Cocktail探针药物法评价黄芩对大鼠CYP450活性的影响

目的:使用cocktail探针药物法研究黄芩对大鼠细胞色素P450酶活性的影响。方法:将大鼠随机分组,实验组给予黄芩水提物,对照组给予生理盐水,通过HPLC检测cocktail探针药物的血药浓度,计算其药动学参数,评价相应的CYP450亚型酶活性。结果:与对照组相比,实验组咖啡因的代谢明显减慢,甲苯磺丁脲的代谢明显加快,氯唑沙宗和美托洛尔的代谢无显著性差异。结论:黄芩对大鼠的CYP1A2有抑制作用,对CYP2C9有诱导作用,而对CYP2E1和CYP2D6无显著性影响。     

Cocktail法研究CYP450酶活性影响因素的探讨

细胞色素P450酶(cytochrome P450, CYP450)是药物代谢的重要酶系,研究CYP450对阐明药物代谢通路、相互作用、代谢多态性、指导临床合理用药等方面具有重要意义.混合探针底物法(Cocktail法)在研究CYP450亚型酶活性应用广泛,具有高效、准确、灵敏、高通量的特点.但CYP450亚型酶存在种属差异、性别差异、探针药物的特异性等方面的问题.查阅国内外相关文献,探讨Cocktail法研究CYP450酶活性的影响因素.     

CYP450酶内源性生物标志物的研究进展

CYP450酶广泛参与药物的I相代谢过程,CYP450酶活性受到基因、性别、年龄、疾病等多种因素的影响,CYP450酶活性直接影响经CYP450酶代谢药物的体内代谢过程.测定CYP450酶活性有助于了解药物在体内的代谢情况,预测药物疗效和不良反应.测定CYP450酶活性的方法主要有外源性探针药物法和内源性生物标志物法,...     

慢性不可预见性温和应激模型大鼠的肝脏药物代谢酶活性变化研究

采用鸡尾酒(cocktail)探针药物法研究慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)造成的抑郁状态对大鼠体内6种CYP450亚酶活性的影响。根据Katz法建立CUMS大鼠抑郁模型;分别选用甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、茶碱、咪达唑仑、奥美拉唑及右美沙芬作为大鼠CYP2C6、CYP2E1、CYP1A2、CYP3A2、CYP2D1、CYP2D2的探针底物,采用液质联用法(LC-MS/MS)测定对照组与模型组大鼠体内6种混合探针的血药浓度,计算药动学参数。结果表明,茶碱和氯唑沙宗代谢显著加快(P<0.01),甲苯磺丁脲、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑的代谢无显著差异。结果说明,慢性不可预见性温和应激造成的抑郁状态对CYP1A2有强诱导、对CYP2E1有中强诱导作用。     

Cocktail 探针药物法评价辣椒素对大鼠CYP450亚型的影响

目的：采用cocktail 探针药物法研究辣椒素在体外对大鼠肝微粒体CYP 450四种亚型的影响。方法：分为试验组和对照组,试验组采用大鼠肝微粒体孵育体系、探针药物和系列浓度的辣椒素（对照组仅加入缓冲液）共同孵育20 min,反应终止后用HPLC方法检测代谢产物的生成量以代表酶的活性。采用Graphpad prism 5.0计算辣椒素对各亚型的IC50值。将辣椒素与大鼠肝微粒体分别预孵育0,5,10,15,20,30 min,计算不同预孵育时间下各亚型的相对活性百分比。结果：辣椒素对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C11、CYP2E1和CYP3A2的IC50值分别为36.21,17.19,51.64,18.86μmol·L-1。预孵育没有增强辣椒素对CYP450的抑制作用。结论：辣椒素在体外对大鼠肝微粒CYP1A2、CYP2C11、CYP2E1和CYP3A2具有抑制作用,且未呈现出预孵育时间依赖性。     

人细胞色素P450同工酶探针底物特异性的研究进展

细胞色素P450(CYP450)同工酶活性测定可用于药物/毒物代谢、药物相互作用和代谢多态性等研究,探针底物的特异性和实验条件的合理性对CYP450同工酶活性测定的准确性有着极其重要的意义。该文就近年来常用和新出现的CYP450同工酶探针底物的研究进展作一综述和评价。     

Cocktail探针药物法评价木犀草素对大鼠CYP450酶活性影响

目的:采用Cocktail探针药物法研究木犀草素体外对大鼠细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)亚型的影响.方法:建立并优化含有大鼠肝微粒体、探针药物、木犀草素或阳性抑制剂的体外孵育体系,分为空白对照组、木犀草素组、阳性对照组,孵育终止后使用HPLC方法检测各组别代谢产物的生成量,采用Grap...     

CYP450酶抑制效应常用检测技术的研究进展

目的综述细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)酶抑制效应常用检测技术。方法查阅国内外近几年相关文献73篇,对CYP450酶抑制效应常用检测技术进行分析和归纳总结。结果检测CYP450酶抑制效应常用体内及体外两种模型,体内模型主要通过临床实验或动物实验联合高效液相色谱质谱联用或其他检测方法,测定给药前后CYP450酶探针底物代谢产物的变化量,反映药物对酶的抑制效应;体外模型中,常用肝微粒体与药物及相应探针底物共孵育后,检测探针代谢产物变化量初步反应药物对酶抑制效应,再利用药物处理原代或转基因细胞,通过相应检测技术测定细胞内CYP450酶相应的基因及蛋白表达量来研究药物对酶抑制机制。结论 CYP450酶抑制效应检测技术已趋于完善,为药物药代动力学和药效学研究提供了良好的保障。     

细胞色素P450酶系体外药物代谢研究方法进展

目的 综述细胞色素P450 (CYP 450)酶影响药物代谢的体外研究方法.方法 参考国内外文献,对与药物代谢相关的CYP酶亚型、CYP酶种属差异、CYP酶体外反应体系、药物主要代谢酶的确认方法及体外CYP酶的抑制和诱导,进行分类、归纳和整理.结果与结论 CYP 450在药物代谢中具有重要作用,药物代谢研究是新药评价体系中重要的一部分.     

细胞色素P450的工具药选择及种属差异的研究进展

药物对代谢酶的影响以及代谢产生的药物相互作用与药物安全性密切相关。细胞色素P450(CYP)是参与内、外源性化合物I相代谢反应的重要超家族酶系。特异性探针、诱导剂、抑制剂以及实验动物模型广泛应用于CYP介导的代谢途径以及药物相互作用研究。已知CYP底物存在明显重叠性,且表达调控机制种属差异显著,故研究中选择适当的实验动物以及特异性的探针、诱导剂和抑制剂,成为影响数据外推的关键问题。本文简要综述了CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP3A4/5的常用体内外探针、诱导剂、抑制剂以及动物种属表达调控的差异。     

Cocktail法评价白香丹胶囊对大鼠体内CYP450酶活性的影响

目的：建立同时测定大鼠血浆中6种CYP450探针药物的方法,并采用Cocktail法研究白香丹胶囊对大鼠CYP450酶活性的影响。方法：选用茶碱(CYP1A2)、氯唑沙宗(CYP2E1)、甲苯磺丁脲(CYP2C6)、右美沙芬(CYP2D2)、奥美拉唑(CYP2D1)、咪达唑仑(CYP3A2)作为探针药物。大鼠随机分为对照组和给药组,给药组每天灌胃白香丹胶囊0.675 g?kg-1,对照组灌胃等量生理盐水,连续给药14天。第15天均灌胃给予6个探针药物,于不同时间点眼眶取血,采用LC-MS/MS法测定各探针药物浓度,计算药动学参数并进行组间t检验。结果：与对照组相比,给药组茶碱(P < 0.01)、氯唑沙宗(P < 0.01)、甲苯磺丁脲(P < 0.05)代谢显著加快,右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑代谢无显著性差异。结论：白香丹胶囊对大鼠CYP1A2有中强诱导作用,对CYP2E1、CYP2C6有弱诱导作用。     

外源物对细胞色素P450同工酶表达的基因调控

细胞色素P450（CYP450）酶系中的1,2,3,4家族是代谢外来化合物的主要酶系。外源物进入体内,因其代谢活性的不同以及CYP450各家族敏感程度的差异,使CYP450的活性和表达受到不同程度的影响。近年来,可通过分子诊断学（如分子探针等）实验方法鉴定受影响的CYP450同工酶的种类,并精确了解外源物在代谢过程中对CYP450的调控方式。本文从的物在CYP450基因水平上的调节（包括对DNA、转录、mRNA及蛋白质合成水平的影响）和芳烃受体（AhR)对CYP450基因的调节等方面进行了综述。CYP450同工酶的存在类型及表达水平可直接影响机体对外源物的代谢转化,这与环境致癌物、化学毒物、药物等外源物对机体的致癌风险、中毒反应及药物间相互作用密切相关。对CYP450同工酶的合理调控将对防治疾病、维护人类健康有重要意义。     

人体内细胞色素P450 3A探针的研究进展

人体内细胞色素P450 3A(CYP3A)是细胞色素P450酶系中最主要的一类.评价CYP3A的活性可用于研究药动学、药物或毒物的代谢、药物相互作用、药物代谢酶的遗传多态性及疾病与代谢酶的相互影响,从而预测最佳给药剂量,达到提高药物治疗效果和减少不良反应的目的.评价CYP3A的活性一般采用探针法,其评价结果的优劣取决于探针的特异性,安全性和方法的科学性.本文就目前被广泛应用的几种CYP3A探针的研究进展作一综述和评价.     

三七总皂苷对CYP450的影响及药物相互作用预测

目的：研究三七总皂苷（血塞通）对肝微粒体CYP450酶不同亚型的影响，进一步了解其在肝脏的代谢特点并据此对该药与其他药物相互作用的安全性进行预测，为临床合理应用提供依据。方法：检测肝药酶CYP1A2和CYP3A4的专属探针药物咖啡因、氨苯砜的原型浓度，采用原型药物减少初始速率测定法考察其体外代谢变化情况，从而评价三七总皂苷对CYPIA2、CYP3A4的诱导或抑制作用。结果：三七总皂苷对肝药酶CYPIA2有诱导作用，而对CYP3A4无影响。结论：三七总皂苷对CYP450。不同亚型酶的影响不同。在临床应用时，尤其是与CYPIA2代谢有关的药物合用时，应充分考虑到这种影响，以避免潜在的毒性或不良反应。     

CYP450酶特性及其应用研究进展

细胞色素P450（CYP450）是药物和其他内、外源物的主要代谢酶,本文综述了人体内参与药物代谢的几种主要代谢酶CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1、CYP1A2和CYP2A6的分子生物学特征,中药对药物代谢酶的影响及药物代谢酶在临床药物治疗和新药研究过程中的应用。     

振源胶囊对细胞色素P_(450)酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响

目的:研究振源胶囊对细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响。方法:用Cocktail探针药物法,将Wistar大鼠随机分组,灌胃给予振源胶囊溶液,以生理盐水组为空白对照,诱导10d,于股动脉插管,注射给予3种探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗,通过高效液相色谱法检测各探针药物的代谢率来评价各组CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1亚型酶的活性;药动学计算采用DAS2.0软件完成。结果:给予振源胶囊的大鼠,咖啡因代谢加快,半衰期缩短;氨苯砜代谢减慢,半衰期延长;氯唑沙宗半衰期与空白对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:振源胶囊对大鼠CYP1A2有诱导作用,对CYP3A4有抑制作用,对CYP2E1的作用不明显。     

细胞色素P450与药物代谢的研究现状

细胞色素P450(CYP)在众多中西药物代谢中起着非常重要的作用。本文综述了与药物代谢相关的CYP亚型、CYP与药物相互作用的关系及中药对CYP的影响，旨在合理解释和预测临床上药物间相互作用和药物不良反应等。同时选择适当的药物作为探针来评价CYP的活性，为实现临床个体化给药提供科学依据。     

大黄素的Ⅰ相代谢途径及其对细胞色素P450酶的抑制作用

目的：考察大黄素的I相代谢途径及其对细胞色素P450酶的影响,为预测临床上可能的大黄素 药物相互作用提供实验依据。方法：分别应用人肝微粒体和重组CYP3A4酶与大黄素及CYP3A4抑制剂酮康唑（KTZ）共孵育 20 min,LC-MS/MS检测分析大黄素原型药物含量的变化;体外Cocktail法评价大黄素对8种P450亚型酶的抑制作用。结果：大黄素与人肝微粒体或重组CYP3A4酶共孵育后,大黄素剩余量分别为 68.5%和 0.015%,加入 100 μmol/L的KTZ后,消除率分别降至 0.1%和 27.7%。体外肝微粒体cocktail实验结果表明,大黄素对大鼠肝微粒体中CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6有中等强度抑制作用,IC50分别为 3.31、2.60和 2.56 μmol/L。结论：大黄素I相代谢主要由CYP3A4介导,对多种P450酶具有抑制作用,临床使用含大黄素相关制剂应注意可能涉及的药物相互作用。     

药物探针在肝储备功能评估中的应用进展

目前细胞色素酶P450（CYP）1A2活性检测在肝功能评估中的作用越来越受重视。反映CYP活性的检测方法主要建立在药物探针上。该文综述CYP1A2活性的影响因素以及在肝储备功能评估中的应用,重点介绍药物探针药物法及相关药物。     

LC-MS/MS同时测定5种探针底物代谢产物和快速评价细胞色素P450同工酶的活性

目的建立同时测定奥美拉唑（CYP2C19）、右美沙芬（CYP2D6）、睾酮（CYP3A4）、氯唑沙宗（CYP2E1）和甲苯磺丁脲（CYP2C9）5种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,快速评价药物对人肝微粒体细胞色素P450同工酶活性的影响。方法通过人肝微粒体与5种探针底物在还原系统NADPH的作用下,于37℃水浴条件下共同孵育,采用液质联用（LC-MS/MS）分析方法,测定探针底物的代谢产物生成量来评价各P450同工酶的活性。结果建立了同时测定5种P450同工酶活性的酶反应条件和LC-MS/MS分析方法,数据显示该方法具有良好的线性和分析灵敏度,以及具有良好的准确度、精密度、重现性,可用于药物间相互作用的体外快速评价。结论可用于体外快速评价药物对相应的CYP450亚型酶活性的影响,以预测潜在的药物相互作用。