牛蒡子苷元复方抗流感病毒的实验研究

目的观察牛蒡子苷元复方的体内外抗流感病毒作用及诱生干扰素水平。方法于狗肾细胞上观察牛蒡子苷元对流感病毒复制的抑制作用。以病毒滴鼻感染小鼠，观察对肺指数、病毒致小鼠死亡率等的影响；对正常小鼠研究诱生干扰素水平。结果牛蒡子苷元复方在体外对甲1型流感病毒未显示有抑制作用。牛蒡子苷元复方能降低流感病毒感染所致小鼠肺指数；对流感病毒致死小鼠有明显的保护作用及延长生命率的作用；对正常小鼠有一定的诱生干扰素作用。结论牛蒡子苷元复方有一定的抗流感病毒作用，其体内抗病毒作用的机制之一可能是诱生体内产生干扰素。     

牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺研究

目的:研究牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺。方法:考察超声功率、药材粒径、液固比、提取时间、提取温度以及占空比等因素对牛蒡苷及牛蒡苷元提取率的影响,并采用正交试验设计优化提取工艺。结果:在本试验条件内,超声提取的最优条件如下:药材粒径为80～100目,提取温度为50℃,液固比为14mL/g,超声功率为400W,提取时间为10min。结论:按照优化正交试验确定的最佳工艺条件合理、可靠。     

田基黄体内抗甲3型流感病毒作用研究

目的：从体内抗病毒实验观察田基黄抗甲3型流感病毒作用。方法：以病毒滴鼻感染小鼠,观察田基黄对肺指数、病毒致小鼠死亡率的影响。结果：口服10 g/kg&;#183;d田基黄可明显抑制甲3型流感病毒引起的小鼠肺组织炎性实变,降低甲3型流感病毒感染小鼠的死亡率。结论：田基黄是一种治疗流行性感冒的有效药物。     

牛蒡子苷元的制备工艺研究

目的通过对牛蒡子Arctii Fructus中提取分离牛蒡子苷元产业化过程中的技术难点进行攻关研究,为牛蒡子苷元的产业化提供一种切实可行的制备工艺,以促进牛蒡子苷元的产业化发展。方法采用酸解醇提法得到干膏,用醋酸乙酯提取,分得粗品,对粗品进行乙醇结晶,得高质量分数牛蒡子苷元。结果经简单提取分离可得到质量分数75.0%的牛蒡子苷元粗品,再经乙醇结晶,即可得到质量分数99.0%的牛蒡子苷元成品。结论本研究得到一种适合牛蒡子苷元工业化生产的制备工艺。     

HPLC法测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸含量的方法,比较3种成分在不同部位以及牛蒡子不同炒制时间的含量。方法:采用Welchrom C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱;流速为1.0m L/min;检测波长为280nm;柱温为30℃。结果:3种成分的进样量分别在4.2844~51.4128μg,0.3254~3.9048μg,0.3072~3.6864μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.64%,100.81%,97.92%,RSD值均小于1.5%;牛蒡叶和牛蒡根中几乎没有牛蒡子苷和牛蒡子苷元;牛蒡子所有炒制品与生品比较,三者的总含量均下降,炒制时间从10~40min时,牛蒡子苷、绿原酸的含量下降,牛蒡子苷元的含量增加。结论:该方法简便、准确,精密度、重复性良好,可为牛蒡子质量控制提供依据,不同部位、炒制时间结果可以为牛蒡综合开发提供依据。     

高效液相色谱法测定不同采购地牛蒡子中牛蒡子苷和苷元的含量

目的 :同时测定牛蒡子药材中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量。方法 :采用高效液相色谱法。HP110 0液相色谱系统四元泵 ,色谱柱 Kromasil ODS(4 .6 mm× 2 5 0 mm,5 μm) ;流动相 :甲醇 -乙腈 -水 -四氢呋喃 10∶ 2 4∶ 6 5∶ 1至 10∶ 39∶ 5 0∶ 1线性梯度 ,检测波长 2 2 0 nm。结果 :牛蒡子苷及牛蒡子苷元的平均回收率分别为 10 2 .4 % ,10 2 .9% ,RSD分别为0 .6 % ,1.3% (n=5 ) ,线性方程分别为 Y=0 .0 0 0 7X- 0 .176 3(r=0 .9999) ,Y=0 .0 0 0 5 X+0 .0 14 1(r=0 .9998)。结论 :该方法快速准确 ,可同时测定牛蒡子药材中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量 ,可用作牛蒡子药材的质量控制方法。     

牛蒡子苷元抗肿瘤血管生成作用研究

目的:观察牛蒡子苷元对S180荷瘤小鼠肿瘤组织生长及其血管生成的影响。方法:以S180荷瘤小鼠为研究对象,设置阴性对照组(溶剂)、阳性药物组5-氟尿嘧啶40mg/kg和牛蒡子苷元低、中、高剂量组(40、80、160 mg/kg),按0.01 ml/g,每日灌胃给药1次,连续10 d,脱颈椎处死小鼠,对肿瘤组织及脾脏称重并计算抑瘤率及脾脏指数,用免疫荧光染色法检测肿瘤组织内微血管密度(MVD)和血管生长因子VEGF的表达。结果:牛蒡子苷元不同剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤的生长和肿瘤组织中的微血管密度(MVD)及VEGF的表达均有显著的抑制作用,牛蒡子苷元40、80、160 mg/kg的抑瘤率分别为23.00±13.10%,40.42±12.90%和45.67±16.15%,肿瘤组织微血管密度(MVD)分别为38.25±4.53、32.62±3.66和22.75±5.28,免疫组化染色VEGF相对光密度值分别为75.66±8.41%、70.32±5.73%和60.66±9.38%。结论:牛蒡子苷元能够抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长及其瘤内微血管密度,对肿瘤组织内VEGF的表达亦有抑制作用。     

星点设计-效应面法优化牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元提取工艺

目的：优化牛蒡子中双指标成分最佳提取工艺。方法：采用星点设计-效应面法,在3个主要因素作用下,以牛蒡子苷及牛蒡子苷元提取率为评估指标,经过多元线性回归和二项式拟合,利用岭嵴分析法优化牛蒡子苷及其苷元提取工艺。结果：确定牛蒡子苷及牛蒡子苷元最佳提取工艺为：70%乙醇,24倍量,超声提取15 min。结论：上述工艺能够大量提取牛蒡子苷及牛蒡子苷元,为制备牛蒡子苷及其苷元提供试验依据,也为充分开发利用牛蒡资源提供参考。     

牛蒡苷元体外抗流感病毒活性

目的：体外观察牛蒡苷元（arctigenin,ACT)抗甲1流感病毒作用，为进一步确认ACT是牛蒡子Fructus arctii解表功能有效成分提供实验依据。方法：采用MDCK细胞培养法，通过红细胞凝集实验，以流感病毒血浆滴度为指标，观察ACT对流感病毒复制的抑制作用。结果：ACT浓度(mmol/L)为6．7，13．4，26．8和53．6的血凝滴度抑制率（％）分别为0．75，87．5和100。结论：ACT在体外有直接抑制流感病毒复制的作用，是牛蒡子解表功能的有效成分，对其进行含量测定作为牛蒡子质量标准的定量指标是适宜和可行的。     

高效液相色谱法测定牛蒡药材不同部位牛蒡子苷和苷元的含量

目的:对牛蒡药材不同部位牛蒡子苷和牛蒡子苷元含量测定.方法:采用高效液相色谱法的测定.Agilent 1100液相色谱系统四元泵,Agilent色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);甲醇一水二元梯度洗脱,检测波长280nm.结果:牛蒡的根、茎、叶中几乎不含牛蒡子苷和牛蒡子苷元.绒毛和花序中含少量牛蒡子苷和牛蒡子苷元,而牛蒡子在牛蒡中二者含量均高.结论:该方法简便、准确,为更好的开发利用牛蒡提供依据.     

金黄Ⅰ号体外抗流感病毒作用研究

目的：探讨中药复方金黄Ⅰ号体外对流感病毒（A1、A3）抑制作用，为临床合理用药提供科学依据。方法：建立体外病毒感染模型，通过三神给药方式，采用细胞病变法（CPE）和MTT法观察金黄Ⅰ号对流感病毒感染细胞的保护作用。结果：金黄Ⅰ号在先感染病毒后加药、先加药后感染病毒、感染病毒同时加药三种给药方式下对A1、A3病毒感染的细胞存活量均高于病毒对照组。结论：金黄Ⅰ号具有体外抗流感病毒作用，其作用机制是多途径的。     

阔叶十大功劳根中生物碱组分体外抗流感病毒试验研究

利用鸡胚试验技术研究了阔叶十大功劳根中生物碱成分在体外对流感病毒的抑制作用。试验结果表明，阔叶十大功劳根中生物碱成分在20mg／ml时对鸡胚无毒性，0．25mg／ml时仍显示出对甲1型流感病毒较强的抑制作用。     

桂枝挥发油与桂皮醛抗流感病毒作用的实验研究

目的观察桂枝挥发油与桂皮醛在鸡胚内的抗流感病毒作用。方法依据药物对鸡胚的最大无毒浓度设置高、中、低三个剂量组,分别以预防和治疗方式给药,经鸡胚尿囊腔和卵黄囊两种给药途径将药物注入鸡胚,孵育48 h后收取鸡胚尿囊液进行血凝试验来评价药物在鸡胚内的抗病毒效应。结果桂枝挥发油无论经尿囊腔还是卵黄囊途径预防方式给药均对鸡胚尿囊液的血凝滴度无明显影响,但治疗方式给药有一定降低作用;桂皮醛经尿囊腔预防方式给药对血凝滴度无明显影响,但治疗方式给药、及经卵黄囊途径的治疗与预防方式给药,均能明显降低血凝滴度。结论桂枝挥发油、桂皮醛在鸡胚内具有良好的抗流感病毒作用,以治疗方式给药效果相对为优,桂皮醛可能是其抗病毒效应的主要成分之一。     

牛蒡子水解后牛蒡苷元的含量测定

目的：建立牛蒡子药材水解后药材中牛蒡苷元的含量测定方法。方法：采用HPLC,以牛蒡苷元的含量测定为指标,测定牛蒡子药材水解后药材中牛蒡苷元的含量。Agilentll00液相色谱系统四元泵,色谱柱：Phenomsil PC-8025,（4．6mm×250mm,5μm）,流动相：甲醇-水（50：55）;检测波长：280nm。结果：牛蒡苷元的线性方程Y=905．74X-90．113,r=0．9993,线性范围0．81～4．86μg;平均回收率为100．09％,RSD=2．244％。结论：采用HPLC含量测定的方法,精密度、重现性及稳定性皆良好,方法简便、易行,可作为牛蒡苷元含量的测定方法。     

牛蒡苷元制备方法的研究

目的:对在体外仿生提取牛蒡苷元的制备方法进行研究,优化筛选牛蒡苷元的酶水解条件、提取工艺等,得到最适工艺流程。方法:以酶浓度、酶解时间、底物浓度为考察因素,用Box-Behnken设计-响应面分析法对牛蒡苷元水解条件进行优化。结果:牛蒡苷元最佳制备条件:转化温度50℃,pH4.8,酶液浓度0.44 U/mL,反应时间46.81 min,底物浓度0.29 mg/mL,牛蒡苷元转化率可达到90.94%。结论:该研究为体外制备牛蒡苷元提供了一定的借鉴价值。     

拘束应激诱发小鼠抗流感病毒能力低下与营养型鸡精的改善作用

目的 探讨拘束应激诱发小鼠抗流感病毒能力低下与营养型鸡精(Essence of Chicken,EC)的改善作用.方法 将雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、病毒组、模型组(拘束应激+病毒)、阳性药物(利巴韦林,50 mg·kg-1)组、EC低、高剂量组(12,24 mL·kg-1).除正常对照组及病毒组外,其余各组在给药的第2天将小鼠拘束负荷18 h,拘束恢复1 d后,除正常组外其他各组小鼠经鼻黏膜感染流感病毒.从感染病毒当天开始连续21d,记录各组小鼠的死亡数目及小鼠的平均存活时间(MDD);计算病毒感染第4天小鼠肺脏指数;观察EC对拘束应激小鼠免疫功能的影响.结果 利巴韦林及EC能提高因拘束应激负荷降低的小鼠抗病毒感染能力,延长生存时间和改善肺脏指数.EC能增加拘束小鼠的胸腺指数、脾脏指数和脾淋巴细胞数目,改善脾淋巴细胞亚群Th(CD3+CD4+)(辅助性T淋巴细胞)/Ts(CD3+CD8+)(抑制性T淋巴细胞)的比值,提高脾自然杀伤(NK)细胞活性,从而改善拘束应激小鼠的免疫功能.结论 EC可以通过改善免疫功能来提高拘束应激小鼠的抗病毒能力.     

汗渍法炮制对了哥王中牛蒡子苷元含量的影响

目的建立牛蒡子苷元含量测定的方法,比较“汗渍法”炮制前后了哥王中牛蒡子苷元含量的变化。方法采用HPLC法;Diamonsil C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:0.2%磷酸水溶液(A相)-甲醇(B相)梯度洗脱;检测波长:280nm;流速:1 mL/min;柱温:30℃;进样量:20μL。结果牛蒡子苷元在31.8~1590μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9999;精密度、重复性、稳定性、加样回收RSD均小于3%。了哥王炮制品中牛蒡子苷元含量大于生品。结论该方法简单快捷、重复性好,适用于了哥王中牛蒡子苷元的定量分析,“汗渍法”炮制后,了哥王中牛蒡子苷元含量增加。     

贯黄感冒颗粒抗甲型流感病毒的作用

目的:观察贯黄感冒颗粒体内、外抗甲型流感病毒的作用。方法:体外观察贯黄感冒颗粒对甲型流感病毒H1N1和H3N2致细胞病变作用的影响,体内观察其对甲型流感病毒FM1感染小鼠的保护作用。结果:贯黄感冒颗粒体外对所试两株病毒所致的细胞病变均显示抑制作用,对H1N1的IC50为1.38mg/mL,TI为5.66;对H3N2的IC50为0.69mg/mL,TI为11.31。体内实验结果显示贯黄感冒颗粒中剂量组可降低甲型流感病毒FM1感染所致小鼠的死亡率,延长平均生存时间。结论:贯黄感冒颗粒体内外均有抗甲型流感病毒的作用。     

牛蒡子提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量测定研究

目的建立牛蒡子提取物中牛蒡苷及其苷元的含量测定方法.方法采用HPLC,以牛蒡甘、牛蒡苷元为含量测定指标,测定了牛蒡了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量.色谱柱为Kromasil C18 100A(150mm×4.6mm,51μm).流动相甲醇-水(采川梯度洗脱的方式0～7min,35%～45%甲醇;7～9[Bin,45%～48%甲醇;9～15min,48%～53%甲醇;15～24min,53%～80%甲醇;24～30min,80%～100%甲醇);检测波长为280nm.结果牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分别为97.7%,96.9%.RSD分别为1.3%,0.9%(n=5);线性方程分别为Y=782.6X-64.11(r=0.999 8).y=1 220.217X-35.26(r=0.999 8).结论该方法快速准确,可同时测定牛蒡提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,可用作牛蒡子提取物的质量控制方法.     

锦带花体内抗流感病毒有效部位研究

目的:研究锦带花有效部位在体内抗流感病毒的作用。方法:建立在体流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过观察小鼠肺部病变程度及指标,测定肺组织内流感病毒血凝滴度,判定锦带花各有效部位对小鼠肺炎的治疗作用。结果:口服锦带花乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及乙醇提取物能明显减轻小鼠肺组织病变程度,对肺组织内病毒的增殖有明显抑制作用,其中,乙酸乙酯提取物效果最为显著。结论:锦带花乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及乙醇提取物均具有良好的抗甲型流感病毒的作用,其中乙酸乙酯提取物效果最为显著,且呈剂量效应关系。