志物和相关调控因子、相关信号通路及缺氧微环境等。乳腺癌细胞EMT会导致内分泌治疗和化疗耐药,机制可能与乳腺癌上皮细胞特性、雌激素受体及乳腺癌干细胞活性改变有关。基础研究表明中医药可逆转乳腺癌EMT,但是相关临床研究及其作用机制的文献报道较少,尚需进一步探索。明确乳腺癌细胞EMT的分子机制,有利于乳腺癌细胞转移和耐药的深入研究,并为临床上乳腺癌的靶向调控及中医药治疗提供新的思路。     

烯醇化酶ENO1抑制非小细胞肺癌细胞上皮间质转换

背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化生长因子(transforming growth factor β,TGFβ)诱导EMT发生的必要条件。本研究以非小细胞肺癌细胞系A549为模型,对烯醇化酶(enolase-1,ENO1)影响细胞EMT过程的分子机制进行了初步研究。方法建立稳定过表达ENO1的A549细胞,用划痕实验检测细胞运动能力;用Western blot技术检测EMT过程相关分子标志物的变化;通过TGFβ-1诱导实验检测ENO1过表达对EMT的影响;通过上皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导实验和Western blot检测ENO1过表达引起胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK)磷酸化的改变。结果 ENO1过表达抑制A549细胞侧向迁移能力。ENO1过表达还会引起上皮样标志物E-cad-herin表达上调,同时间质样标志物N-cadherin和Vimentin表达下降;TGFβ-1诱导实验也证实了ENO1对EMT进程的抑制作用。EGF活化实验显示ENO1对ERK磷酸化的抑制作用。结论在非小细胞肺癌细胞中,ENO1具有抑制细胞EMT的作用,且很可能是通过抑制MAPK通路来实现。     

循环肿瘤细胞的异质性在转移性乳腺癌中的作用研究进展

循环肿瘤细胞（CTC）的计数可以预测转移性乳腺癌的预后,但其改善患者预后的能力在临床试验中尚未得到证实。目前研究专注于CTC的分子表征,作为肿瘤组织的“替代物”以非侵入性地方式评估癌症基因组表达及其在治疗过程中的演变。CTC中存在上皮-间质转化过程（EMT）,其特点为上皮标志物的缺失。EMT过程可以存在于侵袭性及耐药性较强的细胞,其计数和表征,能够引起肿瘤的复发和进展,具有较高的临床价值。本文深入探讨循环肿瘤细胞的异质性及在转移性乳腺癌上皮-间质转化过程中的作用。使其成为乳腺癌患者监测转移和预后的常规的检测指标,并有助于明确转移的机制,更有望发现乳腺癌转移治疗的新靶点。