三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。     

"低温微波-硝酸快速脱钙"技术研究及应用

目的 探讨低温微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法 根据实验条件分为4组：①低温(10℃)微波硝酸；②室温(20℃)微波硝酸；③室温(20℃)硝酸，硝酸脱钙液的浓度分别是5％、8％、10％和13％；④10％乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)脱钙液。应用免疫组织化学LSAB染色，光镜观察免疫组化染色结果。结果 以硝酸作为脱钙剂时，①组和④组的阳性细胞相近，均显著高于②、③组，经8％和10％硝酸脱钙的免疫组化染色阳性细胞明显多于5％和13％的硝酸。低温微波硝酸快速脱钙技术能显著缩短脱钙时间。结论 低温微波．硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的 探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法 选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液（改良混合脱钙液组,146例）与传统硝酸类脱钙液（硝酸类脱钙液组,42例）在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果 改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%（143/146）,HE染色效果良好为98.6%（144/146）;硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%（26/42）,HE染色效果良好为54.8%（23/42）。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论 改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。     

改良骨髓脱钙液对免疫组化染色结果的影响

目的 探讨酸脱钙液对骨髓活检组织免疫组化染色的影响.方法 对445例骨髓活检组织经混合酸脱钙及EDTA双重脱钙固定、免疫组化染色.结果 组织结构、细胞形态清晰完整,免疫组化染色定位准确、背景清晰.结论 混合脱钙液与EDTA联合应用有助于免疫组化染色,是骨髓活检病理诊断的有效方法.     

不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色效果的对比研究

目的:探讨不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色质量的影响。方法:选用10%乙二胺四乙酸钠(EDTA)、HA S复合酸脱钙液和10%硝酸3种不同的脱钙液,分成A、B、C 3组用于脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20~28℃)不同脱钙液对骨髓组织切片制作的影响。结果:A组脱钙液所制切片染色效果良好,但脱钙速度缓慢,所需时间较长;B组脱钙液脱钙速度快,所制切片染色好;C组脱钙液所制切片的染色强度和对比度均不如前两种脱钙液。结论:在制作骨髓组织切片时,EDTA脱钙液和HA S复合酸脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果,但EDTA脱钙液脱钙周期过长;HA S复合酸脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合于临床速检工作;硝酸脱钙液组染色效果较差。     

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的 对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法 观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果 常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论 标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.     

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

EDTA微波快速脱钙法

1材料和方法1．1材料固定后松质骨修成0．7cm×0．5cm×0．2cm；惠而浦微波炉AVM600型，功率900W，分七档；5种脱钙液：中性EDTA、PlankRycho液、10％硝酸．水溶液、Thoma’s液、Bouin＇s液。1．2方法微波设定在二档（160w），辐射smin，测量脱钙液温度，间隙Zmin，重复辐射3～4次后，以针顺利刺入骨组织为脱钙的标准。酸性脱钙液脱钙后，用5％硫酸钠水溶液碱化处理，微波辐射二档smin。中性EDTA脱钙无需碱化．常规石蜡制片，HE染色和免疫组化染色。2结果和讨论2．1经EDTA微波辐射脱钙的骨组织，石蜡切片完整，染色鲜艳，组织细胞…     

不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原性的影响

目的:探讨不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在冰箱(4℃)、室温(2 0℃)、温箱(37℃)、温箱(6 0℃)、超声波、微波、光波、光波/微波组合Ⅰ组、光波/微波组合Ⅱ组条件下脱钙,应用LSAB免疫组织化学染色技术检测ANP、5 HT、S 1 0 0、NF、GFAP、CD3 1 、CD3 4 和Vimentin的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸脱钙从4℃、2 0℃、37℃到6 0℃随着脱钙液温度的温度升高,脱钙时间逐渐缩短,光波、微波和超声波中脱钙所用的时间比2 0℃、37℃、6 0℃明显缩短,比光波/微波组合Ⅰ、Ⅱ中所用的时间长。光波/微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色结果均明显比2 0℃、37℃、6 0℃、微波组、光波组和超声波组的好(P <0 .0 1 ) ,而光波/微波组合Ⅰ组和Ⅱ组之间,微波组、光波组和超声波组之间的免疫组化染色结果均无明显差异(P >0 .0 5 )。结论:光波/微波组合Ⅱ 8%硝酸脱钙所用时间最短,免疫组化染色效果最好。     

光波-微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的应用

目的探讨光波．微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的作用。方法用8％硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波,微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ的条件下脱钙，同时以室温脱钙作为对照；应用光波-微波-LSAB免疫组织化学染色技术检测不同脱钙条件下ANP、CD31、CD34、5-HT、S-100、NF、GFAP和Vimentin的表达。结果8％硝酸室温脱钙时间最长，光波．微波组合脱钙时间最短；微波组、光波组、光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显比对照组好；光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显优于单纯微波、单纯光波法；光波-微波组合Ⅱ-LSAB免疫组织化学染色技术比常规免疫组织化学染色所用时间短、染色效果好。结论光波．微波辐射脱钙及免疫组化染色所用的时间明显缩短，染色效果好。     

Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用

目的：探讨Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用。方法收集200例骨髓活检穿刺组织,选取其中150例采用Jy-Ⅱ脱钙液脱钙,同时选取50例采用5%的硝酸脱钙液脱钙做对照观察,脱钙后分别做HE染色、特殊染色（Go-mori氏网状纤维染色）和免疫组织化学染色（MaxVisionTM法CD38染色）,观察Jy-Ⅱ脱钙液对骨髓活检组织结构的保存及染色情况。结果经Jy-Ⅱ脱钙液脱钙后骨髓活检组织结构保持完整,完整率达98.67%。镜下形态结构清晰,组织结构清晰率达100.00%,染色情况良好,脱钙时间短,为150 min。脱钙完全,效果好。经5%的硝酸脱钙液脱钙后的骨髓活检组织,结构保持不完整,完整率达60.00%,镜下形态结构欠清晰,清晰率达52.00%,染色情况欠佳,脱钙时间长,长达240 min,脱钙不完全,效果欠佳（P〈0.05）。结论 Jy-Ⅱ脱钙液效果明显优于5%的硝酸脱钙液,骨髓活检组织结构保持良好,操作简便,脱钙时间短,在脱钙过程中无需更换脱钙液,HE染色、特殊染色、免疫组化染色效果也较满意,实用性强,不失为一种良好的脱钙液,值得推广     

3种脱钙液对牙体牙周联合切片H-E染色效果的对比

目的对不同脱钙液在牙体牙周联合组织HE染色切片的效果进行比较，并初步探讨了乙二胺四乙酸二钠（EDTA）-微波技术在牙体牙周联合组织切片脱钙过程中的应用。方法取成年健康Beagle犬下颌骨牙体牙周联合组织做为标本，采用10％硝酸溶液、Krinstensen’S液、EDTA-微波辐射3种不同的脱钙方法进行脱钙，在完成组织脱钙后进行H—E染色，并在显微镜下观察组织结构及染色效果。结果EDTA-微波辐射完成组织脱钙约需53h，H—E染色效果良好，牙髓细胞、成牙本质细胞、牙周膜细胞和牙本质小管组织结构清晰；Krinstens—en’s液完成组织脱钙约需1500h，H—E染色效果较好，组织结构较清晰；10％硝酸溶液完成组织脱钙约需360h，H—E染色对比度差，组织结构模糊不清。结论应用EDTA-微波辐射技术能在相对较短的时间内完成牙体牙周联合组织的脱钙，并在H—E染色切片中较好地保存了牙体牙周组织的结构。     

不同脱钙方式观察牙髓组织切片的效果比较

目的比较乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetra-acetic acid,EDTA)脱钙法和复合酸脱钙法处理的牙齿石蜡切片的牙髓组织学形态特点。方法选用10%EDTA及复合酸(Plank-Rychlo)脱钙液,分别用于牙齿石蜡切片脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20～28℃)2种不同脱钙液对切片制作的影响。结果 EDTA脱钙液处理的石蜡切片牙髓细胞、成牙本质细胞、牙本质小管结构清晰,色泽对比鲜明,但脱钙时间较长;Plank-Rychlo脱钙液脱钙速度相对较快,但染色较EDTA脱钙液稍显模糊。结论在制作牙齿石蜡切片观察牙髓组织学形态时,EDTA脱钙液和Plank-Rychlo脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果。     

人工骨成骨模型免疫组织化学染色方法的构建

目的以大鼠单纯胫骨骨折后加入骨粉复合物为模型,观察乙二胺四乙酸(EDTA)-2Na脱钙和混合酸脱钙后免疫组织化学检测的效果。方法将骨粉复合物放置于大鼠左侧胫骨的骨块缺损中建立人工骨成骨模型,将模型分为两组(每组标本10例),实验组用EDTA-2Na脱钙,对照组采取混合酸脱钙后分别观察两组的免疫组织化学检测效果。结果EDTA脱钙组骨小梁结构保存完整,阳性表达较多。混合酸脱钙后,骨结构破坏较多,抗原破坏较严重,阳性表达明显减少。结论EDTA脱钙优于传统的脱钙方法,更适合于骨组织脱钙和免疫组织学化制片。     

IGF-1,OP-1在椎间盘退变中的作用分析

目的 观察IGF-1(胰岛素样生长因子-1)、OP-1(成骨蛋白-1)在大鼠尾椎椎间盘退变中的作用.方法 利用Lindblom折尾加压法建立鼠尾椎椎间盘退变模型,将外源性IGF-1,OP-1在不同时间、不同部位分两次向同一退变尾椎椎间盘髓核内注射.4周后取材,光镜下观察椎间盘形态、厚度,软骨陷窝中细胞密度,分析AB-PAS染色标本髓核中蛋白多糖的MOD值.免疫组织化学SP法检测鼠尾椎椎间盘软骨板内细胞PCNA表达情况,计算阳性表达率.结果 ①HE染色:与对照组比较,OP-1组内层纤维环胶原增粗,排列整齐,陷窝中细胞密度高.两实验组髓核完整性较好,无明显缺失.②AB-PAS染色:与对照组相比,IGF-1,OP-1组椎间盘厚度均增加,髓核的MOD值增加,两实验组比较无明显差异.③免疫组织化学染色:OP-1组软骨细胞PCNA阳性表达率高于IGF-1与对照组.结论 ①鼠尾椎椎间盘内注射生长因子可以刺激细胞增殖,增加胶原和蛋白多糖释放,从而促进退变椎间盘的修复;②在PGs合成方面,两生长因子效果无明显差异,OP-1促进细胞增殖、胶原合成、逆转退变过程的效果优于IGF-1.     

慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢的影响

目的：探讨过量氟对大鼠心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成5组（每组8只）：常规食对照组、常规食加氟组（加氟100 mg ·L^-1）、低钙偏食对照组、低钙偏食加低量氟组（加氟50 mg·L^-1）和低钙偏食加高量氟组（加氟100 mg·L^-1）。采用苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜观察以及免疫组织化学法检测氟中毒大鼠心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达。结果：图像分析显示苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜下显示的Ⅰ型、Ⅲ型胶原面积百分比,各加氟组其Ⅰ型、Ⅲ型胶原均较其对照组稍有增高趋势,但差异无显著性(P＞0.05)。免疫组化观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达量0%~10%,各加氟组与其对照组相比差异亦无显著性(P＞0.05)。结论：慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢无明显影响,心肌胶原可能不是氟化物作用的靶子。     

骨组织电镜脱钙技术在免疫组化中的应用

骨组织的免疫组化一直是病理技术中的一大难题。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，因而骨组织固定、脱钙都是制备标本的重要环节。一些强酸如盐酸、硝酸等虽能快速有效除去骨组织中的钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏；近几年发展的微波辅助EDTA脱钙技术，虽然可实现较好地保护组织抗原性且快速的效果，但操作程序复杂。骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化，其脱钙液与固定液均与其他方法有较大差别，本实验用该方法进行骨组织免疫组化，取得了较理想的效果，现报道如下。     

改良硝酸脱钙方法的研究及应用

目的探讨低温微波-硝酸快速脱钙方法对骨、牙齿及其他钙化组织的脱钙效果。方法实验组采用＂低温微波-硝酸快速脱钙＂方法脱钙,对照组采用室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙,硝酸脱钙液的浓度均为10%。应用HE染色,显微镜下观察染色效果。结果低温微波-硝酸快速脱钙方法与室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙比较,前者能得到一张高质量的HE切片。结论低温微波-硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

大鼠骨组织脱钙浅得

将大鼠的胫骨去掉周围软组织,经固定后置于5％的硝酸溶液中。每隔1—2小时用针刺组织,以能顺利刺入骨组织内为脱钙终点。脱钙完毕投入流水中冲洗24小时。再将组织置于70％酒精三份中,各1小时。进入常规脱水程序,最后透明、浸蜡、包埋。 切片染色时由于经过脱钙剂处理的组织酸化,染     

MMP-13在去势大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及意义

目的 探讨MMP-13在去势大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及临床意义.方法 30只3月龄Sprague-Dawley (SD)大鼠,随机均分为3组,每组10只:基础对照组(BL组);双侧卵巢切除(OVX)手术组;手术对照组(Sham组);BL组在手术开始前处死,其余2组术后三个月处死,取L4-5腰椎及椎间盘进行HE常规染色及运用免疫组化检测椎间盘MMP-13的表达.结果 OVX组与Sham组比较大鼠椎间盘中MMP-13表达明显升高(P<0.05).结论 MMP-13表达量的增加可能是椎间盘退变形成和发展中起重要作用.