腹腔冲洗液沉淀STAT3和CEA检测与胃癌腹膜微转移的研究

目的 比较不同的实验方法对于检测胃癌患者腹膜微转移的效果.方法 收集66例胃癌和12例胃良性病变患者腹腔冲洗液以及临床病理资料,分别采用巢式RT-PCR检测腹腔冲洗液中CEA mRNA、STAT3 mRNA表达;采用HE染色进行腹腔冲洗液细胞学( PLC) 检查.结果 患者腹腔冲洗液中STAT3 mRNA和CEA mRNA的阳性检出率分别为43.9%和48.5%,明显高于PLC(31.8%) (P＜0.01),且阳性率随肿瘤浸润深度、TNM分期及病程增加而增加.结论 巢式RT-PCR检测胃癌患者腹腔冲洗液中STAT3基因,可提高检测腹腔游离肿瘤细胞的灵敏性,适用于预测胃癌患者腹膜微转移.     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

胃癌患者腹腔灌洗液CK19 mRNA、CEA mRNA的检测及其临床意义

目的观察采用巢式逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）检测胃癌患者腹腔冲洗液中细胞角蛋白19（CK19）mRNA和癌胚抗原（CEA）mRNA的临床价值。方法收集67例胃癌患者和8例胃良性病变患者腹腔冲洗液或腹水。常规行H-E染色细胞学检查,采用巢式RT-PCR方法检测腹腔冲洗液中CK19 mRNA和CEA mRNA的表达,并以胃癌细胞SGC7901为阳性对照。结果67例胃癌患者腹腔冲洗液中CK19 mRNA的阳性表达率为58.2％（39/67）;CEA mRNA的阳性表达率为53.7％（36/67）;CK19 mRNA和CEA mRNA的联合检测阳性率为67.2％（45/67）,皆高于细胞病理学检查的19.4％（13/67）,而13例细胞病理学检查阳性患者的CK19 mRNA、CEA mRNA检测结果均为阳性。CK19 mRNA、CEA mRNA阳性率与肿瘤胃壁浆膜受侵、淋巴结转移和胃癌分期明显相关（P＜0.05）。结论采用巢式RT-PCR方法检测胃癌患者腹腔冲洗液中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达敏感性高,对于早期诊断胃癌患者腹腔种植转移有一定临床价值。     

大肠癌患者血清癌胚抗原、CEAmRNA和CK19mRNA检测的临床意义探讨

目的探讨大肠癌患者血清中癌胚抗原（CEA）、CEAmRNA和CK19mRNA检测的临床意义。方法大肠癌患者48例为研究对象，放射免疫分析法检测血清中CEA水平；RT—PCR法检测患者血清中CEAmRNA和CK19mRNA水平。分析血清CEA、CEAmRNA、CK19mRNA水平与大肠癌患者病理因素关系；比较CEA、CEAmRNA、CK19mRNA单独及联合检测的阳性率。结果大肠癌患者血清中CEA、CEAmRNA、CK19mRNA水平在DuckesC＋D期患者的表达率明显高于DuckesA＋B期患者。CEA＋CEAmRNA＋CK19mRNA联合检测阳性率为87．5％，明显高于CEA、CEAmRNA、CK19mRNA任何1项检测的阳性率，也明显高于CEA-i-CEAmRNA、CEA＋CK19mRNA、CEAmRNA＋CK19mRNA任何2项联合检测的阳性率。结论联合检测CEA、CEAmRNA和CK19mRNA可提高大肠癌阳性检出率。     

乳腺癌患者外周血hMAM、CK19、CEA、SBEM mRNA表达与淋巴结微转移的关系

目的探讨腋淋巴结阴性（ANN）乳腺癌患者外周血hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA的表达及与淋巴结微转移的关系。方法研究对象为62例ANN乳腺癌患者,免疫组化S-P法检测CK（AE1/AE3）在其淋巴结中的表达,以判定微转移;用荧光定量PCR技术检测外周血hMAM、CK19、CEA、SBEM mRNA的表达。结果 ANN组腋窝淋巴结微转移率为27.42%,有微转移的患者外周血hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA的阳性表达率分别为41.18%、29.41%、23.52%和35.29%,与对照组相比有显著差异。4种标记物联合检测比单项检测有更高的敏感度和准确性。结论外周血中的hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA联合检测可能为预测ANN乳腺癌患者淋巴道转移和微转移提供有用的观测指标。     

联合检测外周血CK19和SCCAg mRNA对早期宫颈癌患者微转移的诊断价值

目的采用qRT-PCR技术检测早期宫颈癌患者根治术术前外周血中CK19和SCCAg mRNA表达水平的变化,研究联合检测外周血CK19和SCCAg mRNA对早期宫颈癌患者微转移的诊断价值.方法昆明医科大学第三附属医院妇瘤科30例早期(ⅠA2~ⅡA)宫颈癌患者为实验组,15例子宫肌瘤患者和15例健康志愿者为为阴性对照组,15例晚期(ⅡB~ⅢB)宫颈癌患者为阳性对照组.收集外周血样本,qRT-PCR技术检测外周血CK19和SCCAg mRNA表达水平的变化.结果实验组外周血中CK19和SCCAg mRNA表达水平与阴性对照组、阳性对照组比较,差异有明显统计学意义(P<0.01);30例宫颈癌患者手术前外周血CK19和SCCAg mRNA阳性检出率分别为30%(9/30)和20%(6/30),手术前联合检测二者的表达可使阳性检出率提高至43.3%,联合检测2种标志物的阳性检出率高于检测单一标志物,差异有统计学意义(P<0.05).结论外周血CK19和SCCAg mRNA表达水平均可能作为诊断早期宫颈癌微转移的标志物.qRT-PCR技术联合检测两项指标,可提高诊断微转移的敏感度和特异性.     

实时定量RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及其临床价值

目的：以细胞角蛋白19（CK19）mRNA作为基因标志，建立实时定量RT—PCR方法（QRT—PCR）检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞，并探讨其在乳腺癌微转移监测及预后预测中的临床应用价值。方法：采用QRT—PCR方法．检测102名正常献血员、177例乳腺原发癌患者及12例有远处转移的乳腺癌患者外周血有核细胞的CK19 mRNA水平。结果：正常对照组、原发乳腺癌组及远处转移组CK19 mRNA的中位数分别为67、542和1082。原发乳腺癌组与另外两组比较，CK19 mRNA平均水平差异具有显著性（P〈0．05）；以正常对照组CK19 mRNA的最大值497拷贝／ml血作为阳性阈值。原发乳腺癌患者外周血肿瘤细胞阳性检出率为52．0％，与正常对照组（0）比较差异具有显著性（P〈0．05），远处转移组肿瘤细胞阳性检出率（83．3％）显著高于r原发乳腺癌组（P〈0．05）；原发性乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及肿瘤细胞阳性率在临床病理因素各组间差异无显著性，但随着临床分期的增加，患者外周血CK19 mRNA水平呈递增趋势。结论：QRT—PCR方法定量检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平可早期发现血行播散的肿瘤细胞，应用于临床可指导个体化治疗方案的选择和疗效的动态监测，同时有望成为有价值的预后预测指标。     

CK19和CEA mRNA表达与乳腺癌浸润和微转移的关系

目的 探讨细胞角蛋白19(CK19)和癌胚抗原(CEA)mRNA表达与乳腺癌浸润和微转移的相关性.方法 收集乳腺癌手术前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)、术前外周血标本40例,应用免疫组化法检测CK19和CEA mRNA在乳腺癌中的表达.结果 CK19和CEA mRNA的表达与肿瘤细胞分化无关(P＞0.05),与淋巴结转移、TNM分期具有相关性.CK19和CEA mRNA表达存在相关性(P＜0.01).结论 CK19和CEA mRNA的阳性表达可作为预测乳腺癌微转移潜能的生物学指标,且CK19和CEA mRNA的表达存在相关性,协同表达预示乳腺癌具有较强的侵袭转移能力,联合检验有望成为预测乳腺癌淋巴结转移和浸润能力的有价值的手段.     

巢式PCR检测肺癌患者外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA的临床意义

目的 研究肺癌患者外周血中CK19 mRNA,LUNX mRNA的表达及其联合检测的临床意义.方法 采用巢式PCR技术检测50例肺癌患者、20例肺良性疾病患者和20例健康人外周血CK19 mRNA、LUNX mRNA的表达,结合肺癌患者常规病理检查、肿瘤类型、临床分期对临床检测结果的敏感性、特异性进行统计学分析.结果 50例肺癌患者外周血标本中CK19 mRNA阳性25例(50%),LUNX mRNA阳性29例(58%);20例肺良性疾病中CK19 mRNA阳性2例(10%),LUNX mRNA均为阴性;20例健康人外周血CK19 mRNA、LUNX mRNA的表达均为阴性.在肺腺癌、肺鳞癌中,CK19 mRNA的表达阳性率分别为42.8%,55.2%,LUNX mRNA的表达阳性率分别为66.7%,51.7%.Ⅲ,Ⅳ期肺癌CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达阳性率高于Ⅰ,Ⅱ期.结论 CK19 mRNA,LUNX mRNA可作为检测肺癌患者外周血微转移的标记物,联合检测有助于提高准确性.     

食管癌患者外周血CK20、CK19、CEA mRNA的表达及其临床病理意义

目的：研究89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA mRNA的表达,并探讨其临床病理意义。方法：巢式RT—PCR技术检测89例食管癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达。结果：89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为49．44％、34．83％及52．81％;三基因同时检测时,至少1个基因检测结果为阳性的表达率为71．91％,与食管癌的淋巴结转移和（或）远处转移具有相关性。结论：CK20、CEA可作为检测食管癌患者外周血微转移的生物学标志,RT—PCR联合检测多种标志物可为了解肿瘤的恶性生物学行为、指导临床治疗方案的选择、判断预后及监测疗效提供依据。     

CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA在非小细胞肺癌患者外周血微转移中的表达和意义

【目的】研究非小细胞肺癌外周血CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA的表达及联合检测的临床意义。【方法】采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测59例NSCLC患者、31例肺良性疾病患者及20例健康志愿者外周血CK19mRNA、LUNXmRNA及巢式RT-PCR检测CEAmRNA的表达。【结果】59例NSCLC患者外周血CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA阳性率分别为23.7%（14/59）、33.8%（20/59）、57.6%（34/59）。31例肺良性疾病及20例健康志愿者外周血上述三者的阳性率分别为3.2%（1/31）、12.9%（4/31）、0%（0/31）;0%（0/20）。统计结果显示：LUNXmRNA与临床分期、细胞分化程度有关,CEAmRNA与病理类型有关。【结论】CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移的标志物。CEAmRNA对判断病理类型有一定临床意义。LUNXmRNA表达阳性率与肺癌TNM分期、细胞分化程度有关。     

定量RT-PCR法检测CK20 mRNA、CEAmRNA在胃肠道肿瘤外周血中的表达

目的检测胃癌、大肠癌、健康人外周血cK20 mRNA、CEA mRNA的表达，探讨其临床意义。方法用定量RT—PCR法检测外周血白细胞中CK20 mRNA、CEA mRNA的含量，肿瘤组30人，健康对照组23人。结果试验结果显示肿瘤组CEA mRNA、CK20 mRNA表达水平明显高于健康对照组（P=0．000、P=0．000）。分组比较中Ⅳ期CK20 mRNA明显高于Ⅰ～Ⅲ期，P为0．000，差异显著；Ⅳ期与Ⅰ～Ⅲ期CEA mRNA没有差别。肿瘤组其中之一阳性28人，阳性率93．75％；两指标同时阳性22人，阳性率73．33％。结论本试验胃癌、大肠癌外周血检测CEA mRNA敏感性和特异性高于CK20 mRNA，但CEA mRNA数值高低与分期无关，CK20 mRNA的表达量与肿瘤分期有关。两指标联合检测未提高阳性率。     

CK19 mRNA在45例乳腺癌患者外周血中的表达

目的 检测CK19 mRNA在乳腺癌外周血中的表达情况,并探讨其与临床病理因素的相关性.方法 采用RT-PCR技术检测45例术前乳腺癌患者、30例乳腺良性病变患者外周血中CK19 mRNA的表达情况.结果 CK19 mRNA在乳腺癌患者中阳性率为62.2%,在30例乳腺良性患者中阳性率为3.3%.乳腺癌患者和良性病变患者比较差异有统计学意义(P＜0.01).CK19 mRNA阳性率与临床分期、淋巴结转移均有关,二者表达呈正相关(P＜0.01).与ER、PR无显著相关性.结论 乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA显著高于乳腺良性病变者.     

喉癌患者外周血CK19mRNA及CK20mRNA的表达

目的研究喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达,探讨其I临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测喉癌患者术前外周血中CK19mRNA、CK20mRNA的表达。结果48例喉癌患者外周血中CK19mRNA阳性率为37．5％（18／48）,CK20mRNA阳性率45．8％（22／48）。10例肿瘤组织中CK19mRNA阳性率为100％（10／10）。CK20mRNA阳性率80％（8／10）;10例声带息肉患者外周血为阴性对照,CK19mRNA阳性率为10％（1／10）,CK20mRNA阳性率为0。结合临床病理资料,喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA表达与喉癌T分期、临床分期及淋巴结转移存在相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用巢式RT—PCR技术,对喉癌患者外周血单个核细胞CK19mRNA和,或CK20mRNA的检测,在分子生物学水平对喉癌细胞对周围组织的浸润及局部扩散提供了参考,有助于指导临床治疗。     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。