过表达miR-411对宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨过表达miR-411对宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制.方法 以正常宫颈上皮永生化细胞End1/E6E7为对照细胞,qRT-PCR检测宫颈癌Caski、SiHa和C-33A细胞miR-411表达.MTT法、Transwell小室及流式细胞术检测转染miR-411 mimics 48 h的SiHa细胞增殖...     

布比卡因调控LncRNA LBX2-AS1对宫颈癌细胞SiHa增殖及凋亡的影响

摘要：目的:探讨布比卡因对宫颈癌细胞SiHa增殖、凋亡的影响及其对LncRNA LBX2-AS1的调控作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分别加入不同剂量的布比卡因处理细胞,分别将si-NC、si-LBX2-AS1转染至SiHa细胞,分别将pcDNA、pcDNA-LBX2-AS1转染至SiHa细胞后使用布比卡因处理;采用MTT实验检测细胞增殖;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测LBX2-AS1的表达量;Western blot法检测Cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达量。结果:布比卡因可明显降低光密度（OD）值、S期细胞比例、LBX2-AS1的表达水平及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;转染si-LBX2-AS1可明显降低OD值、S期细胞比例及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;转染pcDNA-LBX2-AS1可明显逆转布比卡因对SiHa细胞增殖、细胞周期及凋亡的作用（P<0.05）。结论:布比卡因可通过下调LBX2-AS1的表达从而抑制宫颈癌细胞增殖、诱导细胞周期阻滞于G0-G1期细胞比例及促进细胞凋亡。     

鞣花酸通过调控miR-1254表达抑制口腔鳞癌HSC3细胞增殖、迁移和侵袭的机制

目的 探讨鞣花酸对口腔鳞癌HSC3细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法 体外培养HSC3细胞，用不同剂量(2、4、8μg/ml)鞣花酸干预24 h后，CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖、划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭，蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达，qRT-PCR法检测细胞中miR-1254表达。收集39例口腔鳞癌患者癌组织和癌旁组织，RT-PCR法检测组织中miR-1254表达。转染miR-1254模拟物至HSC3细胞，或转染miR-1254抑制剂至HSC3细胞后再用8μg/ml鞣花酸干预24 h,然后采用上述相同方法检测细胞增殖、迁移和侵袭。结果 与对照组比较，不同剂量鞣花酸提高了HSC3细胞增殖抑制率和E-cadherin蛋白表达(P<0.05),降低了细胞克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达(P<0.05)。同时，与对照组比较，不同剂量鞣花酸促进了HSC3细胞中miR-1254表达(P<0.05)。口腔鳞癌组织中miR-1254表达低于癌旁组织(P<0.05)...     

ALEX1在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞生物学行为的影响

目的研究ALEX1基因在宫颈癌组织与癌旁组织中的表达情况,探讨ALEX1基因对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法应用免疫组化检测临床宫颈癌组织与癌旁组织中ALEX1的表达情况,通过小干扰RNA技术沉默ALEX1,并通过流式细胞仪检测沉默ALEX1后He La细胞的周期、凋亡变化情况,利用CCK-8检测其增殖情况及对抗癌药物白藜芦醇敏感性的影响。结果免疫组化结果显示,临床宫颈癌组织中ALEX1高表达。与对照组He La细胞相比,沉默ALEX1实验组细胞生长受到明显抑制,并且增强白藜芦醇对其的抑制作用,细胞周期阻滞在S期。结论沉默ALEX1能有效阻滞He La细胞的生长能力及增强白藜芦醇对He La细胞的抑制作用。     

S100A11过表达对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的影响

目的探讨钙囊素(S100A11)过表达对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的影响。方法构建S100A11过表达载体质粒pcDNA3.1-S100A11,并转染人胰腺癌细胞PANC-1细胞。Western blot检测转染效果;CCK-8检测转染后PANC-1细胞增殖活力;流式细胞术检测PANC-1细胞的凋亡和细胞周期的变化。结果 S100A11蛋白表达量与pcDNA3.1-S100A11的转染量成正相关。过表达S100A11基因可明显提高PANC-1细胞增殖速度,降低凋亡细胞比例,并使PANC-1细胞S期细胞比例增加,G1期细胞减少(P<0.05)。结论S100A11过表达能调控PANC-1细胞周期,并促进PANC-1细胞的增殖。     

TRAP1对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)在结直肠癌中的表达情况及对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过Oncomine数据库分析TRAP1在结直肠癌组织和正常肠黏膜组织中的表达,Western blot检测TRAP1在结直肠癌组织及其配对癌旁黏膜组织、LOVO、HT29、HCT116、RKO、SW480、NCM460细胞中的表达及干扰TRAP1对细胞周期相关蛋白、凋亡相关蛋白及PI3K/AKT通路的影响,CCK-8检测TRAP1对结直肠癌细胞增殖的影响,平板克隆实验检测TRAP1对结直肠癌细胞克隆形成能力的影响,流式细胞术检测TRAP1对细胞周期及凋亡的影响。结果生物信息学分析显示TRAP1在结直肠癌中的表达高于正常肠黏膜组织,Western blot结果显示TRAP1在结直肠癌组织和细胞中蛋白表达水平均高于正常组织和细胞(P<0.05),干扰TRAP1的表达可以显著抑制SW480细胞的增殖及克隆形成能力(P<0.05),并且将细胞阻滞在G0/G1期,增加细胞凋亡(P<0.01),细胞周期相关蛋白CyclinD1表达降低,凋亡相关蛋白Cleaved-Casp...     

Pirh2对人肝细胞肝癌细胞增殖的影响

目的 探讨泛素连接酶Pirh2对人肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖的影响.方法 流式细胞仪测定血清饥饿释放过程中SMMC-7721和Hep3B细胞的周期分布情况,并用Western blot检测增殖过程中Pirh2及p27Kip1蛋白表达.在SMMC-7721和Hep3B细胞中转染Pirh2 shRNA,cell counting kit-8(CCK-8)和流式细胞分析检测转染后细胞增殖的能力,Western blot检测细胞周期调控因子的表达.结果 细胞饥饿72 h,两种细胞周期进程停滞在G1/G0期,血清释放后增殖到S期.在此过程中,Pirh2表达上调,p27Kip1表达下调.转染Pirh2 shRNA组相较于对照组和转染空载体质粒组,CCK-8和流式细胞分析显示细胞的增殖能力下降及细胞的周期进程明显受到抑制(P＜0.05).结论 Pirh2参与HCC细胞的周期进程调控,有望成为HCC治疗的新靶点.     

锌指蛋白185 对胶质瘤细胞增殖影响的研究

目的 探讨锌指蛋白 ZNF185 在人脑胶质瘤细胞增殖中的作用。方法 标本取自 2011 年 1 月-2013 年12 月于唐山市工人医院就诊, 经病理确诊为胶质瘤患者的肿瘤组织, 以瘤旁组织作对照。提取不同组织总蛋白,Western-blot 检测 ZNF185 的表达。提取瘤旁组织总 RNA, 反转录扩增 ZNF185 编码序列并克隆至 pEGFPC2 质粒,构建 ZNF185 表达载体。采用 Lipofactamine2000 将 ZNF185 表达载体转染人胶质瘤细胞系 SF767, 以转染 pEGFPC2空载体细胞作为对照。采用流式细胞仪检测细胞周期变化; MTT 法检测细胞增殖活性。结果 与瘤旁组织相比,ZNF185 在人脑胶质瘤组织中表达显著降低（P < 0.01）; 转染 ZNF185 表达载体的胶质瘤细胞与对照细胞比ZNF185 的表达显著增加（P < 0.01）; 过表达 ZNF185 导致 SF767 细胞 G0~G1 期细胞比例显著增加（P < 0.05）, 而 S期细胞比例减少（P < 0.05）。同时, 过表达 ZNF185 也导致 SF767 细胞的增殖速度显著降低（P < 0.05）。结论ZNF185 在人脑胶质瘤细胞中发挥抑制细胞增殖的作用。     

TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响

目的 探讨TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测宫颈癌组织中的TUSC3表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系。构建TUSC3过表达的慢病毒载体（LV11-TUSC3）及对照载体（LV11-NC）,选取过表达TUSC3的SiHa细胞作为LV11-TUSC3组,感染对照载体的SiHa细胞作为LV11-NC组,未感染慢病毒的SiHa细胞作为Con组。采用qRT-PCR检测各组细胞中TUSC3的mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法检测TUSC3、E-cadherin、N-cadherin、GRP78、ATF6的蛋白表达水平,MTT实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 宫颈癌组织中TUSC3 mRNA表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05）。TUSC3表达水平与宫颈癌患者的年龄、肿瘤体积、宫颈浸润深度无关（P>0.05）,而与FIGO分期、淋巴结转移有关（P<0.05）。与Con组和LV11-NC组相比较,LV11-TUSC3组细胞TUSC3 mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin表达上调,N-cadherin表达下调,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,内质网应激水平降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 TUSC3在宫颈癌组织中表达下调,上调其表达可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖、上皮间质转化、迁移和侵袭、内质网应激。TUSC3可能成为宫颈癌治疗的潜在靶点。     

子宫颈鳞状细胞癌组织中泛素特异性蛋白酶4和基质金属蛋白酶2的表达及意义

目的 观察宫颈鳞状细胞癌及癌旁正常宫颈组织中泛素特异性蛋白酶4(USP4)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达,探讨两者在宫颈鳞状细胞癌发生、发展中的作用及相关性,并分析两者与各临床病理因素的关系。方法 收集常州市金坛区人民医院病理科2010年1月至2013年12月70例宫颈鳞状细胞癌组织及癌旁组织,采用免疫组化检测USP4和MMP2的表达。结果 USP4和MMP2在宫颈鳞状细胞癌中的表达率分别为61.4%,44.3%,而在癌旁组织中的表达分别为8.0%,4.3%。它们在有淋巴结转移的宫颈癌组织中表达率分别为80.0%,90.7%,在无淋巴结转移的宫颈癌组织的表达分别为47.5%,56.1%。在浸润深度≥1/2间质的宫颈癌组织中的表达分别为62.2%,83.8%,在＜1/2间质的宫颈癌组织中的表达为29.2%,37.5%,与淋巴结转移及浸润深度呈正相关(P＜0.05),但与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级无关(P＞0.05)。且USP4和MMP2在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关(P＜0.05)。结论 USP4和MMP2表达可能与宫颈鳞状细胞癌的发生发展有关,可作为预后判断和治疗指导的参考指标之一。     

长链非编码 RNA肝癌高表达转录本通过微小 RNA-134-5p促进宫颈癌细胞恶性生物学行为的机制研究

目的探讨长链非编码 RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本( HULC)通过抑制微小 RNA-134-5p促进宫颈癌细胞增殖、袭和迁移，促进凋亡的作用及其作用机制。方法 2019年 10月至 2020年 5月，通过实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测体外培侵养的人正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞中 HULC的表达情况，在宫颈癌 C-33A细胞中转染特异性 HULC siRNA，qRT-PCR检测转染效果，细胞计数试剂盒( CCK-8)法分析 C-33A细胞增殖情况，采用流式细胞术分析 C-33A细胞凋亡情况， Transwell实验分析 C-33A细胞侵袭和迁移能力，双荧光素酶报告基因实验检测 HULC与 miR-134-5p的相互作用。在抑制 HULC表达的 C-33A细胞中转染 miR-134-5p抑制剂，以同样的方法检测对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果 HULC在宫颈癌细胞( HeLa、Cas. ki、SiHa、C-33A)中的表达水平为(1.95±0.24、2.26±0.21、1.77±0.19、3.49±0.40)，显著高于正常宫颈上皮细胞 1.00±0.11，HULC在 C-33A细胞中的表达量最高( P<0.05)。转染特异性 HULC siRNA能够抑制 C-33A细胞中 HULC的表达( 0.94±0.08比 0.18±     

PCDH7在胰腺癌组织中的表达及其对胰腺癌细胞的影响

目的探讨原钙黏素7(PCDH7)在胰腺癌组织中的表达及其对胰腺癌细胞的影响。方法采用免疫组化检测76例胰腺癌组织和对应的癌旁组织中PCDH7的表达,分析其与临床特征的关系。培养胰腺癌细胞株SW1990和ASPC1,利用逆转录病毒载体构建过表达PCDH7的SW1990细胞,利用Lenti-CRISPR-v2载体构建PCDH7基因敲除的ASPC1细胞,检测细胞增殖情况。克隆形成实验检测克隆性生长情况。皮下移植瘤实验检测肿瘤的生长。结果 PCDH7在胰腺癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(47.37%vs.7.89%)(P<0.01)。PCDH7的表达与胰腺癌分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。细胞增殖实验发现,过表达PCDH7对细胞增殖情况无明显影响(P>0.05),敲除PCDH7能抑制细胞的增殖(P<0.05)。克隆形成实验发现,过表达PCDH7能促进细胞的克隆性生长(P<0.01)。皮下移植瘤实验发现,过表达PCDH7后,肿瘤重量增加(P<0.05);敲除PCDH7后,肿瘤重量减轻(P<0.01)。结论 PCDH7在胰腺癌组织中...     

马甲子提取物调控HCG18对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

摘要：目的:探索马甲子提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法:分别使用0,25,50,75μg·ml-1马甲子提取物处理宫颈癌细胞SiHa,噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、P21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达,实时荧光定量PCR（qPCR）检测长链非编码RNA（lncRNA）人类白细胞抗原复合体18（HCG18）表达。在细胞中转染si-HCG18,观察抑制HCG18对细胞SiHa增殖、凋亡的影响。在细胞中转染pc DNA 3.1-HCG18,并使用75μg·ml-1马甲子提取物进行处理,探讨过表达HCG18对马甲子提取物诱导的SiHa增殖、凋亡的影响。结果:与0μg·ml-1马甲子提取物组比较,25,50,75μg·ml-1马甲子提取物显著提高SiHa细胞的增殖抑制率、凋亡率、P21、Bax蛋白水平,显著减少Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量及HCG18表达量,且呈浓度依赖性（P<0.05）。抑制HCG18显著减少SiHa细胞HCG18表达量及Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量,显著提高P21、Bax蛋白水平、细胞增殖抑制率、凋亡率（P<0.05）。过表达HCG18能逆转马甲子提取物抑制细胞SiHa增殖、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达,以及促进细胞SiHa凋亡、P21、Bax蛋白表达的作用。结论:马甲子提取物通过调控lnc RNA HCG18表达抑制宫颈癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

喉鳞癌中内皮细胞特异性分子1的表达及临床意义

目的 探讨喉鳞癌组织中内皮细胞特异性分子1(ESM-1)表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法对50例喉鳞癌组织和40例癌旁对照组织ESM-1蛋白表达情况进行检测.同时采用Western blot检测20例喉鳞癌及15例癌旁新鲜标本中ESM-1蛋白的表达.结果 两种方法检测结果均显示喉鳞癌组织中ESM-1表达显著高于癌旁对照组织(P＜0.01).Ⅲ～Ⅳ期喉鳞癌组织ESM-1的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期的表达;伴有颈淋巴结转移的喉鳞癌组织的ESM-1表达明显高于无淋巴结转移组.结论 ESM-1在喉鳞癌组织中高表达,并且其表达程度与喉鳞癌的分期及是否存在淋巴结转移有关,提示ESM-1的表达与喉鳞癌的发生、发展可能相关.     

微小 RNA-466靶向调控 Twist1影响宫颈癌 SiHa细胞增殖和迁移

目的 研究微小RNA-466(miR-466)靶向调控碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist1)对宫颈癌SiHa细胞增殖和迁移的影响和机制.方法 本研究起止时间为2019年1—10月.宫颈癌Caski、SiHa、C33A细胞购自上海沪震生物科技有限公司;正常宫颈上皮End1/E6E7细胞购自上海雅吉生物科技有限公司.定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)方法测定宫颈癌细胞中miR-466表达变化.在宫颈癌SiHa细胞中转染miR-466模拟物(miR-466 mimics),噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖变化,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力变化,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中波形蛋白(Vimentin)和上皮钙黏素(E-cadherin)蛋白表达变化.在线靶基因预测软件预测miR-466的靶基因可能为Twist1,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.将Twist1过表达载体和miR-466 mimics共转染到宫颈癌SiHa细胞中,检测细胞增殖、迁移和侵袭能力变化.结果 正常宫颈上皮End1/E6E7细胞和宫颈癌Caski、SiHa、C33A细胞中miR-466表达水平依次为:(1.00±0.09)、(0.58±0.06)、(0.20±0.03)、(0.45±0.04);宫颈癌细胞系Caski、SiHa、C33A中miR-466表达水平低于End1/E6E7细胞,差异有统计学意义(P<0.0001).与miR-NC组比较,miR-466组SiHa细胞细胞吸光度(0.29±0.04)比(0.45±0.02)降低,细胞侵袭数目[(81.46±6.35)个比(117.95±11.62)个]和迁移数目[(90.17±7.43)个比(147.15±12.04)个]下降,Vimentin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.001).与miR-466+pCDNA3.1组比较,miR-466+pCDNA3.1-Twist1组宫颈癌SiHa细胞吸光度(0.41±0.04)比(0.30±0.03)升高,细胞迁移数目[(127.34±10.26)个比(93.05±6.84)个]和侵袭数目[(108.94±10.24)个比(83.26±5.17)个]增加,Vimentin、Twist1蛋白表达增多,E-cadherin蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05).上调miR-466靶向抑制Twist1表达.结论 miR-466靶向抑制Twist1降低宫颈癌SiHa细胞增殖和迁移能力.     

RhoC基因转染对胆管癌QBC939细胞生物学行为的影响

目的将人RhoC正义、反义基因真核表达载体转染胆管癌QBC939细胞株,研究RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株增殖和侵袭能力的影响。方法以脂质体将包含正义、反义RhoC cDNA真核表达载体,分别转染人胆管癌QBC939细胞。应用克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化,Boyden小室侵袭实验检测侵袭及运动能力的变化。结果正义RhoC基因能促进胆管癌QBC939细胞增殖,流式细胞仪分析结果显示,转染后细胞出现G1期细胞减少;侵袭实验显示,转染后细胞侵袭能力较转染前有显著加强。反义RhoC基因能抑制胆管癌QBC939细胞增殖,流式细胞仪分析结果显示,转染后细胞出现G1期细胞增加;侵袭实验显示,转染后细胞侵袭能力较转染前有显著减弱。结论RhoC基因能够促进胆管癌QBC939细胞株的体外增殖和侵袭能力,反义RhoC基因可抑制胆管癌QBC939细胞的增殖和侵袭能力。     

CLEC5A抑制肝胆管细胞癌增殖和转移的作用研究

目的探究C型凝集素结构域家族5成员A(CLEC5A)在肝胆管细胞癌(ICC)组织中的表达特点,并分析其对ICC细胞株RBE增殖、凋亡、迁移以及侵袭特性的影响。方法免疫组化染色法检测25例ICC患者癌组织及配对癌旁组织中CLEC5A的表达水平;构建慢病毒介导CLEC5A过表达RBE细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞内CLEC5A表达水平,CCK-8法检测CLEC5A对RBE细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测RBE细胞凋亡和细胞周期,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力。结果 CLEC5A在ICC癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。过表达CLEC5A可以抑制RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,诱导细胞凋亡并引起G2/M期阻滞(P<0.05)。结论 CLEC5A是一个潜在的ICC抑癌基因,它可能通过调控细胞增殖、迁移及侵袭特性影响ICC发生发展。     

Lipocalin-2过表达对人肺癌 A549细胞增殖、凋亡及侵袭力的影响

目的：采用基因过表达方法上调人肺癌 A549细胞 Lipocalin-2表达,观察 Lipocalin-2对细胞增殖、凋亡、细胞周期调控及侵袭力的影响。方法构建 Lipocalin-2过表达慢病毒载体,转染人肺癌 A549细胞。Real-time PCR 和 Western blot 检测转染后人肺癌 A549细胞中 Lipocalin-2表达水平。MTT 实验检测细胞增殖。流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况。Transwell 小室实验检测细胞侵袭力。结果与阴性对照组和空载体对照组比较,转染组 Li-pocalin-2 mRNA 和蛋白表达水平均显著增加,差异有统计学意义（ P ﹤0.05）。Lipocalin-2过表达慢病毒载体转染后,细胞增殖率和侵袭力显著增加,同时细胞凋亡率及 G0/ G1期细胞比例显著降低,S 期细胞比例显著提高,差异有统计学意义（ P ﹤0.05）。结论 Lipocalin-2过表达通过调控人肺癌 A549细胞周期、抑制凋亡促进细胞的增殖,还明显提高细胞的侵袭力。     

circ＿0000064靶向miR-503对甲状腺癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨环状RNA 0000064(circ＿0000064)靶向微小RNA 503(miR-503)对甲状腺癌细胞生物学行为的影响。方法 实时定量PCR(RT-qPCR)分析21例甲状腺癌组织和对应癌旁组织中circ＿0000064和miR-503的表达水平。将circ＿0000064小干扰RNA(si-circ＿0000064)、miR-503模拟物、si-circ＿0000064+miR-503抑制物（anti-miR-503）分别转染甲状腺癌SW579细胞,采用平板克隆形成实验、细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测SW579细胞增殖,Transwell实验检测SW579细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测SW579细胞凋亡,蛋白质印迹法检测上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）和神经型钙黏蛋白（N-cadherin）表达量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析circ＿0000064和miR-503的靶向调控关系。结果 甲状腺癌组织中circ＿0000064表达量显著高于癌旁组织（P<0.05）,miR-503表达量显著低于癌旁组织（P<0.05）。沉默circ＿000...     

长链非编码RNA ANCR在肺癌中的表达和作用

目的探讨长链非编码RNA ANCR(LncRNA ANCR)在肺癌组织中的表达及对肺癌细胞增殖和凋亡的作用。方法收集50例肺癌患者的肺癌组织和癌旁组织,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测组织中LncRNA ANCR和叉头框蛋白O1(FOXO1)mRNA的表达水平。将A549细胞分为第1转染组(转染慢病毒阴性对照质粒)、第2转染组(转染pHRi-ANCR)、第3转染组(转染pHRi-sh-ANCR)、第4转染组(转染pHRi-FOXO1)和第5转染组(同时转染pHRi-sh-ANCR和pHRi-sh-FOXO1),未处理细胞为空白组。用RNA pull-down和RIP实验检测ANCR与FOXO1的相互作用。用RT-qPCR检测ANCR和FOXO1的表达水平,用EdU标记技术和流式细胞术分别检测A549细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。结果肺癌组织和癌旁组织中LncRNA ANCR的表达分别为2.78±1.36,1.33±0.51,FOXO1 mRNA的表达为1.28±0.57,3.03±0.72。第1,3,4,5转染组细胞增殖比例分别为(47.90±2.36)%,(27.93±2.37)%,(29.93±0.64)%,(74.27±4.06)%,阻滞于G0/G1期细胞比例分别为(37.43±1.96)%,(64.20±4.05)%,(65.47±1.86)%,(24.93±1.38)%,细胞凋亡比例分别为(8.93±0.53)%,(17.81±1.42)%,(16.18±1.07)%,(7.78±0.55)%。肺癌组织与癌旁组织相比、第3,4转染组与第1转染组相比、第5转染组与第3转染组相比,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论LncRNA ANCR在肺癌中表达升高并通过抑制FOXO1的表达调控肺癌细胞的细胞增殖和凋亡。