透明质酸刺激因子对三维培养的增生性瘢痕成纤维细胞收缩特性的影响

目的：了解透明质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）对三维培养的瘢痕成纤维细胞收缩特性的影响．方法：将提纯的兔源性ＨＡＳＦ加入以人皮肤胶原为支架的人增生性瘢痕成纤维细胞三维培养系统（ＦＰＣＬ）,通过计算ＦＰＣＬ的收缩指数,用放免法测定其中ＨＡ的含量,就ＨＡＳＦ对三维培养的瘢痕成纤维细胞收缩性,快速收缩和ＨＡ合成的影响及其相关性进行初步研究．结果：三维培养系统中ＨＡＳＦ浓度≥１×１０－３ｇ／Ｌ时,ＨＡＳＦ与细胞介导的ＦＰＣＬ最大收缩指数有明显的剂量—效应关系,ＦＰＣＬ的收缩指数与对照组之间的差异非常显著（Ｐ＜０．０１）;ＨＡＳＦ对ＦＰＣＬ的快速收缩无影响（Ｐ＜０．０５）;ＦＰＣＬ中ＨＡ含量随ＨＡＳＦ浓度升高呈剂量依赖性升高;ＦＰ－ＣＬ的最大收缩指数与其中ＨＡ含量呈正相关（ｒ＝０．９８７５,Ｐ＜０．０１）．结论：ＨＡＳＦ能促进三维培养的瘢痕成纤维细胞的收缩,这种作用可能是通过刺激其合成ＨＡ实现的．     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞透明质酸合成的影响

目的　了解兔源性透明质酸刺激因子 (HASF)对体外单层及三维培养条件下增生性瘢痕成纤维细胞 (FB)透明质酸 (HA)合成的影响 .方法　从胎兔羊水及血清中提纯HASF分别作用于单层及三维培养的 FB细胞 ,用放免法测定上清液中 HA浓度 .结果　在单层培养条件下 ,随着 HASF剂量由 0 .1m g· L- 1增至 0 .1g· L- 1 ,HA浓度也由 (495±37) mg· L- 1 增至 (914± 75 ) mg· L- 1 ,在一定范围内呈剂量依赖性 (P<0 .0 1) .继续增加 HASF剂量 ,HA浓度并不成比例增加 ,呈显出饱和性 .随 HASF作用时间由 3d延长至 7d,HA浓度也呈时间依赖性的增加 (P<0 .0 1) .在三维培养条件下 ,随 HASF剂量的增加 ,HA浓度也由 (90± 2 5 ) mg· L- 1增至 (2 93± 6 3) mg· L- 1 ,也呈剂量依赖性 (P<0 .0 1) ,且明显低于单层培养条件下 HA的浓度 (P<0 .0 1) .结论　 HASF对单层及三维培养的 FB有明显的促 HA合成作用 ,并呈剂量和时间依赖性 .     

钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩的抑 …

观察钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩情况的影响，探讨进一步应用于临床治疗增生性瘢痕挛缩的可能性。方法：对人增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养，并构建含成纤维细胞的胶原网络支架，即三维培养系统。结果：通过对６例手术切除的增生性瘢痕进行细胞培养，发现钙通道阻滞剂维拉帕米对ＦＰＣＬ收缩的抑制呈剂量依赖性增高，但对快速收缩模型不影响，并且维拉帕米可使ＦＰＣＬ中的增生瘢痕细胞发生形态学改变。     

透明质酸刺激因子对成纤维细胞胶原合成的影响

０引言在瘢痕机理的研究中，有学者发现一种相对分子质量（Ｍｒ）为１５０ｘ１０３的糖蛋白能刺激体外培养的成纤维细胞（ＦＢ）产生高浓度透明质酸（ＨＡ），称为透明质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）．ＨＡＳＦ参与创伤愈合过程，是导致胚胎早期伤口无瘢痕修复的重要因素之一［１］，而瘢痕的主要基质成分为胶原蛋白，ＨＡＳＦ对于ＦＢ胶原合成的作用尚未见文献报道，我们利用体外培养的正常人皮肤及瘢痕ＦＢ，观察了ＨＡＳＦ对细胞胶原合成的影响．１方法１．１实验仪器与试剂ＬＳ－６５００液问计数仪（Ｂｅｃｋｍａｎ），ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２…     

钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩的抑制作用

目的：观察钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩情况的影响,探讨进一步应用于临床治疗增生性瘢痕挛缩的可能性． 方法： 对人增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,并构建含成纤维细胞的胶原网络支架（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｐｏｐｕｌａｔｅｄ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｌａｔｔｉｃｅ, Ｆ Ｐ Ｃ Ｌ）,即三维培养系统． Ｂｉｏｇｒａｐｈｙ： Ｗ Ａ Ｎ Ｇ Ｚｈｅｎｇ（ｍ ａｌｅ,ｗ ａｓ ｂｏｒｎ ｏｎ Ｊａｎ． １３, １９７４ ｉｎ Ｘｉ＇ａｎ Ｃｉｔｙ, Ｓｈａａｎｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ） ｉｓ ａ ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔ ｓｔｕｄｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｕｒｔｈ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．　 Ｔｕｔｏｒ： Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ Ｌ Ｕ Ｋａｉ Ｈｕａ, Ａｄｄｒｅｓｓ： Ｄｅｐａｒｔｍ ｅｎｔ ｏｆ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ, Ｘｉｊｉｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ, Ｆｏｕｒｔｈ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．　 Ｔｅｌ：（０２９）３３７５３０５ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｄａｔｅ：１９９９┐０１┐１５;　 Ｒｅｖｉｓｅｄ ｄａｔｅ：１９９９┐０３┐２６ 结果：通过对６ 例手术切除的增生性瘢     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞生长增殖的影响

目的：了解兔源性透明质酸刺激因子（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ＨＡＳＦ）对人增生性产痕成纤维细胞生长增殖的影响。方法：将ＨＡＳＦ作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,测定＾３Ｈ－ＴｄＲ参入量、ＭＴＴ反应Ａ值及上清液中有质酸（ＨＡ）的含量。结果：１×１０＾－３～１×１０＾－２ｇ／Ｌ值降低,ＨＡ含量明显增加（Ｐ〈０．０１）。结论：兔源性ＨＡＳＦ在体外能促进人增     

黑色素细胞培养上清液对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学 …

目的 观察正常的黑色素细胞（ＭＣ）对增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦｉｂ）的生物学效应。方法 收集ＭＣ的上清液按不同的浓度加入培养的ＨＳＦｉｂ中,ＭＴＴ法测定细胞的增殖率,＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测定细胞ＤＮＡ合成率。结果 加入ＭＣ上清液的ＨＳＦｉｂ,培养４８ｈ后,较正常对照组,实验组细胞增殖明显（Ｐ〈０．０５（,ＤＮＡ合成率各实验组（ＭＣ１组外）与对照组相差显著（Ｐ〈０．０１）,但高浓度组（７５％）的合     

瘢痕成纤维细胞收缩功能研究

瘢痕增生并继发挛缩畸形的发生、发展机制至今尚不清楚,临床上也无确切可靠的治疗方法。本实验利用胶原胶结缔组织收缩模型,观察体外培养的瘢痕及正常皮肤成纤维细胞促胶原胶收缩情况,了解瘢痕成纤维细胞收缩能力,探讨瘢痕挛缩的发生、发展机制。１　材料和方法１．１　胶原制备［１］　用０．１％醋酸溶液提取鼠尾胶原粗制液,加氯化钠至５％终质量浓度,胶原絮状沉淀,离心收集,透析去除盐成分后,４℃储存。１．２　成纤维细胞培养　将手术切除的增生性瘢痕（８例）及正常皮肤组织（６例）剪成细小碎块后进行组织块培养,培养液为１…     

增生性瘢痕成纤维细胞生长特性的研究

目的：研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长特性的差异。方法：应用消化法建立成纤维细胞系，在倒置相差显微镜下观察细胞形态，应用细胞计数方法绘制细胞生长曲线，测定细胞生长速度。结果：增生性瘢痕成纤维细胞比正常皮肤成纤维细胞胞体大，形态不规则。前者细胞倍增时间约为6d，后者细胞倍增时间为3d。细胞融合后前者细胞数为后者的56％。结论：增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞是两种不同基因表现型的细胞。     

尿道瘢痕成纤维细胞培养及药物对其生长的影响

目的 探讨丹参和川芎嗪对尿道瘢痕成纤维细胞生长的影响。方法 建立尿道瘢痕成纤维细胞的体外培养，并以此为模型研究丹参和川芎嗪对其生长的影响及其作用机理。结果 （1）丹参和川芎嗪能使尿道瘢痕成纤维细胞形态发生明显改变，细胞由梭形变为椭圆形。（2）丹参和川芎嗪均可抑制尿道瘢痕成纤维细胞的增殖，当抑制率为50%时，药物浓度分别为2.5mg/ml和75μg/ml。其机制与药物抑制细胞分裂密切相关，而并非是使细胞产生坏死和降解。结论 丹参和川芎嗪可望成为有效的瘢痕抑制剂，在尿道瘢痕狭窄的治疗中发挥作用。     

外源性一氧化氮对体外培养瘢痕成纤维细胞的抑制作用

目的：探讨外源性一氧化氮对体外培养瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用。方法：取我院整形外科9例病理性瘢痕组织标本,组织块贴壁法培养瘢痕成纤维细胞。传代细胞分5组,对照A组不加一氧化氮供体硝普钠,实验组B～D组加入浓度分别为100、200、300μmol／L的硝普钠,实验组E组加入浓度为200μmol／L的硝普钠及和10μmol／L的鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝。24h后用Griess还原法检测细胞上清液中一氧化氮的释放量,并进行MTT试验。结果：病理性瘢痕组织标本原代培养成纤维细胞全部成活,形态正常。实验24h后细胞上清液中一氧化氮释放量随硝普钠浓度的增高而增加。MTT试验显示经硝普钠作用后瘢痕成纤维细胞的活细胞数较对照组明显减少（p〈0．051,实验组B～D之间,随着硝普钠浓度的增高,细胞活力也有降低趋势。并且,加入美蓝的实验组E较实验组C活细胞数增高（P〈0．05）。免疫细胞化学检测显示：SNP作用后Ⅰ型胶原表达降低,而美蓝作用后Ⅰ型胶原表达增加。Ⅲ型胶原检测结果也有相同的变化。结论：外源性一氧化氮对培养状态下瘢痕成纤维细胞有抑制作用,这其中可能有NO-GC-cGMP通路的参与：     

人皮肤胶原为支架的瘢痕成纤维细胞三维培养

0引言成纤维细胞三维培养方法在有关创伤愈合及派痕研究中已被广泛采用［‘－”．既往多采用鼠尾腔可溶性胶原等，作为成纤维细胞三维培养支架．尚未见采用人皮肤胶原作支架，进行摊痕成纤维细胞三维培养的报道．我们以人皮肤胶原为支架，建立7新的疤痕成纤维细胞三维培养模型．回材料和方法1．l细胞用组织块法进行增生性癫痕组织成纤维细胞原代培养．分别用含200rnL／L和100mL／L／J’牛血清DMEM作为原代和传代后的培养液．实验用第4－－10代细胞．1．2胶原1．2．l可溶性鼠尾增胶原制备取SD大鼠尾胜剪碎，置5ml。／l一醋酸中搅拌，300…     

增生性瘢痕成纤维细胞P物质表达的研究

目的研究P物质（substance P，SP）在人增生性瘢痕体外培养的成纤维细胞的表达情况及其与正常皮肤之间的差异，探讨增生性瘢痕组织SP表达增高的原因。方法以酶消化法体外培养成人增生性瘢痕以及正常皮肤的成纤维细胞，将SP（终浓度为10^-7mol／L）加入培养液中刺激成纤维细胞，分别于刺激前和刺激后1、3、6、12、24h采用RT—PCR检测细胞内SP基因的表达情况，ELISA检测培养液中SP浓度。正常皮肤对照组及瘢痕对照组除不应用SP外，余处理均相同。结果未受SP刺激时，人增生性瘢痕及正常皮肤体外培养的成纤维细胞均能分泌一定浓度的SP，两者之间差异有统计学意义（P〈0．01）。SP刺激后，正常皮肤体外培养的成纤维细胞SP基因和蛋白表达均在1～3h内达到高峰，随后迅速下降，24h后仍高于其正常水平；而增生性瘢痕体外培养的成纤维细胞SP基因和蛋白表达在3～6h内达到高峰，随后缓慢下降，24h后仍高于其正常水平。两种成纤维细胞SP的分泌差异有统计学意义（P〈0．05）。结论外源性SP可诱使成纤维细胞内SP的分泌增加，而增生性瘢痕与正常皮肤成纤维细胞SP的分泌情况有明显差异。     

雷公藤提取物对增生性瘢痕成纤维细胞的负性调节作用

目的 :观察雷公藤提取物对成纤维细胞形态和增殖的影响。方法 :从增生性瘢痕中获取的成纤维细胞进行体外培养 ,加入 5× 10 - 3mg/ ml的雷公藤提取物作用 2 4 h后 ,在光镜下观察细胞形态。并用 MTT法检测成纤维细胞与不同浓度的雷公藤提取物 ( 5× 10 - 3、5× 10 - 4、5× 10 - 5、5× 10 - 6 mg/ m l)作用 2 4 h后增殖活性。结果 :雷公藤提取物在对成纤维细胞无毒性作用的浓度下 ,可使成纤维细胞的突起变短 ,增殖减缓。结论 :雷公藤提取物对成纤维细胞的形态和增殖都具有负性调节作用     

粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响

目的 了解粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的超微结构的影响;方法 培养来自增生性瘢痕的成纤维细胞,在加入粉防己碱后．用透射电镜观察其超微结构;结果 使用粉防己碱后,成纤维细胞胞体变小,胞质突起变少．核变小．核仁不明显．细胞器变少且小;结论 粉防己碱可影响瘢痕成纤维细胞的超微结构,从而可能降低其胶原蛋白等细胞外基质的合成。     

rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构影响的实验研究

目的 研究细胞因子rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响，以探讨细胞因子对增生性瘢痕的作用机理．方法 对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养，采用透射电子显微镜观察、分析，以研究细胞因子rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变．结果 加入rhIFN-α后细胞表现为生长趋势及增殖活性被明显抑制，部分细胞见空泡样及残体样结构，线粒体肿胀，嵴溶解，并出现细胞凋亡现象、结论 细胞因子rhIFN-α对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用，促进成纤维细胞凋亡,提示rhIFN-α是成纤维细胞负性调节因子，在增生性瘢痕的治疗中有一定的应用价值.     

细胞因子对瘢痕成纤维细胞影响的研究进展

瘢痕组织是创伤修复的必然产物，由于某些异常因素的调控，导致成纤维细胞过度增殖，同时过度分泌胶原形成瘢痕。最新研究表明，细胞因子介导的免疫应答对瘢痕形成起到了调控作用，这标志着创伤修复的研究已进入了一个全新的阶段。     

rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构影响的实验研究

目的研究细胞因子rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响,以探讨细胞因子对增生性瘢痕的作用机理.方法对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,采用透射电子显微镜观察、分析,以研究细胞因子rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变.结果加入rhIFN-a后细胞表现为生长趋势及增殖活性被明显抑制,部分细胞见空泡样及残体样结构,线粒体肿胀,嵴溶解,并出现细胞凋亡现象.结论细胞因子rhIFN-a对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用,促进成纤维细胞凋亡.提示rhIFN-a是成纤维细胞负性调节因子,在增生性瘢痕的治疗中有一定的应用价值.     

TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：观察外源性TGF－β3对增生性瘢痕成纤维细胞（HSFB）生长增殖的影响，为临床治疗提供理论依据。方法：用MTT比色法检测TGF－β3对HSFB增殖活性的影响，^3H-脯氨酸掺入法检测细胞内胶原合成，免疫组化检测I，Ⅲ型胶原及TGF－β3蛋白表达情况。结果：TGF－β3可抑制HSFB细胞增殖，下调TGF－β1蛋白及I型胶原蛋白表达。结论：TGF－β3具有抗瘢痕形成作用，有望在临床中应用。     

几丁糖对增生性瘢痕成纤维细胞合成胶原的影响

目的 :探讨几丁糖对增生性瘢痕成纤维细胞的作用及其机制 ,为临床应用几丁糖治疗增生性瘢痕提供理论基础。　方法 :以增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象 ,正常皮肤成纤维细胞为对照 ,观察不同浓度几丁糖作用下增生性瘢痕成纤维细胞合成和分泌的胶原量及其相应Ⅲ型前胶原mRNA量的变化。　结果 :几丁糖作用后 ,各组 3 H 脯氨酸掺入量均减少 ,且两组间比较差异有显著性意义 (Р <0 .0 5 )。其相应Ⅲ型前胶原mRNA量显著下降。结论 :　几丁糖可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞合成及分泌胶原的功能 ,有望在增生性瘢痕的防治中发挥重要作用