肝硬化大鼠肾脏水通道蛋白2和血管加压素V2受体的表达及黄芪对其的作用

目的 观察肝硬化大鼠肾脏水通道蛋白2（AQP2）和血管加压素（AVP）-V2受体的表达情况，及中药黄芪对其的作用。方法 肾脏皮髓制裁AQP2mRNA检测采用半定量RT-PCR法，肾脏AQP2和AVP-V2受体蛋白检测采用免疫组织化学法。结果 肝硬化2周和5周大鼠肾脏皮髓质AQP2mRNA，肾脏AQP2和AVP-V2受体蛋白表达上调，黄芪在2周时可纠正这些指标的升高，5周时则不能。结论 肝硬化大鼠存在AVP系统和AQP2表达的异常。黄芪在早期对其有改善作用。     

大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白2和水通道蛋白4表达的影响

目的 研究大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白（AQP）2、AQP4表达的影响及探讨大黄利尿机制。 方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组，每组8只，分别给予不同剂量大黄总蒽醌灌胃，每天1次，共灌5 d。第4天测定大鼠24 h尿量，尿液Na+水平及尿渗透浓度。5 d后处死大鼠，腹主动脉取血，进行血液生化指标检测；并留取肾脏，用免疫组化、Western印迹和RT-PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。 结果 与正常对照组比较，大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠24 h尿量显著增加[(16.21±1.96) ml、(18.16±1.80) ml比（13.85±1.25）ml, P均＜ 0.05]，低剂量组大鼠尿量变化不明显；中、高剂量组大鼠肾脏AQP2蛋白及mRNA表达均显著下降（P均＜ 0.01），高剂量组大鼠肾脏AQP4蛋白及mRNA表达显著下降（P ＜ 0.01）；中剂量组大鼠AQP4蛋白表达下降（P ＜ 0.01），但mRNA表达无显著降低；低剂量组大鼠AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达无显著变化。 结论 大黄总蒽醌能降低大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平，这可能是大黄产生利尿的机制之一。     

充血性心力衰竭时肾脏水通道蛋白mRNA表达的改变及意义

目的 研究在不同程度的充血性心功能衰竭（心衰）时肾脏水通道蛋白2（AQP2），上皮性钠通道（ENaC)和髓襻升支粗段的Na-K-2Cl转运子（rBSC1)表达的情况。方法 将SD大鼠通过腹主动脉－下腔静脉穿刺造瘘和冠状动脉结扎的方法建成不同的心衰模型，设正常对照组，穿刺造瘘1孔组，穿刺造瘘3孔组和冠脉结扎组。用Doppler超声心动图及心脏秤重的方法比较其心功能的各项参数，并用RT－PCR的方法检测肾脏AQP，ENaCα亚单位和rBSC1mRNA表达。结果 穿刺造瘘大鼠心功能损害较轻，而冠脉结扎大鼠心功能严重失代偿。AQP2仅在冠脉结扎大鼠肾皮质表达增高，而rBSC1在造瘘1孔，3孔和结扎大鼠的肾髓质表达均显著上调。肾皮质αENaC含量3组心衰大鼠都显著增高，而在肾髓质仅冠脉结扎大鼠明显升高，造瘘大鼠虽有上升趋势，但差异无显著性意义。结论 在不同类型的充血性心力衰竭大鼠模型中存在着肾脏AQP，rBSC1和ENaC mRNA表达的上调，其中rBSC1增高可能和心脏受累早期肾脏排钠障碍有一定关系。     

黄芪对肾病综合征大鼠肾脏水通道蛋白的影响

目的:探讨黄芪对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响及其可能的作用机制.方法:24只大鼠随机分成正常对照组(NC组),阿霉素肾病组(NS组),阿霉素肾病 黄芪干预组(A组)和阿霉素肾病 福辛普利干预组(F组),每组6只,在第4周末时检测各组大鼠血尿生化和血尿钠及渗透压等,同时检测了大鼠肾脏皮髓质AQP2、AQP3、AVP V2受体mRNA和蛋白表达情况.结果:(1)阿霉素大鼠在4周末有明显的肾病综合征表现,且有高血钠和高血渗伴低尿钠和低尿渗,黄芪能明显降低大鼠血胆固醇和甘油三酯,而黄芪和福辛普利均能降低血钠,改善高血渗,并提高尿渗和尿钠.(2)黄芪能上调阿霉素肾病大鼠肾髓质AQP2 mRNA的表达,同时降低肾脏AQP2蛋白表达.而对肾脏AQP3的表达无影响,福辛普利仅能减少肾脏AQP3 mRNA和蛋白表达.(3)与对照组相比,NS大鼠肾脏AVP V2受体表达明显下调,黄芪能上调AVP V2 mRNA和蛋白的表达,但福辛普利对此没有影响.结论:黄芪能改善阿霉素肾病大鼠水钠潴留状态,其机制可能与其调节AQP2和AVP V2受体的表达有关.     

ACE2在早期糖尿病大鼠肾脏的表达及意义

目的观察早期糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转化酶2（ACF2）的表达改变。方法链脲佐菌素（STZ）注射建立1型糖尿病大鼠模型,正常对照组和糖尿病组各6只动物,于建模后0、2、4、6和8周测尾动脉压、尿白蛋白,8周末取血检测胰岛素、血肌酐（SCr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、血钠和血钾。免疫组织化学染色检测ACE2在肾脏的表达和分布;RT-PCR检测肾脏中ACE2及ACE mRNA表达水平。结果①8周末糖尿病组血压高于正常组（P〈0．05）,2周末始糖尿病组尿蛋白高于正常组（P〈0．05）,8周末糖尿病组TG较正常组明显增高（P〈0．05）,SCr、血钾及血钠无明显差异（P〉（0．05）;②糖尿病组肾小球ACE2蛋白表达低于正常组,而肾小管ACE2显著高于正常组;糖尿病组ACE mRNA高于正常组（P〈0．05）,而ACE2 mRNA与正常组无明显差异（P〉0．05）。结论ACE2较ACE的相对降低参与早期糖尿病肾脏的进展。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白，即水孔蛋白（Ａｑｕａｐｏｒｉｎｓ，ＡＱＰ）是新近发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白，广泛存在于动物、植物及微生物。目前在哺乳动物组织中鉴定的水通道有六种，每种水通道有其特异笥的组织分布，不同水通道在肾脏和其它器官吸收和分泌过程中的作用和调节机制不同。研究ＡＱＰ的生理和病理生理变化及遗传和获得性水代谢障碍疾病的关系，并给予相应的干预措施具有重要意义。     

水通道蛋白1和3在小鼠前列腺组织的表达及意义

目的:揭示水通道蛋白(AQP)在小鼠前列腺组织的表达及意义,为深入研究前列腺正常及某些病理状态下AQPs表达调控及生理功能奠定基础。方法:取小鼠前列腺组织,采用RT-PCR方法检测AQP 0~4mRNA在前列腺组织的表达,同时应用Western印迹和免疫组化研究AQP1及AQP3在前列腺组织的定位表达。结果:RT-PCR显示前列腺组织中有AQP1、3 mRNA表达,而未见AQP0、2、4 mRNA的表达。Western印迹结果显示在正常前列腺组织中表达相对分子质量为28 000的AQP1蛋白,以及相对分子质量分别为35 000和27 000的糖基化和非糖基化AQP3蛋白。免疫荧光和免疫组化结果表明小鼠前列腺近管腔处分泌细胞的胞内囊泡及细胞膜均可见较强的AQP1蛋白表达;而在前列腺基质上皮细胞有AQP3的表达。结论:AQP1和AQP3基因在前列腺分泌上皮细胞表达,提示AQP1和AQP3可能通过促进前列腺上皮细胞对水的渗透,在前列腺液分泌过程中发挥重要的生理作用。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白，即水孔蛋白（Ａｑｕａｐｏｒｉｎｓ，ＡＱＰ）是新近发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白，广泛存在于动物、植物及微生物。目前在哺乳动物组织中鉴定的水通道有六种，每种水通道有其特异性的组织分布，不同水通道在肾脏和其它器官吸收和分泌过程中的作用和调节机制不同。研究ＡＱＰ的生理和病理生理变化及与遗传和获得性水代谢障碍疾病的关系，并给予相应的干预措施具有重要意义。     

肾脏水通道蛋白2基因和蛋白表达的调节及影响因素

水通道蛋白2(AQP2)属于膜整合蛋白,在肾脏内髓部集合管分布较多,主要受抗利尿激素(AVP)调节,是调节体内水代谢平衡的重要物质基础.近年研究表明除受抗利尿激素调节外还受渗透压、酸碱度、肾上腺皮质激素、药物、饮食、神经系统等因素影响.本文就影响水通道蛋白2基因和蛋白水平表达的因素作一综述.     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白在体内广泛分布，具有特殊的分子结构和生物学特性。受诸多因素的调节，如蛋白激酶C、pH值、睾丸激素、温度等。其中水通道蛋白4（AQP4）与脑水肿关系密切。水通道蛋白使水代谢的研究跃入了一个全新的阶段，它的发现使我们能够在分子水平研究水的运动，将会阐明许多系统疾病的发病机制，并予以相应的干预，对于临床及实际工作具有重要的指导意义。     

高原缺氧对血管内皮细胞止血功能的影响

目的：研究移居拉萨地区的居民在对高原缺氧的习服过程中其血管内皮细胞止血功能的变化。方法：选择世居高原的献血员和移居拉萨的健康居民８３例，分为四组：Ⅰ组为献血员２３例，Ⅱ组为移居２～６月居民１９人，Ⅲ组为移居７月至１０年居民２０例，Ⅳ组为移居１１～３５年居民２１例。采取外周静脉血检测循环内皮细胞（ＣＥＣ）计数、血管性假血友病因子（ｖＷＦ）活度、组织纤溶酶原激活物（ｔＰＡ）活性以及纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ）活性。各组检测值均与平原居民正常值相比较。结果：各组的ＣＥＣ比平原居民增多（Ｐ＜０．０１），且Ⅲ组与世居（Ⅰ组）和初到（Ⅱ组）高原者比较相差也非常显著。ｖＷＦ以Ⅱ组增高明显，与平原居民比较相差非常显著（Ｐ＜０．０１）。ｔＰＡ与平原居民比较各组均降低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），尤以Ⅲ组明显，与初到高原者（Ⅱ组）比较相差非常显著（Ｐ＜０．０１）。各组的ＰＡＩ均高于平原居民。结论：移居高原居民和世居高原居民因缺氧使内皮细胞易衰老和脱落，从而引起血液高凝低纤溶状态，此情况下发生创伤或进行手术更会加重血液凝固而致各种合并症，在处理上要慎重使用促凝药和抑制纤溶药物。     

高原低氧应激对兔睾丸组织的损害

目的 观察高原不同海拔地区低氧应激对兔睾丸组织及生精的损害.方法 将平原兔12只随机分为4组,每组3只.A组为对照组,B、C、D组为平原兔在48 h内直接迁饲到海拔4320 m后,1、7、30 d组.随机将6只饲养在海拔2260 m高原兔分为2组,每组3只.E组为高原对照组,F组为高原兔24 h内迁饲到4320m后1 d.各组宰杀后行睾丸组织病理学观察.结果 从平原急进高原4320 m地区后,病理检查发现,睾丸组织内大部分曲细精管的各级生精细胞减少,以初级母细胞减少明显;精子细胞明显减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),睾丸间质内血管充血,间质细胞明显减少,无成堆现象.曲细精管内细胞计数C、D组分别为390.40±158.94、580.80±167.32,A组868.80±293.98(P<0.05).精子密度减少,C、D组分别为0.0027±0.0011、0.004±0.0017,A组0.006±0.002(P<0.05).曲细精管内生精细胞与支持细胞的比率降低,支持细胞计数A、B、C、D、E、F组分别为113、191、187、48、112、162.曲细精管内生殖细胞与支持细胞比率:A、B、C、D、E、F组分别为7.69、6.91、2.09、12.10、8.54、5.26,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 从平原急进高原地区可致兔睾丸组织受损,表现为各级生精细胞及间质细胞减少.当大气氧分压突然较大幅度降低时,不同大气压环境下生存的动物引起睾丸组织损害的病理组织学改变大致相同.     

功能性便秘患者结肠黏膜水通道蛋白3和水通道蛋白9的表达及意义

目的研究功能性便秘患者结肠黏膜水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白9（AQP9）的表达与分布情况．并探讨其与便秘的关系。方法采用免疫组化技术和Western印迹半定量检测法检测45例功能性便秘患者（试验组）和21例无便秘患者（对照组）结肠黏膜AQP3和AQP9，把AQP3和AQP9与相应内参蛋白β-actin的灰度值之比视为AQP3和AQP9的相对含量。结果免疫组化检测显示：AQP3主要表达在结肠黏膜顶部的吸收细胞．且主要分布于细胞膜的基底侧和腔面，杯状细胞少见阳性染色，AQP9主要表达在黏膜腔面的杯状细胞，且主要分布于细胞膜的基底侧。Western印迹检测结果：试验组和对照组升结肠AQP3灰度比平均值分别为0．905和0．798（P〈0．05）。AQP9灰度比平均值分别为0．544和0．543（P〉0．05）；试验组和对照组降结肠AQP3灰度比平均值分别为0．697和0．701（P〉0．05），AQP9灰度比平均值分别为0．575和0．732（P〈0．05）。结论功能性便秘患者升结肠黏膜AQP3表达高于非便秘者，而其降结肠AQP9表达则低于非便秘者；AQP3和AQP9含量的增减可能在便秘的发生发展过程中发挥了重要作用。     

水通道蛋白4在食管鳞癌中的表达

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在食管鳞癌组织中的表达并探讨其在食管癌发病中的作用.方法 取食管鳞癌组织、癌旁正常鳞状上皮组织各16例,应用免疫组织化学,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测AQP4的表达及分布.结果 免疫组织化学显示,AQP4表达于正常食管黏膜鳞状上皮细胞,在食管鳞癌组中主要表达于肿瘤上皮细胞和癌巢中.RT-PCR法结果 显示,AQP4在癌旁正常组织和食管癌组织中的mRNA表达平均相对A值分别为0.45±0.12、0.70±0.23,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AQP4在正常食管黏膜鳞状上皮细胞以及食管鳞癌组中均有表达,而且在癌组织中表达增加;AQP4可能对人食管癌的发生、发展起促进作用.     

机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达的变化

目的 评价机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的变化.方法 健康雄性SPF级SD大鼠70只,周龄7周,体重200～250 g,随机分为7组(n=10),对照组(A组)仅切开气管保留自主呼吸;不同通气时间小潮气量组(B_1组和B_2组)V_T 7 ml/kg,分别通气2 h或4 h;不同通气时间中潮气量组(C_1组和C_2组)V_T20 ml/kg,分别通气2 h或4 h;不同通气时间大潮气量组(D_1组和D_2组)V_T 40 ml/kg,分别通气2 h或4 h.A组在气管切开即刻,其余各组在机械通气结束时处死大鼠,开胸取肺组织行病理损伤评分,测定AQP5蛋白及其mRNA表达,计算肺组织湿/干重比值(W/D比值),收集肺泡灌洗液,计数中性粒细胞(PMN).结果 与A组比较,C_1组、C_2组、D_1组、D_2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与B_1组比较,C_1组和D_1组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与B_2组比较,C_2组和D_2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与C_1组比较,D_1组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与C_2组比较,D_2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).结论 AQP5表达下调参与了机械通气诱发大鼠肺水肿的发生.     

高原低氧应激对肾脏的影响

目的 观察高原不同海拔地区低氧应激对人和兔肾脏的影响.方法 将平原兔12只随机分为4组,每组3只.A组为对照组,B、C、D组为平原兔在48 h内直接迁饲到海拔4320 m后1、7、30 d组.E组为饲养在海拔2260 m地区的高原兔(高原对照组),F组为海拔2260 m高原兔24 h内迁饲到4320 m后1 d.各组宰杀后行肾脏组织病理学观察.将进入高原2730 m不同时间(G组<6 m,250人,H组2 Y,110人)的健康青年共350人行尿生化及尿微量蛋白检测,设平原健康青年100人为对照组(Ⅰ组).结果 从平原急进4320 m地区后兔肾脏的改变为肾小球毛细血管内皮细胞肿胀、变性、结构不清,间质内毛细血管明显充血,肾小管上皮细胞水样变性.G组和H组尿生化总阳性率28.9%,对照Ⅰ组7%(P<0.01),且G组32.8%～(82/250)高于H组25.0%(25/100,P<0.01),α1微球蛋白G组(48.89±27.23)mg/L,H组(10.14±0.59)mg/L,均高于参考值5.86±4.50(P<0.01).结论 从平原急进入高原地区可致肾小球和肾小管同时受损,表现为尿生化和尿微球蛋白检测阳性.当大气氧分压突然较大幅度降低时,不同大气压环境下生存的动物均可引起肾小球和肾小管应激性损害,其组织病理学改变基本相同.     

水通道蛋白3、4、8在大鼠慢传输型便秘模型结肠黏膜中的表达

目的探讨水通道蛋白（AQP）3、4、8在大鼠慢传输型便秘（STC）模型中的表达情况。方法利用复方地芬诺酯灌胃的方法建立大鼠STC模型,采用RT—PCR方法测定STC组（16只）及对照组大鼠（16只）升、降结肠黏膜的AQP3、4、8mRNA表达情况。结果STC组与对照组升结肠、降结肠AQP3平均相对表达量分别为0．344和0．602（P〈0．05）、0．419和0．509（P〉0．05）：STC组和对照组升结肠、降结肠AQP4平均相对表达量分别为0．764和0．759（P〉0．05）、0．776和0．736（P〉0．05）;AQP8在实验组和对照组升降结肠中未见明显表达。结论AQP3在STC大鼠的升结肠黏膜中表达下调,对水吸收起调节作用：AQP4和AQP8的表达无明显变化。     

水通道蛋白3在人正常椎间盘中的表达

目的 观察水通道蛋白-3(aquaporin-3)在人正常椎间盘中的表达及分布.方法 收集10例青年人因腰椎骨折行椎间融合手术摘除的正常椎间盘样本,运用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、 Western blot检测AQP3在椎间盘中的表达及分布.结果 免疫组织化学显示AQP3表达于椎体软骨终板类软骨细胞,髓核和纤维环未见表达;RT-PCR显示AQP3 mRNA在椎体软骨终板及髓核组织有表达;Western blot检测显示椎间盘组织在29×103左右有一特异性条带.结论 AQP3在人正常椎间盘中的表达及分布提示其可能参与椎间盘内液体平衡,对维持椎间盘组织的正常生理功能、在椎间盘退变的发病机制中可能有重要作用.     

蛋白激酶C-alpha对小鼠尿浓缩功能的调节机制初探

目的通过观察蛋白激酶C(PKC)-alpha基因敲除鼠血清加压素(AVP)水平及髓内水通道蛋白2(AQP-2)分布、表达和转运状态的变化,初步探讨PKC-alpha在小鼠尿浓缩功能中的调节机制。方法使用代谢箱收集PKC-alpha基因敲除鼠及SV129野生鼠24 h尿液并取血,采用渗透计检测尿渗透浓度。ELISA法检测正常饮食下24 h尿尿素排泄量。放射性免疫法(RIA)检测血清AVP水平。免疫荧光及半定量免疫印迹技术检测小鼠内髓AQP-2的分布和表达情况。分别使用V2受体拮抗剂SR141263及不同浓度去氨基精加压素(DdAVP)腹腔内注射,检测3 h内尿渗透浓度、尿量以观察两组小鼠AQP-2转运状态。结果正常饮食下PKC- alpha基因敲除鼠24 h尿尿素排泄量[(3．25±0．18)mmol／24 h比(3．83±0．42)mmol／24 h,P= 0．24]以及血清AVP水平[(4．64±0．43)pmol／L比[(5．03±0．44)pmol／L,P=0．55]与野生鼠相比,差异均无统计学意义。两组小鼠内髓AQP-2的分布及表达相似(P=0．48)。不同浓度DdAVP腹腔注射后两组小鼠尿量变化曲线完全一致。SR141263腹腔注射后PKC-alpha基因敲除鼠及野生鼠尿渗透浓度改变之间差异也无统计学意义[(0．20±0．02)mmol／L比(0．20±0．04) mmol／L,P=0．97]。结论PKC-alpha参与调节的小鼠尿浓缩功能与血清AVP水平、髓内AQP-2状态无关。