肝非实质细胞在内毒素所致肝细胞损害中的作用

对小鼠体外肝细胞进行了内毒素（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）直接毒性作用的研究。发现ＬＰＳ对肝细胞有明显损害作用，表现为肝细胞变性、坏死，存活率降低、培养上清谷草转氨酶（ＡＳＴ）增高，上述改变程度与ＬＰＳ加入量成正比。肝细胞单独培养组与肝细胞－肝非实质细胞混合培养组相比，各指标差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。然而，经Ｄ－氨基半乳糖及ＬＰＳ体内预处理，导致肝损伤后分离肝非实质细胞，以其取代正常的肝非实质细胞，此时肝非实质细胞的存在不仅加重ＬＰＳ所致的肝细胞损害，且对正常肝细胞也有轻度损伤作用，提示被激活的肝非实质细胞可加重ＬＰＳ所致的肝细胞损害。     

林蛙卵油软胶囊对肝损伤影响的实验研究

目的　探讨林蛙卵油对肝损伤的影响。方法　以中国林蛙卵提取物为主要原料制成的林蛙卵油软胶囊 ,利用 CCl4 作为肝脏毒物造成急性肝损伤动物模型 ,观察林蛙卵油软胶囊对动物体重、血清 ALT、AST、TG的影响。结果　林蛙卵油软胶囊高剂量组的 ALT、AST及 TG均低于阳性对照组 (分别为 P<0 .0 5,P<0 .0 1 ,P<0 .0 1 ) ;中剂量组的 ALT、AST均低于阳性对照组差异有显著性 (分别为 P<0 .0 1 ,P<0 .0 5)。高剂量组、中剂量组肝细胞病变程度较阳性对照组轻 ,差异有显著性 (分别为 P<0 .0 1 ,P<0 .0 5)。结论　林蛙卵油软胶囊对肝损伤具有保护作用。     

HO-1诱导对大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制

目的研究诱导HO-1高表达对大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制探讨。方法随机将大鼠分成4组,即正常对照组、四氯化碳染毒组（CCl4）、血晶素（hemin）组、hemin＋CCl4组。采用western blot法测定HO-1蛋白的诱导表达情况：测定各组大鼠血清ALT、AST水平,肝组织MDA浓度和SOD活性以及Caspase-3活性和TNF-α水平变化;HE染色观察肝组织病理形态学改变。结果CCl4成功诱导了大鼠急性肝损伤,表现为染毒24 h后血清ALT、AST水平以及肝组织MDA浓度、Caspase-3活性和TNF-α水平均显著升高,SOD活性下降,和正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）;病理学检测结果显示肝脏有严重损伤,大量肝细胞发生凋亡。给予hemin预处理能显著诱导大鼠肝脏HO-1的表达,并对肝脏产生明显的保护作用,表现为大鼠血清ALT、AST水平和MDA浓度明显降低,SOD活性升高,组织TNF-α水平和Caspase-3活性明显低于CCl4组;此外,hemin预处理亦使染毒大鼠的病理学指标得到明显改善。结论HO-1诱导表达对急性肝损伤大鼠产生明显的保护作用,提示HO-1在防治急性肝损伤的病理生理过程中占有重要地位;HO-1的保护机制可能与其减轻脂质过氧化反应,抑制Caspase-3活性和降低TNF-α水平有关。     

余甘子抗慢性肝损伤性肝纤维化的实验研究

目的：观察余甘子（Phyllanthus emblica L.)抗慢性肝损伤性肝纤维化的作用，并揭示其作用机理。方法：采用四氯化碳（CCl4)建立小鼠肝纤维化, 余甘子水提醇沉物高，中，小剂量组并与秋水仙碱组作对照。观察小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT，天门冬氨酸转氨酶（AST），总蛋白（TP），白蛋白（Alb），肝组织羟脯氨酸（Hyp)及肝脏系数，肝脏组织病理改变。结果：各剂量余甘子可显著降低小鼠肝脏Hyp含量及血清ALT，AST的活性，抑制Alb和A／G比值的降低，减轻肝组织病理损害程度，其作用呈剂量依赖性。结论：余甘子对实验性慢性肝损伤具有保护肝细胞，减少肝损伤，抗肝纤维化作用。     

柴胡、丹参和五味子配伍对CCl4所致肝硬化大鼠的作用及其机制

目的探讨柴胡＋丹参＋五味子（CHAIDANWU）对肝硬化大鼠的作用及其机制。方法复制大鼠CCl4肝硬化模型，给予CHAIDANWU醇提物治疗，同时体外以醇提物和含药血清作用正常与模型大鼠肝细胞。测定血清酶水平、血清与匀浆HYP、PCI、PCIII含量，TNF—α、CD14、iNOS、MMP-1、TIMP-1在肝组织内阳性表达率，TUNEL法检测肝组织细胞凋亡，DNA琼脂糖凝胶电泳检测体外培养肝细胞凋亡，采用标准积分埘肝细胞的变性及胶原纤维增生程度进行评价。结果CHAIDANWU能明显地降低血清酶活性，体外试验与体内结果一致。血清和肝组织中PCI、PCIII含量，肝组织TNF—α、CD14、iNOS、MMP—1、TIMP—1阳性率及肝细胞凋亡率明显降低，阻滞肝细胞的变性及皎原纤维增生。结论CHAIDANWU阻滞CCl4诱导大鼠肝硬化的作用，这种作用可能与抑制肝非实质激活，细胞因子释放减少，贮脂细胞释放TIMP—1壁降低，胶原纤维分解加速，肝细胞凋亡数减少有关。     

软坚护肝片对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察软坚护肝片(RJHGT)对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法腹腔注射CCl4制备小鼠急性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)活性及总抗氧化能力(T-AOC);检测肝组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果 RJHGT各组能够减轻肝细胞损伤程度,与模型组比较,RJHGT能降低血清ALT、AST、AKP的活性及肝组织中MDA、GSH的含量(P0.01或0.05);提高T-AOC能力及SOD、GSH-PX的活力(P0.01或0.05)。结论 RJHGT对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

含氢溶液对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

四氯化碳(CCl4)有较强的致肝脏毒性,目前普遍应用于诱导急性肝损伤模型.CCl4进入体内后,经肝微粒体细胞色素P450激活,产生活性三氯甲基自由基、二氯甲烷自由基和过氧化三氯甲烷自由基,这些自由基可与细胞内和细胞膜的大分子发生共价结合,使酶功能失活,肝细胞膜脂质过氧化,破坏细胞膜结构和功能,进而导致肝细胞损伤[1].CCl4还可激活库普弗细胞释放大量炎性因子,扩大炎性反应,进一步加重肝损伤.近年有研究发现,氢分子可有效抑制羟自由基,但并不影响其他具有重要生理调节作用的氧自由基,具有选择性抗氧化作用[2].     

复方甘草酸单铵和异甘草酸镁对化学损伤人肝细胞的保护作用

目的:研究2 类甘草甜素药物对半乳糖胺( D-GalN)和四氯化碳(CCl4)损伤培养人肝细胞(L-02)的保护作用及差异.方法:培养L-02, 用复方甘草酸单铵(compoundammonium glycyrrhizin, CAG)和异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate, MI)分别进行保护后, 再经D-GalN或CCl4处理. 观察肝细胞生长状态、测定AST、LDH酶活力、及细胞内谷胱甘肽(GSH)含量. 从而评价CAG和MI对D-GalN和CCl4损伤L-02的保护作用差异.结果:浓度为1 g/L的CAG和MI均能提高细胞的存活率, 显著抑制D-GalN和CCl4所致的AST及LDH释放. CAG抑制D-GalN和CCl4所致的AST与LDH效果显著好于MI(均P<0.05);浓度为1 g/L的CAG和MI均能显著抑制2种化学损伤细胞内的GSH降低(CCl4损伤:7.59±1.27, 5.23±0.70 vs 3.33±0.40; D-GalN损伤:7.93±0.36, 5.40±0.52 vs 3.77±0.45, P<0.01或0.05), CAG效果明显好于MI.结论:1 g/L的CAG和MI 2种药物对D-GalN和CCl4致人肝细胞损伤均有保护作用, 其机制与抑制GSH降低相关. 2种甘草甜素药物相比较,CAG保护肝细胞效果好于MI.     

绞股蓝多糖对四氯化碳损伤HepG2细胞的保护作用

目的初步探讨绞股蓝多糖（PGP）对CCl4肝细胞损伤的保护作用。方法用CCl4诱肝HepG2细胞损伤,设立正常对照组、CCl4损伤组和不同浓度PGP保护组;采用倒置相差显微镜和吖啶橙（AO）荧光染色观察、四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞活力以及流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的方法,观察PGP对CCl4诱导的肝细胞损伤的保护作用。结果MTT检测显示PGP保护组细胞活性明显高于损伤组,以PGP浓度为100μg／m1保护组细胞活性最高;流式细胞仪测定细胞凋亡率显示PGP保护组（终浓度为100μg/m1）凋亡率明显低于CCl5损伤组,细胞周期各期细胞分布比例无明显变化。结论PGP对CCl4诱导的HepG2细胞损伤具有保护作用。     

保肝康对急性肝损伤大鼠肝细胞凋亡的影响

目的：探讨保肝康抗肝损伤的作用机理。方法：采用D－GlaN所致大鼠急性肝损伤模型，观察保肝康对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果：（1）保肝康有抑制肝细胞凋亡的作用。（2）Fas/FasL的表达率与肝细胞凋亡呈平行相关，结论：（1）保肝康抑制肝细胞凋亡的作用是其抗肝损伤的作用机理之一。（2）保肝康抑制细胞凋亡作用机理可能是下调Fas/FasL的表达。     

林蛙皮生物活性肽对小鼠免疫功能的影响

目的探讨林蛙皮生物活性肽对小鼠免疫功能的影响。方法将雄性昆明小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和林蛙皮活性肽低、中、高剂量组,每组10只;连续灌胃给药28 d后,通过NK细胞活性、SRBC诱导的迟发性变态反应和碳廓清实验,评价林蛙皮活性肽对小鼠的免疫调节作用。结果林蛙皮生物活性肽中剂量组和高剂量组可明显增强小鼠NK细胞活性(P<0.05或P<0.01);高剂量组可增强羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应(P<0.01);高、中和低剂量组均可提高小鼠碳廓清吞噬指数(P<0.05或P<0.01)。结论在一定剂量范围内,林蛙皮活性肽对小鼠的细胞免疫功能(SRBC诱导的DTH)、单核-巨噬细胞吞噬能力(碳廓清实验)和NK细胞活性均有明显的增强作用,可提升小鼠的非特异性和特异性免疫功能。     

肝脏再生的分子机制

肝再生模型有两种。其一为部分肝切除，须切除75％以上才有再生效应；另一为CCl4的中毒性肝损伤。两者的肝再生的基本步骤相仿，但效应启动时间有差异。某些中毒性肝损伤有细胞因子与干细胞参与，干细胞受激活分化为肝细胞，而部分肝切除无这些变化。     

大鼠脐带间充质干细胞对肝细胞及卵圆细胞体外增殖与功能的影响

目的：探讨大鼠脐带间充质干细胞（UMSC）对原代大鼠肝细胞及肝卵圆细胞增殖与功能的影响。方法采用2-乙酰氨基芴加肝脏三分之二切除术建立肝卵圆细胞增殖模型,通过原位二步胶原酶灌流法分离到单个肝脏细胞,再经过 Percoll 密度梯度离心分离到肝卵圆细胞。原代大鼠肝细胞/肝卵圆细胞各分为3组：UMSC 组、原代大鼠肝细胞组/肝卵圆细胞组及 UMSC 与原代大鼠肝细胞共培养组/UMSC 与肝卵圆细胞共培养组,分别于第1、3、6、8天通过MTT 法检测各组细胞增殖能力,于第3天通过 ELISA 法检测各组细胞培养上清液中白蛋白含量。结果UMSC 与原代大鼠肝细胞共培养组在第3、6、8天的 A 值均比相应时间点的 UMSC 组 A 值与原代大鼠肝细胞组 A 值之和大（P ＜0．05）;UMSC 与肝卵圆细胞共培养组在第3、6、8、10天的 A 值均比相应时间点的 UMSC 组 A 值与肝卵圆细胞组 A 值之和大（P ＜0．05）。UMSC 无白蛋白分泌能力,UMSC 与原代大鼠肝细胞共培养组培养上清液中白蛋白水平为（266．21±50．44）ng/mL,较原代大鼠肝细胞组（130．79±22．10）ng/mL 高（P ＝0．013）;UMSC 与肝卵圆细胞共培养组培养上清液中白蛋白水平（（49．64±3．56）ng/mL）较肝卵圆细胞组（13．54±1．53）ng/mL 高（P ＝0．000）。结论UMSC 在体外可以促进原代大鼠肝细胞及肝卵圆细胞的存活和增殖,并可增强其分泌白蛋白的作用。     

肝病中的肝细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)是细胞生命的基本特征之一,加强其研究对于理解生命个体的正常发育、疾病过程及其影响因素等具有重要意义。现将肝病中的细胞凋亡研究进展综述如下。　　一、肝细胞凋亡与肝非实质细胞　　肝非实质细胞对维持肝细胞的生理功能起到重要作用。研究表明,这些非实质肝细胞与肝细胞凋亡有着重要关系。Bhathal等[1]在研究阻塞性黄疸时发现肝胆管内皮细胞过度增生,通过细胞凋亡的机制可缓解阻塞性黄疸病情。Braun等[2]报道肝部分切除术后,肝非实质细胞产生TGF-β来调控细胞凋亡以旁路途径来调控肝细胞增殖及肝脏再生。枯否细…     

乙型肝炎肝内ICAM-1和HLA-DR表达及意义

乙型肝炎发病机制主要包括细胞毒性T淋巴细胞(CTL)介导的肝细胞损伤坏死和肝细胞凋亡。CD4阳性Th1细胞也可引起肝细胞凋亡。细胞间粘附分子-1(ICAM-1)系免疫球蛋白超家族成员,与其配体淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA1)参与介导淋巴细胞与靶细胞及淋巴细胞间的粘附。国内外研究表明,ICAM-1在病毒性肝炎、内毒素血症所致肝损坏死、缺血后再灌流所致肝损伤、自身免疫性肝损伤及酒精性肝损伤中起重要作用。人白细胞抗原(HLA)Ⅱ类分子在乙     

肝血窦内皮细胞在肝再生和肝纤维化发生中的作用

肝血窦内皮细胞是肝脏非实质细胞的主要组成细胞,是覆盖于肝窦的薄层扁平状细胞,表面富含窗孔,是肝窦和窦状间隙之间溶质交换的开放通道。肝血窦内皮细胞的分泌功能尤其是Wnt信号通路在维持Axin2+源性肝细胞的自我更新、促进肝部分切除或肝损伤时肝再生中均发挥重要的保护作用。肝损伤时,肝血窦内皮细胞结构发生改变,表现为窗孔消失和内皮下基底膜的形成,即肝窦毛细血管化。肝窦毛细血管化既是肝纤维化发生的前奏,也会促进肝纤维化的进展。肝窦内皮细胞在不同生理或病理状态下可通过信号通路的转换实现肝再生和肝纤维化调控作用的转换。肝血窦内皮细胞参与肝再生和肝纤维化机制的深入认识有望为慢性肝病的防治提供新的治疗靶点。     

微载体培养人肝细胞及肝非实质细胞

目的研究用微载体培养人肝细胞及肝非实质细胞的方法．方法采用体外简易两步灌流和差速离心法获取胎肝细胞和肝非实质细胞，在综合限定条件下进行微载体ｃｙｔｏｄｅｘ３粘附培养，并对培养肝细胞的形态及合成葡萄糖和白蛋白的功能进行动态测定．结果分离肝细胞及肝非实质细胞在接种时即呈明显的聚集倾向，将其与微载体混合振荡孵育２０ｍｉｎ后，二者极易相粘附．在被覆聚羟乙基异丁烯酸的培养瓶内，使用激素限定条件培养液培养约４８ｈ，典型的多细胞聚集球形体得以形成．该形态特征以及白蛋白、葡萄糖合成能力可保持１月结论使用微载体培养人肝细胞和肝非实质细胞具有多种优点，有广泛的应用价值．     

Toll样受体4在CCI4诱导的大鼠慢性肝损伤过程中的表达

背景：Toll样受体4（TLR4）在内毒素的信号转导过程中具有重要作用。目的：动态观察在CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤过程中。肝组织和Kupffer细胞TLR4基因表达的变化，探讨TLR4在肝损伤中的作用。方法：以CCl4诱导慢性肝损伤纤维化大鼠模型，分离肝Kupffer细胞。以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA的表达；将Kupffer细胞分别与不同浓度的脂多糖（LPS）孵育，以酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞培养上清的肿瘤坏死因子（TNF）-α水平。以基质显色法测定大鼠血浆内毒素水平。结果：正常大鼠肝组织TLR4 mRNA表达水平较低，Kupffer细胞未检测到TLR4 mRNA表达；CCl4处理2～6周大鼠的肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA表达水平显著增高（P〈0．05）。CCl4处理4周和6周大鼠Kupffer细胞的TNF-α基础分泌水平显著高于正常大鼠（P〈0．05）；在LPS的刺激下，TNF-α的分泌水平较基础值进一步增高（P〈0．05），呈浓度依赖性。大鼠血浆内毒素水平在肝损伤过程中逐渐增高，相关分析显示在慢性肝损伤的早、中期。肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA的表达与血浆内毒素水平呈正相关。结论：在CCl4诱导的慢性肝损伤过程中，大鼠肝脏TLR4基因表达上调，与Kupffer细胞活化和肝脏的炎症损伤有关。     

灰树花多糖对四氯化碳致急性肝损伤的保护作用

目的探讨灰树花多糖(Polysaccharide of Grifola Frondosa,PGF)对四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)急性肝损伤的保护作用。方法 72只昆明种小鼠随机分为8组:正常对照组、CCl4损伤组、PGF保护组(4.5、9、18、36、72、144mg/kg),每组9只。CCl4腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型。观察肝组织病理学改变;测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,肝组织匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量及凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达。结果与CCl4损伤组比较,PGF保护组肝组织病理改变明显减轻;血清ALT、AST活性明显降低(P0.05);肝组织匀浆SOD含量明显升高(P0.05);MDA含量明显降低(P0.05);凋亡相关蛋白bcl-2的表达量明显增加、bax的表达量明显降低。综合各指标以72mg/kg保护组效果最佳。结论PGF对CCl4急性肝损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,清除自由基,调节凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达有关。     

柴胡疏肝散对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的防治作用

观察柴胡疏肝散对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用.方法:用CCl4造成大鼠急性实验性肝损伤模型,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,同时检测肝组织中MDA和GSH的含量.结果:该方能显著降低CCl4所致急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST含量,升高其SOD水平,并可显著降低该模型大鼠血清及肝组织中MDA的含量,而升高GSH水平.结论:柴胡疏肝散对此模型大鼠的肝损伤具有显著的防治作用,其机制可能与降低、抑制脂质过氧化反应以及抗自由基损伤有关.