小胶质细胞和巨噬细胞极化与多发性硬化症的研究进展

多发性硬化症(MS)属于中枢神经系统自身免疫性脱髓鞘疾病.小胶质细胞和巨噬细胞是参与MS病理过程的主要细胞,具有促炎性(M1)和抗炎性(M2)两种极化表型.两种表型的动态变化,可调控疾病的发生和发展.调节小胶质细胞/巨噬细胞极化可能改善MS的病情.文章主要就小胶质细胞和巨噬细胞的来源、特性和功能,调控小胶质细胞/巨噬细...     

补阳还五汤调控小胶质细胞/巨噬细胞极化抑制大鼠脑缺血后炎症反应研究

[目的]研究补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction, BYHWD)对大鼠脑缺血后小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化及神经炎症的影响。[方法]采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,缺血90 min后再灌注。将大鼠随机分为假手术组、模型组和BYHWD组,BYHWD组缺血后24h开始予BYHWD(13g·kg-1)灌胃,连续给药14d。缺血后第14天处死大鼠,分别采用Iba1/CD16/32、Iba1/CD206免疫荧光双标染色检测缺血区M1型和M2型小胶质细胞/巨噬细胞表型,qRT-PCR检测M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD86、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)及促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的m RNA表达;M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD206、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)及抗炎因子白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的mRNA表达。[结果]免疫荧光双标染色结果表明,与模型组比较,BYHWD显著减少缺血区M1型小胶质细胞/巨噬细胞(CD16/32+)数量(P0.01),增加M2型小胶质细胞(CD206+)数量(P0.05)。qRT-PCR结果表明,与模型组比较,BYHWD显著下调M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD86、iNOS和促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达(P0.01),上调M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD206、Arg-1和抗炎因子IL-10、TGF-βmRNA表达(P0.01)。[结论] BYHWD可能通过促进激活的小胶质细胞/巨噬细胞从M1型向M2型转换,从而抑制大鼠脑缺血后炎症反应。     

黄芪甲苷通过促进小胶质细胞/巨噬细胞M2型极化抑制大鼠脑缺血后炎症反应

目的: 研究黄芪甲苷对大鼠脑缺血后小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化及炎症反应的影响。方法: 将48只大鼠随机分为手术对照组、模型对照组和黄芪甲苷组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型。黄芪甲苷组造模后即刻腹腔注射黄芪甲苷（40 mg/kg）,随后1次/d,连续给药3 d。各组术后第1、3天采用改良的神经损伤严重程度评分（mNSS）和角试验进行神经功能评价;术后第3天采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染料（TTC）染色检测脑梗死体积;实时逆转录PCR检测M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标志物CD86、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达,以及M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标志物CD206、精氨酸酶1（Arg-1）、类几丁质酶3样分子1/2（YM1/2）及抗炎因子IL-10、TGF-β的mRNA表达;免疫荧光双标记法检测脑缺血周边区CD16/32/Iba1和CD206/Iba1的表达。结果: 与模型对照组比较,黄芪甲苷组mNSS分值降低、右转次数减少（P < 0.05或P < 0.01）,脑梗死体积减小（P < 0.01）,M1型小胶质细胞/巨噬细胞标志物CD86、iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达下调（均P < 0.01）,M2型小胶质细胞/巨噬细胞标志物CD206、Arg-1、YM1/2、IL-10和TGF-β的mRNA表达上调（均P < 0.01）,脑缺血区CD16/32⁺/Iba1⁺细胞数量减少（P < 0.05）,CD206⁺/Iba1⁺细胞数量增加（P < 0.01）。结论: 黄芪甲苷对大鼠脑缺血损伤有保护作用,可能与促进小胶质细胞/巨噬细胞从M1型向M2型转化、抑制炎症反应有关。     

小胶质细胞极化在脑出血中的研究进展

<正>脑出血是指原发性非外伤性脑实质内出血,约占急性脑血管病的20%～30%,年发病率为(60～80)/10万人,急性期病死率约为30%～40%^[1],其高发病率、死亡率及致残率严重危害人类身心健康,给患者家庭及社会带来巨大经济负担。小胶质细胞是中枢神经系统重要的免疫细胞之一,在脑出血后生理病理反应中发挥着重要作用。目前一致认为小胶质细胞在脑出血后可能发挥着双重作用,其具体机制可能与小胶质细胞的不同表型相关。     

骨髓间充质干细胞源性外泌体促进小胶质细胞/巨噬细胞M2极化抑制急性期脑缺血大鼠炎症反应

为探究骨髓间充质干细胞（bone marrow meaenchymal stem cells, BMSCs）源性外泌体（exosomes, Exos）对急性期脑缺血大鼠小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化的影响,采用超高速离心法分离提取外泌体并鉴定;采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型;采用Longa评分和角实验评价大鼠神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazole chloride, TTC）染色检测大鼠脑梗死体积;采用CD16/32/Iba1、CD206/Iba1免疫荧光双标法检测小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2表型;采用RT-qPCR检测大鼠脑缺血周边区CD86、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase, iNOS）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor, TNF-α）、精氨酸酶1（arginase-1, Arg-1）、白细胞介素-10（interleukin-10, IL-10）和转化生长因子β（transforming growth factor beta, TGF-β）的mRNA表达。实验结果表明,BMSC-Exos减少缺血周边区CD16/32⁺/Iba1⁺阳性细胞数量（P < 0.01）,增加CD206⁺/Iba1⁺阳性细胞数量（P < 0.01）,减少iNOS、CD86和TNF-α的mRNA表达,增加Arg-1、TGF-β和IL-10的mRNA表达（P < 0.05或P < 0.01）。本研究提示BMSC-Exos调控急性期脑缺血大鼠小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化,减轻神经炎症,改善脑缺血损伤。     

小胶质细胞对脑缺血的影响

小胶质细胞是中枢神经系统的重要免疫细胞,在脑缺血后的炎症反应过程中发挥炎性损伤和神经保护双重作用。脑缺血发生后,小胶质细胞出现活化和增生,并被激活为M1型和M2型,不同的小胶质细胞表型对脑缺血的作用不同。M1型极化的小胶质细胞通过释放促炎性介质抑制中枢神经系统恢复,而M2型极化通过释放抗炎细胞因子、转化生长因子、脑源性神经生长因子等促进组织的修复和再生。本文将对脑缺血后小胶质细胞的活化及机制、迁移增生、极化及小胶质细胞对脑缺血的影响作一综述。     

大鼠小胶质细胞及巨噬细胞对胶质瘤C6细胞株迁移能力的影响

目的 探讨大鼠小胶质细胞及外周血巨噬细胞对胶质瘤C6细胞株迁移能力的影响.方法 将大鼠小胶质细胞及外周血单核细胞诱导分化形成的巨噬细胞分别与胶质瘤C6细胞共培养,以大鼠成纤维细胞共培养为阳性对照,单纯胶质瘤C6细胞为空白对照,共培养0、24、48 h分别行划痕实验,于划痕后6 h观察划痕实验结果;共培养24、48 h时以CD11b标记、流式分选分离小胶质/巨噬细胞及C6细胞,行Western blot检测0、24、48 h小胶质/巨噬细胞IL-10、IL-18和MMP-9及C6细胞株TGF-β、FAS配体表达水平的改变.结果 早期小胶质细胞及巨噬细胞均抑制胶质瘤的迁移,巨噬细胞的抑制效果更强(P<0.05);与胶质瘤细胞共培养后两种细胞对肿瘤的抑制作用消失且差异无统计学意义,均表现为促进肿瘤迁移.小胶质细胞、巨噬细胞在初始阶段IL-10、IL-18、金属基质蛋白酶MMP-9表达略有不同,但共培养后两种细胞的上述蛋白表达均升高且一致;共培养后的胶质瘤细胞的TGF-β、FAS配体较共培养前表达均升高且一致.结论 小胶质细胞及巨噬细胞与C6胶质瘤细胞共培养后被驯化成同样的GAMs,对C6细胞迁移影响的生物学表现一致.     

Nrf2基因敲除对小鼠蛛网膜下腔出血后小胶质细胞／巨噬细胞活化的影响

目的：脑内小胶质细胞／巨噬细胞（ microglia／macrophage, M／M）在蛛网膜下腔出血（ subarachnoid hemor-rhage, SAH）脑组织损伤和修复中具有重要作用。文中研究小鼠 SAH后 M／M活化及Nrf2基因敲除对M／M活化的影响。方法野生型ICR小鼠70只,来源于ICR的Nrf2基因敲除小鼠35只,采用小鼠视交叉注射自体血建立SAH模型。假手术组行同样抽血、钻孔及置针,但不行注血。实验分为4组,野生型假手术组、野生型SAH组、基因敲除假手术组、基因敲除SAH组。 SAH术后第1、3、5天取标本,用Western blot法和免疫组化法检测M／M特异性蛋白Iba1的表达;同时Western blot检测SAH后第3天Iba1蛋白表达,免疫荧光染色检测SAH后第3天CD16／32＋Iba1＋细胞数量。结果 Western blot检测结果显示野生型假手术组、野生型SAH 组第1、3、5天 Iba1蛋白表达灰度值分别为0．491±0．039、0．657±0．069、0．930±0．046和0．926±0．046,而 Iba1蛋白免疫组织化学染色平均光密度值为0．412±0．122、0．625±0．135、0．963±0．213和0．978±0．224,野生型SAH组第1、3、5天Iba1蛋白表达均较野生型假手术组明显增加（P＜0．05）,但野生型SAH组第3天与第5天Iba1表达差异无统计学意义（P＞0．05）;Western blot结果示野生型假手术组、基因敲除假手术组、野生型 SAH 组、基因敲除 SAH 组 SAH 后第3天 Iba1蛋白表达灰度值分别为1．157±0．080、1．162±0．073、1．580±0．171和1．913±0．220,CD16／32＋Iba1＋细胞数量分别为0、0、30．200±6．300和42．800±6．260（个／HP）, SAH后第3天基因敲除SAH组Iba1蛋白表达较野生型SAH组增加（P＜0．05）,且基因敲除SAH组CD16／32＋Iba1＋细胞数较野生型SAH组明显增多（P＜0．05）。结论小鼠SAH后M／M活化增加,Nrf2基因敲除促进了SAH后M／M的活化和M1极化。     

小胶质细胞极化在多发性硬化发病中的作用机制研究进展

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种以中枢神经系统(central nervous system,CNS)炎症反应和髓鞘脱失为主要病理特征的自身免疫性疾病,具有青壮年高发、致残率高等特点,具体发病机制尚不明确。研究发现,MS发病时CNS固有的免疫细胞—小胶质细胞向促炎态M1型极化,导致体内小胶质细胞M1/M2比率失衡,形成CNS促炎态的微环境,损害神经组织。受损神经组织进一步促进小胶质细胞极化,构成恶性循环,最终加重病情。小胶质细胞极化状态失衡是启动MS的关键病因,为此,本文将综述近年来国内外小胶质细胞在MS发病中作用机制的研究进展,旨在为进一步阐明MS发病机制及寻找潜在的治疗靶点提供借鉴。     

巨噬细胞功能M1/M2极性化在心血管疾病中的研究进展

巨噬细胞是先天免疫系统的主要细胞,具有可塑性和异质性,在机体的免疫应答、组织稳态、重塑等多方面发挥重要功能。根据功能极性可分为M1(促炎)和M2(抗炎)2个亚型。M1/M2巨噬细胞在响应局部微环境的刺激反应过程中,通过改变其功能极化,获得特定的功能表型并分泌不同的细胞因子。巨噬细胞通过改变代谢重编程以适应其功能变化。M2巨噬细胞以氧化磷酸化和脂肪酸为能量代谢的主要方式,而M1巨噬细胞为无氧糖酵解。目前研究发现在心血管疾病中,巨噬细胞可能通过其功能极性变化引起巨噬细胞激活、组织浸润、释放促炎性细胞因子而参与心血管疾病的发生。本文对巨噬细胞功能极化、代谢重编程在心血管疾病中的作用进行综述。     

Robo4在脑缺血再灌注损伤大鼠小胶质细胞极化中的作用及其机制研究

目的 探讨环形交叉轴突导向受体同源物4（Robo4）蛋白对脑缺血再灌注损伤（CIRI）后小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法 选取60只SD大鼠，随机分为假手术（Sham）组、大脑中动脉短暂性闭塞/再灌注（tMCAO/R）组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒阴性载体（tMCAO/R+Lv-scramble）组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒载体（tMCAO/R+Lv-Robo4）组，每组15只。tMCAO/R+ Lv-scramble组及tMCAO/R+Lv-Robo4组在复制tMCAO前7 d于脑室内注射慢病毒载体。Longa评分评估神经功能缺损，TTC法检测脑梗死面积，实时荧光定量聚合酶链反应及Western blotting检测大脑组织中Robo4的表达，Western blotting检测M1小胶质细胞标志物（iNOS和CD86）、M2小胶质细胞标志物（Arg-1和CD206）和Notch通路蛋白（Notch-1、Hes1和Hes5）表达。酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β水平。结果 tMCAO/R组Longa评分较Sham组高（P <0.05），tMCAO/R+Lv-scramble组较tMCAO/R+Lv-Robo4组高（P <0.05）。tMACO/R组Robo4 mRNA和蛋白相对表达量较Sham组低（P <0.05），tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组高（P <0.05）。tMACO/R组脑梗死面积较Sham组大（P <0.05），tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组小（P <0.05）。tMACO/R组较Sham组高（P <0.05），tMCAO/R+Lv-Robo4组iNOS、CD86较tMCAO/R+Lv-scramble组低，Arg-1、CD206较tMCAO/R+Lv-scramble组高（P <0.05）。tMACO/R组较Sham组高（P <0.05），tMCAO/R+Lv-Robo4组TNF-α、IL-1β较tMCAO/R+Lv-scramble组低，IL-10、TGF-β较tMCAO/R+Lv-scramble组高（P <0.05）。tMACO/R组Notch-1、Hes1和Hes5相对表达量较Sham组高，tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组低（P <0.05）。结论 Robo4可调控CIRI后小胶质细胞极化向M2表型转移，并调控Notch信号通路，缓解CIRI。     

肺结核合并糖尿病研究进展

Pulmonary tuberculosis and diabetes mellitus often coexist and interact with each other. According to the World Health Organization′s tuberculosis report, China ranks second among countries with a high burden of tuberculosis in the world, and the prevalence of diabetes ranks first in the world. In recent years, the co-epidemic of tuberculosis and diabetes has attracted worldwide attention. This paper reviews the prevalence, risk factors, pathogenesis and control strategies of tuberculosis complicate with diabetes mellitus, with a view to providing a reference for the prevention and control of tuberculosis complicate with diabetes mellitus. Combined with the national basic public health service standards, it is recommended to actively implement the screening of tuberculosis symptoms in the quarterly follow-up of diabetic patients under the jurisdiction. At the same time, it is also recommended to regularly follow up the changes of fasting blood glucose in patients during the treatment of tuberculosis, and control the blood sugar of patients in a timely manner with a view to better outcome of tuberculosis treatment. © 2022 Editorial Office of Chinese Journal of Schistosomiasis Control. All rights reserved.     

溶酶体在巨噬细胞极化中的作用研究

目的 探讨溶酶体在巨噬细胞极化中的作用。方法 体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,用脂多糖（LPS）100 ng/ml+ 伽马干扰素（IFN-γ）20 ng/ml 诱导其向经典活化型（M1）极化,用白细胞介素4（IL-4）20 ng/ml 诱导其向替代活化型（M2）极化,建立巨噬细胞极化模型。以未诱导细胞作为对照组。通过流式细胞术、ELISA、Western blot 及实时PCR（real-time PCR）法,检测M1 型及M2 型巨噬细胞比例及标志物表达,验证巨噬细胞极化模型是否建立成功。通过Western blot、real-time PCR 及免疫荧光染色检测M1 型及M2 型巨噬细胞中溶酶体标志物表达,包括溶酶体膜相关蛋白1、2（LAMP-1、LAMP-2）及溶酶体整合膜蛋白2（LIMP-2）。给予溶酶体抑制剂氯喹（chloroquine）25 μmol/L 刺激巨噬细胞,流式细胞术检测M1、M2 型巨噬细胞比例。结果 成功建立巨噬细胞极化模型。与对照组比较,溶酶体标志物（LAMP-1、LAMP-2 及LIMP-2）转录及蛋白水平表达在M1 型极化组中降低,而在M2 型极化组中增加。溶酶体抑制剂氯喹处理可降低M2 型极化比例,增加M1 型极化比例。结论 溶酶体参与巨噬细胞极化过程,抑制溶酶体可促进巨噬细胞向M1 型极化。     

小胶质细胞极化在脊髓损伤中的作用与机制研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种常见的难治性疾病,一直是临床研究热点.它不仅损害患者的身心健康,也给家庭及社会带来沉重的经济负担.虽然对SCI的研究有很多,然而迄今为止对SCI的确切机制仍不清楚,因此缺乏有效的治疗手段.近年的相关研究表明,小胶质细胞极化后引起的炎症反应在SCI中扮演重要角色.本文就小胶质细胞极化在SCI中的作用与机制进行综述,希望能为SCI治疗提供新的策略.     

小胶质细胞极化在脊髓损伤中的作用与机制研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种常见的难治性疾病,一直是临床研究热点.它不仅损害患者的身心健康,也给家庭及社会带来沉重的经济负担.虽然对SCI的研究有很多,然而迄今为止对SCI的确切机制仍不清楚,因此缺乏有效的治疗手段.近年的相关研究表明,小胶质细胞极化后引起的炎症反应在SCI中扮演重要角色.本文就小胶质细胞极化在SCI中的作用与机制进行综述,希望能为SCI治疗提供新的策略.     

5-羟色胺4受体激动剂对糖尿病小鼠结肠黏膜巨噬细胞极化的影响

目的研究5-羟色胺4受体（5-hydroxytryptamine 4 receptor, 5-HT4R）激动剂对糖尿病结肠黏膜巨噬细胞极化的影响。方法使用链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）建立小鼠1型糖尿病模型,使用5-HT4R激动剂RS67333进行治疗干预,实验动物随机分为3组,即非糖尿病组、糖尿病对照组和糖尿病给药组。通过免疫荧光方法验证巨噬细胞标记物F4/80和iba1在CX3CR1-GFP+细胞中的表达;通过激光共聚焦显微镜观察CX3CR1-GFP+细胞形态和数目分析结肠黏膜巨噬细胞的活化数量;通过RNAscope技术检测精氨酸酶1（arginase 1, Arg1）和一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）的表达和分布变化。结果免疫荧光结果显示F4/80和iba1免疫阳性的细胞与CX3CR1-GFP+的细胞基本共定位。与非糖尿病小鼠相比,STZ诱导的1型糖尿病模型小鼠结肠黏膜层活化的巨噬细胞数目增多（P<0.001）,且M1型巨噬细胞产物iNOS在黏膜层腔侧表达增加（P<0.001）,而M2型巨噬细胞产物Arg1在黏膜固有层表达下降（P<0.001）;与糖尿病对照组相比,给予5-HT4R激动剂可以抑制活化的巨噬细胞数目（P<0.001）,结肠黏膜iNOS的表达上调（P<0.01）和Arg1的表达下调（P<0.05）。 结论5-HT4R激动剂可以抑制糖尿病小鼠结肠黏膜巨噬细胞向M1型极化。     

糖尿病合并脓毒症研究进展

糖尿病会造成机体系统性损伤,导致免疫功能下降,易并发严重感染。感染时宿主反应失调可导致脓毒症,其病情凶险,患者常在短时间内出现严重器官功能障碍甚至死亡。随着世界范围内糖尿病患病率的急剧上升,糖尿病合并脓毒症的患者数量也快速增加。因此,增加对这2种疾病之间的相互关联和影响的认识对临床救治有十分重要的意义及迫切性。本文就糖尿病与脓毒症在流行病学、总体结局、系统损害及发病机制4个方面的进展进行综述。