PDGF-AB对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨ＰＤＧＦ－ＡＢ促进伤口愈合的作用机理及其在瘢痕增生中的作用。方法：取体外培养的人正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＴＳＦＢ）测定生长曲线,用ＭＴＴ法观察ＰＤＧＦ－ＡＢ对其增殖影响的差异。结果：两种细胞生长曲线存在差异,ＰＤＧＦ－ＡＢ对两种成纤维细胞增殖均有明显刺激作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异。结论：ＰＤＧＦ－ＡＢ可能通过刺激成纤维细胞增殖促进伤口愈合,同时在瘢痕增生性疾病中起     

瘢痕成纤维细胞的MMP-3 mRNA表达及其基因转染

目的：探讨增生性瘢痕组织中细胞外间质（ＥＣＭ）的过度沉积机制，并探索其基因治疗途径。方法：体外培养瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦ），构建间质溶解素１（ＭＭＰ－３）逆转录病毒载体，利用基因转染技术将ＭＭＰ－３基因转入ＨＳＦ，核酸分子杂交检测ＭＭＰ－３的ｍＲＮＡ表达水平。ＤＮＰ－多肽降解法检测间质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）活性，辅以正常皮肤成纤维细胞作对照。结果：ＨＳＦ表达ＭＭＰ－３ｍＲＮＡ水平及降解ＤＮＰ－多肽     

TGF—β1对瘢痕对纤维细胞α—SMA表达的诱导作用

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对瘢痕成肌纤维细胞中α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）表达的诱导作用。方法 以５例增生性瘢痕为标本,３例正常瘢痕为对照,２成纤维细胞二维培养和三维培养体系及ＬＳＡＢ免疫组织化学染色技术,观察了在不同ＴＧＦ－β１浓度条件作用下,来源的于增生性瘢痕和正常瘢痕在成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的情况。结果 （１）不同浓度的ＴＧＦ－β１诱导瘢痕成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的作用不     

PDGF—B基因的膜型表达产物促进血管平滑肌细胞增殖和胶原合成

考察ＰＤＧＦ－Ｂ基因的膜型表达产物对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增生、胶原合成的影响。制备供转导人ＰＤＧＦ－Ｂ基因的重组逆转录病毒，感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，受染ＮＩＨ３Ｔ３细胞经筛选、扩增后，制备细胞膜上表达产物ＰＤＧＦ－ＢＢ以观察其对ＶＳＭＣｓ生长的影响，并以３Ｈ－ＰｒｏＬｉｎｅ掺入率评估该重组蛋白对ＶＳＭＣｓ胶原合成的影响。结果：重组逆转录病毒介导ＰＤＧＦ－Ｂ基因转移并表达出具有生物学活性的重组ＰＤＧＦ－ＢＢ，免疫荧光细胞化学染色证实其表达；该膜型重组蛋白可促进ＶＳＭＣｓ增殖和胶原合成。     

磺脲类药物继发性失效患者GAD-Ab、ICA的测定

目的：探讨磺脲类药物继发性失效（ＳＦＳ）的发病原因。方法：对４８例ＳＦＳ患者初诊时空腹血糖（ＦＰＧ）,Ｃ－肽（ＦＣ－Ｐ）进行回顾,并对入选ＳＦＳ后的患者测定了谷氨酸脱羧酶抗体（ＧＡＤ－Ａｂ）,胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）。结果：４８例ＳＦＳ患者ＧＡＤ－ＡＢ阳性者９例（占１８．７５％）,ＩＣＡ阳性者６例（占１２．５０％）,６例ＩＣＡ阳性者其ＧＡＤ－Ａｂ均为阳性。４８例ＳＦＳ患者初诊时ＦＰＧ≥１２ｍｍｏｌ／     

老年Graves病患者血清骨钙素与甲状腺功能关系的研究

目的　探讨老年Ｇｒａｖｅｓ 病骨病的发病机制,对不同治疗阶段患者血清骨钙素（ＢＧＰ）及甲状腺功能进行检测并作对比分析。方法　采用放射免疫技术检测Ｇｒａｖｅｓ 病患者血清ＢＧＰ及甲状腺功能指标（ＦＴ３ 、ＦＴ４ 、ＴＳＨ、ＴＧ－ Ａｂ、ＴＭ－ Ａｂ）。结果　Ｇｒａｖｅｓ 病患者血清ＢＧＰ明显升高,相关分析揭示ＢＧＰ与ＦＴ３ 、ＦＴ４ 呈正相关（ＦＴ３ ：ｒ＝ ０．５８２ ,Ｐ ＜ ０．０１;ＦＴ４ ：ｒ＝ ０ ．６２１,Ｐ＜ ０．０１）,与ＴＳＨ、ＴＧ－ Ａｂ、ＴＭ－ Ａｂ 无相关（ Ｐ ＞ ０．０５） 。结论　ＢＧＰ 是Ｇｒａｖｅｓ 骨病病情控制与否的一项较敏感性指标,Ｇｒａｖｅｓ 病骨转换受ＦＴ３ 、ＦＴ４ 影响,而与机体免疫状态无相关。提示老年Ｇｒａｖｅｓ 病的防治主要是以抗甲亢治疗为基础Ｔ３ 、Ｔ４ 恢复至正常水平后才能使骨转换率尽快得到控制。     

5—甲基硫代腺苷对培养鼠脑星形胶质细胞反应性胶质化的抑制

观察５－甲基硫代腺苷（５－ＭＴＡ），作为碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）受体的酪氨酸激酶抑制剂，对反应性星形胶质化的影响。原代培养大鼠星形胶质细胞（ＡＳ）行机械刮伤后，应用免疫组织化学及原位杂交法检测增生细胞核怕（ＰＣＮＡ），胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）及其ｍＲＮＡ表达。结果：与对照组相比，损伤后１－２ｄ，实验组ＡＳ胞体瘦小，突起短少，增生减弱（ＰＣＮＡ阳性细胞数减少，Ｐ〈０．０１），ＧＦＡＰ－     

细胞因子TGF－β_1、PDGF－BB、bFGF在人肝纤维化中的作用

研究和探讨转化生长因子（ＴＧＦ）－β１、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢＢ、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在人肝纤维化中的作用，进一步阐明人体慢性肝病纤维化发生机制。外科切除的肝细胞标本按病变活动程度分为活动性、非活动性或轻度活动性以及对照组，以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分子杂交法测肝组织ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ，以免疫组化法显示组织原位ＰＤＧＦ－ＢＢ，ｂＦＧＦ及其相关细胞，并作半定量分析。结果：（１）肝病组织内ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ含量随肝病活动程度而增高（Ｐ＜０．０１）；（２）组织原位ＰＤＧＦ－ＢＢ、ｂＦＧＦ多肽定位及阳性细胞半定量显示，活动性肝病时两者均增高，阳性细胞所在部位与单核巨噬细胞以及胶原生成细胞一致，与Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积也有密切关系。结论：本实验提示细胞因子ＴＧＦ－β１、ＰＤＧＦ－ＢＢ、ｂＦＧＦ在人肝纤维化中起着关键的调节作用。     

氟伐他汀对高血压大鼠血管结构和功能的影响及机制

目的　探讨内源性胆固醇合成途径的限速酶－ＨＭＧ－ＣｏＡ 还原酶的抑制剂一氟伐他汀对高血压血管肥厚、血管功能和高血压进程的影响,并揭示其可能的作用机制。　方法　（１）雄性ＳＨＲ（ｎ＝ ２６）,从８周龄起予氟伐他汀（ｆｌｕｖａｓｔａｔｉｎ,Ｆｌｕ）２０ ｍ ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１灌胃,分别治疗８ 周和１６周,年龄、性别配对的未治疗的ＳＨＲ（ｎ＝ ２０）和ＷＫＹ（ｎ＝ １８）作对照。分别测定收缩压（ＳＢＰ）,血脂（ＴＣ、ＴＧ 和 ＬＤＬ－Ｃ）（ＣＨＯＤ－ＰＡＰ和ＧＰＯ－ＰＡＰ法）;进行血管组织形态学观察,测定血管壁（中膜）／腔面积（Ｗ／Ｌ）比;应用离体动脉环试验观察血管的功能变化。（２）以培养８周龄的ＳＨＲ 和ＷＫＹ 大鼠胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣｓ）为模型,观察（ｌ）两种不同的有丝分裂原－血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ Ⅱ） 和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对ＡＳＭＣｓ 增殖（细胞计数）和ＤＮＡ 合成（３Ｈ－ＴｄＲ掺入率）的影响。（２）Ｆｌｕ 对２０％ ＦＣＳ、ＡｎｇⅡ和ＰＤＧＦ促ＡＳＭＣｓ 分裂增殖的抑制作用及（３）胆固醇合成代谢中间产物甲羟戊酸（ｍ ｅｖａｌｏｎｉｃ ａｃｉｄ,Ｍｅｖａ）对Ｆｌｕ 抑制ＡＳＭＣｓ增殖和ＤＮＡ 合成的逆转效果。     

人aFGF cDNA的次级克隆及其重组产物的纯化

目的：为使ａＦＧＦ表达产量提高，以便于纯化，将载有人酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）全编码区ｃＤＮＡ的ＰＫＫ２２３－３质粒自ＤＨ５α细菌转入ＪＭ１０５细菌。方法：采用超声法和溶菌酶破碎法裂解扩增的ＪＭ１０５细菌，通过ＨｅｐａｒｉｎＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析法提纯表达的重组产物。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的结果表明，纯化重组产物的分子量约为１８０００。结论：人重组酸性成纤维生长因子在大肠杆菌中得到表达及鉴定     

PDGF-AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩影响的差异

目的：研究血小板衍生生长因子(PDGF)—AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞一胶原网(FPLC)收缩影响的差异,探讨PDGF—AB促进伤口愈合的作用机制及其在瘢痕增生中的作用．方法：取体外培养的人正常皮肤(NsFb)及增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),建立成纤维细胞—胶原网模型,比较PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩影响的差异．结果：PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩均有明显促进作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异．结论：PDGF—AB可能通过刺激伤口收缩促进创面愈合,同时可能在瘢痕挛缩性疾病中起重要作用。     

积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞增殖与Smad7蛋白的影响

目的研究积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及对Smad7蛋白的影响.方法用组织块法培养人瘢痕成纤维细胞.应用流式细胞术、免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot技术结合光密度扫描分析,观察积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期、凋亡和Smad7在细胞中的定位及其mRNA和蛋白含量的改变.结果积雪草甙可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期,增加瘢痕成纤维细胞中Smad7 mRNA和蛋白的含量.结论积雪草甙抑制瘢痕的作用可能部分通过增加抑制性Smad7蛋白.     

抑癌基因p27对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的：探讨抑癌基因p27对增生性瘢痕的作用。方法：取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞（HTsFb），将构建的pcDNA3-p27真核表达质粒体外转染HTsFb，经G418筛选获得稳定性表达的细胞克隆，用MTT和^3H-TdR掺入法观察抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成的影响。结果：抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成均有显著抑制作用。结论：抑癌基因p27可能通过抑制成纤维细胞增殖及DNA合成抑制瘢痕增生。     

Expression of MMP-3 mRNA in hypertrophic scar fibroblasts and MMP-3 gene transfection

Hypertrophicscarring,whichoftencausescosmeticproblemsandfunctionaldisorders,isacommonclinicalproblemforpatientswhohavesurvivedextensivethermalinjury;itrepresentsthedermalequivalentoffibroproliferativedisorders.Histologically,hypertrophicscarringischaracterizedbyexcessiveaccumulationofextracellularmatrix(ECM)inthewoundllj.However,themechanismforexcessivescarformationhasstillnotwellelucidated.Someresearchershavesuggestedthattheexcessivecollagenaccumulationmightbeduetothetransformationofnormalfi…     

神经生长因子对瘢痕组织中炎性细胞及胶原沉积的影响

目的 研究神经生长因子对局部瘢痕组织中肥大细胞等炎性细胞及胶原沉积的影响,探讨增生性瘢痕病理性胶原代谢的启动因素。方法 以大鼠背部创面愈合后瘢痕为研究模型,采用常规ＨＥ、天青－Ａ及ＶＧ染色和计算机图像分析,研究神经生长因子对局部瘢痕组织中肥大细胞等炎性细胞及胶原沉积的影响。结果 注射神经生长因子后局部瘢痕组织中肥大细胞、巨噬细胞、白细胞及淋巴细胞的数量及活化程度、胶原纤维分布的面密度都非常显著增加     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用

目的　观察三七总甙对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用 ,以寻找治疗人增生性瘢痕的有效药物。方法　体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别应用MTT比色法和3H 脯氨酸掺入法检测三七总甙作用后细胞增殖及胶原合成的变化。结果　和对照组相比 ,三七总甙能够显著抑制成纤维细胞增殖及胶原合成 (P <0 0 1)。结论　三七总甙具有体外抗纤维化作用 ,可能成为治疗增生性瘢痕的有效药物     

川芎嗪抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成

目的：研究川芎唪治疗增生性瘢痕的机制。方法：对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,通过ＭＴＴ法检测成纤维细胞细胞的增殖生,用羟脯氨酸（ＨＰ）比色法测定细胞胶中成含量。结果：ＭＴＴ法显示川芎嗪增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性,可以减少成纤维细胞的胶原合成使细胞形态学发生改变。结论;川芎唪可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖及胶原合成。     

增生性瘢痕成纤维细胞P物质表达的研究

目的研究P物质（substance P，SP）在人增生性瘢痕体外培养的成纤维细胞的表达情况及其与正常皮肤之间的差异，探讨增生性瘢痕组织SP表达增高的原因。方法以酶消化法体外培养成人增生性瘢痕以及正常皮肤的成纤维细胞，将SP（终浓度为10^-7mol／L）加入培养液中刺激成纤维细胞，分别于刺激前和刺激后1、3、6、12、24h采用RT—PCR检测细胞内SP基因的表达情况，ELISA检测培养液中SP浓度。正常皮肤对照组及瘢痕对照组除不应用SP外，余处理均相同。结果未受SP刺激时，人增生性瘢痕及正常皮肤体外培养的成纤维细胞均能分泌一定浓度的SP，两者之间差异有统计学意义（P〈0．01）。SP刺激后，正常皮肤体外培养的成纤维细胞SP基因和蛋白表达均在1～3h内达到高峰，随后迅速下降，24h后仍高于其正常水平；而增生性瘢痕体外培养的成纤维细胞SP基因和蛋白表达在3～6h内达到高峰，随后缓慢下降，24h后仍高于其正常水平。两种成纤维细胞SP的分泌差异有统计学意义（P〈0．05）。结论外源性SP可诱使成纤维细胞内SP的分泌增加，而增生性瘢痕与正常皮肤成纤维细胞SP的分泌情况有明显差异。     

C-mer在增生性瘢痕中表达与意义

目的　原癌基因C mer与增生性病变关系密切。本研究探讨它在增生性瘢痕中所起的作用及意义。方法　收集瘢痕作为研究对象 ,利用原癌基因C mer的基因特异片段制成寡核苷酸探针 ,与瘢痕组织切片和成纤维细胞爬片原位杂交 ,统计学处理后分析其变化规律。结果　早期增生性瘢痕中C mer基因的探针在组织细胞中有较强阳性的反应 ,而非增生瘢痕则阳性反应较低 ,正常皮肤则更少。将增生性瘢痕与非增生瘢痕对比 ,二者差别特别显著。成纤维细胞爬片杂交结果存在相同的结果。结论　原癌基因C mer与瘢痕增生之间存在密切关系。同时 ,抑制该基因的表达 ,有望实现减轻瘢痕增生。