创面愈合过程中内源性EGF变化的研究

本文通过免疫组织化学方法,对大鼠创面愈合过程中内源性表皮生长因子(EGF)变化进行了研究,结果表明:创面愈合过程中内源性EGF有规律性变化。对内源性表皮生长因子的作用进行了讨论,创面愈合过程中,结合内源性EGF的变化,合理应用EGF可能会取得更好的效果。     

独一味胶囊对大鼠机械性皮肤损伤的促愈合作用

目的研究独一味胶囊对大鼠机械性皮肤损伤的促愈合作用及其可能机制。方法在SD大鼠背部皮肤造成机械性损伤模型,将损伤模型大鼠分为独一味(生药)4、2、1 g.kg-1组、模型组、阳性对照组,给予大鼠ig独一味胶囊药液或阳性药,连续16 d,观察各创面的愈合情况,计算各创面的愈合率,并于造模后第4、7、10、14、17天分别处死大鼠,取创面标本,分别进行病理组织学检查、毛细血管计数和血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)的免疫组化测定。结果大鼠灌服独一味胶囊后可明显缩短伤口的愈合时间。造模后第4~14天,生药4.0 g.kg-1组大鼠的创口愈合率、创面组织EGF、VEGF的表达明显高于模型组(P<0.05);造模后第4~7天,生药4.0 g.kg-1组大鼠新生毛细血管计数明显多于模型组(P<0.01)。组织形态学评价结果表明:造模后第4~14天,生药4.0 g.kg-1组大鼠的创口修复情况明显优于模型组,在创口修复早期,能加速成纤维细胞的增生,促进新生毛细血管的生成,减少炎症反应。结论独一味胶囊能促进机械性皮肤损伤的愈合,其作用机制可能与促进新生毛细血管生成,促进组织中内源性EGF、VEGF等相关因子的表达有关。     

rhGM-CSF和纳米银联合外用对深Ⅱ°烫伤创面上皮化的影响

目的研究重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)和纳米银敷料联合外用对深Ⅱ°烫伤创面愈合过程上皮化的影响。方法用Wistar大鼠建立深Ⅱ°烫伤模型120例,均分为4组,A组用凡士林纱布覆盖、B组用纳米银敷料覆盖、C组用rh GM-CSF涂抹创面、D组用rh GM-CSF+纳米银敷料覆盖,伤后第1、4、7、10、14、21天,观察创面的病理学改变,用ELISA法测定血清中的表皮生长因子(EGF),采用RT-PCR法检测创面愈合过程中TGF-β1mRNA表达的变化。结果 4个组均在第10天出现明显的上皮化;EGF水平逐渐上升,A组上升最慢,D组最快;A、B组的TGF-β1mRNA相对表达量逐渐上升,C、D组的在第14天达到峰值,第21天下降,且D组下降幅度较大。结论 rh GM-CSF和纳米银联合外用,加速了深Ⅱ°烫伤创面愈合过程中上皮化的形成,上皮化程度优于单独应用。     

大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶2的表达

目的研究急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶2(MMP-2)mRNA和蛋白表达的变化,探讨表皮细胞生长因子(EGF)在急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中的作用。方法雄性SD大鼠60只,随机均分为3组。A组15Gyβ射线照射组;B组45Gyβ射线照射EGF治疗组;C组45Gyβ射线照射生理盐水对照组。采用直线加速器产生的β射线照射大鼠臀部皮肤,面积20mm×40mm。观察创面出现及愈合的时间;光镜观查创面愈合过程中组织学改变;以RT-PCR法和Westernblot法检测创面愈合过程中MMP-2mRNA和蛋白表达的变化。结果A组未形成创面,B组和C组出现深Ⅱ度烧伤创面。B组创面愈合速度明显比C组快(P<0.05)。A组5、6、8周时MMP-2的表达逐步减弱,B组和C组5、6、8、10周时MMP-2的表达由强到弱,而后由弱到强;B组在6、8周时MMP-2的表达均高于C组。结论EGF在β射线皮肤损伤创面愈合过程中起重要作用,EGF可促进MMP-2的表达与合成,从而促进创面愈合。     

膀胱移行细胞癌EGF,EGFr含量的测定及意义

用125I标记分析法对25例膀胱移行细胞癌组织和14例正常膀胱组织进行了EGF、EGFr含量测定。表明EGF、EGFr在肿瘤组织中的含量明显高于癌旁正常对照组织（P＜0.05）。肿瘤组织各病理分级组之间EGF、EGFr含量随病理分级增高，有明显增高趋势，但经统计学处理，尚未观察到有显著性差异（P＞0．05）。25例病人术后随访，1年内肿瘤复发的5例患者中，4例肿瘤组织中有EGFr较高水平的表达，表明EGFr与肿瘤复发有一定联系     

黄芪提取物联合表皮生长因子治疗大鼠皮肤烫伤的实验研究

目的：探讨黄芪提取物联合表皮生长因子对皮肤烫伤愈合的疗效。方法：Wistar大鼠80只,每只背部造成2处直径2.8cm深Ⅱ度烫伤创面。将大鼠随机分为黄芪提取物联合表皮生长因子治疗组（联合组）、表皮生长因子治疗组（EGF组）、黄芪提取物治疗组（黄芪组）和生理盐水对照组（对照组）,每组20只,观察伤后愈合情况。烫伤后第2、5、7、10、14、18、21天计算创面愈合率;第7、14、18天取大鼠创面皮肤采用羟脯氨酸测试盒测定烫伤创面羟脯氨酸含量;第7、14、21天取大鼠创面皮肤采用Ⅷ因子免疫组织化学染色计算微血管密度;第14、21天取大鼠创面皮肤做病理学分析。结果：联合组愈合时间显著小于其它组（P〈0.05,P〈0.01）,EGF组和黄芪组愈合时间显著小于对照组（P〈0.05）;联合组于烫伤后10、14、18、21d和7、14d创面愈合率、创面微血管密度明显大于其它组（P〈0.05,P〈0.01）,EGF组和黄芪组创面愈合率以及创面微血管密度显著大于对照组（P〈0.05）;联合组创面组织羟脯氨酸水平在伤后第7、14天均显著高于其他组（P〈0.05,P〈0.01）,EGF组和黄芪组创面组织羟脯氨酸水平显著高于对照组（P〈0.05）。结论：黄芪提取物联合表皮生长因子能显著促进皮肤烫伤的愈合,缩短愈合时间。     

壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子的影响研究

目的:研究壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子(EGF)和EGFmRNA表达的影响及意义。方法:105只Wistar大鼠除5只作为正常对照组外,其余建立烧伤模型后分为壳聚糖低、中、高浓度(1%、2%、4%)组及贝复济组(阳性对照组)和自然愈合组(模型组),每日2次连续21d于受伤处喷以相应药物,采用免疫组织化学法、核酸分子杂交法及图象分析法检测烧伤后3、7、14、21d时大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和EGFmRNA的表达。结果:与模型组比较,壳聚糖各浓度组均可增强EGF和EGFmRNA的表达,并呈浓度依赖性,尤以4%壳聚糖组作用更强(P<0.01或P<0.05)。结论:壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面有促愈合作用,其促愈合机制与增强创面EGF和EGFmRNA表达有关。     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对深Ⅱ度烫伤模型大鼠创面愈合的影响

目的研究外用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)对深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响。方法90只Wistar大鼠建立深Ⅱ度烫伤模型,分为A、B、C三组,每组30只。A组:凡士林纱布覆盖;B组:纳米银敷料覆盖;C组:rh GM-CSF涂抹创面。伤后第1,4,7,10,14,21天,观察创面病理学改变,按照酶联免疫吸附法测定血清中表皮生长因子(EGF)水平,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测创面愈合过程中转化生长因子(TGF)-β1mRNA表达的变化。结果病理学改变:A、B、C三组均在第10天出现明显的上皮化;EGF水平逐渐上升,A组上升最慢,C组上升最快,第1,4天各组间及第7天A组与B组差异无统计学意义(P>0.05),第7天其余各组间及第10,14,21天各组间差异均有统计学意义(均P<0.05);TGF-β1mRNA相对表达量,A组、B组逐渐上升,C组在第14天达到峰值,第21天下降,第1天,B组与C组之间差异有统计学意义(P<0.05),第4天各组间差异无统计学意义(P>0.05),第7,10,14,21天各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 rh GM-CSF可加速深Ⅱ度烫伤创面愈合。     

壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和PDGF表达的影响

目的研究壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子(EGF)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法W istar大鼠分为1%壳聚糖组(W/V)、2%壳聚糖组(W/V)、4%壳聚糖组(W/V)、成纤维细胞生长因子(贝复剂)组(阳性对照组)、自然愈合组(模型组),制备成大鼠Ⅲ度烧伤模型,采用免疫组织化学SABC法、原位杂交法及图像分析法检测大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和EGFmRNA的表达;PDGF的活性用L929细胞生物法测定。结果4%壳聚糖组(W/V)对烧伤后7、14 d创面EGF的表达、对烧伤后3、7 d创面EG-FmRNA的表达有明显的提高;对烧伤后3、7、14 d创面PDGF的活性有明显的提高,与自然愈合组相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面的EGF表达和PDGF活性有促进作用。     

短肽支架纤维对创面表皮碱性成纤维生长因子及表皮细胞生长因子的促进作用

目的：探讨自组装纤维支架肽RADA16在皮肤烫伤中的治疗作用。方法：在SD大鼠背部以电力机械方法制造深Ⅱ度烧伤模型,对照治疗组以0.9%NaCl溶液代替,烧伤后按时换药,并在不同时间段（伤后7、10、14d分别取烧伤修复创面的皮肤组织进行免疫组化染色,记录创面碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及表皮细胞生长因子（EGF）的表达,并以图像处理系统软件记录生长因子表达的半定量检测。比较了短肽处理组及空白对照组创面生长因子表达的灰度值。结果：免疫组织化学结果显示,在烧伤修复的不同修复期,短肽处理组bFGF和EGF均明显表达在新生表皮组织中,与空白对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：自组装纤维支架肽对烧伤皮肤生长因子的表达具有促进作用。     

重组人表皮生长因子软膏对烧伤患者血清表皮生长因子浓度的影响

目的:观察不同深度、不同面积烧伤创面对局部外用重组人表皮生长因子(rhEGF)软膏的吸收作用以及对血清EGF浓度的影响。方法:选择烧伤患者41例,局部外用rhEGF软膏治疗,每日换药一次。浅Ⅱ°创面患者于用药前和用药第4,7天;深Ⅱ°创面于用药前和用药后第7,14天,分别取患者静脉血清,采用放射免疫分析法测定患者各时间点血清中EGF浓度。结果:rhEGF软膏在试验浓度范围内,无论用药面积大小和用药时间长短其血清EGF水平均无明显变化,各时间点用药前后EGF血药浓度无显著差异(P>0.05);血清EGF浓度与创面深度和用药面积无明显的相关性。结论:rhEGF软膏局部外用,通过创面吸收的量甚微,体内无蓄积现象。     

表皮细胞生长因子及其相关信号通路在角膜损伤修复调控机制的研究进展

角膜损伤是临床上因为物理、化学、微生物感染、免疫等因素造成的角膜结构、功能异常为主的一系列眼科临床疾病。根据流行病学研究显示，我国不可逆盲病人的40%来自于角膜盲，而各类角膜损伤则是角膜盲的最主要病因。随着相关研究的深入，发现表皮细胞生长因子（epidermal growth factor,EGF）在角膜损伤阶段对伤口的愈合发挥着重要作用，但不同研究表明其在各个通路中存在不同的作用机制，该研究就目前关于EGF在角膜损伤修复过程中的作用通路研究做出综述，旨在为日后角膜损伤修复的临床治疗提供新思路。     

急性肾衰患者尿液和肾组织中表皮生长因子的检测及动态变化的意义

应用放射免疫法对6例急性肾功能衰竭（ARF）患者尿中表皮生长因子（EGF）的水平进行测定和动态观察，并用免疫组化法对其中5例患者肾活检组织中肾小管上EGF和EGF受体（EGF－R）进行定量分析。结果ARF恢复期尿中EGF含量的不断增加，血清肌酐水平和钠滤过分数逐渐下降，在伴有肾小管上皮细胞再生表现者其肾小管上EGF的增加尤为明显，并且与肾活检时尿中EGF含量的变化相平行。揭示在ARF恢复期尿中EGF含量的变化可反映肾小管和肾功能的恢复状态，而肾小管上EGF的增加可能有利于肾小管上皮细胞的再生。     

Enhancing dermal matrix regeneration and biomechanical properties of 2nd degree-burn wounds by EGF-impregnated collagen sponge dressing

To better define the relationship between dermal regeneration and wound contraction and scar formation, the effects of epidermal growth factor (EGF) loaded in collagen sponge matrix on the fibroblast cell proliferation rate and the dermal mechanical strength were investigated. Collagen sponges with acid-soluble fraction of pig skin were prepared and incorporated with EGF at 0, 4, and 8 microg/1.7 cm2. Dermal fibroblasts were cultured to 80% confluence using DMEM, treated with the samples submerged, and the cell viability was estimated using MTT assay. A deep, 2nd degree- burn of diameter 1cm was prepared on the rabbit ear and the tested dressings were applied twice during the 15-day, post burn period. The processes of re-epithelialization and dermal regeneration were investigated until the complete wound closure day and histological analysis was performed with H-E staining. EGF increased the fibroblast cell proliferation rate. The histology showed well developed, weave-like collagen bundles and fibroblasts in EGF-treated wounds while open wounds showed irregular collagen bundles and impaired fibroblast growth. The breaking strength (944.1 +/- 35.6 vs. 411.5 +/- 57.0 Fmax, gmm(-2)) and skin resilience (11.3 +/- 1.4 vs. 6.5 +/- 0.6 mJ/mm2) were significantly increased with EGF-treated wounds as compared with open wounds, suggesting that EGF enhanced the dermal matrix formation and improved the wound mechanical strength. In conclusion, EGF-improved dermal matrix formation is related with a lower wound contraction rate. The impaired dermal regeneration observed in the open wounds could contribute to the formation of wound contraction and scar tissue development. An extraneous supply of EGF in the collagen dressing on deep, 2nd degree-burns enhanced the dermal matrix formation.     

Improvement in Wound Healing by Epidermal Growth Factor (EGF) Ointment. I. Effect of Nafamostat,Gabexate, or Gelatin on Stabilization and Efficacy of EGF

The healing effect of human epidermal growth factor (hEGF) on open wounds was studied in rats. No improvement in wound healing was found by topical application of EGF alone to open wound sites. We found an ointment containing EGF and a protease inhibitor, nafamostat mesilate or gabexate mesilate, or gelatin accelerated the healing rate of open wounds. Significant increases in the dry weight of the wound site granulation tissue, uronic acid (as an index of acid mucopolysaccharide) and hydroxyproline (as an index of collagen) were observed by treatment with EGF ointment containing nafamostat compared with the controls. The effects of the protease inhibitor on wound healing were dose dependent. Nafamostat was more efficient than gabexate or gelatin on wound healing. The degradation of ¹²⁵I-EGF in wound tissue homogenate was significantly decreased in the presence of a protease inhibitor, such as nafamostat or gabexate, or gelatin. These findings indicate that the stabilization of EGF at the wound site is an important factor in permitting the expression of its healing effects and suggest that the ointment containing EGF and a stabilizing agent would be a suitable dosage form for acceleration of wound repair.