NLRP3炎性小体在炎症疾病中的研究进展

炎症是清除体内危险刺激的一种防御反应,炎性小体通过促炎细胞因子的裂解并使其成熟来调节炎症。NLRP3炎性小体能活化胱天蛋白酶(caspase)1,并引起白细胞介素(IL)1β、IL-18和IL-33等促炎细胞因子的分泌,参与机体抵抗病原体免疫应答。各种内源或外源的刺激可通过不同的信号通路激活NLRP3炎性小体来活化caspase-1。该文介绍了NLRP3炎性小体的结构、激活途径及其对非感染性炎症疾病的研究进展。     

石榴皮多酚乳膏抑制NLRP3炎性小体抗炎抗痤疮的机制研究

目的 探究石榴皮多酚乳膏抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎性小体抗炎抗痤疮的机制.方法 将42只雌雄各半SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、基质组、石榴皮多酚低中高浓度组、...     

NLRP3与NOD2受体激活对下游炎症因子表达的影响

目的 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)与核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体被其特异性配体激活后对下游炎症因子表达的影响.方法 实验分为4组:空白对照组、TATP组、TMDP、TMDP+ATP组.用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定白细胞介素(IL)-1β及IL-18的表达,逆转录PCR测定NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)的表达情况.结果 TMDP组、TATP组、TMDP+ ATP组的IL-1β和IL-18水平均高于空白对照组(P＜0.05),且TMDP+ ATP组水平增高更显著.TMDP组、TATP组、TMDP+ATP组的NLRP3和Caspase-1表达均高于空白对照组(P＜0.05),且TMDP+ATP2水平增高更显著(P＜0.05).结论 NOD2的特异性配体胞壁酰二肽,NLRP3的特异性配体腺苷三磷酸单独刺激THP-1后NLRP3及下游炎症因子的表达很弱或无表达,联合刺激后可显著增强NLRP3及下游炎症因子的表达,二者之间存在相互促进及协同作用.     

疏肝、健脾、补肾复方对慢性束缚应激大鼠行为学和免疫功能的影响

目的　研究慢性束缚应激时大鼠行为学和免疫功能的变化以及疏肝、健脾、补肾三种中药复方对其影响。方法　用特制束缚架连续束缚 2 1d(或 7d) ,每天 3h的方法制作大鼠束缚应激模型 ,观察大鼠行为学和免疫功能的变化。结果　慢性束缚应激后 ,大鼠的行为学发生了明显的变化 ,血清IL - 1β 上升 ,IL - 2和IL - 6下降 ,并且随着束缚时间的延长变化越明显。结论　逍遥散、四君子汤和金匮肾气丸能改善大鼠行为学的变化 ,明显增强慢性束缚应激大鼠的免疫功能。     

NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF信号通路与Ⅱ型糖尿病临床相关性研究

目的 探讨NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF 信号通路与初诊Ⅱ型糖尿病（T2DM）的临床相关性。方法 入选符合纳入标准的健康对照组30例及T2DM组40例,收集所有研究对象的一般临床资料,采用RT qPCR检测各组患者外周单个核细胞（PBMCs）中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRP3)炎性小体各组分mRNA 的表达水平,Western blot法检测其蛋白表达水平,并采用ELISA法测定各组患者空腹血浆白介素-1β（IL-1β）、白介素-18（IL-18）、转化生长因子(TGF)水平。结果 PBMCs中NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）mRNA表达水平在T2DM组和对照组之间无显著性差异（P＞0.05）,但ASCmRNA在T2DM组与总胆固醇（TC）呈正相关(P＜0.05);Caspase 1mRNA在T2DM组与体重指数（BMI）呈正相关(P＜0.05)。PBMCs中NLRP3、ASC、Caspase-1表达水平及血浆IL-1β、IL-18、TGF水平在T2DM组和对照组之间有显著性差异(P＜0.05),且ASC在T2DM组与平均动脉压（MAP）、空腹血糖(FPG)、TC、IL-1β、IL 18呈正相关(P＜0.05);Caspase-1在T2DM组与吸烟、FPG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、IL-1β呈正相关(P＜0.05);IL-1β在T2DM组与TGF 呈正相关(P＜0.05)。结论 以NLRP3炎性小体为中心的NLRP3-ASC-Caspase-1=IL-18/IL-1β-TGF信号通路可能在初诊T2DM的发生发展过程中发挥重要作用。     

电针足三里对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能及白细胞介素-1β和白细胞介素-6的影响

目的观察针刺足三里对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠的肺通气功能及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的影响,初步探讨针刺治疗COPD的机制。方法采用香烟烟雾和脂多糖复合法诱导COPD大鼠模型,电针治疗大鼠双侧足三里穴(ST36),连续2周,检测大鼠肺功能,观察肺组织形态学变化,采用放射免疫法检测大鼠肺组织及血浆IL-1β和IL-6含量,对肺功能及白介素的相关性进行Pearson相关分析。结果与模型组比较,电针组大鼠的总气道阻力(the total airway resistance,RL)显著降低(P<0.05),肺动态顺应性(lung dynamiccompliance,Cdyn)显著升高(P<0.05),肺泡总面积与肺组织面积之比呈现增高趋势,细支气管壁厚度显著降低(P<0.05),肺组织匀浆中IL-1β和血浆IL-6含量显著降低(P<0.01)。Pearson相关分析显示,IL-1β及血浆IL-6含量与肺功能RL呈显著正相关,与Cydn呈显著负相关(P<0.05)。结论针刺足三里穴可以下调肺组织IL-1β及血浆IL-6的含量,抑制肺组织炎性反应,这可能是针刺改善肺通气功能的机制之一。     

NLR家族Pyrin域蛋白3炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制研究

目的 探究含NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制。方法 将30只大鼠随机分为对照组、模型组、炎症小体抑制组,每组10只。除对照组外,采用高糖饲养+腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,模型复制成功后用球钻毁损大鼠部分牙槽骨骨质,复制牙槽骨缺损模型。模型复制成功后,炎症小体抑制组大鼠立即尾静脉注射20 mg/kg NLRP3抑制剂,1次/d,连续给药28 d。给药结束后,检测各组大鼠空腹血糖。采用酶联免疫吸附试验测定各组大鼠血清护骨因子（OPG）和碱性磷酸酶（ALP）含量。分别采用苏木精-伊红（HE）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TARP）染色观察牙槽骨缺损愈合情况及破骨细胞数,进行骨再生Lane-Sandhu评分。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blotting检测NLRP3、Caspase-1和白细胞介素1β（IL-1β）mRNA和蛋白的表达。结果 模型组OPG、ALP低于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。HE染色结果显示,模型组大鼠牙槽骨缺损严重,可见大量炎症浸润细胞,炎症小体抑制组牙槽骨缺损程度低,炎症浸润细胞较少。模型组Lane-Sandhu评分低于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。TARP染色结果显示,模型组破骨细胞数高于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。模型组大鼠上颌骨组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。结论 抑制NLRP3炎症小体可改善骨代谢,促进糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合,其作用可能与抑制NLRP3/IL-1β通路有关。     

NLRP3炎症小体介导单核细胞增生李斯特菌感染小鼠和巨噬细胞的细胞焦亡

目的:探讨单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)感染引起小鼠和巨噬细胞的细胞焦亡作用机制.方法:体内实验,C57B/6小鼠分为Lm组和阴性对照组(NC组),分别经小鼠尾静脉注射Lm菌液5×104 CFU/鼠和无菌PBS,24 h后取脾脏、肝脏、脑组织,蛋白质印迹法检测焦亡及核苷酸结合...     

咖啡因对慢性刺激过程中小鼠行为和学习记忆的影响

目的探讨咖啡因对慢性刺激小鼠行为和学习记忆的影响。方法选取28只C57BL/6J小鼠,随机分为正常组(n=10):空白+0.15ml生理盐水;刺激组(n=8):慢性刺激+0.15ml生理盐水;药物组(n=10):慢性刺激+15mg/kg咖啡因。刺激组和药物组分别孤养,并接受持续10周的慢性不可预知温和刺激。结合旷场实验和Morris水迷宫方法,评价小鼠的行为和学习记忆能力。结果 10周后刺激组和药物组的水平穿越格子数[(118.50±12.20)次,(80.10±16.02)次)]都明显高于正常组(49.00±10.05)次(P<0.01);水迷宫测试中,药物组定位航行训练第1天的潜伏期明显短于正常组和刺激组[(13.12±2.27)s,(27.34±5.00)s,(30.62±4.54)s](P<0.05);药物组和正常组体重增加量[(3.40±0.37)g,(5.40±0.69)g]有明显差异(P<0.05),10周后药物组和正常组体重[(24.60±0.43)g,(26.60±0.62)g]有明显差异(P<0.05)。结论长期慢性低剂量咖啡因注射可以减缓慢性刺激下小鼠体重增加,同时还能加强刺激状态下小鼠的空间学习记忆能力;长期慢性刺激也能加强小鼠的探索行为。     

天麻熄风汤联合尼莫地平防治蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的临床研究

[目的]观察天麻熄风汤联合尼莫地平防治蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的疗效.[方法]选取2009年6月至2013年6月间在本院和浙江大学附属第二医院住院治疗的64例蛛网膜下腔出血患者,随机分为试验组和对照组,每组32例.对照组患者静脉滴注尼莫地平,试验组患者在对照组的基础上加服天麻熄风汤加减.对比分析两组患者迟发性脑血管痉挛和脑梗死的发生率,以及经颅多普勒超声（TCD）检测结果.[结果]试验组患者血管痉挛的总发生率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;试验组患者脑梗死发生率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.两组患者治疗前两侧大脑前动脉（ACA）、大脑中动脉（MCA）、大脑后动脉（PCA）的血管收缩峰流速（Vp）值间差异均无统计学意义（P＞0.05）.治疗后试验组患者两侧ACA、MCA的Vp值与对照组相比明显减慢,差异有统计学意义（P＜0.05）.[结论]天麻熄风汤联合尼莫地平能有效降低蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛和脑梗死的发生,改善预后.     

基于血清代谢组学的天麻炮制前后对小鼠生物学效应影响

目的:本研究以中药整体观为指导,运用血清代谢组学的方法,从整体代谢角度分析天麻生药与饮片干预小鼠后可能存在的血清内源性代谢物的变化,筛选并鉴别出差异代谢物和代谢途径,从而评价和探讨天麻炮制前后对于机体代谢的影响。方法:通过不同时段(1,3,5 d)灌胃小鼠,利用LC-MS技术检测不同时段的小鼠血液代谢图谱,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法,变量重要性投影(VIP)和t检验筛选潜在差异代谢标志物,从整体代谢角度分析天麻炮制前后生物学效应的差异。结果:通过对小鼠体内代谢物质以及代谢通路的分析,确定15个差异代谢物。在血清代谢的层面,炮制后天麻与生药有显著的生物学效应差别。结论:天麻生药经过炮制以后,会引起氨基酸代谢、肠道菌群代谢等多条代谢通路在不同层面协同发挥作用,具有多靶点性,产生与天麻生药不同的功效,为探讨天麻炮制增效机制提供理论和数据支撑。     

硒对慢性应激小鼠行为、海马神经元及脑LPO的影响

目的：探讨硒对应激损伤的作用。方法：建立束缚悬吊应激模型。采用旷场行为测定法、Nissl染色法和TBA比色法测定亚硒酸钠对慢性应激小鼠的行为、海马神经元和脑LPO的影响。结果：饮入亚硒酸钠的慢性应激小鼠脑LPO含量明显降低，海马神经元丢失减少，行为活动明显增多。结论：硒对应激引起的海马神经元损伤和抑郁样行为具有保护作用，该作用可能与其抗应激动物脑脂质过氧化有关。     

慢性束缚应激对小鼠认知功能及海马不同亚区星形胶质细胞的影响

目的 探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠认知功能的影响,观察海马不同亚区(CA1、CA3和DG区)星形胶质细胞(AS)的激活情况,明确慢性应激对海马的损伤是否存在特异性靶点.方法 雄性KM小鼠24只按体质量随机分为对照组和应激组,每组各12只.采用慢性束缚方法建立小鼠CRS模型,利用新异物体识别实验(NORT)和Morris水迷宫(MWM)评测其认知功能,HE染色观察细胞的形态结构变化,免疫组织化学染色法对海马CA1、CA3和DG区AS标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)进行染色,采用显微镜和图像分析软件对海马上述亚区AS进行计数并分析GFAP的表达.结果 与对照组相比,应激组小鼠NORT及MWM实验的成绩均显著下降(P＜0.05),海马神经元形态结构损伤,CA1和CA3区AS细胞数及GFAP表达均显著增加(P＜0.05),DG区两者均无显著变化(P＞0.05).结论 CRS能够导致小鼠认知功能障碍,海马CA1、CA3区AS的活化可能是其机制之一.     

加味天麻钩藤饮对帕金森病模型小鼠行为学的影响研究

目的:研究加味天麻钩藤饮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(简称MPTP)诱导的帕金森病(简称PD)模型小鼠行为学的影响,为将此药在临床治疗PD方面进行推广做前期准备。方法:采用MPTP复制PD小鼠模型,随机分为正常组,模型组和加味天麻钩藤饮组,每组20只。通过爬杆实验、矿场实验、游泳实验、步态分析这4项行为学实验观察小鼠运动行为的变化。结果:造模后,模型组小鼠行为障碍最为明显,随着给药天数的增加,加味天麻钩藤饮组与模型组相比,加味天麻钩藤饮可以使PD模型小鼠爬杆时间显著缩短(P<0.01),平均步长明显增长(P<0.01),游泳时间明显延长(P<0.01),可以使小鼠水平运动频率显著增加(P<0.01),垂直运动频率增加(P<0.05)。结论:加味天麻钩藤饮可以改善PD模型小鼠运动迟缓,起到平衡协调的作用;缓解PD模型小鼠步态异常的问题,使平均步长延长,并可改善小鼠少动的现象。     

天麻地上部分降压作用的实验研究

目的:观察天麻地上部分对肾型高血压大鼠血压的影响。方法:建立两肾一夹型(模型)大鼠高血压模型,以天麻块茎为对照,给药后测定并比较各组大鼠的血压,心率及血浆AngII、A1d含量,考察其降压作用。结果:天麻地上部分能明显降低肾型高血压大鼠的收缩压。结论:天麻地上部分具有降压作用。     

天麻对束缚急性应激大鼠下丘脑酪氨酸羟化酶的表达影响

目的：实验观察灌胃天麻水提取物对束缚应激火鼠下匠脑酪氨酸羟化酶（TH）遗传因子及蛋白质表达的影响,进一步探讨天麻的镇静作用机制。方法：分别取实验组、对照组及正常大鼠的下丘脑组织,通过逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白免疫印迹法（Western Blotting）比较TH基因及蛋白质的表达。结果：与正常组相比对照组大鼠下丘脑组织的TH基因和蛋白质表达均明显增高（P〈0．01）;天麻水提取物灌胃（40mg／kg）实验组大鼠下丘脑组织的TH基因和蛋白质表达与对照组相比均明显降低（P〈0.05）。结论：天麻可抑制急性应激而增高的TH的活性,而发挥镇静调节作用。     

三种不同产地天麻乙酸乙酯提取物对兔血小板聚集作用的影响

目的:对不同产地天麻进行血小板聚集作用的试验研究,对比天麻药材因产地差异对药效产生的影响.方法:采用二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集法研究不同产地天麻药效学差异.结果:云南昭通、湖北、陕西天麻提取物乙酸乙酯部分均能抑制由二磷酸腺苷(ADP)诱导的家兔血小板聚集功能.云南昭通天麻提取物乙酸乙酯部分的作用明显强于其他产地.结论:天麻乙酸乙酯提取物具有显著的抗血小板聚集作用,且以云南昭通天麻作用最强.     

补中益气汤对慢性萎缩性胃炎保护作用的实验研究

目的:研究补中益气汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)的影响。方法:将小鼠分为正常对照组、模型组、补中益气汤大剂量组及补中益气汤小剂量组4组。除正常对照组外,其余小鼠采用多因素刺激的方法,制作CAG小鼠模型,观察各组小鼠的一般状况及胃粘膜的病理改变。结果:模型组小鼠一般情况较正常组差,胃窦腺体明显萎缩,胃黏膜炎细胞浸润明显;与模型组比较,补中益气汤大剂量及小剂量组小鼠胃黏膜病变减轻,炎症程度明显降低(P<0.01)。结论:补中益气汤对CAG小鼠胃黏膜有保护作用。