淫羊藿甙诱导白血病细胞凋亡及其对癌基因表达的影响

淫羊藿甙 (ｉｃａｒｒｉｎ ,ＩＣＡ)是从朝鲜淫羊藿中提取的主要单体成分 ,具有多种生物学效应 ,能抑制多种肿瘤细胞株的增殖 ,能诱导白血病细胞ＨＬ 6 0沿粒系方向分化[1] 。我们对ＩＣＡ诱导白血病细胞凋亡进行了观察 ,并检测ＩＣＡ作用后白血病细胞癌基因ｍＲＮＡ和蛋白表达水平的改变。材料和方法1　材料　ＩＣＡ ,淡黄色结晶 ,纯度在 96 %以上 ,购于沈阳药科大学。以乙醇助溶 ,ＲＰＭＩ 16 4 0配制。ＨＬ 6 0细胞系 ,由中国医学科学院血液学研究所提供 ,培养于含体积分数为 10 %的小牛血清的ＲＰＭＩ 16 4 0培养基中。ＩＣＡ对ＨＬ 6 0…     

紫草素诱导白血病细胞K562凋亡的研究

目的探讨紫草素对人白血病K562细胞的诱导凋亡作用。方法MTT显色法检测紫草素对K562细胞的增殖抑制作用;形态学观察分析DNA琼脂糖凝胶电泳;AnnexinV/PI双标记法检测紫草素对K562细胞的凋亡效应;Caspase检测K562细胞凋亡通路。结果紫草素0.25~8μg/ml浓度即能明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度的依赖性。1μg/ml紫草素作用48h后的K562细胞出现凋亡细胞的特征。1~4μg/ml浓度紫草素诱导K562细胞凋亡具有明显的量效关系,2μg/ml紫草素在0~72h内诱导K562细胞凋亡具有明显的时效关系;DNA凝胶电泳呈现细胞凋亡的典型梯形条带;紫草素诱导K562细胞凋亡经历了Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的激活。结论紫草素能有效地诱导K562细胞凋亡,并主要通过线粒体凋亡通路。     

淫羊藿素对人舌鳞癌细胞CAL-27增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的 探索淫羊藿素对人舌鳞癌细胞CAL-27的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能作用机制。方法 分别采用0、10、20、40μmol/L浓度的淫羊藿素干预人舌鳞癌细胞CAL-27。采用CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增殖;采用划痕实验检测细胞迁移;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。采用分子对接预测淫羊藿素与舌鳞癌目的基因结合效果,采用逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)进行验证。结果 淫羊藿素对CAL-27细胞作用24 h的半数抑制浓度(IC₅₀)为33.37μmol/L, 48 h IC₅₀为15.57μmol/L。与0μmol/L浓度淫羊藿素相比,40μmol/L浓度的CAL-27细胞克隆形成率降低,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.001)。淫羊藿素浓度增加时,CAL-27的迁移、侵袭数呈淫羊藿素剂量依赖性抑制;细胞内AR、ESR1、PRKACA、PTGS2的相对表达量呈淫羊藿素剂量依赖性减少。结论 淫羊藿素可抑制人舌鳞癌细胞CAL-27的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,...     

鱼藤素对K562细胞nup98表达的影响

本研究观察鱼藤素对白血病细胞株K562细胞核孔蛋白nup98表达的影响。用MTT比色法检测细胞增殖活性;流式细胞术及RT-PCR法分析鱼藤素作用K562细胞后nup98蛋白及mRNA含量的变化。结果表明:鱼藤素能显著抑制K562细胞的增殖,并与作用时间和鱼藤素浓度呈依赖关系;空白对照组K562细胞nup98蛋白表达的平均荧光强度为34.22±1.63,显著高于阴性对照组(2.83±0.02,P<0.01),10nmol/L鱼藤素即能显著抑制nup98蛋白的表达;10nmol/L鱼藤素对nup98mRNA表达的抑制作用不显著,20、40、80、160nmol/L鱼藤素能显著抑制nup98mRNA的表达,并且呈剂量依赖性。结论:鱼藤素可通过抑制核孔蛋白nup98的表达进一步抑制K562细胞的增殖。nup98可能成为急性白血病治疗的基因靶点。     

D-柠檬烯对K562细胞增殖及凋亡的影响

本研究探讨D-柠檬烯对K562白血病细胞增殖的影响及机制。应用MTT试验观察不同浓度D-柠檬烯作用后K562细胞增殖的改变；应用细胞形态学检查、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果表明：在0．125-1．0mmol／L浓度范围内，D-柠檬烯对K562细胞增殖的抑制作用呈现剂量依赖的关系。典型的细胞形态学改变、DNA琼脂糖凝胶电泳梯形条带及流式细胞仪检测出亚G1峰共同证实了D-柠檬烯能诱导K562白血病细胞凋亡。结论：D-柠檬烯抑制K562细胞的增殖并呈剂量依赖的方式，使细胞滞留于G1期，诱导其凋亡。     

淫羊藿与骨代谢研究现状

淫羊藿（Hera Epimdii）为小蘖科植物，李时珍在《本草纲目》中记载具有“益精气，坚筋骨，补腰膝，强心力”的功效。现代药理研究发现淫羊藿的主要成分是淫羊藿黄酮类、淫羊藿多糖、淫羊藿甙、淫羊藿苷和淫羊藿次苷等，临床应用广泛，本文就其与骨代谢研究现状综述如下：     

淫羊藿对家兔骨折愈合的影响

目的：探讨中药淫羊藿对家兔骨折愈合的作用。方法：手术制作成年雄性家兔双前肢桡骨中段骨折动物模型(缺损约3mm)。术后随机将其分为两组，实验组除每日给予淫羊藿煎液口服外，其他饲养条件完全与对照组相同。分别于术后14d，24d，34d及42d处死动物，处死前摄兔前肢X线片，处死后取骨折标本作连续硬组织切片(厚5μm)，切片作常规Masson三色染色。结果：淫羊藿实验组较之对照组在骨痂形成、骨痂改建以及髓腔再通等方面均明显更早。结论：淫羊藿能促进家兔骨折骨痂的形成与改建，促进髓腔的再通。淫羊藿能促进家兔骨折愈合。     

淫羊藿的化学成分及药理作用

淫羊藿是常用中草药小檗科植物同属品种，来源比较复杂，产地很多；近年来，由于市场众多保健品和壮阳药的需求量较大。对该品种有较大的市场潜在力。笔者对该品种进行了较全面的研究。从研究结果来看。以柔毛淫羊藿的质地较佳。本品史载于《神农本草经》后在《雷公炮制论》中有仙灵脾的记载。     

骨髓间充质干细胞对K562细胞增殖及凋亡的影响

本研究比较K562细胞与相同数量以及不同数量的人骨髓间充质干细胞（MSC）黏附培养前后K562细胞增殖、细胞周期和凋亡的变化,以探讨MSC对人白血病K562细胞生长的影响。通过建立正常人骨髓MSC的体外培养体系及其与K562细胞共培养的体系测定K562细胞的生长曲线;将不同数量的MSC与K562细胞共培养测定K562细胞的增殖率曲线;应用流式细胞术检测K562细胞周期以及凋亡的变化。结果显示：与单独K562细胞培养相比,K562细胞与相同数量MSC共培养后,生长受抑;K562细胞与不同数量MSC共培养后,MSC对K562细胞的抗增殖作用呈剂量依赖性;细胞周期分析发现,K562细胞与MSC共培养后,G0／G1期以及G2／M期的细胞增加,S期的细胞减少。共培养24、48、72小时后流式细胞仪检测发现,K562细胞的凋亡率下降。结论：正常人骨髓MSC能使导致K562细胞生长抑制,阻止K562细胞周期的运行,凋亡率下降,且在一定范围内,随着MSC数量的增加,对K562细胞的抗增殖作用增强。     

淫羊藿总黄酮对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

本实验研究了淫羊藿总黄酮（ＥＦＴ）对γ射线所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果表明：γ射线可造成小鼠免疫功能的抑制或损伤,在实验剂量下,ＥＦＴ能明显增加小鼠血清抗体水平（Ｐ〈０．０５）和单个抗体形成细胞数（ＰＦＣ）（Ｐ〈０．０５）,能明显增加了Ｔ淋巴细胞花结形成率（Ｐ〈０．０５）,和酸性α醋酸萘酯酶阳性率（Ｐ〈０．０５）。提示：ＥＦＴ能增强γ射线所致免疫功能抑制小鼠的体液和细胞免疫功能,且对细胞     

淫羊藿总黄酮的药理作用研究进展

<正>淫羊藿性味辛、甘、温,归肝、肾经,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功效。淫羊藿来源于小檗科植物心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿等的干燥叶,药用价值较高,药用历史悠久。早在《本草纲目》中已有记载,称其"益精气、坚筋骨、补腰膝、强心力"。现代药理学研究显示,淫羊藿的有效成分主要为淫     

G-CSF对洛伐他汀诱导的K562细胞内酸碱度及凋亡的影响

重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）广泛用于防治放化疗后的粒细胞减少，但G—CSF可以抑制肿瘤细胞的凋亡。已有研究报道，细胞内碱性化，即细胞内酸碱度（pHi）值升高可以使DNA合成增加，细胞增殖，同时抑制细胞凋亡。我们对G—CSF在洛伐他汀（LOV）诱导K562细胞凋亡作用中的影响及其机制进行了初步探讨。     

淫羊藿活性成分抗肿瘤作用的研究进展

<正>淫羊藿又名仙灵脾,为小檗科植物淫羊藿、箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿或朝鲜淫羊藿等的干燥叶,味辛甘,性温,归肝、肾经,具有补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效。淫羊藿主要的活性成分[1~2]为8位异戊烯基(及其衍生基团)的黄酮醇苷类,如淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿次苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C等。随着时代的发展,淫羊藿及其活性成分的研究远超古人的记载和传统医学的范畴,临床上已广泛     

氯化锂抑制K562白血病细胞增殖及诱导凋亡机理的研究

本研究旨在探讨氯化锂(LiCl)在体外抑制K562白血病细胞增殖和诱导凋亡的机制。在细胞培养体系中加入LiCl(30mmol/L)进行培养;以流式细胞术分析细胞周期;用半定量RTPCR检测bcr/abl融合基因mRNA的表达;用原子吸收光谱仪检测不同时间点细胞内Li 浓度及Na 、K 通道阻断剂TTX、FSK分别对细胞内Li 浓度的影响,并观察了Na 、K 通道阻断剂对LiCl抑制细胞生长的作用。结果显示:LiCl(30mmol/L)导致K562白血病细胞出现G2/M期阻滞,bcr/ablmRNA表达下降,细胞内Li 的浓度从30分钟开始增加,在2小时达高峰,以后逐渐下降,4小时达到平衡;Na 、K 通道阻断剂TTX(3.4×10-7mol/L)与FSK(5×10-5mol/L)分别阻断Na 、K 通道后可升高细胞内Li 的浓度,并增加LiCl对K562白血病细胞增殖的抑制作用。结论:LiCl诱导K562细胞增殖抑制和凋亡的机制可能与K562细胞G2/M期阻滞、下调bcr/ablmRNA的表达及Na 、K 通道被阻断后Li 通道的状态有关。     

骨髓间充质干细胞对K562细胞增殖及化疗敏感性的影响

背景:近年来研究发现,骨髓造血微环境尤其足骨髓间充质干细胞在白血病细胞恶性克隆的增殖、分化和凋亡中发挥重要作用.目的:探讨联合正常人骨髓间充质干细胞共培养后,K562细胞的增殖情况及对化疗敏感性的变化.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-06/2008-06在南京医科大学附属南京儿童医院完成.材料:骨髓来源于南京医科大学附属南京儿童医院骨科收治的下肢骨折需手术的患儿.方法:percoll密度梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞.设立2组:单独培养组培养皿中只接种处于对数生长期的K562细胞1×106个;共培养组培养肌中按2×108 L-1接种第3代人骨髓间危质干细胞,3 d后伞量换液,再加入处于对数生长期的K562细胞1×106个,共培养24 h.消化收集两组K562细胞,分别加入质量浓度为0.1,0.2,0.4,0.8 mg/L的阿糖胞苷,再次培养24 h.主要观察指标:骨髓间充质干细胞对K562细胞生长曲线、细胞周期的影响.不同质量浓度阿糖胞苷干预后K562细胞凋亡率的变化.结果:与单独培养组比较,共培养组K562细胞数明显降低,至第7天仅为单独培养组的57.7%:Go/G1期、G2期共培养组K562细胞比例明显增加(P均＜0.05),S期、S+G2期共培养组K562细胞比例显著减少(P＜0.01,P＜0.05).阿糖胞苷质量浓度为0.1～0.8 mg/L时,对K562细胞诱发凋亡作用逐渐增强;在相同质量浓度的阿糖胞苷干预下,共培养组K562细胞凋亡率明显低于单独培养组(P＜0.05).结论:与骨髓间充质干细胞共培养后,K562细胞的生长受到抑制,且处于增殖期的细胞比例F降,主要阻滞于Go/G1期.骨髓间充质干细胞对K562细胞具有保护作用,可降低阿糖胞苷诱导K562细胞的凋亡率,产生化疗耐药.     

淫羊藿对血液透析患者T淋巴细胞亚群的影响

目的：观察中药淫羊藿对维持性血液透析（ＭＨＤ）患者Ｔ淋巴细胞亚群的影响。方法：将２０例ＭＨＤ患者随机分成２组，采用相同的ＭＨＤ方式（周３次，每次４小时）。治疗组同时每日给予淫羊蕾１５ｇ，煎液２０￣３０ｍｌ，分２次口服。２组分别于透析第１、５、９、１３和２５周的第１次透析前作外周血Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋检测。结果：治疗组９周后Ｔ淋巴细胞ＣＤ４＾＋较对照组均明显增高（Ｐ均〈０．０５），Ｃ     

三氧化二砷对K562及其多药耐药细胞系K562/A02细胞的诱导凋亡研究

Ｐ170表达阳性的白血病细胞往往对多种不同化学结构和作用靶点的药物同时发生耐药。我们观察了三氧化二砷(Ａｓ2 Ｏ3 )对体外培养的人急性红白血病细胞系Ｋ5 6 2及其多药耐药细胞系Ｋ5 6 2 /Ａ0 2细胞的凋亡诱导作用 ,以探讨Ａｓ2 Ｏ3 对多药耐药白血病细胞的作用。材料和方法1　药品　Ａｓ2 Ｏ3 (Ｓｉｇｍａ公司 )溶于Ｈａｎｋｓ缓冲液中 ,配制成 1ｍｍｏｌ/Ｌ ,保存于 4℃。2　细胞株及细胞培养　Ｋ5 6 2及其多药耐药细胞系Ｋ5 6 2 /Ａ0 2细胞 (中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所提供 )置于含体积分数为 10 %小牛血清的ＲＰＭ…