胰腺癌S100A4癌基因及ppENK抑癌基因的甲基化状态

目的 分析胰腺癌及胰腺癌细胞株ppENK、S100A4基因的甲基化状态.方法 收集31例胰腺癌及相应癌旁组织、5株胰腺癌细胞株及1例正常胰腺组织.采用MSP方法分析ppENK基因甲基化状态,采用COBRA方法分析S100A4基因甲基化状态,RT-PCR检测ppENK和S100A4 mRNA,免疫组化法检测S100A4蛋白表达,并与胰腺癌临床参数进行相关性分析.结果 正常胰腺组织ppENK基因无甲基化,S100A4基因高甲基化.31例胰腺癌组织中ppENK基因甲基化率为90.3%,与临床参数无相关性;S100A4基因低甲基化率为71.0%,仅与外周血CA19-9水平呈相关性(P=0.011,OR=0.05).S100A4蛋白在胰腺癌组织中表达率为87.1%,该表达与S100A4基因低甲基化相关(P=0.017),同时与肿瘤的分化程度有关,肿瘤分化程度越低,表达阳性率越高.S100A4基因低甲基化与ppENK基因甲基化相关(P=0.019).5株胰腺癌细胞株ppENK基因均甲基化,ppENK mRNA不表达;S100A4基因均低甲基化,S100A4 mRNA均高表达.结论 胰腺癌组织ppENK基因为高甲基化状态,而S100A4基因为低甲基化状态.     

胃癌组织中E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化的临床意义

目的探讨胃癌组织中E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化的临床意义。方法采用甲基化特异性PCR方法,检测64例胃癌患者（胃癌组）病变组织及15例胃溃疡患者（对照组）正常胃组织中的E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化,分析二者与胃癌生物学特征的关系。结果胃癌组E-cadherin基因启动子区甲基化38例（59.38%）,S100A2基因启动子区甲基化36例（56.25%）;对照组分别为2、2例（13.3%、13.3%）。在胃癌不同大体分型、分化程度及淋巴结转移患者中,E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化率均有统计学差异（P〈0.05或〈0.01）。结论胃癌组织中的E-cadherin、S100A2基因启动子区呈高甲基化状态,甲基化状态与胃癌的分化、转移、侵袭有关。     

膀胱移行细胞癌组织中S100A4、MMP-2的表达及意义

目的探讨S100A4和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在膀胱移行细胞癌（TCCB）组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移的关系。方法用免疫组化SP法检测癌组织中的S100A4和MMP-2。结果S100A4及MMP-2在TC-CB组织中的阳性表达率分别为60%和55%,而正常组织中未见表达或微量表达;两者在癌组织中的表达与肿瘤浸润深度及分级有关（P均〈0.01）,S100A4与MMP-2的表达有关（r=0.66,P〈0.01）。结论S100A4与MMP-2在TCCB中的表达增加,其过量表达与TCCB浸润转移相关。     

非小细胞肺癌患者S100A4蛋白表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌S100A4蛋白的表达及临床意义。方法选择130例非小细胞肺癌患者术后癌组织标本,用免疫组织化学S-P方法,检测NSCLC中的S100A4蛋白含量并进行统计学分析。结果在NSCLC中S100A4蛋白阳性率为69．2％;鳞状细胞癌、腺癌、腺鳞癌、大细胞肺癌阳性率分别为62．7％、68．1％、70．O％、100％;S100A4蛋白表达阳性表达与年龄、淋巴结转移、远处转移及TNM临床分期明显相关;S100A4蛋白阳性组和阴性组3年生存率比较有显著差异（P〈0．05）。结论S100A4蛋白的表达和与年龄、淋巴转移、临床分期及预后有密切相关;可作为肺癌早期的标记物。     

S100A4和E-Cadherin在胰腺癌组织中的表达及相关性研究

探讨S100A4和E-Cadherin在胰腺癌中的表达及与胰腺癌浸润、转移的相关性。采用免疫组化方法,检测168例胰腺癌组织芯片中S100A4和E-Cadherin的表达情况。S100A4和E-Cadherin在癌组织中分别有82.74%和65.4%的异常表达。癌旁S100A4表达率仅9.8%(10/102);粘液性囊腺瘤57%(4/7)。E-Cadherin在癌旁和正常胰腺百分之百表达,在粘液性囊腺瘤的异常表达率30%(2/7)。S100A4和E-Cadherin异常表达在癌组织中呈正相关。S100A4在胰腺癌中的过量表达反映了肿瘤的浸润、淋巴结转移(P<0.01,P<0.01),并与E-Cadherin的下调(异常表达)相关。     

沉默人胰腺癌细胞S100A4基因表达对肿瘤相关基因mRNA表达的影响

目的 观察沉默S100A4基因表达对人胰腺癌BxPC-3、AsPC-1细胞肿瘤相关基因COX-2、bcl-2 、Surviving、MMP-9 mRNA表达的影响,探讨它们之间的关系.方法 应用靶向S100A4的小干扰RNA(siRNA)转染人胰腺癌BxPC-3、AsPC-I细胞,应用无同源性的siRNA-C转染细胞作为阴性对照,以未转染细胞作为对照组.采用RT-PCR检测干扰后细胞S100A4、COX-2、Survivin、MMP-9、bcl-2 mRNA的表达.结果 人胰腺癌BxPC-3细胞的对照组、siRNA-C组、siRNA-S100A4组的S100A mRNA表达量分别为0.661 ±0.023、0.659±0.043、0.379±0.039;COX-2 mRNA表达量分别为0.760±0.026、0.830±0.017、0.443±0.006;Survivin mRNA表达量分别为0.948±0.049、0.909±0.081、0.068 ±0.006;bcl-2mRNA表达量分别为0.462±0.018、0.421±0.049、0.184±0.025;MMP-9 mRNA表达量分别为0.813±0.008、0.908±0.063、0.246±0.027.AsPC-I细胞的对照组、siRNA-C组、siRNA-S100A4组的S100A4mRNA表达量分别为0.641±0.042、0.626±0.053、0.320±0.081;COX-2 mRNA表达量分别为0.727±0.021、0.743±0.025、0.560±0.035;Survivin mRNA表达量分别为0.994±0.032、0.984±0.049、0.063±0.005;bcl-2 mRNA表达量分别为0.458±0.004、0.537±0.046、0.181±0.007;MMP-9 mRNA表达量分别为0.698±0.011、0.718±0.073、0.199±0.013.2株细胞的siRNA-S100A4组的S100A、COX-2、Survivin、bcl-2、MMP-9 mRNA表达量均较其相应的siRNA-C组及对照组显著减少(P值均＜0.01),而siRNA-C组与对照组间的表达量差异无统计学意义.结论 S100A4通过上调COX-2、Survivin、bcl-2、MMP-9基因的表达在胰腺癌发生、发展中发挥作用.     

S100A4蛋白在肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨S100A4蛋白在肺癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法搜集45例肺鳞癌、50例腺癌、23例小细胞肺癌病例,调查其分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期等参数;采用免疫组化SP法分别检测各型肺癌组织及癌旁组织中S100A4蛋白的表达,应用Image-Pro Plus 6.0软件进行图像分析。结果所有肺鳞癌、腺癌标本中S100A4蛋白的表达均强于相应的癌旁组织,组间比较差异有统计学意义(P0.01)。小细胞肺癌细胞内未检测到S100A4的表达,但在其间质血管中检测到S100A4的表达。在鳞癌患者中的S100A4蛋白表达中,Ⅰ期IOD值为19012.12±4856.98,Ⅱ期为27654.40±5365.86,Ⅲ期为39001.38±6435.97,IV期为48753.00±7727.42(P0.05),而在腺癌中,Ⅰ期为22343.11±5156.18,Ⅱ期为31942.04±4915.36,Ⅲ期为44519.23±5435.07,Ⅳ期为51060.53±10757.74(P0.05)。鳞癌和腺癌标本中S100A4蛋白的表达有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P0.05),有远处转移组明显高于无远处转移组(P0.05)。肺鳞癌、腺癌标本中S100A4蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度无关(P0.05)。结论 S100A4蛋白在非小细胞肺癌的增殖及转移中起重要作用,检测S100A4蛋白有助于非小细胞肺癌预后的判断;同时它可能在小细胞肺癌的侵袭转移中也起到一定作用。     

配对胃癌组织中S100A4的表达

目的:分析配对胃癌组织中S100A4的蛋白与胃癌临床病理及预后的相关性.方法:构建胃癌组织芯片,免疫组化方法检测S100A4蛋白在80例胃癌组织以及配对切缘正常胃黏膜和转移淋巴结组织中的表达,分析S100A4表达与胃癌临床病理及预后的相关性.结果:S100A4在切缘正常胃黏膜、癌灶、淋巴结转移灶表达阳性率依次为7.5%、23.8%、30.0%,差异具有显著性(P=0.001);癌灶中S100A4表达与肿瘤浸润深度及TNM分期相关(P=0.051),与预后无关;转移淋巴结组织中S100A4表达出现分化(P=0.031,OR=1.756),阳性表达者预后差(P=0.0009),并且是独立预后影响因子(P=0.030,OR=2.103).结论:S100A4表达参与了胃癌的进展过程,转移淋巴结中S100A4蛋白的表达状况对胃癌预后判断价值优于原发灶的表达.     

S100A4在非小细胞肺癌中的表达及对肺癌A549细胞生物学行为的影响

目的观察肺癌组织中钙离子结合蛋白A4(S100A4)对肺癌A549细胞增殖的影响。方法免疫组织化学方法分别检测67例飞小细胞肺癌及其配对的正常肺组织中S100A4的表达水平。CCK-8法检测不同浓度(0¹0μg/ml)S100A4对肺癌A549细胞活力的影响,并分析对细胞周期的影响。结果 S100A4在非小细胞肺癌中显著高表达,表达强度与临床病理分期密切相关(P<0.01)。S100A4蛋白可以促进肺癌A549细胞的增殖,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论 S100A4蛋白可以增加肺癌细胞活性,可能与非小细胞肺癌的发生与发展相关。     

抑制S100A4表达对大鼠系膜细胞增殖状况的影响

目的明确抑制大鼠系膜细胞内S100A4的表达对系膜细胞增殖状况的影响。方法培养Wistar大鼠系膜细胞,设计合成S100A4-15siRNA,转染入系膜细胞,分3组培养细胞:10%FCS正常培养组、10%FCS+siCon组、10%FCS+siS100A4组,培养时间48 h,MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖能力及细胞周期变化,Western印迹法方法检测p21、cyclinD1、CDK2的表达。结果转染siS100A4后48 h,10%FCS+siS100A4组细胞数明显低于正常对照组和无关siRNA(SiCon)组(P<0.05,n=6),10%FCS+siS100A4组S期细胞以及S+G2/M期细胞数明显低于正常对照组及无关siRNA转染组(P<0.05,n=3)。siRNA抑制S100A4 48 h后,Western-印迹法结果显示CDK2和CyclinD1均低于正常对照组及无关siRNA转染组(P<0.05,n=3),p21也出现类似的变化趋势。结论 S100A4部分参与了系膜细胞的增殖过程中正调控作用。     

S100A6、S100B对非小细胞肺癌的变化及与预后的意义

目的分析S100A6、S100B对非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的变化及与预后的意义。 方法选取2016年10月至2018年9月我院收治的76例NSCLC患者作为对象,治疗前及治疗6个月后检测S100A6、S100B蛋白表达水平,分析S100A6、S100B对NSCLC预后的预测意义。 结果76例NSCLC患者的3年生存者11例(14.47%),死亡者65例,中位生存时间为15.5个月。死亡者治疗前后S100A6、S100B蛋白水平高于生存者(P<0.05)。死亡者TNM分期Ⅲb~Ⅳa期及出现骨转移所高于生存者,KPS评分低于生存者(P<0.05)。TNM分期Ⅲb~Ⅳa期及出现骨转移、KPS评分低、S100A6、S100B蛋白表达水平高为NSCLC预后的影响因素(P<0.05)。ROC结果,S100A6、S100B蛋白水平及联合对NSCLC预后预测的AUC分别为0.763(95%CI：0.649~0.876)、0.801(95%CI：0.694~0.907)、0.849(95%CI：0.731~0.952)。 结论S100A6、S100B蛋白表达水平对NSCLC患者预后具有临床意义。     

血清S100A9、S100A2在NSCLC患者中的变化及预后的意义

目的分析血清S100钙结合蛋白A9(S100A9)、S100钙结合蛋白A2(S100A2)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的变化及预后的意义。 方法选取2019年1月至2020年10月我院收治的46例NSCLC患者为对象,选择同期在我院进行健康体检的32例为对照组。对比两组血清S100A9、S100A2水平。统计NSCLC患者预后,依据预后情况分为生存者和死亡者。Logistic多因素回归分析分析影响NSCLC患者预后的因素。绘制工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)分析血清S100A9、S100A2联合检测对NSCLC患者预后。 结果观察组血清S100A9、S100A2水平均高于对照组(P<0.05)。截止随访结束,病死率为26.08%。Logistic回归分析结果,临床分期为Ⅲ期、分化程度为低分化、血清S100A9及S100A2水平均为影响NSCLC患者预后的危险因素(OR＝2.824、2.790、3.401、3.102,P<0.05)。ROC结果显示,血清S100A9、S100A2预测NSCLC患者预后的最佳点分别为302.11 ng/L、7.59 μg/L,两者联合的特异度为97.92%,高于血清S100A9、S100A2, S100A9、S100A2两者联合预测NSCLC患者预后的AUC为0.899,高于S100A9、S100A2单独预测的AUC(P<0.05)。 结论血清S100A9、S100A2两者联合检测对NSCLC患者预后有意义。     

食管鳞癌组织中S100A4和MMP2蛋白表达与临床病理学特征的关系

目的:探讨食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜组织中S100A4和MMP2的表达及其与食管鳞癌临床病理因素之间的关系.方法:应用SP免疫组织化学技术检测100例食管鳞癌及其癌旁正常黏膜组织中S100A4和MMP2蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中S100A4和MMP2蛋白阳性率分别为52.00%和67.00%,明显高于癌旁正常黏膜组织26.00%和3 1.00%(P<0.01).二者在食管鳞癌中的表达呈正相关,且与癌组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论:S100A4可能通过对MMP-2蛋白的调控在食管鳞癌的发生、发展及食管鳞癌的早期侵袭转移中起关键作用,有望成为评估食管癌预后的一个新的标志物.     

S100A6基因沉默对胰腺癌细胞侵袭的影响

目的 探讨S100A6基因沉默对胰腺癌细胞侵袭的影响和可能机制。方法 将不同浓度(3.125、6.25、12.5 nmol/L)的靶向S100A6的小干扰RNA( S100A6-siRNA)转染人胰腺癌BxPC3细胞,分别采用荧光实时定量PCR和蛋白质印迹法检测S100A6 mRNA和蛋白的表达,采用Transwell小室检测癌细胞侵袭能力,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性。结果 S100A6-siRNA转染组细胞的S100A6 mRNA和蛋白表达呈浓度、时间依赖性明显下调,穿膜细胞数呈浓度依赖性明显减少。12.5 nmol/L的S100A6-siRNA转染组细胞转染后48 h的S100A6 mRNA表达从对照组的(100±0.3)％降到(15.3±0.2)％(P＜0.01);S100A6蛋白的表达从(83.2±0.18)％降到(13.5±0.12)％(P＜0.01);穿膜细胞数从(44.5±2.2)个降到(7.6±1.5)个(P＜0.05)。同时,S100A6-siRNA转染组细胞的MMP-9活性明显下调。结论 抑制S100A6基因表达可抑制胰腺癌细胞侵袭转移,其机制可能与下调MMP-9活性有关。     

S100A6基因过表达对 A549肺腺癌细胞恶性表型特征的影响

目的：探讨 S100A6基因过表达对于肺腺癌细胞恶性表型的影响。方法构建重组pLeno-DCE-S100A6载体,慢病毒转染 A549肺腺癌细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应和 Western blot 鉴定 S100A6基因和蛋白表达;采用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell 和流式细胞仪分别检测细胞增殖、侵袭、细胞周期及凋亡等恶性表型特征。结果转染 S100A6基因的 A549肺腺癌细胞 S100A6 mRNA 和蛋白的表达较空载体对照组和阴性对照组均有明显的上调(P 值均<0.05);细胞增殖和侵袭能力较空载体对照组和阴性对照组增加(P 值均<0.05);细胞周期比例在 G0/G1期与空载体对照组和阴性对照组比较差异无统计学意义(P 值均>0.05),在 S 期显著高于其他两组(P 值均<0.05),在 G2/M 期显著低于其他两组(P 值均<0.05);平均凋亡率较空载体对照组和阴性对照组下降(P 值均<0.05)。结论肺腺癌细胞 S100A6基因过表达可增强肿瘤细胞的增殖和侵袭能力,增加DNA 合成,减弱凋亡等,与肿瘤发生、发展、侵袭及转移等生物学行为密切相关,有望作为肺腺癌诊断和治疗的分子标志物。     

冠状动脉粥样硬化患者外周血单个核细胞钙结合蛋白S100A8和S100A9基因表达的变化

目的:探讨外周血单个核细胞钙结合蛋白S100A8和S100A9基因表达水平与冠状动脉粥样硬化的关系。方法:稳定性心绞痛(CAD)组61例:经冠状动脉造影(CAG)发现左主干有≥50%狭窄,或在左前降支、左回旋支和右冠状动脉主支发现至少有一处病变狭窄≥75%;对照组53例:有胸痛症状或有异常心电图、异常超声心动图表现,但冠状动脉造影表现为冠状动脉管壁光滑、未见明显粥样硬化斑块的患者。CAG前获得空腹静脉血进行血常规和高敏C反应蛋白(hs-CRP)检测、提取总核糖核酸并合成互补脱氧核糖核酸用于实时定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)。结果:CAD组糖尿病比例(34.4%比15.1%,P=0.032)、合并闭塞性动脉硬化和(或)缺血性脑卒中病史比例(19.7%比0%,P=0.0006)以及hs-CRP水平[0.20比0.10,P=0.022]均高于对照组。CAD组淋巴细胞百分比低于对照组(27.2%比31.7%,P=0.019)。CAD组S100A8和S100A9基因表达水平均高于对照组[分别为0.92(0.83-1.03)比0.84(0.72-0.99),P=0.028;1.09(0.91-1.41)比0.92(0.65-1.25),P=0.009]。S100A8和S100A9基因表达水平与白细胞分类计数水平均不存在相关性(均P0.05)。糖尿病患者和无糖尿病患者的S100A8和S100A9基因表达水平无统计学意义(均P0.05)。S100A8和S100A9基因表达水平均与hs-CRP水平相关(分别为r=0.52,P=0.0000;r=0.62,P=0.0000)。结论:稳定性心绞痛患者的外周血单个核细胞S100A8和S100A9基因表达水平升高,提示其持续高表达与冠状动脉粥样硬化有关。     

小细胞肺癌脑转移患者血清S100β蛋白表达水平及临床意义

目的小细胞肺癌(SCLC)脑转移患者S100β蛋白血清表达水平及其临床意义。方法选择138例确诊SCLC患者及138例就诊于该院体检中心的健康成人志愿者(健康对照)。使用ELISA方法检测两组患者血清S100β的表达水平。结果在138例SCLC患者中,有48例发现脑转移,44例发现其他部位转移;其余46例中,20例为初次确诊,26例接受手术及术后化疗。与健康对照相比,SCLC患者血清S100β蛋白水平明显增高(P0.05)。而在SCLC患者亚群中分析发现,出现脑转移患者的血清S100β水平明显高于其他亚组患者(P0.05)。而在除脑转移外其他SCLC患者中,S100β水平未发现明显差异。在出现脑转移患者中进行钴60放疗后,患者血清S100β蛋白表达水平明显减低(P0.05)。随访发现,S100β蛋白的表达水平越高,患者的预后越差,1年内死亡率越高,存活率越低。结论 S100β蛋白可以作为SCLC脑转移的血清学标志,对于脑转移的早期预警提供重要的理论支持。     

S100A4基因表达与胃癌生物学行为的关系

目的 探讨胃癌组织中S100A4基因表达与胃癌生物学行为的关系.方法 收集45例进展期胃癌手术切除标本,以RT-PCR法检测病灶中S100A4 mRNA的表达.按不同临床病理因素和TNM分期进行分组,比较不同组间S100A4 mRNA的表达水平.结果 S100A4 mRNA表达水平与胃癌的大体类型、浸润深度(P＜0.01)及淋巴结转移程度(P＜0.05)密切相关.TNM Ⅲ/Ⅳ期病例的S100A4表达水平明显高于Ⅰ/Ⅱ期病例(P＜0.01).结论 S100A4表达与胃癌生物学行为密切相关,其高表达是胃癌高侵袭能力和预后不良的标志之一.     

人肺腺癌组织S100 A6蛋白表达及其临床意义

目的：探讨S100A6蛋白表达对肺腺癌患者的临床特征及其转移预后的影响。方法收集手术切除、经病理证实的肺腺癌及配对癌旁正常肺组织标本各98例,通过 Western blot 检测S100A6蛋白表达。结果肺腺癌组织 S100A6蛋白表达量显著高于癌旁正常肺组织(t=19.884,P<0.05);S100A6蛋白表达与肺腺癌患者性别、年龄无相关性(P 值均>0.05),与患者吸烟指数、肿瘤细胞分化、淋巴结转移、远处转移、临床分期均有显著相关(P 值均<0.05);Kaplan-Meier 法比较低表达组和高表达组患者的生存期,差异有统计学意义(P <0.05);COX比例风险多因素回归分析发现,肿瘤分化、TNM分期和 S100A6蛋白表达是影响肺腺癌患者预后的独立因素。结论 S100A6在肺腺癌组织显著高表达,可以作为与肿瘤发生、发展密切相关的一种标志蛋白。     

靶向性沉默DNMT1基因对胰腺癌细胞DNA甲基化的影响

目的 观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因沉默后对人胰腺癌PaTu8988细胞的DNMT活性及hMLH-1基因CpG岛DNA甲基化状态的影响.方法 由美国Ambion公司设计合成DNMT1siRNA和阴性对照siRNA,分别用15、30 nmol/L的浓度转染胰腺癌PaTu8988细胞,以未转染组细胞作为对照.应用实时PCR和蛋白质印迹法检测DNMT1 mRNA和蛋白的表达;用DNMT活性检测试剂盒检测其活性;用亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)法检测hMLH-1基因CpG岛的甲基化状态;实时PCR法检测hMLH-1 mRNA的表达.结果 转染48 h后,DNMT1 siRNA15、30 nmol/L组细胞DNMT1 mRNA表达量分别为0.573±0.026和0.143±0.044,显著低于对照组的1.020±0.217及阴性siRNA 15、30 nmol/L组的0.900±0.475和0.938±0.327(P值均＜0.05);DNMT1 siRNA组的DNMT1蛋白表达亦低于对照组和阴性siRNA组.DNMT1 siRNA15、30 nmol/L组细胞DNMT活性分别为0.364±0.124和0.250±0.072,明显低于对照组的0.931±0.065及阴性siRNA 15、30 nmol/L组的0.665±0.055和0.472±0.040.DNMT活性与DNMT1 mRNA表达呈正相关(r=0.69,P＜0.01).DNMT1 RNA干扰后导致hMLH-1基因CpG位点的8个甲基化减少到1个甲基化.结论 DNMT1 siRNA能特异性抑制胰腺癌PaTu8988细胞DNMT1基因的表达,明显抑制DNMT的活性,并引起hMLH-1基因CpG岛去甲基化.