布鲁氏菌的基因组序列被破译

一个国际科学家小组于本周一宣布 ,他们已经成功破译了布鲁氏菌的基因组序列 .这种细菌能够导致人类中普鲁斯病或马尔他热 .马尔他热的特点是发热、疼痛、身体衰弱和极度疲劳 .研究人员在 1月 8日出版的《美国国家科学院科学新进展杂志》上提出 ,布鲁氏菌主要感染动物 ,但它也可以作为生物战的潜在工具 .布鲁氏菌常常会感染绵羊和山羊 ,导致这些动物发生流产 .这种细胞可以通过直接接触或进食被污染的奶制品而传播给人类 .尽管这种细菌感染很少会致命 ,但是它难以治疗 ,可以作为可能性较小的生物战制剂 .根据Ｓｃｒａｎｔｏｎ大学的Ｖｉｔｏ…     

布鲁氏菌DNA疫苗的发展：过去、现在和未来

布鲁氏菌病(Brucellosis)是目前世界上流行最广，危害最大的人畜共患病之一，其致病菌为胞内寄生的革兰氏阴性杆菌，感染机体后主要激发细胞保护性免疫反应。新兴的DNA疫苗将表达的目的蛋白以肽的形式递呈给MHCI后能激活抗原特异性T细胞，诱发细胞介导的免疫反应，为控制布鲁氏菌病提供了一条可行途径。1997年第一种布鲁氏菌DNA疫苗pCDNA3-L7／L12构建成功并在动物实验中表现出了潜在的应用前景。本文介绍了现有的目前几种较为成功的布鲁氏菌DNA疫苗，分析其优、缺点，并探讨了未来提高其免疫效果的可能途径。     

广州市2006—2009年布鲁氏菌病发病趋势分析

目的分析广州市布鲁氏菌病（简称布病）疫情,了解布病疫情的流行特点和发展趋势,为今后制定防治措施提供依据。方法利用“国家疾病监测信息报告管理系统”报告的病例数和监测中的数据,进行流行病学分析。结果2006—2009年,广州市共报告布病31例,其中男20例,女11例,年龄最大69岁,最小19岁,以青壮年居多;病例几乎都与活羊、羊肉和羊内脏接触有关;临床表现以发热、多汗、关节游走性疼痛为主。结论来自布病疫区感染布病的羊只流人我市、从业人员缺乏防病意识、检疫和免疫措施不到位是造成我市布病发病数上升的主要原因。因此,加强人市牲畜检疫和从业人员布病健康教育是当前重要的策略。     

浅析新疆农十师181团布鲁氏菌病的防治

掌握我团布鲁氏菌病在人畜间的暴发流行情况,根据市鲁氏菌病暴发流行情况作出调查分析,并提出相应的对策.     

布鲁氏菌DNA疫苗的发展:过去、现在和未来

布鲁氏菌病(Bmcellosis)是目前世界上流行最广,危害最大的人畜共患病之一,其致病菌为胞内寄生的革兰氏阴性杆菌,感染机体后主要激发细胞保护性免疫反应。新兴的DNA疫苗将表达的目的蛋白以肽的形式递呈给MHCI后能激活抗原特异性T细胞,诱发细胞介导的免疫反应,为控制布鲁氏菌病提供了一条可行途径。1997年第一种布鲁氏菌DNA疫苗pCDNA3-L7/L12构建成功并在动物实验中表现出了潜在的应用前景。本文介绍了现有的目前几种较为成功的布鲁氏菌DNA疫苗,分析其优、缺点,并探讨了未来提高其免疫效果的可能途径。     

用亲和层析处理的抗体鉴定布鲁氏菌致病株与疫苗株差异抗原的研究

目的 建立用亲和层析处理的抗体鉴定布鲁氏菌致病株与疫苗株差异抗原的方法.方法 以羰基二咪唑(CDI)活化载体sepharose CL 4B,制备布鲁氏菌抗原亲和层析柱.致病株M28抗体先经疫苗株M5抗原柱吸附、中和,洗出液再经致病株M28抗原柱纯化、浓缩,分别与M28、M5抗原进行免疫印迹反应.结果 处理后的M28抗体与M28抗原间存在两条特异的反应条带,此两条条带没有出现在与M5抗原的反应条带中.结论 通过亲和层析处理的致病株M28抗体能够用于布鲁氏菌致病株与疫苗株差异抗原的鉴定.     

浅析新疆农十师181团布鲁氏菌病的防治

掌握我团布鲁氏菌病在人畜间的暴发流行情况,根据布鲁氏菌病暴发流行情况作出调查分析,并提出相应的对策。     

布鲁氏菌IgM/IgG抗体检测试剂临床试验设计解析

布鲁氏菌IgM/IgG抗体检测试剂属于体外诊断试剂,该类试剂需向国家药品监督管理局提交相关技术资料进行注册申报,获得医疗器械注册证后方可在医疗机构使用。按照法规要求,该类试剂应通过临床试验路径开展临床评价,以证明其安全性和有效性。如何科学合理地开展临床试验对于该类试剂的注册申报至关重要。为了指导申请人能够科学地设计和开展临床试验,基于笔者对于该类试剂的技术审评经验,本文对该类试剂注册临床试验时应关注的重点问题,包括临床试验机构选择、对比方法的选择、样本量和统计分析等要点进行了解析。     

布鲁氏菌快速检测技术研究进展

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的,以流产和发热为特征的一种世界性人畜共患慢性细菌传染病,严重威胁着人类和多种动物的生命健康,影响人类正常的生产生活。布鲁氏菌可感染人类、多种家畜和野生动物,给养殖生产者和国家造成经济损失,并引发严重的公共卫生问题。因此,该病的快速准确检测能为预防、治疗提供早期、有效的疫病信息。笔者综述了PCR方法、免疫学ELASA等布鲁氏菌的快速检测技术,这些技术均能准确、快速、特异性地检测出布鲁氏菌。     

布鲁氏菌种及种内部分生物型快速PCR鉴定方法的建立及应用研究

目的 建立一步法PCR快速鉴定布鲁氏菌种及种内部分生物型.方法 设计6对引物,建立一步法PCR反应,将布鲁氏菌6个种和种内某些生物型进行鉴定,应用该方法检测了27株布鲁氏菌参考菌株和239株临床分离的布鲁氏菌,并与生物学分型方法进行比较.结果 通过一步法PCR能够将待检菌株准确的鉴定到布鲁氏菌种,对于猪种可以定位到生物型和疫苗株；对于牛种可以鉴定到牛种生物型1、3、4 与2、5、6、7、9两组生物型；对于羊种可以鉴定到1与2、3两组生物型和羊种疫苗株.生物学分型方法和PCR方法准确鉴定到种水平的符合率分别为98.33％和100％.结论 一步法PCR是一种快速、特异、简便而低费用的鉴定布鲁氏菌种的分子分型方法.     

珠海市职业人群布鲁氏菌病血清学监测结果

目的了解珠海市职业人群布鲁氏菌病感染情况。方法采用血清流行病学监测方法,选取珠海西部地区与牲畜及畜产品有接触的重点人群,设计问卷调查表进行流行病学调查,并采集血清进行虎红平板凝集试验。采用单因素分析和多因素Logistic回归分析对职业危险因素进行探讨。结果共监测226个职业人群,采集到226份标本,检出阳性标本23份,阳性率为10.2%。多因素Logistic回归模型结果显示,幼畜接生员OR=6.00（1.11～32.46）是危险因素,使用消毒液洗手OR=0.32（0.12～0.90）是保护因素,差异有统计学意义。结论珠海市畜牧业从业人群中,幼畜接生员工种感染布鲁氏菌病的危险性大,使用消毒液洗手具有保护作用。     

2005年新疆生产建设兵团农十师181团布病调查分析

目的 了解新疆生产建设兵团农十师181团人畜共患病流行情况．为制定科学的预防控制措施提供依据。方法 用虎红平板凝集试验（RBPT）方法，对181团抽检人群进行血清学流行病学检测。结果 共检测853人，阳性人数为42人，发病率为4．92％。结论 应加强布鲁氏菌病的防治工作。目前，181团作为农十师最大的农牧团场，布鲁氏菌病的流行逐年升高，到了较为严重的程度．今后人畜共患病的防治工作不仅是181团也将是农十师防治地方病工作的重点之一。     

6个布鲁氏菌蛋白的克隆、表达及纯化

目的构建含6个布鲁氏菌蛋白的原核表达载体,并对其重组蛋白进行诱导表达及纯化。方法以羊种布鲁氏菌16M基因组DNA为模板扩增6个蛋白基因,与载体pET32a(+)连接,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE及Westernblot鉴定,采用HisTrapTMHP纯化目的蛋白。结果成功克隆了6个布鲁氏菌蛋白,经对表达条件进行优化,目的蛋白获得大量表达,纯化后纯度达90%以上。结论获得了纯度较高的6个布鲁氏菌蛋白,为进一步研究其免疫原性及保护性奠定基础。     

CIP29对布鲁氏菌侵袭和巨噬细胞凋亡影响的初步研究

目的 研究CIP29在细胞中的定位及其对巨噬细胞凋亡和布鲁氏菌侵袭的影响.方法 通过RT-PCR方法从细胞中获取CIP29基因片段,并将其亚克隆入质粒载体pET28a和eGFP,构建原核表达质粒pET28a-CIP29和真核表达质粒eGFP-C IP29,原核表达质粒用于制备CIP29抗体,用于后续CIP29蛋白的检测;真核表达质粒用于转染巨噬细胞,通过荧光显微镜、Western blot技术检测CIP29在真核细胞中的表达及定位, Annexin-Ⅴ/PI双染检测其对细胞凋亡的影响,布鲁氏菌侵袭试验检测其对布鲁氏菌入侵巨噬细胞的影响.结果 获得了CIP29基因,构建的表达质粒pET28a-CIP29 和eGFP-CIP29经测序和双酶切鉴定,证实重组表达质粒构建成功.将pET28a-CIP29转化BL 21中,CIP29蛋白得到了表达,制备了特异性抗体,经ELISA检测效价达1∶25 600.进一步构建真核表达质粒eGFP-CIP29,转染细胞后,荧光显微镜观察结果显示其定位于核内,但也有部分扩散之胞质中,CIP29可诱导细胞的凋亡,但对布鲁氏菌侵袭的影响无统计学意义.结论 本研究获得CIP29重组蛋白,并制备了其多克隆抗体,CIP29瞬时高表达诱导巨噬细胞凋亡.     

广州市布鲁氏菌病聚集性疫情分析

目的分析广州市人间布鲁氏菌病（简称布病）聚集性疫情,了解布病疫情的流行特点及危险因素,为制定防治策略提供依据。方法采用现况流行病学调查方法,对广州市牲畜交易市场聚集性疫情进行分析。分别采用虎红平板凝集试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）进行初筛和确诊血清学检测。结果共检测241人,37人感染布氏菌,其中27人为确诊病例,10人为隐性感染者,未发现危重和死亡病例;布病感染者以慢性起病,其中发热、乏力占81.08%,肌肉关节酸疼占67.57%;接触羊是布病疫情的主要危险因素,几乎所有感染者都曾接触过羊（35例）;同时从事动物销售、屠宰、运输等工种的感染率明显高于其他人员,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论广州市布病疫情不断上升,职业人群是布病防控的重点,应加强布病知识的宣传教育以及动物检验检疫。     

布鲁氏菌引起的巨噬细胞依赖性树突状细胞迁移与免疫应答

目的: 研究阴道巨噬细胞清除后小鼠对布鲁氏菌疫苗的免疫应答机制.方法: BALB/c小鼠60只随机分为3组, 每组20只, 实验组小鼠阴道内滴注脂质体包裹的clodronate以清除阴道巨噬细胞, 3 d后阴道滴注10 μL布鲁氏菌疫苗(含6×108个布鲁氏菌).同时设空脂质体对照组(不含clodronate)和PBS对照组.依次在12、 24、 36、 72 h收集小鼠阴道、髂内淋巴结和血液.采用免疫组织化学染色法观察阴道巨噬细胞清除效果和树突状细胞(DC)的迁移, 并用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的含量.收集小鼠腹腔液制备巨噬细胞进行细胞培养, 1.2×106个巨噬细胞中加入布鲁氏菌疫苗10 μL, 于不同时间点对巨噬细胞进行姬姆萨染色, 观察巨噬细胞的变化.结果: 清除巨噬细胞组小鼠接种布鲁氏菌疫苗后, 髂内淋巴结中S-100阳性DC数量没有明显的变化, IFN-γ和IL-4的含量也没有明显的升高.非清除组中, 不同的时间点, 髂内淋巴结中S-100阳性DC明显增多, 与PBS对照组相比, IFN-γ含量显著增高, 而IL-4则没有明显变化.体外巨噬细胞负载布鲁氏菌疫苗发现, 随着时间的延长, 巨噬细胞吞噬布鲁氏菌逐渐增多, 在12 h, 巨噬细胞开始出现坏死性凋亡.结论: 小鼠在对布鲁氏菌疫苗的免疫应答中, DC的迁移是巨噬细胞依赖性的, 并且这种依赖性有可能是由布鲁氏菌抗原成分在细胞间间接传递引起的.     

新疆兵团农十师布鲁氏菌病普查分析监测工作体会

布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人，畜共患的传染．变态反应性疾病．临床主要表现是头痛、全身痛、发热、寒战、出汗、部分病人伴有肝脾肿大，颈或颌下淋巴结肿大等诸多症状表现；家畜布病感染的表现是母畜流产，不孕，繁殖或活率低，并导致产肉，产量奶损失，严重影响人体身心健康及当地畜牧发展。据卫生世界和我国布病疫区调查统计得知，新疆是我国布病严重流行地区之一。     

布鲁氏菌病患者中PD-1 和PD-L1 的表达

目的:研究程序性死亡受体1(PD-1) / 与配体(PD-L1) 以及相关细胞因子转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)在布鲁氏菌病(Brucellosis)患者中的变化。方法:选取60 例布鲁氏菌病患者与60 例健康志愿者,采用流式细胞术分别检测其外周血单个核细胞(PBMC)中CD3+ T 细胞、CD4+ T 细胞、CD8+T 细胞中PD-1 的表达,以及树突状细胞(Dendritic cell,DC)中PD-L1 的表达,同时采用流式液相多重蛋白定量技术(Cytometric bead array,CBA )检测血清中TGF-β和IL-10 的变化,采用Pearson 法分析布鲁氏菌病患者体内PD-1 与TGF-β及IL-10 的相关性,并对34 例布鲁氏菌病治愈患者进行了追踪随访。结果:与正常对照组相比,布鲁氏菌病患者组外周血中PD-1、PD-L1 的表达及血清中TGF-β和IL-10 的水平均明显升高(P<0.01),而治愈组外周血中PD-1、PD-L1 的表达及血清中TGF-β和IL-10 的水平较治疗前明显降低(P<0.01),并且布鲁氏菌病患者组PD-1 的表达与TGF-β(r =0.817,P<0.01)及IL-10 均呈正相关(r = 0.835,P<0.01)。结论:PD-1/ PD-L1 及TGF-β和IL-10 在布鲁氏菌病患者体内高表达,可能共同参与了布鲁氏菌对宿主免疫应答的负性调控作用。