共刺激分子4-1BB与肿瘤治疗的研究进展

近年来,诸如PD-1,PD-L1等免疫检查点为靶点的单克隆抗体成为了肿瘤免疫治疗的热点,其作用机制是阻断T细胞表面的共抑制分子与配体的相互作用,从而激活T细胞进行肿瘤免疫应答.共刺激分子4-1BB(CD137)又名肿瘤坏死因子超家族受体9,多表达于活化的T细胞表面,也可表达于粒细胞或树突状细胞表面.4-1BB在免疫应答...     

IL-21对慢性粒细胞白血病患者调节性T细胞的影响

目的:观察白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的作用,为CML的免疫治疗提供新思路.方法:收集兰州大学第二医院血液科初诊CML患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),免疫磁珠法分选出CD4+T细胞.分别加入50、100、200 ng/ml IL-21与CD4+T细胞共培养72 h后,流式细胞术检测Treg的比例,并设生理盐水空白对照组.Real-time PCR法检测Treg细胞中Foxp3 mRNA的表达,ELISA法检测各组细胞上清液中IL-10、TGF-β的水平.结果:与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml IL-21组CD4+ CD25+ Treg占CD4+T细胞的比例均降低[(3.42±0.76)％、(6.81±0.33)％、(7.98±0.76)％vs(12.09±0.91)％,P＜0.05];且3组的Foxp3 mRNA均降低[(0.05±0.02)、(0.16±0.02)、(0.25±0.02)vs 1,P＜ 0.05];Treg分泌IL-10量减少[(26.13 ±7.28)、(44.88 ±3.72)、(79.77±3.94) vs(133.00±12.32) pg/ml,P＜0.05],分泌TGF-β量也减少[(9.25 ±0.84)、(16.70±1.00)、(20.47±1.60)vs (26.05±1.81) pg/ml,P＜0.05].结论:IL-21在体外可减少CML患者外周血中Treg的比例,并抑制其功能.     

非小细胞肺癌患者外周血CD8+T细胞表面PD-1的表达及其临床意义

目的 观察非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中CD8+T细胞表面程序性死亡蛋白1（PD-1）分子的表达,并分析其表达与部分临床病理参数的关系。方法 分别取90例NSCLC（50例鳞癌、40例腺癌）患者新鲜血液,以30例健康体检者作对照;Ficoll密度梯度离心法分离外周血单核细胞,通过免疫磁珠法获得CD8+T细胞,流式细胞仪检测PD-1+CD8+T细胞的表达率;并比较不同年龄、性别、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移的NSCLC患者外周血中CD8+T细胞表面PD-1的表达水平的差异。结果 肺鳞癌组、肺腺癌组、健康对照组的PD-1+CD8+T表达阳性率依次为（18.32±5.20）%、（18.68±5.41）%和（7.44±2.59）%,肺鳞癌组和肺腺癌组均高于健康对照组（F=58.344,P＜0.001）;PD-1+CD8+T表达与临床分期、淋巴结转移有关（P＜0.05）;且临床分期越高,PD-1+CD8+T表达阳性率进行性增高,差异有统计学意义（rs=0.875,P＜0.001）;PD-1+CD8+T阳性率与年龄、性别、病理类型、组织分化程度无关（P＞0.05）。结论 PD-1在NSCLC患者外周血CD8+T细胞表面高表达,并与临床分期、淋巴结转移显著有关,提示PD-1分子可能通过与肿瘤细胞上的PD-L1相互作用而抑制CD8+T细胞功能,导致肿瘤进展,从而参与NSCLC免疫逃逸过程,在NSCLC的发生发展中起到至关重要的作用。     

肺癌患者调节性T细胞与NK细胞活化受体NKG2D的相关性及其临床意义

目的 分析肺癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞及自然杀伤细胞(NK细胞)活化受体NKG2D的表达水平之间的关系,探讨其在肿瘤免疫逃逸机制中的作用及临床意义.方法 选择70例肺癌患者,均经病理确诊.采用流式细胞术(FCM)检测患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞、NK细胞及NKG2D表达水平,并以50名健康人为对照.结果 肺癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞比例较健康对照组明显升高[(8.4±4.1)％与(6.7±1.7)％],差异有统计学意义(t=3.09,P＜0.05);肺癌组NK细胞比例与健康对照组比较[(15.6±8.3)％与(17.2±4.2)％],差异无统计学意义(t=-1.33,P＞0.05);肺癌组NKG2D较健康对照组明显降低[(83.3±4.9)％与(87.4±2.9)％],差异有统计学意义(t=3.16,P＜ 0.05).CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞与NKG2D呈负相关性(r=-0.302,P＜0.05).结论 在肺癌患者外周血中调节性T细胞可能通过下调NKG2D,参与肿瘤免疫逃逸机制,二者可作为评估肺癌患者免疫功能状态及预后的参考指标.     

非小细胞肺癌患者外周血PD-1表达水平及淋巴细胞亚群分析

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血细胞程序性死亡蛋白1(programmedcell death protein 1-ligand l,PD-L1)的表达水平和淋巴细胞亚群比例与NSCLC临床分期的关系及其临床意义.方法:收集2014年3月至12月承德医学院附属医院肿瘤科收治的38例肺腺癌、35例肺鳞癌患者为实验组,以30例健康体检者作为对照组.采集受试者晨起外周血5ml,用ELISA法检测血清PD-1的表达水平;流式细胞术检测CD4+、CD8+、CD19+、NK细胞比例.结果:实验组血中PD-1表达水平高于对照组[(104.98±20.76)、(109.13 ±24.65) vs (50.80±14.38)pg/ml,P＜0.01];实验组外周血中CD4+、NK细胞比例低于对照组(P ＜0.001),CD8+细胞比例高于对照组(P＜0.01);Ⅲ、Ⅳ期肺癌CD4+细胞比例和NK细胞比例均低于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0.01),PD-1表达水平CD8+细胞比例均高于Ⅰ、Ⅱ期(P ＜0.01);CD19+比例差异无统计学意义(P＞0.05);PD-1的表达水平与NK细胞比例呈负相关(P＜0.01),与CD8+细胞比例呈正相关(P＜0.01),与CD4+、CD19+无相关性(P＞0.05).结论:NSCLC患者外周血PD-1的表达水平较健康体检者明显上调,检测外周血PD-1表达水平和淋巴细胞亚群比例对NSCLC患者病情监测及预后判断有重要意义.     

非霍奇金淋巴瘤患者外周血T细胞亚群及NK细胞检测的临床意义

目的 探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者外周血T细胞亚群及NK细胞检测的临床意义.方法 收集病理确诊的初治NHL患者62例,采集静脉血经流式细胞术检测T细胞亚群及NK细胞水平,与30名健康对照者进行比较；并比较不同年龄、性别、病理类型患者之间的表达差异,分析其与临床分期、国际预后指数(IPI)、有无B症状等因素的相关性.结果 NHL组外周血CD3、CD4、NK细胞比例[(64.13±19.83)％、(27.10±8.20)％、(13.51±10.59)％]低于健康对照组[(65.78±10.69)％、(31.95±12.74)％、(18.76±7.36)％](P＜0.05)；CD8、调节性T细胞(Treg细胞)比例[(32.15±13.83)％、(10.44±3.00)％]高于健康对照组[(29.25±12.35)％、(7.51±4.36)％](P＜0.05).NHL患者≤60岁组CD3、NKT细胞比例[(67.06±19.24)％、(4.91±3.69)％]明显高于＞60岁组[(59.18±20.33)％、(4.89±3.05)％](P＜0.05),T细胞NHL组Treg细胞比例明显高于B细胞NHL组[(8.17±6.41)％比(7.11±2.53)％](P＜0.05).NHL患者外周血CD3、CD4、NK、NKT细胞比例与临床分期相关(均P＜ 0.05)；CD8细胞比例与IPI相关(P=0.000)；Treg细胞比例与IPI、B症状相关(均P＜ 0.05).结论 NHL患者存在细胞免疫抑制,其外周血T细胞亚群及NK细胞比例在不同性别、年龄、病理亚型之间存在不同,与临床分期、IPI、有无B症状等的相关性尚需进一步探讨.     

Ⅲ-Ⅳa期鼻咽癌LMP特异性T细胞免疫反应与临床分析北大核心CSCD

目的探讨Ⅲ-Ⅳa期鼻咽癌EB病毒潜伏膜蛋白(LMP)1、LMP2特异性T细胞免疫反应及临床意义,为鼻咽癌免疫治疗提供思路和依据。方法收集新疆医科大学附属肿瘤医院2018年2月至2020年10月初治的59例鼻咽癌患者,应用LMP抗原刺激外周血单核细胞,胞内细胞因子染色及流式细胞术研究CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞白细胞介素(IL)-2、IL-13、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)4种细胞因子的表达,并结合临床资料分析。结果鼻咽癌患者外周血T细胞对LMP1、LMP2反应阳性率存在差异。T_(3)-T_(4)期鼻咽癌患者LMP1特异性CD4^(+)T细胞阳性率明显高于T_(1)-T_(2)期患者(51.0%∶10.0%,P=0.042),LMP1和LMP2、CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞间部分细胞因子表达也存在差异。生存分析显示,2、3年OS率为91.5%、88.2%,2、3年PFS率为83.3%、75.3%;单因素分析提示吸烟史、男性、LMP1刺激CD4^(+)T细胞IL-13阳性表达是疾病的进展的危险因素(P=0.026、0.045、0.006);多因素分析显示LMP1刺激CD4^(+)T细胞IL-13阳性表达与吸烟史是局部晚期鼻咽癌患者PFS的独立危险因素(P=0.017、0.019)。结论LMP在鼻咽癌患者外周血中产生特异性T细胞免疫反应,不同T细胞亚群表达存在差异。LMP1、LMP2特异性T细胞免疫反应与原发肿瘤大小、转移淋巴结体积有关。LMP1刺激CD4^(+)T细胞IL-13阳性表达和吸烟史影响疾病的进展。     

GM-CSF 基因修饰肿瘤细胞疫苗治疗前后黑素瘤患者CD8 +T细胞的变化及其对预后的影响

目的:探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因修饰的肿瘤细胞疫苗(GM-CSF modified tumor cell vaccine,GVAX)治疗前后黑素瘤患者外周血免疫指标的变化及其对预后的影响。方法:收集2007年10月至2012年12月期间于天津医科大学肿瘤医院接受GVAX治疗的56例黑素瘤患者,采用流式细胞技术检测患者治疗前后外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、调节性T细胞(Treg)、自然杀伤细胞(NK)及树突状细胞(DC1和DC2)的比例,分析治疗前后外周血各免疫细胞比例的变化,并探讨其与患者预后的关系。结果:GVAX治疗后患者外周血CD8+T细胞比例较前升高[(37.56±12.76)%vs(34.71±12.30)%,P=0.006],CD4+T细胞比例降低[(53.44±13.36)%vs(56.27±13.15)%,P=0.017],CD4+/CD8+比值降低[1.61(1.37)vs 1.75(0.71),P=0.009]。治疗后CD3+T、NK、Treg、DC1、DC2与治疗前的差异无统计学意义(P>0.05)。晚期患者GVAX治疗前外周血CD8+T细胞比例大于均值组与小于均值组相比,中位生存时间显著延长(29.16 vs 13.34个月,P=0.012)。结论:GVAX治疗黑素瘤可增强CD8+T细胞为主的抗肿瘤免疫应答,晚期患者外周血CD8+T细胞比例可作为预测GVAX疗效的指标,为判断预后起到一定的提示作用。     

康莱特对晚期乳腺癌患者外周血CD4及PD-1阳性T细胞的影响

目的：检测康莱特（KLT）对晚期乳腺癌患者外周血CD4+及程序性死亡分子1（PD-1）阳性T细胞比例的影响,探讨KLT在乳腺癌患者中诱导抗肿瘤免疫的作用。方法选取接受过化疗或内分泌治疗后肿瘤进展的晚期乳腺癌患者30例,以KLT注射液处理;处理前后取外周血经流式细胞术检测治疗前后外周血中CD4+和CD4+PD-1+T淋巴细胞数量变化。并选取同期健康体检者20名为对照组,常规抽血检测。结果晚期乳腺癌患者治疗前外周血CD4+T细胞较健康人群低,而CD4+PD-1+T细胞的比例较健康人群高;经KLT治疗后的晚期乳腺癌患者外周血CD4+T细胞较治疗前显著增高,而CD4+PD-1+T细胞的比例较治疗前显著降低,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论 KLT有效降低晚期乳腺癌患者外周血CD4+PD-1+T淋巴细胞比例,减弱机体肿瘤免疫抑制状态。     

胃腺癌患者外周血中CD4+T淋巴细胞表面抑制性分子PD-1的表达

目的:检测胃腺癌患者外周血中程序性死亡分子1（programmed death-1,PD-1）在CD4+T淋巴细胞上的表达水平,探讨其与胃腺癌的关系。方法:选取未经放、化疗或外科手术治疗的胃癌患者57例、疾病对照22例与健康对照20例,取新鲜抗凝血经流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测抑制性分子PD-1的百分比例;同时对胃腺癌患者进行TNM分期比较。结果:胃腺癌患者外周血中PD-1在CD4+T淋巴细胞上的表达水平（10.91±4.36）%比疾病对照（8.14±3.65）%和健康对照（7.37±3.06）%显著升高,Ⅲ-Ⅳ期胃腺癌患者的CD4+PD-1+T细胞的百分比例（11.9±3.85）%显著高于Ⅰ-Ⅱ期（9.08±3.13）%。结论:抑制性分子PD-1在胃腺癌外周血中CD4+T淋巴细胞表面表达增加,并随胃腺癌进展而升高,提示CD4+PD-1+T淋巴细胞与胃腺癌的发生发展相关。     

吉西他滨对卵巢癌移植瘤小鼠的免疫调节作用

目的:观察吉西他滨(gemcitabine,GEM)对卵巢癌移植瘤小鼠肿瘤免疫微环境的调节作用.方法:C57BL/6小鼠皮下注射卵巢癌ID8细胞构建卵巢癌移植瘤模型,实验组腹腔注射GEM,对照组注射生理盐水,观察肿瘤生长情况.流式细胞术检测小鼠脾脏及肿瘤组织的调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)及髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC),实时定量PCR检测小鼠肿瘤组织arginase-1(Arg-D和Foxp3 mRNA的表达,流式细胞仪检测小鼠脾脏CD8+T细胞的比例,ELLSE法检测小鼠血清IFN-γ及IL-2的表达.结果:GEM处理后的移植瘤小鼠肿瘤生长明显受到抑制[(366.8±44.88) vs (499.3±24.14)mm3,P＜0.01].移植瘤小鼠肿瘤组织及脾脏Treg比率明显降低[(12.71±2.31)％ vs (20.36±2.65)％、(10.09±1.69)％ vs (13.79±1.31)％,均P＜0.01].实验组的相关基因mRNA表达较对照组显著降低[Foxp3:(4.30±0.46)vs (6.35±0.58);Arg-1:(16.32±0.38)vs(13.26±0.37);均P＜0.01].实验组血清中的IFN-γ和IL-2含量明显高于对照组[IFN-γ:(71.90±2.28)vs (53.91±3.91) pg/ml;IL-2:(51.46±1.69)vs (40.90±1.50) pg/ml,均P＜0.01].结论:GEM下调卵巢癌移植瘤小鼠免疫抑制活性,并可上调小鼠抗肿瘤免疫原性,该结果可为GEM作为卵巢癌免疫治疗干预措施提供实验依据.     

外周血PD-1及相关免疫指标在鼻咽癌患者放化疗过程中的变化及其意义

目的：检测鼻咽癌患者接受放化疗过程中T细胞表面PD-1表达、T细胞亚群等免疫指标的水平,探讨不同治疗时间段内患者的免疫功能。方法：收集2015年4月至2015年9月在福建省肿瘤医院经病理确诊的30例鼻咽癌患者的血液标本,通过流式细胞术动态监测患者在不同治疗时段（治疗前、新辅助化疗后、放疗结束）的免疫指标水平,包括T细胞上PD-1及T细胞亚群、NK细胞、B细胞等。结果：与治疗前相比,新辅助化疗后外周血CD3+细胞、CD4+T细胞、CD8+CD28+T细胞及CD4+/CD8+比值显著升高,而CD19（+ 即B细胞）及CD3-CD16+CD56（+ 即NK细胞）细胞水平显著下降（均P<0.05）。放化疗结束后,外周血CD4+细胞、CD8+CD28+T细胞、CD4+/CD8+比值下调至较治疗前更低的水平（均P<0.05）,而NK细胞的比例则表现为上调（P<0.05）。与治疗前相比,放疗后T细胞PD-1的表达水平显著升高（P<0.05）。结论：鼻咽癌患者外周血T细胞亚群比例在新辅助化疗后上调,而放疗结束时明显下降,提示放疗结束时患者的免疫功能受到显著抑制;T细胞PD-1的表达水平在放疗结束时显著上调,意味着放化疗结束时可能正是使用PD-1抑制剂的良机,抗PD-1维持治疗有望产生更高效持久的抗肿瘤效应。     

地西他滨对骨髓增生异常综合征患者PD-1／PD-L1表达的影响#br#

目的 探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者接受地西他滨（DAC）治疗前后程序性死亡因子 1／程序性死亡因子 1配体（PD-1／PD-L1）的变化。方法 收集2016年1月至2017年1月初治MDS中符合WHO 2008分型WPSS预后分层中危组及高危组并接受DAC（20 mg／m2 d1～d5,21～28天为1个周期,治疗2个周期）治疗的18例患者,同时以5例非恶性血液病患者为对照。于DAC治疗前后收集外周血和骨髓细胞。流式细胞术（FCM）检测DAC治疗前后外周血CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞的PD 1和骨髓单核细胞PD L1的变化;QPCR检测DAC治疗前后外周血及骨髓单个核细胞PD-1 mRNA、PD-L1 mRNA相对表达量的变化;比较化疗缓解组（n=5）和未缓解组（n=13）PD 1／PD L1的表达水平。结果 FCM检测显示,DAC治疗后,中危组CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞PD 1和骨髓单个核细胞的PD L1比例分别为（11.43±1.88）％、（11.46±1.60）％和（16.59±0.72）％,高危组分别为（16.36±3.71）％、（1659±381）％和（1869±160）％,均高于治疗前和对照组（P＜0.05）;未缓解组CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞PD 1和骨髓单个核细胞上PD L1的比例分别为（18.51±262）％和（19.03±2.18）％和（19.22±1.40）％,高于缓解组（P＜0.05）。QPCR检测显示,DAC治疗后,中危组外周血单个核细胞PD 1 mRNA和骨髓单个核细胞PD L1 mRNA的相对表达量为632±337和288±172,高危组分别为12.55±6.27和7.47±4.90,均高于治疗前（P＜0.05）。MDS未缓解组外周血PD 1 mRNA和骨髓单个核细胞PD L1 mRNA的相对表达为16.28±4.64和9.16±5.40,高于缓解组（P＜0.05）。结论 DAC治疗后中、高危MDS患者的外周血、骨髓中PD-1／PD-L1表达明显上升,尤其是未缓解组,PD-1／PD-L1高表达可能是介导DAC耐药的原因之一。     

Toll样受体-4表达对树突状细胞表型及功能的影响

目的:探讨Toll样受体-4(TLR-4)表达对树突状细胞(DC)表型及功能的影响及其机制.方法:以构建的含有TLR-4全基因序列的pcDNA3.1质粒载体为模板,通过mMESSAGE mMACHINE T7 Kit体外转录获得TLR-4 mRNA,并采用脂质体法将其转染健康人外周血PBMC来源的DC,用流式细胞术检测鉴定转染后DC表面功能性分子的表达及DC体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)分泌细胞因子的能力.结果:成功构建人TLR-4-pcDNA3.1质粒载体;体外扩增成功人TLR-4和EGFP mRNA片段.TLR-4 mRNA转染后的DC表面趋化因子CCR7及功能性分子HLA-DR的表达显著高于control mRNA转染DC、转染前成熟DC[CCR-7:(42.4±4.93)％ vs (20.1±3.09)％、(17.1±4.33)％,P＜0.05;HLA-DR:(62.1±7.23)％ vs(17.7±6.01)％、(25.8±4.16)％,P＜0.05],同时转染后的DC体外诱导CTL分泌IFN-γ细胞因子的能力强于control mRNA-DC、空载转染DC诱导的CTL及加入DC前CTL[(66.5±3.58)％ vs (41.1±4.27)％、(37.9±2.96)％、(3.2±2.03)％,P＜0.05].结论:TLR-4 mRNA转染DC可显著增强DC的功能,提高了DC抗原提呈及诱导CTL的能力,为增强DC疫苗抗肿瘤效应提供实验依据.     

Klotho基因对子宫颈鳞癌细胞恶性生物学行为的影响及相关机制

目的:探讨Klotho基因对人子宫颈鳞癌细胞株SiHa生物学特性的影响及其作用机制.方法:实时荧光定量PCR及Western blotting检测Klotho基因在子宫颈鳞癌细胞系SiHa、HeLa和C33A及人永生化表皮细胞HaCaT细胞中的表达水平.构建Klotho过表达载体并转染SiHa细胞,采用CCK-8法、Transwell侵袭实验和流式细胞术检测SiHa细胞增殖、凋亡和迁移能力的变化;Western blotting检测Rho A和ROCK1蛋白表达水平.结果:Klotho在子宫颈癌SiHa、Hela、C33A细胞中表达水平低于HaCaT细胞(P＜0.05).在SiHa细胞中过表达Klotho后,(1)细胞的增殖能力显著低于对照组[(67.37±5.04)％ vs(100.34 ±7.62)％,P＜0.05)];(2)G0/G1期细胞百分率显著增加[(82.56±3.89)％ vs(61.37±3.28)％,P＜0.05]、S期细胞百分率显著减少[(9.12±2.48)％vs(28.97±2.08)％,P＜0.01];(3)细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均显著增加(均P＜0.05);(4)细胞迁移率显著降低(P＜0.01);(5) Rho A和ROCK1蛋白表达水平均显著下降(均P＜0.01).结论:Klotho能够抑制人子宫颈癌SiHa细胞的增殖和迁移,并促进其凋亡;作用机制可能与抑制Rho A/ROCK 1信号通路的活化有关,提示Klotho可以作为诊断和靶向治疗子宫颈癌的潜在作用位点.     

DC-CIK对胃癌合并腹水患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞增殖及功能的影响

目的:探讨DC-CIK对胃癌合并腹水患者外周血CD4+CD25+调节性T胞(Treg细胞)比例及功能的影响。方法:60例胃癌合并腹水患者,于输注DC-CIK前1天及DC-CIK治疗结束后1周分别采集外周血。流式细胞术检测外周血Treg细胞的比例,RT-PCR法检测其Foxp3mRNA表达情况;将分选出的Treg细胞和CD4+CD25-T细胞分为单纯Treg细胞组（A组）、1∶1混合培养（B组）、单纯CD4+CD25-细胞组（C组）进行培养,3H-TdR掺入法检测Treg细胞抑制CD4+CD25-细胞增殖的能力。结果:治疗后外周血Treg细胞占CD4+T细胞的比例较疗前显著下降［(6.21±1.37)% vs (9.38±1.06)%,P＜0.05］。治疗后Treg细胞Foxp3mRNA表达水平较治疗前显著下降［(56.18±13.25)% vs (85.26±11.58)%,P＜0.05］。治疗后Treg对CD4+CD25-T细胞抑制增殖能力较治疗前明显下降［(37.31±4.16)% vs (48.92±5.25)%,P＜0.05］。结论:输注DC-CIK免疫治疗,可显著降低胃癌合并腹水患者外周血Treg细胞比例,下调Foxp3mRNA表达水平,降低Treg细胞免疫抑制功能,有利于诱导抗肿瘤免疫效应。     

Role of 4-1BB:4-1BB ligand in cancer immunotherapy

The activation of T cells plays a central role in antitumor immunity. In order to activate na?ve T cells, two key signals are required. Signal one is provided through the T-cell receptor (TCR) while signal two is that of costimulation. The CD28:B7 molecules are one of the best-studied costimulatory pathways, thought to be the main mechanism through which primary T-cell stimulation occurs. However, a number of molecules have been identified which serve to amplify and diversify the T-cell response, following initial T-cell activation. These include the more recently described 4-1BB:4-1BB ligand (4-1BBL) molecules. 4-1BB:4-1BBL are a member of the TNFR:TNF ligand family, which are expressed on T cells and antigen-presenting cells (APCs), respectively. Therapies utilizing the 4-1BB:4-1BBL signaling pathway have been shown to have antitumor effects in a number of model systems. In this paper, we focus on the 4-1BB:4-1BBL costimulatory molecules. In particular, we will describe the structure and function of the 4-1BB molecule, its receptor and how 4-1BB:4-1BBL costimulation has and may be used for the immunotherapy of cancer.     

食管癌放疗患者T淋巴细胞和自然杀伤细胞水平的临床研究

 【摘要】　目的　探讨行放疗的食管癌患者外周血T淋巴细胞、自然杀伤（NK）细胞的变化及其与放疗疗效的相关性。方法　对56例经病理组织学确诊的食管癌患者采用单纯放疗,应用流式细胞术测定其治疗前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞比例,评价其与近、远期治疗效果的相关性。以30名健康体检者外周血为健康对照。结果　食管癌患者外周血T细胞比例、Th细胞比例、Th／Ts分别为（58.3±5.2）%、（28.7±5.0）%、1.0±0.3,低于健康对照组的（65.8±7.2）%、（38.1±7.7）%、1.6±0.7（均P＜0.05）;而Ts细胞比例为（28.8±5.3）%,高于健康对照组的（25.4±5.7）%（P＜0.05）。外周血T淋巴细胞亚群及Th／Ts的变化与患者性别、肿瘤分期、病理分化程度、病变部位等临床病理参数之间的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。放疗后,患者外周血总T细胞比例、Th细胞比例、Th／Ts及NK细胞比例分别为（66.9±4.5）%、（40.6±5.6）%、（1.6±0.5）%和（16.2±3.9）%,均高于治疗前的（59.4±4.9）%、（29.1±4.2）%、（1.0±0.4）%和（14.6±3.2）%（均P＜0.05）,而Ts细胞比例治疗后为（25.4±3.6）%,较治疗前的（28.4±5.7）%降低（P＜0.05）。总T细胞、Th细胞增高程度与病变进展密切相关,差异有统计学意义（均P＜0.05）。结论　T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于行放疗的食管癌患者的免疫监测。检测患者外周血相关指标的表达对评估患者的免疫功能、治疗及预后具有一定的临床意义。     

胃癌术后化疗联合自体肿瘤细胞抗原致敏DC CIK细胞治疗的疗效

目的:探讨进展期胃癌根治术后化疗联合自体肿瘤细胞抗原致敏树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤(autologous tumor antigen load dendritic cells-cytokin-induced killer,Ag-DC-CIK)细胞治疗的疗效和安全性.方法:收集2013年1月至2014年3月于荆州市中心医院胃肠外科诊断为进展期(Ⅱ期和Ⅲ期)胃癌的60例患者,均接受胃癌D2根治术,术后按照随机数字表法分为两组,单纯化疗组采用FOLFOX化疗方案,给予6个周期化疗;联合治疗组除给予上述化疗外,同时给予Ag-DC-CIK细胞进行治疗.随访期2年,观察两组患者2年OS和PFS、外周血T细胞亚群免疫学指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD3+CD56+)、生活质量评分、化疗不良反应分级.结果:联合治疗组患者2年OS及PFS较单纯化疗组明显提高(均P＜0.05).联合治疗组治疗前后外周血T细胞亚群水平无明显变化(P＞0.05),而单纯化疗组治疗后外周血T细胞亚群水平明显降低(P＜0.05),且明显低于联合治疗组(P＜0.05);联合治疗组的综合生活质量评分明显高于单纯化疗组[(7.25±1.56) vs(5.54±1.27)分,P＜0.05].联合治疗组不良反应发生率明显低于单纯化疗组(10.0％ vs 20.0％,P＜0.05).结论:Ag-DC-CIK细胞治疗联合化疗能显著提高胃癌术后患者的2年OS及PFS,保护机体的免疫功能,减少化疗的不良反应,改善其生活质量.