人工肝生物材料--猪肝细胞的研究进展

目前,生物人工肝细胞材料研究的主要来源有人肝细胞、肝肿瘤细胞株及异种动物肝细胞。由于人肝细胞来源不足以及肝肿瘤细胞株潜在的致瘤性,使异种动物肝细胞逐渐成为国内外生物人工肝研究的主要对象,其中猪肝细胞已成为生物人工肝应用最多的肝细胞。近年来,在大量实验研究基础上,猪肝细胞用于生物人工肝的研究已经取得较大进展。     

用于生物人工肝的细胞培养及其应用

人工肝研究已发展到混合性生物人工肝阶段,其主要部分——培养有活性的肝细胞对生物人工肝发展起着决定性作用,本文就肝细胞培养方法及其在生物人工肝中的应用作一概述。     

生物人工肝在肝衰竭治疗中的应用

生物人工肝一般是指以培养肝细胞为基础的体外生物人工肝支持系统(EBLSS)。从理论上讲,以肝细胞为材料的生物人工肝最能代替正常肝脏的功能,为暴发性或急性肝衰竭(FIIF/ALF)患者提供可靠的过渡支持治疗,使患者通过自身肝再生或肝移植而恢复。 1.基本原理:生物人工肝是肝细胞培养技术与血液净化技术相结合的产物,其基本原理是将体外培养增殖的肝细胞(人肝细胞、哺乳动物肝细胞或肝细胞系)置于特殊的生物反应器内,利用体外循环装置将肝衰竭患者血液或血浆引入生物反应器,通过反应器内的半透膜与肝细胞进行物质交换与生物作用。由于这一过程如正常机体血液流过肝脏肝窦一样,一方面血液中的毒性物质被培养肝细胞摄取、转化、代谢,另一方面血液中因肝功能衰竭而缺乏的机体必需物质由培养肝细胞合成、补     

生物人工肝的基础与临床

随着细胞学、生物工程学的发展,生物人工肝的建立和临床应用已成为研究热点,生物人工肝已成为治疗肝衰竭的新途径。保持肝细胞的活性和功能,在培养液或生物反应器中要有足够的细胞营养成分,同时还要祛除细胞代谢产物,由此已经产生了许多生物人工肝支持装置,有三种装置已经进行了临床实验。本文综述了肝细胞的培养方法及其在生物人工肝中的应用、生物人工肝的研究成果和存在的问题。     

生物人工肝之肝细胞分离和培养研究现状

组合型生物人工肝支持系统(Hybrid Bioartificial Liver Support System. HBLSS)具备解毒、分泌、合成与转化等功能。在国外已完成动物试验,并进入了Ⅰ期临床试验,取得良好效果。笔者拟就现代生物人工肝的基础——肝细胞的分离和培养研究作一综述。 1 肝细胞来源 生物人工肝(BLSS)的肝细胞,要求既要有足够的数量,又要有完备的生物学活性。肝细胞来源大概有3条途径:①来自人或动物的肝脏分离的原代肝细胞;②肿瘤肝细胞建株后的     

肝衰竭患者血浆(血清)对体外培养肝细胞毒性作用的研究现状

生物人工肝是以培养肝细胞为基础的人工肝支持系统,高活性和功能良好的肝细胞是其基本要素之一,然而,由于肝衰竭患者肝脏大量肝细胞坏死,导致机体代谢紊乱和大量毒性物质堆集,这些毒性物质会对反应器中肝细胞产生毒性作用,直接影响生物人工肝的治疗效果.因此,了解肝衰竭患者血浆（liver failure plasma,LFP）或血清（liver failure serum,LFS）对体外培养肝细胞的各种不良作用,对生物人工肝的临床应用有重要意义.本文综述近年来在该领域的研究进展.     

实验用小型猪相关生物人工肝猪逆转录病毒感染的初步研究

猪肝细胞型生物人工肝治疗肝功能衰竭在我国刚起步．而影响猪肝细胞用于临床治疗的主要问题之一是猪内源性逆转录病毒（PERV）感染。我们建立PCR、RT—PCR方法，检测了猪肝细胞、肝细胞悬液及经生物人工肝治疗患者治疗前后的血清，旨在初步说明PERV在上述样本中的存在和表达及生物人工肝治疗后PERV的感染情况。     

生物人工肝使用肝细胞的标准

肝细胞是生物人工肝的核心材料。1997年国际消化系统疾病顾问委员会在《暴发性肝衰竭的控制现状》中曾专题讨论过肝细胞型生物人工肝系统的发展问题,其中理想的肝细胞标准被描述为:①人源性、正常(非恶性)表型肝细胞;②能够高活性地准备;③容易     

解决生物人工肝细胞源匮乏的可能途径——干细胞

以培养肝细胞为材料、生物反应器为核心的生物人工肝,不仅能为肝衰竭患者等待肝移植争取时间,而且可为肝再生恢复创造条件.然而,由于人肝细胞来源的困难、哺乳动物肝细胞传播动物源性传染病的可能性、永生化肝细胞株的功能差异以及远期致瘤危险等,使细胞源成为生物人工肝进一步临床研究与应用的瓶颈.自1998年Thomson等报道胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESc)建株以来,干细胞(stem cells)的研究引起了人们的极大兴趣.干细胞的可塑性使其有可能成为解决生物人工肝细胞源匮乏的途径.     

生物人工肝体外支持系统合成功能的评价

目的 对人肝细胞型体外生物人工肝进行生物合成功能的评价,藉以探讨其用于肝衰竭治疗的可能性。方法 用2×10~8个混合聚集球形培养的人肝细胞、肝非实质细胞与中空纤维型生物反应器组成体外生物人工肝支持系统(EBLSS),通过循环液(RPMI 1640)中肝细胞合成分泌产物的分析,评价其生物功能。结果 经过6小时的体外循环,循环液中总蛋白、白蛋白和甲胎蛋白含量均显著增加,尿素和葡萄糖水平也有明显改变,该循环液使体外培养大鼠肝细胞DNA合成率显著增加(与对照组比较P<0.01),实验后球形体肝细胞仍保持良好的活动。结论 由培养人肝细胞相中空纤维型生物反应器组成的体外生物人工肝具备肝脏生物合成功能,并有刺激肝细胞增殖的能力,对肝衰竭可能有一定的支持治疗作用。     

生物人工肝支持系统研究新进展

体外人工肝支持系统 (人工肝 )是国外近年来发展起来的用以为肝衰竭患者提供体外肝功能支持的装置 ,这一技术的出现和发展为肝衰竭的治疗开辟了新途径。国外人工肝的研究开始于 2 0世纪 5 0年代 ,已有近 5 0年的历史。近 10余年来有关生物型人工肝 (ｂｉｏａｒｔｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒ ,ＢＡＬ)的研究成效最大 ,其基本原理是将体外培养增殖的肝细胞 (人肝细胞、哺乳动物肝细胞或肝细胞系 )置于体外循环装置 (生物反应器 )中 ,患者血液(血浆 )流过生物反应器时 ,通过容器内的纤维素半透膜或直接与肝细胞进行物质交换 ,从而达到人工肝支持…     

C3A永生化肝细胞系的部分功能评价

全面检测肝永生化细胞系的功能,对评价其功能状态、比较不同肝细胞系的差别、研究生物人工肝的疗效、判断药物对肝细胞功能的影响,以及改建与优化更好的肝细胞系等方面具有重要的意义。C3A细胞是目前用于临床研究的生物人工肝永生化肝细胞系,它从肝纤维母细胞瘤细胞转化获得。本研究以C3A细胞为对象,对反映肝细胞生长增殖、蛋白合成、代谢、分泌、抗氧化的部分指标进行检测,以期建立较全面反映其功能状态的检测方法，为其细胞改建与功能优化提供依据，为新一代生物反应器及生物人工肝发展服务。[第一段]     

人工肝用肝细胞的培养及相关技术研究现状

近年来人工肝技术在临床上得到了快速发展,明显降低了肝衰竭的病死率[1,2].生物型人工肝(Bio-artificial liver,BAL)可以较好的替代肝脏解毒、生物合成和分泌代谢等功能,是国内外研究的热点.肝细胞是生物型人工肝发展的关键因素,如何得到满意的生物人工肝用肝细胞、实现肝细胞的体外大规模培养和冻存,使其快速、稳定增殖,而且能在数天或数周内保持良好的分化状态,能在体外完成合成和解毒功能,近年来有较多研究.现就目前BAL用肝细胞培养和相关技术的研究现状作一介绍.     

生物型人工肝的新种子细胞来源-诱导性多潜能干细胞

生物型人工肝在严重广泛肝细胞功能受损特别是急性肝衰竭的临床应用方面获得了一致认可,而肝细胞的获取是生物型人工肝的根本所在,无论是何种来源的肝细胞,获取后其功能正常高效发挥是所有工作的导向。因此,获取良好状态的人工肝种子细胞是一切工作的前提。由于分化、培养和增殖等方面的限制,获取人工肝种子细胞的常规途径并不能满足临床对种子细胞的需求。2006年日本学者通过重编程体细胞成功诱导成具有多分化潜能的iPS细胞,这为生物型人工肝在获取安全有效种子细胞来源方面带来了新的曙光,本文主要论述iPS细胞的来源、分化及其特性,以及将其应用于临床特别是生物型人工肝所面临的主要问题,并对其前景进行探讨。     

生物人工肝细胞材料的研究进展

近年来,许多学者对生物人工肝（bioartificial liver,BAL）多种来源的细胞材料进行了广泛深入地研究和探索,但生物人工肝细胞材料的来源问题至今仍未得到满意解决。本文对近年来生物人工肝细胞材料研究进展进行综述,以期为建立和选择理想的生物人工肝细胞材料的深入研究提供参考。     

肝脏功能重建的细胞来源

生物人工肝、肝细胞移植、组织工程等技术的开展,为肝病的治疗开辟了新的途径.然而,肝细胞来源短缺已经逐渐成为一个突出的问题.本文着重论述了目前肝脏细胞的分化来源研究进展情况,并对各种肝源性和非肝源性干细胞的优缺点进行了讨论,以期为肝组织工程选择细胞来源提供参考,为生物人工肝、肝细胞移植提供充足、合适的细胞来源,协助治疗肝脏疾病.     

中空纤维型生物人工肝用于支持治疗重型肝炎的体外初探

本实验采用混合多细胞聚集培养的人肝细胞、肝非实质细胞为生物材料，中空纤维管为生物反应器，组成人工肝装置。取重型肝炎患者血清进行体外循环，通过观察血清胆红素、白蛋白等部分生化指标和实验装置内肝细胞活力的变化，探讨生物人工肝用于支持治疗重型肝炎的可能性。...     

生物人工肝研究进展和应用前景

急性肝功能衰竭是最具挑战性的一种临床综合征,肝移植是唯一可治愈急性肝功能衰竭的方法,但供体匮乏是肝移植的主要问题,人工肝可作为肝移植过渡支持手段.非生物人工肝在提高急性肝功能衰竭患者存活率方面作用有限,生物人工肝具有肝细胞的代谢、解毒和合成功能,典型的生物人工肝包括细胞来源、细胞培养方式及生物反应器.本文主要论述目前进入临床试验的生物人工肝,并对生物人工肝替代治疗的将来作一展望.     

生物人工肝临床应用的疗效与难点

各种原因导致的肝衰竭病死率高,人工肝不仅为肝衰竭患者等待肝移植提供过渡,还为部分患者延长生存时间、争取肝脏再生、避免肝移植提供可能.肝脏具有复杂的代谢、合成、转化等功能,生物人工肝支持系统引入肝细胞,从而部分替代肝脏的解毒与生物合成的功能.随着肝细胞及其体外分离、培养,纯化技术的深入研究,国内外许多类型的生物人工肝支持系统进入临床研究[1 2].     

体外生物人工肝支持系统的构建及其意义

为建立理想的体外生物人工肝支持系统（ＥＢＬＳＳ），给肝衰竭患者提供新的治疗手段和措施，应用两步灌流技术分离人肝细胞，球形聚集法加以培养，同时使用中空纤维型生物反应器和血液透析仪改装的辅助循环系统，共同构成体外生物人工肝支持系统，并以正常犬为对象进行体外实验。结果显示，分离所得肝细胞成活率为９４％，总产量达２×１０１０个以上，肝细胞在限制贴壁条件下形成球形聚集体悬浮生长，ＥＢＬＳＳ在实验犬体外运行５小时后，肝细胞仍保持较高的活性。实验过程犬生命征平稳，血清总蛋白和白蛋白增加。上述结果表明，所建ＥＢＬＳＳ已基本解决了生物人工肝的关键技术，系统安全、有效。为进一步开展肝衰竭的生物人工肝支持研究奠定了基础。