氟西汀对脓毒症小鼠认知功能的影响

目的 探讨氟西汀对脓毒症小鼠认知功能障碍和神经炎症的影响。
方法 SPF级雄性C57BL/6小鼠69只,3～4月龄,体重20～30 g。采用随机数字表法将小鼠分为三组：生理盐水组（NS组）、脓毒症组（S组）和脓毒症+氟西汀组（SF组）,每组23只。在小鼠右侧海马组织CA1区植入8-通道线性硅探针记录局部场电位（LFP）,研究γ震荡强度变化,并根据“两次打击”学说制备脓毒症小鼠模型。S组和SF组腹腔注射脂多糖（LPS）3 mg/kg,NS组在相同时点腹腔注射等体积生理盐水。注射1 d后,S组和SF组每日暴露在4种随机压力源之下,持续21 d;SF组于注射LPS 1周后每日予氟西汀20 mg/kg,持续至行为学测试结束。压力源暴露结束后,所有小鼠进行行为学测试,测试项目包括旷场实验、Y-迷宫、新奇事物识别实验和糖水偏好实验,分别记录中央区域停留时间和运动距离、Y-迷宫交替率、辨别指数和γ震荡强度、糖水偏好率。糖水偏好试验结束后即刻处死小鼠获得脑组织,采用MSD法检测IL-6、IL-1、IL-10浓度。
结果 与NS组比较,S组运动距离明显延长（P<0.05）,Y-迷宫交替率、辨别指数、糖水偏好率明显降低（P<0.05）,γ震荡强度明显减弱（P<0.05）,海马组织IL-6浓度明显升高（P<0.05）。与S组比较,SF组运动距离明显缩短（P<0.05）,Y-迷宫交替率、辨别指数、糖水偏好率明显升高（P<0.05）,γ震荡强度明显增强（P<0.05）,海马组织IL-6浓度明显降低（P<0.05）。三组海马组织IL-1和IL-10 浓度差异无统计学意义。NS组和SF组各项指标差异均无统计学意义。
结论 氟西汀可以改善小鼠行为,降低海马组织促炎因子浓度,改善脓毒症小鼠认知功能。     

右美托咪定对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响

目的 探讨右美托咪定对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响及与肾脏细胞焦亡的关系。
方法 健康清洁级ICR小鼠32只,雌雄各半,8~12周龄,体重20~25 g。采用随机数字表法将小鼠分为四组：对照组（C组）、脂多糖（LPS）组（L组）、LPS+右美托咪定组（LD组）和LPS+右美托咪定+阿替美唑组（LT组）,每组8只。L组、LD组和LT组腹腔注射LPS 400 μg/kg,8 h后腹腔注射LPS 10 mg/kg建立脓毒症急性肾损伤模型。L组于建模即刻、建模后0.5、2、2.5、4、4.5 h腹腔注射生理盐水0.5 ml;LD组于建模即刻、建模后2、4 h腹腔注射生理盐水0.5 ml,于建模后0.5、2.5、4.5 h分别腹腔注射右美托咪定40 μg/kg;LT组于建模即刻、建模后2、4 h腹腔注射阿替美唑750 μg/kg,于建模后0.5、2.5、4.5 h分别腹腔注射右美托咪定40 μg/kg;C组在各时点腹腔注射等量生理盐水。所有小鼠于建模后24 h麻醉处死。采用全自动生化分析仪检测血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）浓度,化学发光法测量肾皮质细胞三磷酸腺苷(ATP)和血清ATP浓度,ELISA法检测肾组织IL-1β和IL-18浓度,qRT-PCR法检测肾组织caspase-11、泛连接蛋白1（pannexin-1）、P2X7 mRNA表达量,Western blot法检测肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7蛋白含量,HE染色法观察肾组织病理结构,TUNEL染色记录肾小管上皮细胞凋亡细胞数并计算细胞凋亡率。
结果 与C组比较,L组、LD组和LT组血清BUN、Scr、ATP浓度均明显升高（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显降低（P<0.05）,肾组织IL-1β和IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显升高（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。与L组比较,LD组血清Scr、BUN、ATP浓度均明显降低（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显升高（P<0.05）,肾组织IL-1β浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1 mRNA表达量均明显降低（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显降低（P<0.05）;LD组和LT组肾组织IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1蛋白含量、肾组织P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显降低（P<0.05）。与LD组比较,LT组血清BUN、Scr、ATP浓度均明显升高（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显降低（P<0.05）,肾组织IL-1β和IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显升高（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。
结论 右美托咪定减轻了LPS导致的脓毒症小鼠肾脏病理学损伤,降低肾组织IL-1β和IL-18浓度,降低肾小管上皮细胞凋亡率,可能通过非经典途径减轻了肾脏细胞焦亡。     

Indian Hedgehog信号通路在软骨细胞成熟及转分化过程中的调控作用

目的 探究Indian Hedgehog（IHH）信号通路对软骨内成骨过程中软骨细胞成熟以及转分化的影响。方法 取10日龄野生型小鼠的胫骨组织,采用原位杂交和免疫组织化学染色检测生长板区域IHH信号通路相关分子Ihh、Ptch1和Gli1的表达水平。构建肥大软骨细胞特异性Ihh基因敲除小鼠（Col10a1^Cre/+; Ihh^null/C）,并采用影像学检查和阿利新蓝染色评估该小鼠的骨骼发育状况。构建肥大软骨细胞IHH信号通路持续激活小鼠（Col10a1^Cre/+; R26Smo^M2/M2和 Col10a1^Cre/+; Ptch1^LacZ/C）,采用HE染色、原位杂交和TUNEL染色分别对受精15.5天胎鼠胫骨组织形态结构、Ihh（肥大软骨细胞分子标志物）和Col1a1（成骨细胞分子标志物）以及肥大软骨细胞凋亡水平进行检测;另外应用HE染色对10日龄小鼠的胫骨组织进行组织学分析。结果 肥大软骨细胞合成分泌IHH,但不表达Ptch1和Gli1。抑制肥大软骨细胞合成IHH蛋白会导致出生后小鼠出现侏儒症;X线检查结果显示小鼠出现严重的骨骼发育不良,包括胸廓狭小、球形头骨以及椎骨发育异常等表现。持续启动IHH信号通路时,胚胎早期软骨细胞成熟分化过程虽未见异常,但是出生后小鼠的骨小梁、骨内膜以及皮质骨等结构均出现一定的异常表现。结论 IHH信号通路虽然不参与肥大软骨细胞的终末分化过程,但在软骨细胞转分化的过程中起到了重要的调控作用。     

利多卡因对脓毒症大鼠肺损伤的影响

目的 研究利多卡因对脓毒症大鼠肺损伤的影响。
方法 选择清洁级SD成年雄性大鼠30只,2月龄,体重250～300 g。采用随机数字表法将大鼠分为三组：假手术组（S组）、盲肠结扎穿孔组（C组）和利多卡因组（L组）,每组10只。S组仅打开腹腔后缝合,C组和L组采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症模型。L组建立脓毒症模型后即刻给予利多卡因的负荷剂量10 mg/kg,后尾静脉持续泵注利多卡因10 mg·kg^-1·h^-1,持续3 h;S组和C组注射等量等渗氯化钠溶液。于建模后24 h处死大鼠,打开腹腔,采集下腔静脉血5 ml,采用ELISA法检测血清TNF-α、糖萼成分多配体聚糖1（Syndecan-1）、乙酰肝素酶（Heparanase）浓度。处死大鼠后采集腹主动脉血0.5 ml进行血气分析,记录PaO₂和PaCO₂。腹主动脉取血之后迅速开胸,取双肺组织,左肺组织计算肺组织湿/干重比,右肺组织采用透射电镜观察血管内皮糖萼结构。
结果 与S组比较,C组血清TNF-α、Syndecan-1和Heparanase浓度均明显升高（P<0.05）,PaO₂和PaCO₂明显降低（P<0.05）,C组肺组织湿/干重比明显升高（P<0.05）。与C组比较,L组血清TNF-α、Syndecan-1和Heparanase浓度均明显降低（P<0.05）,PaO₂和PaCO₂明显升高（P<0.05）,肺组织湿/干重比明显降低（P<0.05）。S组糖萼连续,分布均匀,结构致密;C组糖萼不连续,出现大量中断,分布不均匀,糖萼结构明显疏松;L组糖萼不连续,出现少量中断,分布不均匀,糖萼结构较疏松,但中断程度、分布不均匀程度以及疏松程度均轻于C组。
结论 利多卡因可以减少炎性因子释放、改善肺血管通透性、减轻脓毒症肺损伤,保留糖萼结构完整性。     

血管紧张素-（1-7）及其受体激动剂AVE0991治疗大鼠急性肺损伤的效果

目的 探讨血管紧张素-（1-7）［Ang-（1-7）］及其特异性受体激动剂AVE0991用于治疗大鼠急性肺损伤（ALI）的效果。
方法 选择清洁级雄性SD成年大鼠45只，6～8周龄，体重250～300 g。采用随机数字表法将大鼠分为五组：对照组（C组）、ALI组（L组）和Ang-（1-7）组（LA组）、AVE0991组（LAV组）和Ang-（1-7）抑制剂（A-779）（LAN组），每组9只。L组静脉注射脂多糖（LPS） 5 mg/kg，机械通气V_T 15 ml/kg，持续4 h；C组静脉注射与 L组等容量的生理盐水，机械通气V_T 8 ml/kg，持续4 h；LA组、LAV组和LAN组静注LPS 5 mg/kg，机械通气V_T 15 ml/kg，持续2 h后分别静注Ang-（1-7） 50 pmol·kg^-1·min^-1、AVE0991 500 pmol·kg^-1·min^-1和A-779 100 pmol·kg^-1·min^-1，继续机械通气2 h 。记录机械通气前（T₀）、机械通气 2 h（T₁）、药物处理 30 min（T₂）、60 min（T₃）、90 min（T₄）、120 min（T₅）时的肺动脉压（PAP）；T₁和T₅时取肺动脉血行血气分析，记录LA组、LAV组和LAN组的PaCO₂、PaO₂。处死大鼠，对支气管肺泡灌洗液（BALF）采用瑞氏-姬姆萨染色行白细胞分类计数，采用ELISA法检测股静脉血TNF-α浓度，采用肺组织称重法计算肺湿/干重比（W/D），采用HE染色观察肺组织病理改变并评估肺损伤程度。
结果 与T₁时比较，T₂时LA组PAP明显降低（P<0.05），T₂—T₄时LAV组PAP明显降低（P<0.05），T₅时LA组PaO₂明显升高（P<0.05）。与C组比较，L组和LAN组BALF中白细胞计数明显增多（P<0.05），L组、LA组、LAV组和LAN组血清TNF-α浓度和W/D值明显升高（P<0.05）。与L组比较，LA组和LAV组BALF中白细胞计数、血清TNF-α浓度和W/D值明显降低（P<0.05）。与LA组比较，LAN组BALF中白细胞计数、血清TNF-α浓度和W/D值明显升高（P<0.05）。C组肺组织损伤轻微，L组肺组织损伤中度，LA组和LAV组肺组织损伤轻度，LAN组肺组织损伤严重。
结论 Ang-(1-7)及AVE0991可以减轻大鼠大潮气量通气合并LPS所致ALI的炎症反应，改善肺损伤，具有肺保护作用。     

多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞注射对小鼠椎体微结构的影响

目的 利用多靶点SOST基因沉默技术修饰小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,并将其注射到小鼠体内,观察其对小鼠椎体骨密度及微结构的影响。方法 取18只18月龄雌性C57BL/6小鼠在无菌条件下手术切除双侧卵巢制作骨质疏松模型,并分为3组（n=6）：SOST基因沉默组注射采用多靶点SOST基因沉默技术修饰并同时转染CRISPR-sgRNA载体系统和SOST-RNAi修复模板载体假病毒颗粒的MC3T3-E1细胞;阴性组注射同时转染CRISPR-sgRNA载体系统和SOST-N修复模板载体假病毒颗粒的MC3T3-E1细胞;空白组注射不作任何处理的MC3T3-E1细胞。采用HE染色和Masson三色染色观察小鼠椎体骨小梁面积的变化,免疫组化染色观察骨组织中骨保护素（OPG）和RANKL表达的变化,实时荧光定量PCR检测观察各组细胞SOST及骨代谢相关细胞因子（RUNX2、β-catenin、RANKL、OPG）的表达变化。结果 L₁ HE染色和L₂ Masson三色染色结果显示,SOST基因沉默组骨小梁面积大于阴性组和空白组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。L₂免疫组织化学染色结果显示,SOST基因沉默组OPG表达量高于阴性组和空白组,RANKL表达量低于阴性组和空白组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。L₃实时荧光定量PCR检测结果显示,SOST基因沉默组SOST和RANKL表达量低于阴性组,RUNX2、β-catenin和OPG表达量高于阴性组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论 多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞尾静脉注射能够促进小鼠成骨细胞分化和分泌功能,抑制破骨细胞活性,有效改善小鼠椎体微结构。     

不同剂量瑞马唑仑用于宫腔镜手术的安全性和有效性

目的 比较三种剂量瑞马唑仑和丙泊酚用于宫腔镜手术的安全性和有效性。
方法 选择择期全麻下行宫腔镜手术患者180例,年龄18~60岁,ASA Ⅰ—Ⅲ级。采用随机数字表法将其分为四组：C组、R1组、R2组和R3组,每组45例。所有患者静脉注射舒芬太尼5 μg后,C组静脉注射丙泊酚1～2 mg/kg进行麻醉诱导,待改良警觉/镇静评分（MOAA/S）为0分后予以5 mg·kg^-1·h^-1静脉泵注维持;R1组、R2组和R3组均静脉泵注瑞马唑仑6 mg·kg^-1·h^-1进行麻醉诱导,MOAA/S为0分后,R1组、R2组和R3组分别调整剂量为0.5、1.0和1.5 mg·kg^-1·h^-1术中维持。记录镇静起效时间、术中补救镇痛例数以及苏醒时间。记录入室平静时（T₀）、麻醉诱导后MOAA/S为0分时（T₁）、术中SBP最低时（T₂）、麻醉苏醒（T₃）后HR、SBP和DBP。记录术中知晓、体动、多巴胺使用例数、呼吸抑制、肌震颤、头痛、注射痛、瘙痒、恶心、呕吐、咳嗽、出汗、寒战和苏醒后眩晕等不良事件的发生情况。
结果 R1组、R2组和R3组镇静起效时间明显长于C组（P＜0.05）,R2组、R3组术中补救镇痛率明显低于R1组（P＜0.05）,R2组和R3组苏醒时间明显长于C组和R1组（P＜0.05）。T₁时R1组、R3组HR明显快于C组（P＜0.05）。T₁、T₂时R1组、R2组和R3组SBP和DBP均明显高于C组（P＜0.05）。R1组术中体动发生率明显高于R2组、R3组（P＜0.05）,R1组、R2组和R3组术中多巴胺使用率和注射痛发生率明显低于C组（P＜0.05）。
结论 以瑞马唑仑6 mg·kg^-1·h^-1静脉诱导、1.0 mg·kg^-1·h^-1麻醉维持应用于宫腔镜手术时相对于应用丙泊酚对循环系统影响更小,注射痛发生率更低,可安全、有效地应用于此类手术患者。     

铁死亡抑制剂Ferrostatin-1在心肺转流大鼠认知功能中的作用

目的 探讨铁死亡抑制剂Ferrostatin-1在心肺转流（CPB）大鼠认知功能中的作用。

方法 选择SPF级健康雄性SD大鼠24只,12周龄,体重350～400 g。采用随机数字表法将大鼠分为三组：假手术组（S组）、CPB组（C组）和CPB＋Ferrostatin-1组（F组）,每组8只。S组行股动静脉及颈内静脉穿刺置管,不进行CPB;C组穿刺置管后行CPB 60 min;F组术前腹腔注射Ferrostatin-1 5 mg/kg,60 min后穿刺置管并行CPB 60 min。于术后第3天行水迷宫实验,记录潜伏期和穿越平台次数。处死大鼠,采用ELISA法检测海马组织活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）浓度,亚铁嗪比色法检测海马组织Fe²⁺浓度,Western blot法检测海马组织τau蛋白、β-淀粉样蛋白（Aβ）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白含量,HE染色观察海马组织锥体细胞病理变化,透射电镜观察海马组织锥体细胞线粒体结构。

结果 与S组比较,C组和F组潜伏期明显延长（P＜0.05）,穿越原平台次数明显减少（P＜0.05）,海马组织ROS、MDA、Fe²⁺浓度、τau蛋白和Aβ蛋白含量明显升高（P＜0.05）,GSH浓度和GPX4蛋白含量明显降低（P＜0.05）,海马组织锥体细胞核固缩,线粒体损伤加重。与C组比较,F组潜伏期明显缩短（P＜0.05）,穿越原平台次数明显增多（P＜0.05）,海马组织ROS、MDA、Fe²⁺浓度、τau蛋白和Aβ蛋白含量明显降低（P＜0.05）,GSH浓度和GPX4蛋白含量明显升高（P＜0.05）,海马组织锥体细胞病理结构和线粒体损伤减轻。

结论 CPB诱导大鼠海马组织神经元发生铁死亡,诱发大鼠术后认知功能障碍,Ferrostatin-1通过抑制铁死亡降低大鼠海马组织ROS、MDA、Fe²⁺浓度和τau、Aβ蛋白含量,改善CPB大鼠的术后认知功能。     

高迁移率族蛋白1通过PINK1/Parkin介导的线粒体自噬促进骨髓干细胞的趋化及成骨分化

目的 探讨高迁移率族蛋白1（HMGB1）通过PTEN诱导假定激酶1（PINK1）/帕金蛋白(Parkin)介导的线粒体自噬对骨髓干细胞的趋化及成骨分化的影响。方法 将人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）分为7组：control组、siRNA-NC组、siRNA-HMGB1组、pcDNA-NC组、pcDNA-HMGB1组、pcDNA-HMGB1+siRNA-NC组、pcDNA-HMGB1+siRNA-PINK1组。采用Transwell检测细胞迁移能力;茜素红染色检测各组细胞中钙结节数目;ELISA检测骨桥蛋白（OPN）、碱性磷酸酶（ALP）的含量;RT-qPCR检测各组细胞中成骨细胞特异性转录因子（Osterix）、HMGB1及Runt相关转录因子2（RUNX2）、转录因子CCAAT/增强子结合蛋白（C/EBPα）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）水平;透射电镜检测线粒体自噬小体数目;Western Blot检测hBMSCs中Parkin及微管相关蛋白1A/1B-轻链3（LC3Ⅱ/Ⅰ）、选择性自噬接头蛋白62（P62）和自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin1）等线粒体自噬相关蛋白的表达。结果 HMGB1通过PINK1/Parkin介导的线粒体自噬对hBMSCs的趋化作用研究表明：与pcDNA-NC组相比,pcDNA-HMGB1组HMGB1表达、细胞迁移率、线粒体自噬数目及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达增加,Parkin、P62等蛋白的表达降低（P＜0.05）;与siRNA-NC组相比,siRNA-HMGB1组HMGB1表达、细胞迁移率、线粒体自噬数目及Beclin-1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ等表达降低,Parkin、P62表达增高（P＜0.01）。HMGB1通过PINK1/Parkin介导的线粒体自噬对hBMSCs的成骨分化作用研究结果显示：与pcDNA-NC组相比,pcDNA-HMGB1组钙结节数量、Osterix及RUNX2含量、ALP及OPN的表达升高（P＜0.01）,PPARγ、C/EBPα的表达降低（P＜0.05）;与pcDNA-HMGB1+siRNA-NC组相比,pcDNA HMGB1+siRNA-PINK1组钙结节数量、Osterix及RUNX2含量、ALP及OPN的表达降低（P＜0.05）,PPARγ、C/EBPα的表达升高（P＜0.05）。结论 HMGB1高表达能通过PINK1/Parkin介导的线粒体自噬促进hBMSCs的趋化、成骨细胞分化及抑制成脂细胞分化,可能是骨质疏松症的潜在治疗靶点。     

Serum adenosine deaminase activity in brain tumours

Summary Adenosine deaminase (ADA) activity in serum was estimated in 86 patients with intracranial tumours and 40 healthy volunteers. Although high ADA concentrations in biological fluids and tumour tissues were observed in several neoplastic conditions, there was no significant difference in the ADA in sera of brain tumour patients when compared to the control values. Therefore, cell-mediated immunity probably does not play a significant role in brain tumours.     

腺苷脱氨酶在大鼠睾丸,附睾中的分布

利用本实验室前期制备和鉴定了的抗人精子膜结合脱氨酶单克隆抗体和ＡＢＣ组分技术，我们分析了正常性成熟和性未成熟大鼠睾丸及附睾中的该酶分布情况。实验结果显示：（１）ＡＤＡ在正常性成熟和性未成熟大鼠睾丸和附睾中无分布；在性成熟大鼠中，ＡＤＡ的分布从际睾头部开始出现；（２）ＡＤＡ在正常性成熟大鼠附睾中的分布由附睾头部至尾部其密度未发现变化。     

腺苷脱氨酶在人睾丸及附睾的分布

应用本实验室前期制备的特异性的抗人精子膜结合腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）同功酶的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和免疫组化技术，我们分析了该同功酶在正常人睾丸和附睾中的分布。实验结果显示：（１）ＡＤＡ在正常人睾丸中无分布，而在附睾头部，附睾管腔上皮细胞中开始分布；（２）ＡＤＡ在正常人附睾管腔上皮细胞中的分布，由附睾头部至尾部，其密度递增。这一研究结果提示：（１）ＡＤＡ分布具有附睾特异性；（２）人精子膜结合ＡＤＡ可能来自附睾管腔上皮细胞。     

Pathogenetic significance of adenosine deaminase in autoimmune diseases

Adenosine deaminase (ADA: E.C.3.5.4.4.) is one of the catabolic enzymes of purine nucleotide. In 1972 Gibllet has discovered two cases of ADA deficiency combined with severe immunodeficiency (ADA-. SCID) with remarkable dysfunction in both T and B cell. Thereafter, it has been believed by many investigators that deficiency of purine metabolic enzyme had played important role in immune function mechanism. Rheumatoid arthritis (RA) is one of the autoimmune diseases which is very frequently seen, but its pathogenesis is not distinct yet. This study has shown how the catabolic pathway of erythrocytes and lymphocytes in RA has been distorted. Materials: Erythrocytes and lymphocytes in peripheral blood were obtained from patients with RA (48 cases), SLE (4), primary gout (55) and healthy control (23). 2. T cell and non-T cell in peripheral blood were obtained from patients with RA (5), gout (55) and healthy control (28). 3. T cell and non-T cell in joint fluid were obtained from patients with RA (19) and osteoarthritis (OA (9)). Methods: Erythrocytes and lymphocytes were separated from peripheral blood by Ficoll-Conray (density 1,077) by use of gradient centrifugation method. The lymphocytes with PBS was mixed with sheep red blood cells. E rosette-positive (T cell) and E rosette-negative (non-T cell) populations were separated from lymphocytes in peripheral blood and joint fluid by human sodium metrizoate Ficoll mixed solution (density 1,090) by use of gradient centrifugation method. Erythrocytes bursted at -70 degrees C and lymphocytes were sonicated for 25 sec. at 20 kHz. The reaction mixture which consisted of 0.2 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4), 30 mM [8-14C] adenosine and the samples was incubated at 37 degrees C for 30 min. After incubation, adenosine, inosine and the reaction mixture were applied on DEAE-cellulose paper. Radioactivity of the samples was measured with liquid scintillation counter. Results: There was no significant difference in ADA activity of erythrocytes between normal male and female, but a significant difference was found in ADA activity of lymphocytes among its subpopulations. ADA activity of erythrocytes and lymphocytes in RA patients was much lower than the other groups (gout and normal subjects). Particularly, ADA activity in T cell was the lowest. In gouty patients, ADA activity of erythrocytes and T cell was higher. ADA activity of peripheral erythrocytes in RA patients was lower than that of joint fluid.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

Malondialdehyde level and adenosine deaminase activity in nasal polyps.

OBJECTIVE: Although there are many reports on adenosine deaminase (ADA) activities in different tissues, no information is available about the enzyme activity in nasal mucosa and polyp tissues. Whereas ADA is related to the production of free radicals by neutrophils, malondialdehyde (MDA) is an indicator of lipid peroxidation that is a general mechanism of tissue damage by free radicals. This study is aimed at determining and comparing the ADA activity and MDA level in nasal polyps and normal mucosa. STUDY DESIGN AND SETTING: Twenty-three patients with nasal polyps and a control group consisting of 14 patients with septal deviation and lower turbinate hypertrophy were included in the study. Tissue MDA level was measured by the method of Okawa with modification and tissue ADA activity by the method of Giusti. RESULTS: In patients with nasal polyp, mean tissue MDA level and ADA activity were 2.43 +/- 0.38 nmol/mg protein (Pr) and 0.235 +/- 0.055 U/mg Pr, respectively, which were significantly higher than those of control nasal mucosa (1.03 +/- 0.41 nmol/mg protein and 0.056 +/- 0.011 U/mg Pr, respectively) (P < 0.05). In addition, tissue MDA level was positively correlated to ADA activity in nasal polyps (r = 0.701, P < 0.001). CONCLUSIONS: The present study showed the presence of detectable ADA activity in nasal mucosa, and also significant increases in both tissue MDA level and ADA activity in NP tissue when compared to normal turbinate tissue. EBM rating: B-2b.     

Sib-pair analysis of adenosine deaminase locus in NIDDM.

Recently, linkage between the ADA gene locus and MODY, a subtype of NIDDM, has been reported. The possibility that the region of chromosome 20q containing the ADA locus also may play a role in susceptibility to NIDDM needs to be investigated. Therefore, we examined the linkage between the ADA locus and NIDDM in affected siblings of 50 European white diabetic pedigrees--21 Italian and 29 British. Departure from independent segregation of the disease and an Alu VpA polymorphism within the 5' flanking region of the ADA locus was tested in the affected sib-pairs with the APM statistical method. After DNA amplification by the PCR and PAGE, five alleles were identified in the ALU VpA tract at the ADA locus in the two populations. Allele frequencies did not differ significantly between the two populations (chi 2 = 2.426, P > 0.05 [NS]). Analysis of the 50 diabetic sib sets, and independently of the Italian and British groups of affected sib pairs, revealed no segregation distortion between the marker locus and NIDDM. We conclude that mutations within or around the ADA locus are unlikely to play a major role in the etiology of NIDDM.