人星形细胞瘤中eNOS和VEGF的表达与血管生成关系的研究

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与星形细胞瘤血管生成及恶性程度的相互关系.方法应用免疫组化方法检测37例星形细胞瘤和4例胶质增生组织eNOS、VEGF的表达水平,并检测Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)以反映微血管密度.结果微血管密度随肿瘤恶性程度增高而显著增多(P＜0.05).eNOS、VEGF在血管内皮及肿瘤细胞胞质中均有表达,其阳性程度及标记指数(LI)均随血管密度及恶性程度增高而显著增高(P＜0.05).eNOS与VEGF的表达水平有明显的正相关性(P＜0.01).结论eNOS与VEGF可能相互影响促进肿瘤组织内血管生成,在星形细胞瘤的形成与发展过程中起着重要作用,其表达水平对判断恶性程度及预后有指导意义.     

定量分析人脑星形细胞肿瘤组织芯片中血管生成与肿瘤微血管结构

目的定量检测人脑星形细胞肿瘤组织芯片中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及微血管结构参数及其意义.方法采用组织微阵列技术构建包含正常人脑组织、弥漫型星形细胞瘤(WHOⅡ级)、间变型星形细胞瘤(WHOⅢ级)、胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)及阳性对照的168点阵的石蜡组织芯片.用免疫组织化学双重染色法标记组织芯片中的VEGF及CD34的表达.采用图像分析软件对组织芯片上VEGF的表达强度以及微血管结构参数(包括血管数、血管平均周长)进行定量测试.结果星形细胞肿瘤各级别之间除VEGF阳性单位(positive unit,PU)值、血管平均周长在Ⅲ级与Ⅳ级之间没有差异外,其他级别之间的差异都有显著性差异(P<.05).结论星形细胞肿瘤中VEGF PU值与微血管结构参数可作为星形细胞肿瘤分级和血管生成程度的重要指标.     

M-CSF的表达与骨巨细胞瘤病理分级及生物学行为的关系

目的:探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)在骨巨细胞瘤中的表达与肿瘤病理学分级及生物学行为的相关性。方法:对58例骨巨细胞瘤进行Jaffe分级;采用组织学方法观察出血坏死、侵袭血管或周围组织,病例随访6月-6年确认是否复发;免疫组化SP法检测M-CSF在骨巨细胞瘤中的表达,半定量分析它们与肿瘤病理Jaffe分级及生物学行为之间的相关性。结果:Jaffe分级与肿瘤生物学行为无明显相关性;M-CSF表达与肿瘤的出血坏死、侵袭存在一定的相关性,而与肿瘤的复发无明显相关性;M-CSF表达强度与病理Jaffe分级呈负性相关关系。结论:通过检测骨巨细胞瘤中M-CSF的表达,可以协助进行肿瘤病理Jaffe分级,推断肿瘤的生物学行为并判断预后。     

人脑星形细胞瘤瘤周水肿机制的探讨

目的 探讨人脑星形细胞瘤瘤周水肿产生的机制,指导临床医生对患者病情判断、预后估计和治疗。方法 透射电镜观察星形细胞瘤微血管超微结构改变;免疫组织化学方法检测33例人脑星形细胞瘤血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,并研究其与肿瘤病理分级和瘤周水肿（peritumoral brain edema,PTBE）的关系。结果 星形细胞瘤微血管超微结构表现为：微血管形态不规则,结构不完整,内皮细胞缺氧退变,毛细血管通透性增强。星形细胞瘤VEGF表达与肿瘤病理分级和PTBE明显相关（P＜0．002和P＜0．02）。结论 人脑星形细胞瘤瘤内微血管超微结构的特征性改变是PTBE产生的形态学基础。星形细胞瘤VEGF表达与肿瘤病理分级和PTBE明显相关。肿瘤细胞分泌VEGF是星形细胞瘤PTBE产生的重要原因。临床上可把PTBE和VEGF表达程度作为参考因素进行星形细胞瘤分级,分期判断和预后估计。     

MMP-2、TIMP-2的表达与骨巨细胞瘤复发的相关性

目的研究骨巨细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子-2(Tissue inhibitor of metalloproteinase-2)的表达与肿瘤血管形成和关系。方法用免疫组化SP法检测45例骨巨细胞瘤组织中MMP-2、TIMP-2的表达情况,以CD31标记检测微血管密度(MVD),计算肿瘤复发组和非复发组MMP-2/TIMP-2的比值,分析这些指标与骨巨细胞瘤预后的关系。结果骨巨细胞瘤组织有高水平的MMP-2、TIMP-2和CD31表达。复发组表达MMP-2、MMP-2/TIMP-2比值以及MVD均显著高于非复发组,但与组织学分级无关。MMP-2与MVD呈正的直线相关。结论MMP-2/TIMP-2比值升高与骨巨细胞瘤的复发以及肿瘤血管形成有关。     

CD105在骨巨细胞瘤中的表达及其意义

目的研究CD105在骨巨细胞瘤组织中的表达及CD105标记的微血管密度与骨巨细胞瘤生物学行为的关系。方法采用S-P免疫组织化学染色法，用CD105单抗标记并检测38例骨巨细胞瘤中的微血管密度。结果骨巨细胞瘤组织学分级Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰ级与Ⅲ级、Ⅱ级与Ⅲ级间，其MVD值的差异无显著性（P〉0．05）。而肿瘤内微血管密度（Micro Vessel Density，MVD）值与放射学分级相关。浸润型肿瘤的MVD值明显高于静止型，差异有显著性（P〈0．05）。复发组的骨巨细胞瘤其MVD值高于未复发组，差异有极显著性（P〈0．01）。结论CD105标记的MVD值与组织学分级无关，与放射学分级和肿瘤复发有关，CD105标记的MVD可作为预测骨巨细胞瘤复发的客观依据。     

膀胱肿瘤组织中bFGF和微血管密度的免疫组化研究

目的 使用免疫组化方法研究膀胱肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达情况及微血管密度（MVD）水平。方法 手术切除的膀胱肿瘤组织26例,应用bFGF抗体、CD34 Envision两步法进行免疫组化染色。bFGF免疫组化染色参考Matern方法进行评分,MVD的计数按Weidner法并稍改进。结果 bFGF在膀胱肿瘤组织中的过表达及MVD值随着病理分级和临床分期的升高而增加,MVD的多少与bFGF表达强弱有关。结论 血管生成因子bFGF促进膀胱肿瘤的微血管生成和浸润,为抑制肿瘤微血管生成的治疗提供了试验依据。     

FOXO4和nNOS在星型胶质细胞瘤中的表达及意义

目的:观察转录因子叉头框蛋白O4(FOXO4)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)在星型胶质细胞瘤中的表达,探讨星型胶质细胞瘤恶性程度发生发展的的机制,进而寻找可能的药物治疗靶点。方法:从弋矶山医院病理科调取星形胶质细胞瘤27例蜡块标本。运用双盲法进行免疫组织化学和免疫荧光染色,检测各例星型胶质细胞瘤组织中FOXO4、nNOS的表达。结果:FOXO4在Ⅰ～Ⅳ级星形胶质细胞瘤组织中的阳性表达,随着肿瘤级别的升高而逐渐降低(P<0.05)。而随着星形胶质细胞瘤级别升高,nNOS的阳性表达也越来越高(P<0.05)。结论:FOXO4阳性表达的减少,nNOS阳性表达的增强,可能与星形胶质细胞瘤瘤恶性程度发生发展有关;调控FOXO4、nNOS的异常表达可能是新的治疗药物靶点之一。     

肝癌的MSCT动态增强与肿瘤血管生成的相关性研究

目的 采用多层螺旋CT(MSCT)探讨肝癌动脉期最大强化率与组织病理分级、CD34、血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管密度(MVD)计数的相关性, 评价肿瘤血管生成. 方法 手术病理证实的30例肝癌患者,术前分别应用16层CT 的Testblous序列进行同层动态增强扫描,术后肿瘤标本行HE染色及免疫组化分析. 结果 ①肝癌组织的时间密度曲线在动脉期强化的斜率明显高于周边肝组织;②MVD计数、CD34与癌组织动脉期最大强化率呈正相关因素;③肝癌分化差、组织学分级高的患者微血管计数高于分化好、组织学分级低的患者. 结论 MSCT动态增强扫描可间接判断肿瘤微血管生成的情况,能反映癌组织的生物学特性,且无创、快捷、能重复运用.根据肝癌的MSCT动态增强的征像,可间接评价其相关基因的表达,为其的治疗和预后的判断提供有价值的依据.     

计算机辅助的人脑间变性星形细胞瘤微血管构筑三维重建

目的观测恶性胶质瘤微血管三维构筑的形态学特征.方法采用人脑间变性星形细胞瘤组织连续切片,进行免疫组织化学标记微血管内皮细胞,利用计算机辅助的图片处理和三维重建技术进行微血管构筑的三维重建.结果成功构建了星形胶质细胞瘤部分微血管的三维结构.胶质瘤微血管与正常脑微血管迥然不同,其分布、分枝和走行怪异,在三维构筑上有其自身的特点,不完全遵从由大到小的分级规律,而且某段可向外呈盲管状膨出,部分血管为两端均不通的盲管. 结论恶性星形细胞肿瘤的微血管不仅丰富,而且具有形态结构的多样性和异质性.这一特点对于认识恶性肿瘤血管生成三维结构特性、构建数字化肿瘤微血管模型及其在抗血管生成治疗上可能有重要意义.     

解聚素-金属蛋白酶17和上皮生长因子受体在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的探讨解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）和上皮生长因子受体（EGFR）在人脑胶质瘤的表达及临床意义。方法回顾性分析同济大学附属第十人民医院（以下简称＂我院＂）2011年1月~2013年11月收治的并行外科手术治疗的人脑胶质瘤患者38例,选择同期在我院行外科手术治疗脑外伤患者15例为对照组。采用免疫组织化学法和Western blot法检测胶质瘤组织中ADAM17和EGFR蛋白的表达,并分析其与人脑胶质瘤恶性程度的相关性。结果人脑胶质瘤中ADAM17和EGFR表达较对照组明显增多（P〈0.05）,且随着恶性程度的提高,表达逐渐增多,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ADAM17和EGFR在人脑胶质瘤细胞内均有表达,且随着肿瘤恶性程度的增高而增加,提示ADAM17和EGFR在人脑胶质瘤的发生过程中可能起重要的作用,其水平高低与胶质瘤的恶性程度具有一定相关性。     

3D-ASL脑灌注成像在脑胶质瘤分级中的应用

目的:探讨3D动脉自旋标记成像(ASL)全脑灌注成像技术在脑胶质瘤分级中的应用价值。方法:对25例经手术病理证实的低级别脑胶质瘤(Ⅰ~Ⅱ级,9例),高级别脑胶质瘤(Ⅲ~Ⅳ级,16例)行3D-ASL脑灌注成像扫描,测量各级别脑胶质瘤的脑血流量(CBF)及相对脑血流量(r CBF白质和r CBF灰质),并评价它们间的差异性。结果:高级别脑胶质瘤的CBF及r CBF白质、r CBF灰质均大于低级别胶质瘤,差异具有统计学意义(P0.001)。结论:3D-ASL脑灌注成像技术在评价脑胶质瘤的分级中具有重要应用价值。     

脑胶质瘤中血小板衍生生长因子和血管内皮生长因子表达的协同效应

目的：研究血小板衍生生长因子（PDGF）和血管内皮生长因子（VEGF）在脑胶质瘤中的表达及相关性,探讨其在人脑胶质瘤发生、发展和侵袭中的意义。方法：采用免疫组织化学S-P法,检测脑胶质瘤60例、正常脑组织10例中PDGF和VEGF的表达。结果：（1）PDGF在胶质瘤60例中表达30例（50．0％1,不同级别胶质瘤间的表达有差异,其表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=0．5807,P〈O．01）;（2）VEGF在胶质瘤中表达34例（56．7％）,不同级别胶质瘤表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=O．5373,P〈0．01）;（3）PDGF与VEGF在脑胶质瘤中的表达呈正相关fr=0．7715,P〈0．01）。结论：PDGF、VEGF的表达水平随着胶质瘤级别的增加而升高,与胶质瘤的病理学分级呈正相关,与胶质瘤进展密切相关,是恶性程度增高标志,两者在胶质瘤发生、发展中起协同作用。     

脑胶质瘤分子标志物IDH1R132突变、MGMT和Ki-67与病理分级及预后关系的研究

目的 联合检测脑胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶1R132位点核苷酸突变(IDH1R132突变)、O.6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)和Ki-67蛋白的表达,探讨其表达与胶质瘤病理分级的相关性及对预后的影响.方法 收集脑胶质瘤病理标本135例,采用免疫组织化学方法检测病理标本中IDH1R132突变、MGMT和Ki-67蛋白的表达情况,并对此部分患者进行长期随访,从而分析这3种分子标志物的表达与病理分级及预后的相关性.结果 135例脑胶质瘤标本中IDH1R132突变总阳性表达率为31.1%(42/135),Ⅱ级、Ⅲ级及Ⅳ级脑胶质瘤标本中IDH1R132突变阳性表达率分别为49.1%、22.2%、11.8%,三者间表达差异有统计学意义(P<0.01);IDH1R132突变阳性表达者中位生存时间明显高于阴性表达者,分别为27个月和13个月(P<0.01).MGMT总体阳性表达率为42.2%,不同级别的胶质瘤之间MGMT阳性表达率差异无统计学意义;MGMT阳性表达者中位生存时间(12个月)低于阴性者(23个月)(P<0.01).所有患者Ki-67呈阳性表达,Ⅱ-Ⅳ级胶质瘤中Ki-67的表达率呈上升趋势,不同级别的胶质瘤之间Ki-67阳性表达程度差异有统计学意义(P<0.001);Ki-67表达程度与患者中位生存时间无显著差异.结论 IDH1R132突变、Ki-67的表达水平与肿瘤的恶性程度密切相关,IDH1R132突变、MGMT在不同级别胶质瘤的预后评价中具有重要意义,可作为预后的独立预测指标.     

脑胶质瘤60例CXCR_4与EGFR的表达及意义

目的:探讨CXCR4和EGFR在脑胶质瘤中的表达状况及其与肿瘤发生、发展和侵袭性生长的关系。方法:采用免疫组织化学SP法,检测60例脑胶质瘤、5例正常脑组织中CXCR4和EGFR的表达。用统计学方法分析其表达及与胶质瘤病理分级的关系。结果:60例胶质瘤患者中分别有39例表达CXCR4和EGFR。CXCR4在Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为38.10%、73.91%、87.50%;EGFR在Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为52.38%、60.87%、87.50%。正常脑组织均不表达CXCR4、EGFR。CXCR4、EGFR在不同级别胶质瘤间的表达有显著性差异(P<0.05),两者随着胶质瘤病理分级增高而表达增强(rs=0.426,P<0.05)。结论:CXCR4与EGFR表达呈正相关,均与胶质瘤的病理分级有关。     

人脑胶质瘤中HIF-1α、Ki-67的表达及其临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子HIF-1α和细胞核内与细胞分裂增殖相关的蛋白抗原Ki-67在人脑胶质瘤的表达情况以及二者之间的相关性;揭示HIF-1α、Ki-67与脑胶质瘤预后的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法检测HIF-1α、Ki-67在56例人脑胶质瘤中的表达情况。结果：HIF-1α在病理为Ⅲ~Ⅳ级的人脑胶质瘤中的表达显著高于病理为Ⅰ~Ⅱ级的表达,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。Ki-67在病理为Ⅲ~Ⅳ级的人脑胶质瘤中的表达显著高于病理为Ⅰ~Ⅱ级的表达,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。人脑胶质瘤中HIF-1α的表达与Ki-67的表达呈显著正相关（rs=0.513,P〈0.01）。结论：HIF-1α在人脑胶质瘤中呈阳性表达并与人脑胶质瘤的病理分级显著相关,在人脑胶质瘤血管生成和肿瘤的侵袭中起重要作用;Ki-67的阳性表达与人脑胶质瘤的病理分级显著相关,可以作为评价人脑胶质瘤增殖状态的指标,对判断人脑胶质瘤的恶性程度有重要价值;HIF-1α表达与Ki-67表达密切相关,HIF-1α、Ki-67两者联合检测可作为判断脑胶质瘤恶性程度及预后的指标。     

脑肿瘤干细胞的分布与肿瘤微血管的相关性

目的 探讨脑肿瘤干细胞(BTSC)标记物CD133、Nestin和血管内皮细胞标记物CD31在脑胶质瘤中的表达.方法 (1)按照世界卫生组织(WHO)2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例,Ⅲ级23例,Ⅳ级24例,采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在65例胶质瘤组织中的表达.(2)采用免疫荧光双染法检测CD133/CD31、Nestin/CD31和CD133/Nestin共表达情况.计算CD133~+肿瘤干细胞、CD133~+血管、Nestin~+肿瘤干细胞和Nestin~+血管所占的百分率,并进行统计学分析.结果 CD133~+肿瘤干细胞或Nestin~+肿瘤干细胞在各级别胶质瘤中均有表达,并且均可表达于血管内皮细胞.低级别组中,在CD133~+肿瘤干细胞或Nestin~+肿瘤干细胞分布的区域可见CD133~+血管或Nestin~+血管分布较少.在高级别组中,该区域则有丰富的CD133~+血管或Nestin~+血管分布,同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长.并且,CD133~+细胞或Nestin~+细胞的百分比与CD133~+血管(r=0.945,P<0.01)或Nestin~+血管(r=0.727,P<0.01)的表达呈正相关.免疫荧光双染可见,CD133~+细胞或Nestin~+细胞均聚集于CD31~+血管周围,并且,CD133~+/CD31~+、Nestin~+/CD31~+细胞共表达于血管内皮细胞.结论 在脑胶质瘤组织中,血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物,因此认为,肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化,并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布.随着肿瘤病理级别的升高,CD133~+肿瘤干细胞或Nestin~+肿瘤干细胞的百分比与CD133~+血管或Nestin~+血管的表达呈正相关.     

脑胶质瘤及其浸润组织中NF-κBp65和VEGF的表达

目的：探讨核因子NF-κBp65、血管内皮生长因子（VEGF）在脑胶质瘤及其浸润组织中的表达和意义。方法：应用免疫组化S-P法检测53例脑胶质瘤、26例脑胶质瘤周围浸润组织及5例正常脑组织中NF-κBp65及VEGF的表达。结果：NF-κBp65和VEGF表达强度均与脑胶质瘤恶性度有关（P<0.05）;在恶性度高的脑胶质瘤周围的浸润组织中NF-κBp65和VEGF的表达也增强。脑胶质瘤中NF-κBp65表达与VEGF表达呈正相关（r=0.695 2,P<0.05）。结论：脑胶质瘤相关的癌蛋白NF-κBp65对VEGF表达具有正向调节作用,促进肿瘤血管的生成,使脑胶质瘤不断恶化。     

人脑胶质瘤骨桥蛋白的表达

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)在人脑胶质瘤中的作用、表达及其意义. 方法:采用RT-PCR及免疫组化染色方法检测脑胶质瘤组织和正常组织中骨桥蛋白. 结果:骨桥蛋白在胶质瘤组织细胞中表达,而在正常脑组织细胞中无表达,而且OPN的表达浓度与胶质瘤恶性程度呈正相关. 结论:人脑胶质瘤中OPN的表达与其恶性程度密切相关.     

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在人脑胶质瘤中表达及其临床意义

目的探讨促。肾上腺皮质激素释放因子受体2（conicotmpin-releasing factor receptor type2，CRFR2）在人脑胶质瘤中表达及其临床意义。方法随机收集35例手术切除的胶质瘤组织标本及培养人类胶质母细胞瘤株U87，进行CRFR2免疫组织化学染色，分别取5例泌乳素垂体腺瘤组织标本作为阳性对照及5例正常脑组织作为阴性对照。结果CRFR2着色于肿瘤细胞膜，在不同类型、级别的脑胶质瘤中均有着色，且随肿瘤病理级别增高而表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05），在正常脑组织中呈阴性表达，U87细胞株中存在CRFR2＇高表达。结论CRFR2可能参与胶质瘤恶性生物学行为形成，但其具体作用及机制不详。