COX-2、VEGF、TGF-β1在甲状腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨COX-2、VEGF、TGF-β1在甲状腺癌中的表达与临床病理类型、病理分期和淋巴结转移的关系及临床意义。方法对75例甲状腺癌及20例正常甲状腺标本采用MaxVisionTM/HRP免疫组化染色法检测COX-2、VEGF、TGF-β1的表达。结果 COX-2、VEGF、TGF-β1在甲状腺癌组织中阳性率分别为74.67%、72.00%、68.00%,显著高于正常甲状腺组织(χ2=36.376,33.366,21.535,P均=0.000);COX-2、VEGF、TGF-β1在有淋巴结转移组织中表达显著高于无转移组织,与病理分期均存在正相关(r=0.277,P=0.016;r=0.402,P=0.000;r=0.272,P=0.018),COX-2与VEGF表达呈正相关(r=0.661,P=0.000),VEGF与TGF-β1表达呈正相关(r=0.782,P=0.000),COX-2与TGF-β1表达呈正相关(r=0.783,P=0.000)。结论 COX-2、VEGF、TGF-β1在甲状腺癌中过表达在肿瘤转移和侵袭过程中起重要作用,COX-2与TGF-β1可能都对VEGF有正向调节作用,从而进一步增加肿瘤血管生成,促进肿瘤生长和转移。     

COX-2基因对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞生长及Notch信号通路的影响及其作用机制

目的探讨抑制环氧合酶-2(COX-2)基因表达对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞系MRC-5活力、胶原合成和转化及Notch信号通路的影响。方法将MRC-5细胞分为对照组、TGF-β1组、NC组和COX-2-siRNA组,各组细胞处理48 h,Western blotting检测COX-2、胶原合成相关的COL-Ⅰ和COL-Ⅲ、 EMT标志物α-SMA及Notch信号通路受体Notch1及配体Jagged1的蛋白表达;CCK8法检测各组细胞活力。结果 TGF-β1组COX-2的表达显著高于对照组,COX-2-siRNA组COX-2的表达显著低于TGF-β1组(P0.05),NC组COX-2的表达与TGF-β1组差异无统计学意义(P0.05);与对照组比较,TGF-β1组细胞活力及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、Notch1和Jagged1的蛋白表达均显著升高(P0.05),与TGF-β1组比较,COX-2-siRNA组细胞活力及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、Notch1和Jagged1的蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论抑制COX-2基因表达中可能通过降低MRC-5细胞活力、抑制细胞胶原合成和转化,并下调Notch信号通路,从而对肺纤维化起保护作用。     

前列腺癌中COX-2 TGF-β1表达与肿瘤发生浸润和转移的相关性研究

目的:通过检测前列腺癌(PCa)、癌前期病变及良性前列腺增生(BPH)组织中COX-2、TGF-β1表达,探讨其在PCa发生、发展及转移中的作用。方法:随机选择39例PCa、13例癌前期病变和23例BPH标本,应用免疫组化SABC法分别检测COX-2和TGF-β1的表达强度、分布和形态,并采用北航病理图像分析系统分析实验结果。结果:在BPH和PCa组织中,COX-2阳性率分别为8.70%(2/23)、64.10%(25/39);而TGF-β1的阳性率分别为21.74%(5/23)、79.49%(31/39)。COX-2、TGF-β1在PCa组织中的表达均明显高于BPH(P<0.01)。结论:COX-2、TGF-β1表达与PCa生物学行为关系密切,尤其在PCa浸润、转移过程中,二者可能通过促进PCa细胞增殖、抑制细胞凋亡和诱导血管生成等协同发挥重要作用。     

螺内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞PAI-1表达的抑制作用

目的 观察醛固酮拮抗剂--螺内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响.方法 采用正常糖(NG)、高糖(HG)及HG+不同浓度螺内酯体外培养大鼠系膜细胞.以RT-PCR检测PAI-1、醛固酮受体(MR)和保护其配体特异性的11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)的mRNA表达,采用ELISA检测培养细胞上清中PAI-1蛋白的浓度.结果肾小球系膜细胞表达MR和11β-HSD2 mRNA;高糖刺激系膜细胞后PAI-1 mRNA表达明显升高,培养上清液蛋白浓度增加,加入螺内酯干预后系膜细胞PAI-1 mRNA和蛋白表达明显下降,且随螺内酯浓度增大,作用更明显.结论 螺内酯可能通过降低高糖对系膜细胞PAI-1表达的刺激作用而发挥其肾脏保护作用.     

COX-2、VEGF及TGFβ1在急性白血病的表达及其临床意义

目的:检测不同类型急性白血病(AL)患者在不同阶段的COX-2、VEGF、TGFβ1等指标的表达变化情况,分析各检测指标在AL的诊断、治疗及预后判断中的临床意义.方法:选择90例AL患者为研究对象,以该院体检中心健康体检者40例为正常对照,采用ELISA方法检测血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,并对AL患者进行治疗前、后两个不同阶段的动态检测.结果:(1)初诊时,AL组的血清COX-2及VEGF的表达量较正常对照组明显升高,而TGFβ1表达量较正常对照组明显降低(P＜0.001).(2)治疗前AML组血清VEGF、COX-2及TGFβ1水平与ALL组患者比较,无显著差异.(3)CR(完全缓解)时,与治疗前比较VEGF与COX-2水平明显下降,TGFβ1显著升高(P＜0.001).(4)治疗前血清VEGF及COX-2表达水平与骨髓原始加幼稚细胞数呈正相关,而TGFβ1表达水平与之呈负相关,VEGF、COX-2的水平均与TGFβ1呈负相关.结论:COX-2及VEGF在AL患者血清中含量显著增加,完全缓解后其水平显著下降,而血清TGFβ1明显减低,完全缓解后其水平明显升高,提示血管生成可能在AL的发生、发展中具有一定作用.因此,动态监测AL患者血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,可作为AL病情评估进展的重要参考指标.     

地塞米松和TGFβ1对人卵巢癌HO-8910细胞中PAI-1表达的影响

目的观察地塞米松(Dex)和转化生长因子β1(TGFβ1)对人卵巢癌HO-8910细胞中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达的影响,探讨其在卵巢癌的发生发展中可能发挥的作用。方法将HO-8910细胞分别用TGFβ1(0.01～10ng/ml)和Dex(100nmol/L)单独或联合处理不同时间后,用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测PAI-1mRNA和蛋白表达的变化;用放线菌素D阻断新的mRNA合成,检测PAI-1mRNA的稳定性。结果HO-8910细胞中,TGFβ1能以时间和浓度依赖性的方式上调PAI-1mRNA的表达,最高可上调3.75倍(P<0.01);Dex也能上调PAI-1mRNA的表达,最高为1.65倍(P<0.01);Dex和TGFβ1两者联合作用4h,可上调PAI-1mRNA12.7倍(P<0.01),远大于两者单独作用之和,两者联合处理对PAI-1蛋白的上调作用也大于两者单独作用;Dex和TGFβ1单独及联合作用均不影响PAI-1mRNA的稳定性。结论Dex和TGFβ1单独均能上调HO-8910细胞中PAI-1的表达,联用对PAI-1上调有协同作用,该协同作用不是通过增强PAI-1mRN...     

慢性粒细胞白血病患者血清COX-2、bFGF及TGF-β1的表达及意义

目的检测不同分期慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者不同发展阶段血清环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)及转化生长因子(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)的变化,并探讨其在CML的诊治和预后中的临床意义。方法 50例初诊患者[慢性期(chronic phase,CP)30例,加速期(accelerated phase,AP)10例,急变期(blast crisis,BC)10例]为CML组,健康体检者40例为正常对照,采用ELISA方法检测血清COX-2、b FGF及TGF-β1水平。结果初诊时,与对照组相比,CML组患者的血清COX-2及b FGF含量升高,而TGF-β1含量减低(P0.001)。CML组急变期、加速期患者血清b FGF及COX-2水平较慢性期患者增高,而TGF-β1水平减低(P0.001)。完全缓解(complete response,CR)时,CML患者血清b FGF及COX-2含量下降,而TGF-β1含量基本恢复到正常水平,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);未达到缓解时,血清b FGF、COX-2及TGF-β1水平与CR组比较,差异有统计学意义(P0.001)。CML初诊患者治疗前血清b FGF、VEGF水平与TGF-β1呈负相关(P0.05)。结论 CML患者初诊时COX-2及b FGF高表达,TGF-β1低表达,治疗后,达到CR时,血清相关因子水平基本恢复正常,提示其与CML的发生、发展与血管生成有密切关系。因此,动态监测CML患者血清COX-2、b FGF及TGF-β1水平,可作为CML病情评估的重要参考指标。     

COX-2和TGFβ1在宫颈癌中的表达及其意义

目的 探讨环氧合酶-2（COX-2）和转化生长因子β1（TGFβ1）的表达与宫颈癌生物学行为特征的关系。方法 采用免疫组化SP法检测郑州大学第三附属医院2002年1月～2006年3月期间70例宫颈癌和25例正常宫颈组织中COX-2、TGF-β1的表达。结果 COX-2和TGFβ1蛋白在宫颈癌和正常宫颈组织中的表达差异有显著性意义（P〈0．05）；COX-2表达与宫颈癌淋巴结转移、肿瘤大小和组织学类型显著相关，TGFβ1的表达与淋巴结转移、肿瘤大小、临床分期和组织学类型显著相关。COX-2与TGFβ1的表达之间呈正相关（r=0．553，P〈0．05）。结论 COX-2和TGFβ1蛋白表达与宫颈癌的发生发展相关，并对宫颈癌的淋巴结转移可能起重要作用。     

烟雾吸入性损伤修复中IL-1βmRNA和COX-2mRNA的表达变化及意义

目的:探讨IL-1β和COX-2在新西兰白兔烟雾吸入性损伤修复中表达的变化及其作用。方法:将新西兰白兔36只随机分为正常对照组、烟雾吸入性损伤后第1天,第4天,第7天,第14天,第21天,共6组,应用RT-PCR方法检测各组IL-1βmRNA和COX-2mRNA的表达。建立烟雾吸入性损伤修复模型,光镜下观察烟雾吸入对新西兰白兔气管、肺组织的病理变化。结果:(1)病理变化表明烟雾吸入性损伤第1、4、7天组以损伤后炎症反应为主(损伤期),第14、21天组以损伤后修复为主(修复期),这表明烟雾吸入性损伤修复模型成功建立;(2)RT-PCR结果表明:IL-1βmRNA表达在烟雾吸入性损伤后第1天立即升高,与正常对照组比较有极显著性差异(P<0.01),损伤期第1、4天组IL-1βmRNA表达明显高于修复期第14、21天组,第4天组(1.75±0.31)与第14天组(0.75±0.33)比较有极显著性差异(P<0.01);COX-2mRNA表达在烟雾吸入性损伤后第1天升高,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05),在第21天达到最高,修复期第14、21天组COX-2mRNA表达明显高于损伤期第1、4天组,第14天组(1.86±0.31)与第1天组(1.03±0.26)比较有极显著性差异(P<0.01)。结论:通过建立烟雾吸入性损伤修复模型,检测IL-1βmRNA与COX-2mRNA表达变化,发现IL-1βmRNA在损伤期表达上调,而COX-2mRNA在修复期表达升高,表明IL-1β和COX-2在烟雾吸入性损伤修复过程中可能具有重要作用。     

结肠癌组织中PKCβ1、COX-2及nm23-H1的表达及其意义

目的:研究结肠癌、结肠腺瘤和癌旁正常结肠粘膜组织中蛋白激酶C(PKCβ1)、环氧化酶-2(COX-2)及转移抑制基因nm23-H1的表达及其临床意义。方法:65例结肠癌、16例结肠腺瘤和8例癌旁结肠粘膜组织采用免疫组织化学法检测PKCβ1、COX-2及nm23-H1的表达。结果:PKCβ1表达在结肠癌与腺瘤和正常黏膜差异显著(P<0.01),表达率和表达强度依次递减。COX-2在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠粘膜组织中的表达差异显著,结肠癌组织中C0X-2的表达与结肠癌分化程度、淋巴结和远处转移以及Dukes分期有关,与年龄和性别无关。nm23-H1的表达在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠黏膜组织中差异有显著性(P<0.01),结肠癌组织中nm23-H1的表达与分化程度、远处转移及Dukes分期有关,但与其它临床病理资料无关。结论:PKCβ1可能与结肠黏膜上皮增生有关,可能参与了结肠的癌变过程,并可能在癌变早期发生改变。COX-2异常表达可能是结肠癌发生的早期事件,且在结肠癌的发生、发展中起一定作用。nm23-H1的表达下调,可促使结肠癌细胞获得进一步恶性分化及远处转移的潜能。     

PAI-1、u-PA、VEGF、CD34在动脉粥样硬化鼠急性脑缺血中的表达及意义

目的:探讨PAI-1、u-PA、VEGF、CD34在动脉粥样硬化大鼠急性脑缺血中的表达及意义。方法:将大鼠随机分成正常饮食组(A组)和高脂饮食组(B组),分别制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型;观察大鼠神经病学评分,HE染色法检测脑缺血区病理改变,免疫组化法检测缺血区PAI-1、u-PA、VEGF、CD34表达,并应用流式细胞仪计数外周血CD34+血管内皮祖细胞(EPC)。结果:脑缺血后再灌注24h,PAI-1、u-PA、VEGF的表达增高,B组PAI-1、VEGF表达较A组明显,u-PA相反;再灌注48h后,外周血CD34+EPC计数B组(0.89%)较A组(1.11%)降低(P<0.05),脑缺血区CD34+细胞B组也少于A组。结论:PAI-1、u-PA及VEGF高表达促进了动脉粥样硬化的形成并加重急性脑缺血/再灌注损伤,CD34+低表达及EPC减少使血管再生能力降低。     

预处理对大鼠缺血冠脉等组织t—PA,PAI—1基因表达的影响

采用Northern印迹杂交、斑点杂交、原位杂交技术和发包庇物显色测定方法研究急性心肌缺血大鼠冠脉等组织t－PA、PAI－1基因表达和t－PA活性变化、缺血预处理对这些改变的影响。结果表明：（1）缺血组冠脉等组织t－PA活性明显低于对照组，预处理组高于缺血组，3组组间比较均P＜0．01。（2）Northern和斑点杂交显示急性心肌梗塞时t－PA、PAI－1mRNA表达均增高，分别为对照大鼠的1．2和4．6倍，预处理组PAI－1mRNA表达明显降低，t－PAmRNA表达与缺血组近似。（3）心肌组织原位杂交检测到t－PA、PAI－1mRNA主要分布在冠脉血管，尤其集中于内皮细胞。上述结果提示，心肌缺血损伤时t－PA、PAI－1mRNA均异常表达，其中PAI－1的高表达是心肌缺血时纤溶活性降低的主要原因，预处理恢复组织中t－PA活性与PAI－1mRNA表达减少密切相关。以上结果为预处理保护机制研究提供了新的资料。     

穴位埋药线和穴位注射对脑缺血大鼠PAI-1影响的比较观察

目的观察穴位埋药线和穴位注射对脑缺血再灌注后大鼠纤溶酶系统PAI-1含量的影响,比较两种方法的优劣。方法将SD大鼠随机分为模型组、穴位注射组和穴位埋药线组;采用改良线栓法制备局灶型脑缺血(MCAO)再灌模型,以胶原川芎嗪制备的缓释剂(药线)在百会、大椎穴位埋药线。用免疫组化法观察各组大鼠缺血皮质区中PAI-1含量的变化。结果大鼠缺血侧皮质区PAI-1表达降低,两治疗组均能上调PAI-1的表达,穴位注射与模型组比较有显著性差异(P0.01);其中穴位埋药线1d对PAI-1的调节作用并不明显,与模型组比较无统计学意义(P0.05),其优势作用表现在3d和5d,与模型组比较有显著性差异(P0.01),与穴位注射组比较有显著性差异(P0.05)。结论穴位埋药线可以上调大鼠缺血皮质区中PAI-1的表达,减轻脑微血管基底膜和内皮细胞的损害进而保护脑微血管结构的完整性,从而起到脑保护作用,其作用优于穴位注射组。     

脑梗死血糖与纤溶酶原激活物抑制物-1的相关性研究

目的探讨血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activitor inhibitor-1,PAI-1)活性与急性脑梗死患者空腹血糖及糖化血红蛋白的关系。方法应用ELISA法(酶联免疫吸附双抗体夹心法),对急性脑梗死患者(162例)进行检测血浆PAI-1活性。结果(1)急性脑梗死患者PAI-1活性明显升高,空腹血糖、糖化血红蛋白与PAI-1活性升高密切相关(P<0.01)。(2)血脂、体重指数、C-反应蛋白、神经功能评分与PAI-1活性无明显相关(P>0.05)。结论PAI-1活性升高是急性脑梗死患者的特征之一,空腹血糖及糖化血红蛋白与PAI-1活性升高有关,积极控制血糖、糖化血红蛋白可能降低PAl-1活性,改善预后。     

t-PA,PAI-1检测在脑梗死患者中的应用

目的:探讨组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)含量及t-PA/PAI-1比值在脑梗死患者中的临床意义。方法:用酶联免疫发色底物法分别测定53例脑梗死患者和30例健康对照组血浆t-PA、PAI-1含量。结果:脑梗死患者血浆中t-PA、PAI-1及t-PA/PAI-1比值与正常对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:检测患者血t-PA、PAI-1水平及t-PA/PAI-1比值对脑梗死患者的诊断和治疗有重要意义。     

联合检测tPA、PAI-1、uPA及uPAR对急性脑梗死诊治及预判的价值

目的对急性脑梗死病人进行血浆tPA、PAI-1、uPA及uPAR水平的联合检测,探讨其治疗观察及预后判定的临床价值。方法急性脑梗死病人(36例)及对照组在治疗前和治疗后分别进行血浆tPA、PAI-1、uPA及uPAR的联合检测(ELISA法)。结果 36例脑梗死病人治疗前与对照组相比tPA、PAI-1、uPA和uPAR水平均有明显增高(均P<0.01);治疗后与治疗前比较tPA又有明显升高(P<0.05),而PAI-1,uPA and uPAR则在治疗后明显降低(P<0.05,P<0.01),PAI-1及uPAR降至接近对照组水平(P>0.05)。结论血浆tPA、PAI-1、uPA和uPAR水平的变化与脑梗死病人的治疗状况密切相关,联合检测有利于对急性脑梗死的治疗观察和预后判定。     

自噬参与氧糖剥夺对N2a细胞的损伤

自噬在脑缺血中的作用目前没有统一定论。本文主要是通过建立氧糖剥夺(OGD)模型来模拟脑缺血的过程从而探讨自噬在脑缺血中的作用。在小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)经过OGD处理后,检测处理前后自噬相关蛋白、细胞活力以及乳酸脱氢酶释放率的改变。结果发现在OGD处理后,N2a细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin 1及溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白表达量均增高,而细胞活力明显下降;与OGD组相比,使用3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬后,N2a细胞乳酸脱氢酶释放率下降。本研究表明在脑缺血过程中自噬被激活,但自噬的激活可能对神经细胞是起损伤性作用的。     

脑梗死患者急性期血浆纤溶活性变化的研究

目的:探讨脑梗死患者急性期血浆纤溶活性改变与脑梗死发病的相关性。方法:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法,对38例脑梗死患者及31例健康对照者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)进行检测,并观察梗死体积对这些指标的影响。结果:脑梗死组急性期血浆PAI-1和PAP水平较对照组明显升高,t-PA水平比对照组降低;梗死体积较大的患者PAP水平明显高于腔隙性梗死者,均有统计学意义(P<0.05)。结论:脑梗死患者血浆t-PA、PAI-1的水平异常,既提示了脑血管内皮细胞的损害,又可能是疾病发生的独立危险因子:血浆PAP的升高则反映了纤溶系统被激活的程度,其临床检测有助于及时对患者进行必要的溶栓和抗凝等治疗。     

脑梗死患者甘油三酯与纤溶活性异常的研究

目的：探讨患血浆高甘油三酯与纤溶系统异常对脑梗死发病的危险度。方法：采用酶联免疫吸附双抗体夹心法、酶法、对51例脑梗死患及50例健康对照组血浆组织型纤溶酶原激活物（tPA)、纤溶酶原激活剂抑制物－1（PAI－1）和甘油三酯（TG）水平进行对比分析。结果：血浆高TG，高PAI－1与低tPA含量变化为脑梗死患异常变化的特征，与正常组相比差异有显性（P＜0．01），结论：高甘油三酯通过改变纤溶活性是诱发脑梗死疾病发生，发展的危险的因素之一。     

脑梗塞、冠心病血脂代谢与纤溶酶原激活物抑制物关系的研究

为探讨脑梗塞及冠心病血脂代谢紊乱与血浆纤溶酶原激活物抑制物 1(PAI -1)活性变化的关系及意义 ,采取合理有效的干预性治疗方法改善低纤溶状态。测定 112例脑梗塞、81例冠心病患者及 45例健康体检者血总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDLC)、非高密度脂蛋白胆固醇 (nHDLC) ,同时测定纤溶酶原激活物抑制物活性 (PAI -1∶A)并进行比较分析。结果显示 :脑梗塞组及冠心病组患者血浆TG、nHDLC含量增高 ;血浆PAI -1∶A明显升高 ,与正常组比较差异均有高度显著性 (P <0 .0 1)。经多因素回归分析 ,脑梗塞组及冠心病组TG、nHDLC水平与血浆PAI -1∶A呈正相关 (P <0 .0 1)。提示脑梗塞及冠心病患者组血清TG ,nHDLC增高作为PAI -1∶A增高的独立因素 ,而PAI -1活性增高致心脑血管血栓性疾病的机率增加。纠正血脂代谢紊乱可改善纤溶活性 ,从而达到降低心脑血管事件发生的目的