升陷乌梅汤对激素干预哮喘大鼠TGF-β1/Smad信号通路及气道重塑的影响

目的观察升陷乌梅汤对激素干预哮喘大鼠TGF-β1/Smad信号通路和气道重塑的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、哮喘组、激素组、布地奈德组、升陷乌梅汤组。除正常组外,其余各组采用卵蛋白致敏、雾化激发建立哮喘大鼠模型,并予各给药组大鼠腹腔注射糖皮质激素干预,在此基础上予升陷乌梅汤组大鼠灌胃、布地奈德组大鼠雾化吸入。观察各组大鼠肺功能及支气管病理改变,并采用Western blot及RT-qPCR法检测TGF-β1/Smad信号通路相关因子蛋白及mRNA表达的变化。结果①与正常组比较,哮喘组大鼠肺组织中胶原蛋白表达、WAi/Pbm、WAm/Pbm及WAe/Pbm升高(P0.05),信号通路因子TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白和mRNA表达及p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达均升高(P0.05),而肺功能中FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF50%及FEF75%均降低(P0.05),肺组织中Ai/Pbm以及通路因子Smad6、Smad7的蛋白和mRNA表达均降低(P0.05)。②与哮喘组比较,各给药组均可减少肺组织中WAi/Pbm、WAm/Pbm和WAe/Pbm(P0.05),降低TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达及TGF-β1、Smad2、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P0.05),并升高FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF50%和FEF75%(P0.05),增加Smad6、Smad7的mRNA表达(P0.05);且升陷乌梅汤组较激素组可进一步减少WAi/Pbm、WAm/Pbm、WAe/Pbm,降低TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白和mRNA表达及p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P0.05),并升高FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF75%,增加Smad6的蛋白和mRNA表达以及Smad7的mRNA表达(P0.05)。结论升陷乌梅汤可在激素干预基础上进一步阻止TGF-β1/Smad信号通路的异常激活,抑制气道重塑发展,延缓肺功能下降。     

加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型气道重塑及转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响

目的:观察加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型气道重塑及转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路的影响。方法:选取30只雄性SD大鼠并随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组、布地奈德组及中药组,除正常组外其余组以卵蛋白致敏、雾化激发方法建立哮喘大鼠模型,除正常组和哮喘组外其余均予地塞米松干预并逐步撤减,布地奈德组予以普米克令舒雾化,中药组予以加减乌梅丸颗粒灌胃。光镜下观察各组大鼠肺组织病理形态学改变,测定气道壁面积百分比(Wat%)、气道平滑肌面积百分比(Wam%),免疫组织化学法比较各组Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)表达水平,蛋白质印迹法和荧光定量PCR法比较TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7蛋白及基因表达水平。结果:与正常组比较,哮喘组大鼠气道壁及平滑肌层明显增厚,管腔变窄,Wat%、Wam%升高,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及基因表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05),Smad7表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与哮喘组比较,地塞米松组Wat%降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、Smad3蛋白及基因表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与地塞米松组比较,中药组Wat%降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及基因表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加减乌梅丸颗粒可通过调控TGF-β1/Smad信号通路从而减少气道平滑肌增生以及CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白沉积,抑制气道壁增厚,延缓气道重塑的发展。     

加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型肺通气功能及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的：观察加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型肺通气功能及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法：将30只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、哮喘组、激素组、阳性药组及中药组,除正常组以外,其余各组均采用卵蛋白致敏、雾化激发的方法建立哮喘大鼠模型;除正常组和哮喘组外其余各组均予地塞米松干预并逐步撤减,在此基础上阳性药组予普米克令舒雾化吸入,中药组予加减乌梅丸颗粒灌胃。用药7周后检测大鼠肺通气功能,HE染色观察大鼠肺组织病理形态学改变,Western blotting法检测大鼠肺组织CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白相对表达量,RT-qPCR法检测大鼠肺组织CollagenⅠmRNA、CollagenⅢmRNA相对表达量。结果：哮喘组大鼠用力肺活量（FVC）、0.2秒用力呼气容积（FEV0.2）、0.2秒内的平均流速（FEV0.2/FVC%）、用力最大呼气流速（PEF）、用力中期呼气流速（FEF25%～75%）均显著低于正常组（P<0.05）;激素组大鼠FVC、FEV0.2、FEV0.2/FVC%、PEF、FEF25%～75%与哮喘组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;中药...     

麻芍平喘汤对哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用

目的:观察麻芍平喘汤对哮喘大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA蛋白)的影响,初步探讨麻芍平喘汤防治哮喘气道重塑的可能作用机制。方法:采用10%卵白蛋白加氢氧化铝干粉10 mg致敏和激发,建立哮喘大鼠气道重塑模型,将70只大鼠随机分为正常组、模型组、麻芍平喘低剂量组、麻芍平喘中剂量组、麻芍平喘高剂量组、地塞米松组、阳和平喘组,造模成功后,采用麻芍平喘汤、地塞米松和阳和平喘汤进行干预,干预结束后,HE染色法观察气道病理切片,肺功能测定仪测定用力呼气肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、最大呼气流量(PEF)与0.3 s用力呼气容积占用力呼气肺活量的比值(FEV0.3/FVC),RT-PCR法检测TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA在肺组织中的表达。结果:模型组大鼠FVC、FEV0.3、PEF明显低于正常组(P0.01),FEV0.3/FVC值明显高于正常组(P0.01)。各给药组大鼠FVC、FEV0.3、PEF均有改善(P0.05);模型组大鼠肺组织TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA蛋白表达水平明显高于正常组,各给药组灰度值低于模型组(P0.01),麻芍平喘高剂量组和阳和平喘组与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:麻芍平喘汤能够改善肺功能,降低TGF-β1、α-SMA的蛋白表达,抑制支气管平滑肌增生,减轻气道壁厚度,从而减轻气道炎症,延缓气道重塑。     

宣肺健脾法对哮喘大鼠转化生长因子-β1及其抑制型Smad的影响

目的:观察宣肺健脾法对哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制。方法:建立哮喘大鼠模型,观察支气管-肺组织病理学改变,检测支气管壁厚度(Wat)、平滑肌厚度(Wam)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体和Smad7的表达。结果:造模后Wat、Wam、TGF-β1及其受体Ⅰ(TβRⅠ)表达明显增加(P<0.01),Smad7 mRNA显著下调(P<0.01)。药物干预后,Wat、TGF-β1、TβRⅠ显著降低(P<0.05),Smad7 mRNA显著上调(P<0.01),中药组尤为明显。结论:宣肺健脾法可能通过抑制哮喘大鼠TGF-β1、TβRⅠ的过度表达,上调抑制型Smad,影响TGF-β/Smads通路的转导,减轻气道重塑。     

宣肺健脾法对哮喘大鼠转化生长因子-β1及其受体表达的影响

目的:观察宣肺健脾法中药哮逐平对支气管哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠32只随机分为正常对照组(A组)8只、哮喘模型组(B组)8只、地塞米松组(C组)8只、哮逐平组(D组)8只。除A组外,余组动物建立哮喘模型。HE染色,观察支气管-肺组织病理学改变,以医学图像分析软件测量支气管基底膜周径(Pbm)、支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数。免疫组化PV二步法染色,应用上述图像分析软件检测支气管-肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体Ⅰ(TβRⅠ)、受体Ⅱ(TβRⅡ)水平的积分光密度(IOD)。结果:与A组相比,B组EOS百分比、Wat、Wam和支气管-肺组织TGF-β1、TβRⅠ表达明显增加,具有非常显著性意义(P0.01)。经药物干预后,C和D组EOS百分比、Wat、Wam减少,支气管-肺组织TGF-β1、TβRⅠ表达显著降低(P0.05)。D组EOS百分比、Wat、Wam、TGF-β1和TβRⅠ减少尤为明显,与B组相比,均有显著差异(P0.05),其中Wat、Wam与A组相比,无显著性差异(P0.05)。与C组相比,D组EOS百分比、TGF-β1和TβRⅠ表达明显减少,具有非常显著性意义(P0.01)。结论:宣肺健脾法中药可能通过抑制哮喘大鼠支气管-肺组织TGF-β1及其受体的过度表达而影响平滑肌增殖、减轻气道壁增厚,干预气道重塑。     

宣肺健脾中药对哮喘大鼠支气管-肺组织病理学和转化生长因子-β_1的影响

目的观察宣肺健脾中药哮逐平对支气管哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制。方法 SPF级雄性Wistar大鼠32只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、地塞米松组(C组)、哮逐平组(D组),每组8只。除A组外,其余组动物建立哮喘模型。HE染色,观察支气管-肺组织病理学改变,以医学图像分析软件测量支气管基底膜周径(Pbm)、支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam)。免疫组化PV二步法染色,应用上述图像分析软件检测支气管-肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的积分光密度(IOD)。结果与A组相比,B组Wat、Wam和支气管-肺组织TGF-β1含量明显增加,差异有统计学意义(P0.01)。经药物干预后,C、D组Wat、Wam减少及支气管-肺组织TGF-β1含量显著降低(P0.05)。D组Wat、Wam和TGF-β1减少尤为明显,与B组相比,差异有统计学意义(P0.05),其中Wat、Wam与A组相比,差异无统计学意义(P0.05)。与C组相比,D组TGF-β1含量明显下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论宣肺健脾中药可能通过抑制哮喘大鼠支气管-肺组织TGF-β1的过度表达而影响平滑肌增殖、减轻气道壁增厚,干预气道重塑。     

宣肺健脾中药对哮喘大鼠肺组织TGF-β1、TβR Ⅰ、TβRⅡ表达的影响

目的:观察宣肺健脾方对哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制.方法:将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组和宣肺健脾方组.除正常对照组外,其余各组动物建立哮喘模型.观察支气管一肺组织病理学改变,测量支气管基底膜周径、支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度( Wam),支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数.免疫组化PV二步法检测TGF-β/Smads信号通路中配体(TGF-β)及其受体Ⅰ(TβR Ⅰ)、受体Ⅱ(TβRⅡ)水平.结果:模型对照组大鼠支气管肺组织有大量炎性细胞浸润,支气管腔内可见黏液栓和炎性细胞,支气管平滑肌层明显增厚;地塞米松组炎性细胞浸润减少,气管壁和平滑肌增厚明显减轻,黏膜结构较完整;宣肺健脾方组支气管黏膜上皮无明显增厚,管壁及其周围少量炎性细胞浸润.地塞米松组和宣肺健脾方组的Wat、Wam减少,宣肺健脾方组Wat、Wam较模型对照组低,差别有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01),但与正常对照组对比,差别无统计学意义(P＞0.05).与模型对照组对比,两药物组BALF中的嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(WEU)降低,巨噬细胞(MAC)升高,差别有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组相比,模型对照组支气管一肺组织TGF-β1、TβR Ⅰ表达增加,差别有统计学意义(P＜0.01);2药物组TGF-β1、TβR Ⅰ表达降低,与模型对照组对比,差别有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01);宣肺健脾方组TGF-1β1、TβRⅠ表达较地塞米松组低,差别有统计学意义(P＜0.01).结论:宣肺健脾法可能通过抑制哮喘大鼠TGF-β1及其受体的过度表达而干预气道重塑.     

活血化瘀法对哮喘大鼠气道重塑模型的调控作用研究

目的观察中医活血化瘀法对哮喘大鼠气道重塑后肺组织及TGF-β1、MMP-9的影响,探讨活血化瘀法干预气道重塑的作用机制。方法将SPF级SD成年雄性大鼠30只随机分为正常组、模型组、药物干预组。用卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏与激发建立大鼠哮喘气道重塑模型,激发8周后处死,观察各组大鼠肺组织病理情况,采用ELISA法检测大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平。结果模型组大鼠气道炎细胞浸润及支气管平滑肌增厚,肺组织TGF-β1、MMP-9水平显著高于正常组(P均0.05);药物干预组气道炎细胞浸润减少,管壁趋于正常,肺组织TGF-β1、MMP-9水平明显低于模型组(P均0.05)。结论TGF-β1、MMP-9参与哮喘气道重塑过程,活血化瘀法可通过抑制TGF-β1、MMP-9水平而干预阻断哮喘气道重塑。     

基于“痹-虚”病机中药对肺纤维化大鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:研究通痹补肺方对肺纤维化大鼠的保护作用及可能的作用机制。方法:60只大鼠随机分为3组,空白组、模型组和中药组(通痹补肺方组),每组20只。除空白组外,其余各组用博来霉素气管内注射造成肺纤维化模型,造模28天后给药,中药组给予通痹补肺方12.4g/kg/d灌胃,空白组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续给药28天。首先测定大鼠肺功能(FVC、FEV0.3/FVC、PEF、MVV、Cdyn),继之处死大鼠行肺组织病理学观察,同时应用免疫组化及免疫印迹法测定大鼠肺组织中TGF-β、Smad3、Smad7及Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结果:光镜下显示,模型组大鼠正常肺泡结构破坏,多数肺泡壁增厚,可见纤维组织增生,伴有少许炎性细胞浸润,呈中重度纤维化样改变,中药组大鼠肺纤维化及肺泡炎性程度均较模型组明显减轻。各组大鼠肺功能比较,FVC、FEV0.3/FVC、PEF、MVV值各组之间比较均无差异(P0.05);与模型组比较,中药组及空白组Cdyn值明显升高(P0.05),中药组及空白组肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低(P0.05),TGF-β、Smad3含量明显下降(P0.05),Smad7含量明显上升(P0.05);与空白组比较,中药组及模型组Cdyn值明显降低(P0.05),中药组及模型组肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低(P0.05),TGF-β、Smad3含量明显下降(P0.05),Smad7含量明显上升(P0.05)。结论 :通痹补肺方能够通过抑制肺纤维化大鼠TGF-β及Smad3的异常增高,同时提高肺纤维化大鼠Smad7水平,达到抑制肺纤维化大鼠胶原异常增殖的作用。     

基于TGF-β1/Smad2/3信号通路研究芪参六味方对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的:采用芪参六味方干预自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化(MF)模型,观察其对大鼠MF的影响并探讨其作用机制。方法:SHR大鼠15只,分为模型组、中药组和氯沙坦钾组,每组5只。另魏-凯二氏大鼠(WKY)5只作为对照组。干预12周后检测各组大鼠超声心动图,处死后取左室心肌组织进行相关检测。采用Masson染色及苦味酸-天狼猩红染色,观察心肌组织胶原含量与分布;采用Western blot法测定各组大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1、转化生长因子(TGF)-β1、Smad2、Smad3蛋白的表达;采用RT-PCR法检测TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达。结果:干预12周后,与模型组比较,中药组镜下胶原纤维明显减少,排列较均匀,E/E’、心肌组织胶原纤维面积百分比、CollagenⅠ/CollagenⅢ明显降低(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-9、TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达量均降低(P<0.05),T...     

TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的表达及丹参的干预作用

目的:观察TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的动态变化,探讨丹参干预气道重建的作用机制。方法:SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组,7个小组。用卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏与激发建立大鼠哮喘气道重塑模型,激发2、4、8周后处死。观察哮喘大鼠肺组织病理变化,采用ELISA法检测大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平。结果:哮喘大鼠气道炎性细胞浸润及支气管平滑肌增厚,随着激发时间的延长逐渐加重;同时,哮喘大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平逐渐升高,哮喘4周组、哮喘8周组较正常对照组显著升高(P0.05、P0.001);使用丹参干预后,丹参8周组较哮喘8周组显著降低(P0.001)。结论:气道重建的程度随着哮喘发作及时间推移而发生动态变化;TGF-β1、MMP-9参与哮喘气道重建过程;活血化瘀药丹参可通过抑制TGF-β1、MMP-9水平而干预阻断哮喘气道重建。     

薏苡附子散对支气管哮喘患者一秒率及生活质量的影响

目的:探讨薏苡附子散对支气管哮喘急性发作期(寒哮证)患者肺功能及生活质量的影响。方法:120例患者按配对设计的方法分为两组,治疗组60例采用薏苡附子散治疗,对照组60例采用氨茶碱治疗,两组患者均同时吸入用布地奈德混悬液。治疗10 d后观察比较两组的临床疗效及FEV1/FVC%的变化,随访1年观察FEV1/FVC%及用哮喘控制测试(ACT)量表统计患者哮喘控制情况。结果:治疗组与对照组都能改善患者通气状况,但治疗组FEV1/FVC%较对照组明显改善(P0.05),差异有显著性意义;随访1年显示哮喘患者缓解期FEV1/FVC%改善,用ACT量表显示治疗组哮喘控制情况较对照组明显改善,差异均有统计学意义。结论:薏苡附子散联合布地奈德治疗哮喘比氨茶碱联合布地奈德更能改善肺功能,延缓肺功能的减退,提高患者的生活质量。     

小青龙汤对0505大鼠TGF-β1／Smad3信号通路的影响

目的：探讨小青龙汤对哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路的影响。方法：将24只SPF级sD雄性大鼠随机分为正常对照组（A组）,支气管哮喘组（B组）和小青龙汤组（c组）,每组各8只。以卵清白蛋白（OVA）致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。小青龙汤干预支气管哮喘大鼠后,HE染色观察各组气道壁嗜酸性粒细胞浸润及气道平滑肌增生情况;应用图像分析技术测定各组肺内支气管Wat、Wam等重塑指标;免疫组织化学法检测各组肺组织TGF-β1、Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附（ELISA）法测定各组血清中TGF-β1的浓度。结果：B组、C组大鼠Wat、warn较A组明显增加,差异均有统计学意义（P〈0．01）,C组Wat、Warn较B组低,差异具有统计学（P〈0．01）;免疫组织化学显示B组和C组TGF-β1及Smad3蛋白的表达明显高于A组,差异具有统计学（P〈0．01）,B组高于c组,差异具有统计学（P〈0．01）;血清中TGF-β1的浓度比较,B组和c组明显高于A组,差异具有统计学（P〈0．01）,B组高于c组,差异具有统计学（P〈0．01）。结论：小青龙汤可能通过影响支气管哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路来拮抗气道重塑,从而起到治疗作用。     

中西医结合治疗对大鼠哮喘模型气道重组影响的实验研究

目的观察速效平喘合剂与激素单独及联合应用对气道重组的病理形态学改变以及对TGF-β1表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积的影响。方法观察中药与激素单独及联合应用对气道壁TGF-β1与EOS以及对胶原Ⅰ、Ⅲ的影响,并采用图像分析光密度进行半定量评定。结果 ①速效平喘合剂与糖皮质激素联合应用能显著降低哮喘模型大鼠肺泡灌洗液(BALF)中EOS的含量,明显减轻由EOS浸润引起的慢性变态性炎症反应。②速效平喘合剂与糖皮质激素联合应用能显著降低TGF-β1及胶原Ⅰ、Ⅲ的表达,干预哮喘气道重组,发挥治疗作用。结论 ①EOS的浸润、TGF-β1表达及胶原Ⅰ、Ⅲ的沉积在气道重组中发挥着重要的作用;中药速效平喘合剂与激素的联合运用能够减少EOS的浸润以及TGF-β1的表达和胶原Ⅰ、Ⅲ的沉积。②在气道重组形成早期糖皮质激素或中药速效平喘合剂预防性给药,可明显预防或延缓气道重组的发生。     

芪苈强心胶囊对心肌梗死后心力衰竭大鼠肺结构重塑作用及机制

目的观察芪苈强心胶囊防治心肌梗死(心梗)后心力衰竭大鼠肺结构重塑的作用及机制。方法结扎大鼠冠脉左前降支,建立急性心梗模型,随机分为模型组(灌胃蒸馏水1 m L/100 g,n=13),芪苈强心组[中药组,灌胃芪苈强心胶囊药液1 g/(kg·d),n=9],另设假手术组(灌胃蒸馏水1 m L/100 g,n=10)。干预4周后,应用超声心动图检测大鼠的心功能;取肺组织采用HE染色、Masson染色方法观察肺的结构学变化;用Western blot方法、免疫组织化学法检测肺组织α-SMA、CollagenⅠ、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达情况。结果与假手术比较,模型组EF、FS降低(P0.05),LVIDd、LVIDs、EDV、ESV、α-SMA、CollagenⅠ、TGF-β1、pSmad3蛋白表达升高(P0.05),模型组肌型血管比例及肺组织胶原面积升高(P0.05)。与模型组比较,中药组EF、FS升高(P0.05),LVIDs、ESV、肺α-SMA、CollagenⅠ、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达降低(P0.05),中药组肌型血管比例及肺组织胶原面积域降低(P0.05)。结论芪苈强心胶囊可改善心梗后心力衰竭大鼠肺结构重塑程度,其作用机制可能通过调控TGF-β1/Smad3信号通路实现。     

三七含药血清对成纤维细胞功能及VEGF、TGF-β、Collagen Ⅰ表达的影响

目的:探讨三七含药血清对L929成纤维细胞增殖、迁移及血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)表达的影响。方法:将28只SPF级SD大鼠随机分为对照组及三七低、中、高剂量组,制备血清。体外培养小鼠成纤维细胞系L929,对照组给予生理盐水血清,低、中、高剂量组给予相应的三七含药血清干预。CCK-8法检测成纤维细胞增殖,划痕实验检测成纤维细胞迁移,RT-qPCR及Western Blot分别检测VEGF、TGF-β、Collagen Ⅰ的mRNA及蛋白表达。结果:与对照组比较,低剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比升高(P<0.05),VEGF、TGF-β蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);中剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比提高(P<0.05),VEGF、TGF-β、Collagen Ⅰ蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);高剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比降低(P<0.05),VEGF、TGF-β蛋白及mRNA表达下...     

防风-乌梅配伍含药血清对气道平滑肌细胞增殖模型表型转化调控作用

目的:观察防风-乌梅含药血清对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖模型表型转化调控的影响,探索防风-乌梅配伍抑制气道重塑的机制,揭示中药配伍机制。方法:采用血小板衍生因子(platelet derived growth factor,PDGF)诱导的方式建立ASMCs增殖模型;分别给予大鼠灌胃生理盐水、防风、乌梅、防风-乌梅(生药15. 425,15. 425,30. 85 g·kg-1·d-1药液)制备药物血清;取4代对数生长期的人支气管平滑肌细胞(human bronchial smooth muscle cell,HBSMC),将其分为空白组、细胞模型组、正常大鼠血清组、正常大鼠血清细胞模型组、激素干预组、防风血清组、乌梅血清组、防风-乌梅血清组,对细胞给予相应处理,分别采用免疫荧光、蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测ASMCs收缩型标志蛋白α-肌动蛋白(α-actin),合成型标志蛋白骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达,观察表型转化情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测ASMCs分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量。结果:与空白组、正常大鼠血清组比较,模型组、正常大鼠血清细胞模型组α-actin荧光强度与蛋白表达较弱,OPN荧光强度与蛋白表达较强,VEGF,TGF-β,IL-6含量明显提高(P 0. 05);与模型组、正常大鼠血清细胞模型组比较,防风-乌梅血清组与激素干预组可显著增强α-actin荧光强度及蛋白表达,降低OPN荧光强度及蛋白表达,降低VEGF,TGF-β,IL-6含量(P 0. 05)。结论:防风-乌梅配伍的抑制气道重塑作用,可能与抑制ASMCs由收缩型向合成型的转化,从而减少VEGF,TGF-β,IL-6等活性物质释放有关。     

防风-乌梅配伍对哮喘模型小鼠气道重塑的影响

目的:观察防风-乌梅配伍对哮喘模型小鼠气道重塑的影响,并探索其机制,为进一步研究中药配伍奠定基础。方法:70只BALB/C小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、防风组、乌梅组、防风-乌梅组、防风-乌梅合激素干预组。以卵蛋白(OVA)建立哮喘模型。造模成功后连续用药干预7 d。防风组、乌梅组、防风-乌梅组、防风-乌梅合激素干预组分别于上午9∶00给予防风(3.082 5 g·kg~(-1)·d~(-1))、乌梅(3.082 5 g·kg~(-1)·d~(-1))、防风-乌梅(6.165 g·kg~(-1)·d~(-1))、防风-乌梅(6.165 g·kg~(-1)·d~(-1))药液灌胃,其余各组给予生理盐水灌胃;激素干预组、防风-乌梅合激素干预组分别于下午3∶00给予0.02%布地奈德雾化吸入,其余各组给予生理盐水雾化吸入。观察各组小鼠肺组织病理改变,测量支气管平滑肌厚度,ELISA法测定肺组织MMP-9、TIMP-1、IL-6及IL-8的含量。结果:防风-乌梅配伍可改善哮喘模型小鼠肺组织炎症,减少支气管平滑肌厚度,降低肺组织IL-6、IL-8、MMP-9、TIMP-1的表达及MMP-9/TIMP-1的比值(P0.05或P0.01),以防风-乌梅合激素干预组最佳,防风-乌梅组优于防风组和乌梅组。相关性分析提示IL-6、IL-8与MMP-9、TIMP-1显著相关。结论:防风-乌梅"相须为用"配伍可改善哮喘气道重塑,其机制可能与减轻支气管平滑肌肥厚、改善气道炎症、降低肺组织MMP-9、TIMP-1的表达及MMP-9/TIMP-1的比值有关。     

针刺对哮喘大鼠气道重构及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:探讨针刺治疗哮喘的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和药物组。采用卵蛋白致敏的方法制备哮喘模型。针刺组选用邵氏"五针法",即"肺俞""大椎""风门"穴进行治疗,留针20min,每日1次,共10次。药物组以100mg/kg的剂量腹腔注射氨茶碱注射液。治疗结束后,取肺组织HE染色,采用图像分析的方法测定气道壁和气道平滑肌厚度,评价气道重构程度;免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠小气道中的表达情况。结果:模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度明显高于空白组(P0.01),肺组织中TGF-β1表达明显高于空白组(P0.01);经治疗,药物、针刺两组支气管管壁和平滑肌厚度较模型组均有降低(P0.05),TGF-β1表达较模型组明显减少(P0.01);针刺组和药物组比较,支气管管壁和平滑肌厚度的差异无统计学意义(P0.05),TGF-β1表达针刺组明显低于药物组(P0.05)。结论:邵氏"五针法"能下调小气道中TGF-β1的表达,进而干预气道结构的改变,这可能是针刺防治哮喘的作用机制之一。