兔眼房水及玻璃体中川芎嗪含量的高效液相色谱法测定

目的用高效液相色谱法测定兔眼房水、玻璃体中川芎嗪的含量,了解川芎嗪注射液直流电离子导入后的有效成分在兔眼房水和玻璃体中的吸收、分布、代谢及排泄情况。方法色谱柱为Waters公司symmetryC18(5μm,4.6×150 mm),流动相:甲醇∶水=40∶60,1000 ml中含SDS0.9130 g,磷酸二氢钾0.6770 g,冰醋酸1 ml;检测波长:294 nm,流速:1 ml/min,室温操作。结果在1.25~36μg/ml范围内,房水中川芎嗪平均回收率均在80%左右,日内精密度在5%左右,日间精密度在10%左右;在0.3125~10μg/ml范围内,玻璃体中川芎嗪平均回收率均在80%左右,日内精密度及日间精密度均在10%左右。结论当川芎嗪浓度在一定范围内时,兔眼房水和玻璃体中川芎嗪峰面积与浓度呈良好线性关系。     

HPLC测定鼻炎灵喷剂中4种组分的含量

 目的：测定鼻炎灵喷剂中盐酸麻黄碱、呋喃西林、地塞米松磷酸钠、盐酸苯海拉明的含量。方法：高效液相色谱法，国产C₁₈柱；检测波长258 nm；流动相A液为0.025 mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇-乙腈(77∶3∶20)，B液为甲醇；梯度洗脱。结果：盐酸麻黄碱0.60～3.60 mg/ml，呋喃西林0.012～0.07 mg/ml，地塞米松磷酸钠0.018～0.11mg/ml，盐酸苯海拉明0.10～0.61 mg/ml范围内，峰面积与其浓度呈良好线性关系；平均回收率依次为99.95%，RSD=0.78%；101.7%，RSD=0.50%；101.9%，RSD=0.57%；101.4%，RSD=0.58%。结论：方法简便、快速、准确，可作为样品的检测方法。     

HPLC测定兔血浆及淋巴组织中的阿霉素

 目的：测定兔血浆及微量淋巴組织中阿霉素的含量，揭示阿霉素脂质体的靶向定位及生物体内的药物代谢 动力学特性。方法：取样量，血浆为0.5ml，淋巴組织为0.1g，加入磷酸盐緩冲液1ml(0.2mol/L，pH7.8)于冰浴 中超声匀浆，以盐酸柔红霉素为内标，采用有机相[氯仿-甲醇（4 ：1)]一步提取，40℃下氮气吹干，残渣用甲醇溶解， 进样75μl色谱条件为YWG-C18柱（150mmΧΦ4.6mm，粒径为10μm);流动相为甲醇-L腈-0.01mol/L磷酸二氢铵-冰醋酸（50：22：28：0.5);流速为1.2ml/min，激发波长为479nm，发射波长为587nm,检測器灵敏度为 H;室温下操作。结果：本方法线性范围：血浆阿霉素为10-1000ng/ml;淋巴组织阿霉素为0.05-5.0μg/g，两者 的线性相关系数r=0.9999(n=6);日内及日间重现性：RSD%在2.10-6.15之间；药物自血浆及淋巴组织的平均 回收率分别为100.11%和100.5%;灵敏度：血浆及淋巴组织中最低检測浓度分别为2ng/ml和0.025μg/g;方法 简便快速，一个样本从提取处理到色谱分离出结果，可在30min内完成。结论：本方法能够簡便、准确地測出兔血浆 及微量淋巴组织中阿霉素的含量，适于淋巴给药后阿霉素生物体内药物代谢动力学的研究。     

HPLC法测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷含量

目的：测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷的含量。方法：供试品用甲醇超声提取30min,滤过,取续滤液作为供试品溶液,经高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱：Inertsil ODS-sp（5um,4.6mm×150mm）;流动相：甲醇：水（36：73）;检测波长：270nm;流速：1.0ml/min;柱温：25℃。结果：蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷与其他组分分离良好。保留时间为17.1min。龙胆苦苷对照品线性范围1.68-8.40μg,r=0.9993。结论：本法灵敏度高、操作简便、结果准确,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定。     

反相高效液相色谱法测定血浆中青藤碱的含量

 用反相高效液相法测定血浆中青藤碱的含量。色谱条件：仪器为Varian 5000液相色谱仪， 色谱柱为ODS C₁₈柱，流动相为乙腈-0.01mol/L磷酸二氫钾（55:45)，内标为氨基比林，流速为1ml/min,检测波长为263nm。线性范围在0.8-12.4μg/ml (r= 0.9974)。最小检出量为0.03g。平均回收率为96.95%±1.62%，RSD= 1.6%。曰内误差PSD<2% 、日间误差RSD<3% 。     

HPLC法测定肾衰宁片中丹参素钠的含量

目的建立以HPLC法检测肾衰宁片中丹参素钠的含量测定。方法色谱柱：依利特C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-1%磷酸溶液（4：96）;流速：0.8ml/min;检测波长：280nm;以丹参素钠为对照品,采用外标法定量。结果丹参素钠线性范围为0.0737～0.6633mg（r=0.9999）,平均回收率为99.88%,RSD为0.43%。结论本法简便,结果准确,重现性好,可用于该药品的质量控制。     

珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定

目的 建立高效液相色谱法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量.方法 供试品用60%乙醇超声提取40min,滤过,取续滤液作为供试品溶液;高效液相色谱仪测定峰面积.色谱柱:Inertsil ODS-sp(5μm,4.6 mm×150 mm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(35:65);柱温:30℃;流速:1.0 ml/min;检测波长:203 nm.结果 珠子参中竹节参皂苷Ⅳa与其他组分分离良好,保留时间12.5 min.竹节参皂苷Ⅳa对照品线性范围1.007 6～10.076μg,r = 0.999 9,平均回收率为103.46%,RSD为0.81%.结论 该法操作简便,方法 稳定性,分离度好,灵敏度高,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定.     

盐酸左氧氟沙星眼用即形凝胶在兔眼房水内的药动学

 目的研究盐酸左氧氟沙星即形凝胶在兔眼内的药动学行为,考察该制剂的释药特征。方法以高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星即形凝胶给药后不同时间兔眼房水中的药物浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数。结果盐酸左氧氟沙星即形凝胶在兔眼内的吸收和消除过程呈线性动力学特征,其t_1/2(ke),MRT,t_max,ρ_max,AUC_0-τ和AUC_0-∞分别为(118.76±7.21)min,(208.40±13.46)min,(34.07±5.02)min,(2.56±0.14)mg·L^-1,(432.05±13.55)mg·min·L^-1及(501.52±25.24)mg·min·L^-1。结论盐酸左氧氟沙星眼用即形凝胶显著延长药物在眼部的滞留时间,可用之实现长效治疗的目的。     

RP-HPLC测定人血浆中洛匹那韦浓度

 目的 建立人血浆中洛匹那韦的高效液相色谱测定方法,用于临床进行药物浓度监测。方法 血浆样品经醋酸乙酯液液萃取后,采用高效液相色谱法（HPLC进行分析。Eclipse C₁₈柱分离,流动相采用甲醇-0.1 mol·L-1醋酸铵溶液,流速为1 mL·min-1 ;梯度洗脱在0~6 min甲醇-0.1 mol·L-1醋酸铵溶液为70∶30,6.1~15 min甲醇-0.1 mol·L-1醋酸铵溶液为80∶20;利用光电二极管阵列检测器对流份进行双波长同时检测（洛匹那韦210 nm,内标298 nm,柱温30 ℃。结果 内源性物质不干扰测定,洛匹那韦的线性范围为1～12 mg·L-1（r=0.997 0,最低定量限为1 mg·L-1,基质效应为92.11%～105.31%（n=5,萃取回收率为73.32%～89.50%（n=5,批内和批间精密度（RSD%分别为1.75～5.99（n=5和4.97～9.79（n=3。结论 建立的HPLC方法简便、灵敏、准确、所需样本量小,可以用于临床血药浓度测定。     

HPLC法测定兔房水中羟基红花黄色素A

目的建立兔眼房水中羟基红花黄色素A测定的高效液相色谱法,为红花黄色素全身用药后眼内药动学研究提供依据。方法兔静脉注射红花黄色素10 mg/kg,采用高效液相色谱法测定房水中羟基红花黄色素A质量浓度。以Diamonsil C18为色谱柱,甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26∶2∶72)为流动相;体积流量0.8 mL/min;检测波长403 nm;柱温50℃。结果在0.28⁴.48μg/mL质量浓度范围内,羟基红花黄色素A峰面积和质量浓度呈良好的线性关系(r=0.999 8),回收率大于90%,日内、日间精密度RSD均小于6.0%。结论该方法准确、可靠,可用于测定兔房水中羟基红花黄色素A。     

双氯芬酸钠滴眼液在家兔房水中的吸收

 目的建立房水中双氯芬酸钠的高效液相色谱测定方法,并测定家兔用药后眼房水中药物浓度。方法采用C18色谱柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(80∶20∶0.5),房水用甲醇沉淀蛋白后,上清液挥干,再用甲醇复溶后进样。结果本方法线性范围为10～500 ng·mL^-1,最低检测浓度为10 ng·mL^-1。3种浓度的平均回收率达到99.7%,日内和日间RSD均小于10%,家兔单剂量应用0.1%双氯芬钠滴眼液50μL后,房水中15 min即可检测到药物,在给药后1h达到最高浓度。结论本方法灵敏,准确,精密。适合于眼房水中双氯芬酸钠的测定。     

复方血栓通软胶囊药代动力学研究

目的:建立家兔灌胃给予复方血栓通软胶囊后,房水、血液、眼组织中其化学成分之一人参皂苷Rg1含量的RPHPLC测定法,并测定灌胃给药后不同时间家兔眼内人参皂苷Rg1质量浓度变化,研究其药代动力学特点.方法:取合格一级新西兰家兔,按每只10 mg·kg-1剂量灌胃给予复方血栓通软胶囊,采用RP-HPLC测定给药后不同时间点房水、血液和眼组织中人参皂苷Rg1的药物浓度.结果:建立的RP-HPLC可用于兔房水、血液及眼组织中人参皂苷Rg1的含量测定.房水中人参皂苷Rg1在质量浓度7.6～152 mg·L-1线性关系良好,r=0.999 6;血液中人参皂苷Rg1在质量浓度10.35～103.5 mg·L-1线性关系良好,r=0.999 8.回收率方法符合要求.结论:复方血栓通软胶囊经灌胃给药后,其中的人参皂苷Rg1能够通过血-眼屏障进入眼部,达到一定浓度,此研究结果为复方血栓通软胶囊全身用药治疗眼部疾病提供了理论与临床应用依据.     

苦参碱滴眼液对家兔实验性眼炎的药效学研究

目的：观察苦参碱滴眼液对家兔实验性眼炎的治疗作用。方法：将0．5％、1．0％苦参碱滴眼液、地塞米松磷酸钠滴眼液和生理盐水溶液分别滴入兔眼结膜囊内，观察药物对兔眼前房穿刺引起房水蛋白浓度升高和辣椒酊刺激引起眼炎模型的抑制作用。结果：苦参碱滴眼液能有效地抑制兔眼前房穿刺引起的房水蛋白浓度升高，且对辣椒酊刺激引起的兔外眼部、前眼部炎症反应与地塞米松磷酸钠滴眼液疗效相当。结论：苦参碱滴眼液对家兔实验性眼炎有较好的治疗作用。     

环孢素A生物黏附性纳米脂质载体的制备及在家兔眼部组织分布研究

 目的 制备适于眼部给药的环孢素A生物黏附性纳米脂质载体,考察其在家兔眼组织的分布情况,并进行眼局部刺激性研究。方法 采用熔融-乳化法制备纳米脂质载体,与生物黏附性材料泊洛沙姆407（P407）溶液混合后,得到泊洛沙姆407纳米脂质载体。运用激光粒度仪测定粒径,透射电镜观察形态,流变仪测定黏度,动态透析法研究其在人工泪液中的释药行为,HPLC测定泊洛沙姆407纳米脂质载体在家兔眼部各组织中不同时间点药物浓度,以未加入泊洛沙姆407的纳米脂质载体(CsA-NLC)及药物油滴眼液作对照,采用线性梯形法计算参数。利用家兔研究其眼局部刺激性。结果 泊洛沙姆407纳米脂质载体多为类球形粒子,泊洛沙姆407包覆于纳米脂质载体的外表,其平均粒径（41.2±0.2）nm,Zeta电位(-15.2±0.21) mV,属于非牛顿流体。体外释放表明,泊洛沙姆407纳米脂质载体具有明显的缓释特征,且体外释药行为符合单指数分布模型。含6.0%泊洛沙姆407的泊洛沙姆407纳米脂质载体在角膜、房水、虹膜的AUC_{0-24 h}分别是油滴眼液的10.75、4.45和4.62倍,是环孢素A纳米脂质载体的2.77、1.22和1.54倍,MRT分别是油滴眼液的3.28、2.26和3.46倍,是环孢素A纳米脂质载体的1.69、1.50和1.62倍。泊洛沙姆407纳米脂质载体对家兔眼部无刺激性。结论 泊洛沙姆407纳米脂质载体可延长药物在眼部的作用时间,显著提高药物在眼部各组织中的浓度,减少刺激性,作为眼部给药载体具有良好的应用前景。     

骨形成蛋白微球温敏性凝胶复合系统的制备及释药特性研究

 目的考察处方和制备工艺对人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)微球释放度的影响,并比较rhBMP-2微球和rhBMP-2微球温敏性凝胶复合系统的体外释药特性。方法采用W/O/W型乳化溶剂挥发法以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)和端羧基聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA-COOH)为材料制备空白微球。通过吸附法制备rhBMP-2载药微球。以单甲基聚乙二醇-羟基乙酸共聚物(MPEG-PLGA)为材料制备凝胶。通过试管倒转法测定凝胶剂和微球凝胶剂的初始胶凝化温度(IGT),采用夹心法酶联免疫吸附法测定释药速度。结果20%的MPEG-PLGA凝胶和微球凝胶剂的IGT均在37℃左右,微球中药物呈现三相释药模式,而微球凝胶剂体外释药曲线符合Higuchi方程。采用PLGA-COOH制备的rhBMP-2微球,其突释明显小于以PLGA为材料制备的微球,增加内水相与油相的体积比、在内水相中加入氯化钠均可以在一定程度上减小突释。结论rhBMP-2微球温敏性凝胶复合系统可以减少药物突释,具有比微球剂更理想的体外释药特性。     

腹膜透析对邻异丙基苯基甲基氨基甲酸酯毒物动力学的影响

 目的：对新型农药邻异丙基苯基甲基氨基甲酸酯(叶蝉散，IPMC)在家兔体内的代谢动力学、毒效应及腹膜透析进行研究，为临床救治此类农药中毒病人时提供理论依据。方法：对于ig 50 mg/kg IPMC染毒后的家兔在规定时间内采血，腹膜透析组采血同时收集腹膜透析液，用HPLC测定血清及腹膜透析液中IPMC的浓度，用3P87药物动力学程序计算动力学参数，并对腹膜透析组与非透析组的各项动力参数及其毒效进行比较。结果：IPMC 50 mg/kg ig后，兔体内的动力学过程符合一级吸收一室模型，生物半衰期(T_1/2)为29.01±6.5 min,腹膜透析能显著降低血中IPMC的浓度，透析组与非透析组相比，血清中IPMC的浓度-时间曲线下面积(AUC)明显减小(P＜0.05),且所有受试动物的中毒症状减轻，腹膜透析平均清除率为29.49±13.6 ml/min。结论：家兔ig IPMC中毒时，体内的代谢符合线性动力学过程，其代谢半衰期短，清除较快，且腹膜透析可以加速本品的清除。     

丹酚酸组分中各代表性成分药效贡献率的评价及其油水分配系数的整合表征

该实验利用人脐静脉内皮细胞氧化损伤实验、家兔体外凝血4项实验和大鼠心肌缺血实验相结合的方法比较了丹酚酸组分中3个代表性成分的药效活性的差异,并利用CRITIC权重法评价代表性成分的药效贡献率;结果得到丹酚酸组分中代表性成分丹酚酸B、迷迭香酸、丹参素的贡献率分别为28.85%,30.11%,41.04%。采用摇瓶法测定了丹酚酸组分在水以及不同p H缓冲液中的油水分配系数,进一步以质量权重系数和药效贡献率相结合的方法整合表征了该组分整体的油水分配系数,结果表明丹酚酸组分在正辛醇-水/p H 1.2的盐酸溶液/p H 2.0,2.5,5.0,5.8,6.8,7.4,7.8的磷酸盐缓冲液中表观油水分配系数0.32,1.06,0.89,0.98,0.90,0.13,0.02,0.20,0.56。该实验为组分整体性质的表征提供了一定的参考。     

α-细辛脑乳液型与溶液型注射剂的体内药动学和分布比较

目的:比较α-细辛脑乳液型(脂肪乳)与溶液型注射剂的体内药动学行为和组织分布情况,为拓展注射剂类型奠定基础。方法:以α-细辛脑市售注射剂(溶液)为对照,尾静脉注射给药,HPLC测定大鼠血浆和小鼠组织中的药物浓度,进行相应数据处理和结果分析。结果:大鼠单剂量静注α-细辛脑脂肪乳和溶液后,其平均血药浓度-时间曲线相似并均符合二室模型,但脂肪乳的组织分布能力强于溶液;小鼠单剂量静注脂肪乳和溶液后,α-细辛脑在小鼠肺中的分布相似,但脂肪乳增加了α-细辛脑在肝、脾中的分布,减少了其在心、肾、脑中的分布。结论:α-细辛脑脂肪乳与溶液静注后的血药浓度相似,但脂肪乳显著改变了α-细辛脑的体内组织分布。     

毛鸡骨草中总黄酮含量测定方法

目的:建立毛鸡骨草总黄酮含量的专属性测定方法。方法:采用紫外-可见分光光度法研究三乙胺显色剂及其不同含水乙醇溶液对黄酮类成分光谱吸收变化影响。结果:不同黄酮类显色后光谱吸收峰变化存在明显差异;三乙胺法适应于芹菜素黄酮类含量测定,且不同体积分数乙醇对其吸收光谱具有显著影响,当加入50%乙醇显色后光谱吸收值稳定在400nm,经方法学考察,芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖苷对照品在0.507~101.4 mg·L-1与吸光度具有良好的线性关系(r=0.999 5),平均加样回收率为98.01%,RSD 2.1%。结论:毛鸡骨草总黄酮含量的测定可采用三乙胺-50%乙醇显色法,该方法对于芹菜素母核黄酮类具有良好的专属性和准确性,操作简单易行。