RT-Q医用生物膜的止血及生物相容性研究

目的：研究RT-Q医用生物膜（以下简称RT-Q膜）的术中局部止血作用及其生物相容性。方法：通过比较RT-Q膜、瞬康医用胶（以下简称瞬康胶）、附加剂、阴性对照对大鼠颈外静脉切口出血时间和出血量的影响，研究其术中止血效果；通过观察大鼠后肢肌肉切开用此膜后对伤口愈合、生物膜降解及周围组织是否有毒性影响等情况评价其生物相容性。结果：与阴性对照组、附加剂组比较，RT-Q膜组止血效果显著（P〈0．01），与瞬康医用胶组比较无统计学意义；RT-Q膜对伤口愈合既无促进也无延迟性影响，形成的膜于术后15d开始降解，3～4周完全吸收，对周围组织无毒性影响。结论：RT-Q医用生物膜的局部止血效果显著、且具有生物相容性。     

卡氮芥-聚乳酸缓释剂生物相容性研究

目的：研究卡氮芥(BCNU)-聚乳酸缓释剂生物相容性。方法：将BCNU-聚乳酸缓释膜片(BCNU—PLA组)及聚乳酸缓释膜片(PLA组)分别植入2组Wistar大鼠的额叶脑组织内，观察其对脑、心、肝、脾、肺、肾及血液系统的影响。结果：BCNU—PLA组缓释膜片植入后造成的局部脑水肿持续7d以上，术后14d仍有2只鼠轻度脑水肿，但与PLA组比较差别无统计学意义。其他器官及血液系统未见明显异常。聚乳酸缓释膜片植入后，除早期手术造成的轻微脑水肿外，其他器官与系统无异常。结论：BCNU-聚乳酸缓释剂安全、可靠，生物相容性良好。     

双层人工皮肤的生物相容性研究

目的 考察一种新型的皮肤替代物双层人工皮肤的生物相容性.方法 依据GB/T16886医疗器械生物学评价标准规定的细胞毒性、急性毒性试验、皮内刺激试验、致敏试验、亚慢性毒性试验、植入试验和遗传毒性试验方法,评价双层人工皮肤的生物相容性,以验证其安全性和有效性.结果 显示双层人工皮肤无急性毒性、无皮内刺激作用、无致敏作用,细胞毒性不超过1级;皮下植入后1周、4周和12周后,植入组织样品的炎症反应和纤维囊形成与对照无明显差别;遗传毒性采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验）、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验、哺乳动物细胞体外基因突变试验,结果均为阴性,说明双层人工皮肤无遗传毒性.结论 双层人工皮肤具有良好的生物相容性,没有观察到不良反应,符合临床使用要求.     

胶原蛋白-壳聚糖生物相容性研究

制备胶原蛋白-壳聚糖复合膜,根据中国人民共和国国家标准医疗器械生物学评价推荐方案测评胶原蛋白-壳聚糖的溶血性、全身急性毒性、亚急性毒性、皮内刺激性、致敏性。研究结果表明,胶原蛋白-壳聚糖溶血率为2.17%符合国家标准,急性全身毒性、亚急性全身毒性试验小鼠没有中毒症状、内脏器官正常,对皮内无刺激,并且对皮肤没有致敏性作用。胶原蛋白-壳聚糖生物相容性优秀。     

复方替硝唑单向缓释膜的研制及其生物相容性的研究

药膜用于口腔疾病的治疗取得了较好的效果,但用于治疗口腔粘膜疾病的常用膜剂,在口腔内被唾液所包围,有相当一部分药物会随唾液流走,影响了病灶部位药物有效浓度的维持。为此,我们研制成复方替硝唑单向缓释药膜并对其生物相容性进行了研究。1 仪器与材料     

注射用交联透明质酸钠凝胶的制备及其体外抗酶降解性的研究

目的筛选交联反应条件,制备强抗酶降解的注射用交联透明质酸钠(HA)凝胶(HA-凝胶),并建立其体外抗酶降解性的测定方法。方法用1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)交联HA制备HA-凝胶,对其体外抗酶降解性的测定方法进行确证;采用正交试验考察6个因素对交联反应的影响,选择最佳反应条件。结果透明质酸酶(HAas)对HA-凝胶体外抗酶降解性测定方法无干扰,HAas在100~500 U/mL与产物显色后的吸光度呈线性关系(r=0.998 8)。正交试验极差分析和方差分析显示HA的起始反应浓度、BDDE与HA的比例对交联反应具有显著性影响,在氢氧化钠浓度1%、HA平均相对分子质量1.2×106、反应温度50℃、BDDE与HA的比例为1∶10(g/g)、反应时间4 h和HA浓度为15%的反应条件下,可得到抗酶降解性最好的HA-凝胶。结论选择适宜反应条件可以制备得到体外抗酶降解性强的HA-凝胶,为进一步开发注射美容和整形产品奠定了基础。     

念珠菌生物被膜特性及抗生物被膜治疗

随着广谱抗生素的广泛使用,骨髓实体器官移植与医用材料植入治疗的增加,艾滋病、恶性肿瘤等免疫功能低下的患者增多,耐药念珠菌感染呈逐年上升趋势。耐药念珠菌感染通常与生物被膜的形成有关,生物被膜被认为是念珠菌重要的毒力因子,其形成与耐药性、侵袭力增强以及免疫逃避密切相关。本文从念珠菌生物被膜形成、耐药机制、免疫逃避及抗生物被膜治疗方面进行评述,以期为寻找新的药物靶点、为念珠菌感染的新型治疗策略提供新的思路。     

念珠菌生物被膜特性及抗生物被膜治疗

随着广谱抗生素的广泛使用,骨髓实体器官移植与医用材料植入治疗的增加,艾滋病、恶性肿瘤等免疫功能低下的患者增多,耐药念珠菌感染呈逐年上升趋势。耐药念珠菌感染通常与生物被膜的形成有关,生物被膜被认为是念珠菌重要的毒力因子,其形成与耐药性、侵袭力增强以及免疫逃避密切相关。本文从念珠菌生物被膜形成、耐药机制、免疫逃避及抗生物被膜治疗方面进行评述,以期为寻找新的药物靶点、为念珠菌感染的新型治疗策略提供新的思路。     

金属生物材料的抗腐蚀性能和生物相容性研究

研究金属生物材料的目的就是要使生物材料代替组织器官，在其完成功能的同时，应与周围组织匹配并且毒性反应最小。本文介绍一些金属生物材料的抗腐蚀性能和生物相容性，为组织工程与外科移植提供技术支持。腐蚀问题、力学性能问题、材料与组织相容性问题三方面应综合考虑。     

聚乙二醇制备的透明质酸衍生物的生物降解性

目的对聚乙二醇(PEG)交联制备的透明质酸(HA)衍生物薄膜的含水量及其体内和体外生物降解特性进行初步研究。方法25℃利用5 d时间制备200μm厚的HA衍生物薄膜,将其干燥后制备成10 mm×10 mm规格的试样,浸泡24 h后计算其含水量。将上述得到的HA衍生物薄膜浸入磷酸盐缓冲液(PBS)和植入到白鼠背部皮下组织,测试其体外和体内降解特性。结果当PEG浓度大于2.5%,pH 8.0时,经交联制备的HA衍生物水凝胶含水量可低于60%(w/w);当pH 8.0,PEG浓度为3.8%时HA衍生物薄膜在37℃浸泡在PBS中至少10 d无任何重量改变;将其植入白鼠皮下组织1周后,约有75%的交联薄膜仍存留在白鼠皮下组织中。结论可以利用PEG交联制备含水量较低、生物降解性小的HA衍生物凝胶材料。     

透明质酸滴眼剂制备及其临床初步应用

选用新鲜正常人脐带为原料,经蛋白水解酶酶解消化,氯代十六烷基吡啶和乙醇分次沉淀,获透明质酸粗品,精制成钠盐成品。其核酸含量为2.67%,蛋白质含量为0.50%,锥板粘度为1.87mPa·?毛细管粘度为1.79mPa·s,pH为6.9。紫外和红外吸收图谱与文献报道基本一致。理化分析结果及质量已达眼科外用要求。将成品配制成滴眼剂,经动物实验证明,无致炎及毒副作用。作为辅助治疗用药经临床试用,对干眼症等疾病治疗,收到了较好效果。     

Microneedles containing cross-linked hyaluronic acid particulates for control of degradation and swelling behaviour after administration into skin

Microneedles (MN) containing cross-linked hyaluronic acid (X-linked HA) particulates were prepared to control the degradation and swelling behaviour after transdermal drug delivery. The X-linked HA particulates were prepared by cross-linking HA chains and then passing the particulates through a sieve. Then, microneedles were prepared by micromolding method. The rheological properties of X-linked HA were studied. The penetration success rate, mechanical failure and dissolution rate of microneedles containing only hyaluronic acid (HA MN) and microneedles containing X-linked HA were compared. The delivery of fluorescein into the skin with X-linked HA MN was also observed using a confocal microscope. The size of the pulverised particulates in water ranged between 29 and 82?μm in diameter. The HA MN and X-linked HA MN were 270?μm in length. X-linked HA MN with fluorescein was inserted to a depth of 90% of the microneedle length successfully. There was no decrease in the penetration success rate for MN with up to 20% content of X-linked HA particulates. X-linked HA MN with up to 20% of particulate content did not change the dissolution time. Delay in degradation of HA, sustained drug release, and swelling behaviour of the skin layer can be obtained by X-linked HA MN.     

荧光分光光度法测定交联透明质酸凝胶中交联剂的残留量

目的:建立测定交联透明质酸凝胶中交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)残留量的方法。方法:利用BDDE与烟酰胺产生的强荧光物质,在λex=370 nm/λem=430 nm检测其荧光强度,建立测定BDDE残留量的荧光分光光度法,并与气相色谱法进行比较。结果:在0.5～8.0μg.mL-1范围内,BDDE浓度和荧光强度有良好的线性关系,回归方程为y=76.729x-2.9517,r2=0.998;定量限为0.53μg.mL-1;平均回收率为99.4%,RSD=2.5%;市售样品中BDDE平均残留量为(1.47±0.41)μg.mL-1。气相色谱法定量限为1.85μg.mL-1,灵敏度和线性相关性均较差。结论:荧光分光光度法简单准确,灵敏度高,更适用于交联透明质酸凝胶的质量控制。     

透明质酸衍生物在生物药品传递方面的研究进展

目的综述透明质酸衍生物的制备及近年来在生物药品传递方面的研究进展。方法参考国内外相关文献32篇,进行相关信息的分析、归纳和总结。结果阐述通过化学修饰透明质酸制备衍生物的方法和在传递基因和蛋白质等生物药品方面的应用。结论透明质酸衍生物在药物传递方面将会有广阔的发展的前景。     

透明质酸对关节软骨蛋白聚糖aggrecan的影响

目的研究关节腔注射透明质酸对兔骨关节炎软骨基质的保护作用。方法关节滑液用软骨素酶ABC降解,丹磺酰肼柱前衍生。采用NH2色谱柱,流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸溶液-10 mmol/L醋酸钠溶液(76∶16∶8),荧光检测器检测,激发波长350 nm,发射波长530 nm,流速为1 mL/min。结果透明质酸可减少兔关节滑液中C4S、C6S的含量。结论关节腔注射透明质酸可抑制兔软骨蛋白聚糖的降解或上调蛋白聚糖的合成,维持关节软骨正常的新陈代谢。     

透明质酸修饰载紫杉醇靶向脂质体抑制脑肿瘤干细胞的初步评价

目的:制备透明质酸修饰载紫杉醇(paclitaxel,PTX)靶向脂质体(HALP-PTX),考察其对脑胶质瘤肿瘤干细胞的亲和力和抑制效果。方法:采用薄膜分散法制备HALP-PTX,细胞摄取实验研究胶质瘤干细胞对脂质体的摄取。MTT实验研究不同紫杉醇药物对肿瘤干细胞的增殖抑制率。构建原位移植瘤动物模型,考查不同脂质体对荷瘤裸鼠的生存期的影响。结果:肿瘤干细胞对HALP的摄取能力显著大于普通脂质体(LP),脑肿瘤干细胞对经透明质酸修饰的脂质体的摄取效率是普通脂质体的2.8倍,差异有统计学意义(P<0.01);HALP-PTX对肿瘤干细胞的生长的抑制作用显著强于LP-PTX,HALP-PTX能够显著延长荷瘤裸鼠的中位生存期,生理盐水组、PTX组、LP-PTX组和HALP-PTX组的中位生存期分别为19,23,29,41 d。结论:与PTX以及LP-PTX相比,HALP-PTX能够更加有效的被脑肿瘤干细胞识别和摄取,抑制肿瘤细胞的增殖,具有更强的抗肿瘤作用。     

透明质酸酶催化透明质酸水解的最适反应条件

目的确定透明质酸酶(HAase)催化透明质酸(HA)水解的最适条件。方法HAase不同条件下催化HA水解,反应结束后利用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测量反应产物的相对分子质量及其分布系数。结果HAase催化HA水解受温度、pH值、酶浓度、底物浓度、反应时间等因素的影响。结论HAase催化HA水解的最适反应条件是底物浓度为10 g/L,酶浓度为150 000 U/L,pH为5.0,反应温度为50℃。     

低相对分子质量透明质酸的制备及其促血管生成作用

目的观察2种降解方法制备的低相对分子质量(Mr)透明质酸(LMWHA)对血管生成的影响。方法采用过氧化氢氧化降解和透明质酸酶酶解的方法制备LMWHA,利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型观察LMWHA对血管生成的影响。结果Mr不同的LMWHA,其对CAM血管生成的影响也不同;Mr低于10000的LMWHA对CAM血管生成的影响与溶剂对照组相比,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论Mr低于10000的LMWHA具有促进CAM血管生成的作用。     

载阿霉素透明质酸聚合物纳米粒的构建及其体外性质研究

目的 合成透明质酸（HA）接枝单油酸甘油酯（GMO）两亲性聚合物HGO,并研究其所制备载阿霉素（DOX）纳米粒的理化性质及体外抗肿瘤效果。方法 HA与GMO通过酯化反应制得载体聚合物HGO,通过核磁共振波谱法及红外光谱法对其进行结构表征;采用芘荧光探针法测定聚合物临界聚集浓度（CAC）。采用透析法制备聚合物HGO载阿霉素（DOX@HGO）纳米粒,并对其进行粒径分布、Zeta电位及微观形态的表征;通过检测其在不同离子强度、不同pH条件下的粒径变化考察纳米粒的体外稳定性;考察DOX@HGO纳米粒在不同pH条件下的体外释放行为;CCK-8法考察DOX@HGO纳米粒对MDA-MB-231细胞的体外抑瘤效果;并通过荧光显微镜研究MDA-MB-231细胞对DOX溶液、DOX@HGO纳米粒的摄取能力,以及HA预处理对DOX@HGO纳米粒摄取的影响。结果 成功制得两亲性聚合物HGO,聚合物HGO中GMO的取代度为15.8%,CAC为0.023 mg·mL^-1。DOX@HGO纳米粒呈规则的球形,平均粒径为（130.800±1.709）nm,平均电位为（-32.600±0.153）mV,包封率和载药量分别为（98.65±0.74）%和（33.03±0.17）%,在不同离子强度下、模拟胃肠液中表现出良好的稳定性;DOX@HGO纳米粒的体外释放表现出pH依赖性。体外抗肿瘤活性实验表明,DOX@HGO纳米粒对MDA-MB-231细胞的生长具有较好的抑制作用;与DOX溶液比较,DOX@HGO纳米粒显著增加肿瘤细胞对于DOX的摄取（P＜0.05） ,HA预处理显著减少肿瘤细胞对DOX@HGO的摄取（P＜0.05）。结论 所构建的DOX@HGO纳米粒具有良好的理化性质,并且具有一定的pH敏感性及靶向抗肿瘤细胞的能力,是具有应用潜力的药物载体。