急性髓系白血病CEBPA基因突变的研究进展

CCAAT/增强子结合蛋白α基因(CCAAT/enhancer binding proteinα,CEBPA)是维持造血系统粒系分化的重要转录因子,在调节细胞增殖与分化的平衡中起着关键作用。CEBPA基因突变易发生在M1和M2型急性髓系白血病中,约占成人急性髓系白血病的5%-14%,约占儿童急性髓系白血病的7.9%。目前国内关于CEBPA基因突变的研究远远少于国外。本文将从CEBPA基因及其蛋白的结构特点、突变的检测方法、突变患者的临床特征、突变对患者预后的影响及治疗方案的选择等研究进展作一综述。     

骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病中转录因子CCAAT/增强子结合蛋白ζ转录本的定量研究

转录因子CCAAT／增强子结合蛋白(C／EBP)是一组具有同源序列的转录因子，在细胞增殖、分化、凋亡和免疫调节多种细胞反应中发挥着重要作用。C／EBPα基因突变如碱基替换、缺失、重复等可见于骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)。C／EBPζ，又称为生长阻滞和DNA损伤诱导基因3(GADD153)、DNA损伤诱导的转录因子3（DDTT3）、     

C/EBPα在炎症疾病中的研究

CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)是CCAAT增强子结合蛋白家族的一员,该家族属于碱性亮氨酸拉链(bZIP)蛋白家族,在细胞增殖分化、细胞周期调控、免疫应答、炎性反应、能量代谢、肿瘤发生及凋亡等过程中发挥重要作用。C/EBPα主要分布于肺、皮肤、肝脏、乳腺和造血系统中,能作为转录激活剂在分化后期介导基因表达。该文将从C/EBPα在炎症疾病中的作用展开综述。     

转录因子C/EBPs家族在髓系细胞分化中的作用

CCAAT/增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins,C/EBPs)是一转录因子家族,在细胞增殖和分化的控制、代谢、造血、脂肪形成、免疫和炎症反应过程及多种疾病发生中发挥重要作用,特别是在髓细胞增殖、分化和成熟的过程中发挥关键的作用.C/EBPα在早期髓细胞向粒细胞分化过程中扮演着一个关键性角色,C/EBPβ能促使未成熟细胞向粒细胞分化,C/EBPε在后期粒细胞分化过程中具有重要作用.本文就转录因子C/EBPs家族在髓系细胞分化中的作用作一综述.     

转录因子C/EBPα异常与急性髓系白血病

增强子结合蛋白C/EBPα在造血系统髓系分化中扮演着重要的角色,其功能的改变与白血病的发生发展存在着关联,尤其是与急性髓系白血病(AML)的分类及预后关系密切,同时对AML的治疗具有指导意义.本文就转录因子C/EBPα异常与AML的相关性进行综述.     

转录因子C/EBPα异常与急性髓系白血病

增强子结合蛋白C/EBPα在造血系统髓系分化中扮演着重要的角色,其功能的改变与白血病的发生发展存在着关联,尤其是与急性髓系白血病(AML)的分类及预后关系密切,同时对AML的治疗具有指导意义.本文就转录因子C/EBPα异常与AML的相关性进行综述.     

转录因子C/EBPα异常与急性髓系白血病

增强子结合蛋白C/EBPα在造血系统髓系分化中扮演着重要的角色,其功能的改变与白血病的发生发展存在着关联,尤其是与急性髓系白血病(AML)的分类及预后关系密切,同时对AML的治疗具有指导意义.本文就转录因子C/EBPα异常与AML的相关性进行综述.     

骨髓增生异常综合征患者c/ebpα基因表达水平及其临床意义

本研究探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)基因的表达及其在MDS发病、病情进展中的意义.应用Taq-man探针的实时荧光定量PCR(Real-time ...     

急性髓系白血病患者转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α基因突变研究

目的 探讨髓系转录因子CCAAT／增强子结合蛋α(C／EBPα)基因突变与急性髓系白血病(AML)发生的关系。方法 采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析联合测序的方法检测48例AML患骨髓标本，11名正常体检的外周血标本C／EBPα基因突变情况。结果 经PCR-SSCP检测，48例AML患巾有5例(10.4％)存在突变经测序证实有4种重复，1种缺失，均为新的突变类型。结论 C／EBPα基因在少数AML患中存在不同类型的突变，其变异可能与某些AML的发生有关。     

诱骗RNA靶向阻断RNA结合蛋白E2诱导K562细胞向粒系分化

目的 应用诱骗RNA(decoy RNA)靶向阻断RNA结合蛋白E2(hnRNP E2)调节CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPα)基因异常翻译的作用,诱导白血病细胞株K562细胞向粒系分化,并初步探讨其分子机制.方法 将已构建的hnRNP E2 decoy RNA表达质粒经阳离子脂质体的介导转染K562细胞,用G418筛选出稳定表达细胞株,用RT-PCR和Western blot方法检测该细胞株C/EBPα和粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)的表达,通过瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态,免疫细胞化学法分析细胞粒系分化抗原CD13、CD15的表达.结果 筛选到稳定表达细胞株pG细胞,与未转染的K562细胞相比,其C/EBPα mRNA水平无改变,但相对分子质量42×103的C/EBPα蛋白(42kD-C/EBPα)水平升高了(49.7±5.5)%(P＜0.05);G-CSFR mRNA水平升高了(42.1±3.6)%(P＜0.05),其蛋白水半也.升高了(37.4±6.2)%(P＜0.05);细胞形态学方面观察到pG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞的特征,且免疫细胞化学法检测显示粒系分化抗原CD13、CD15表达增高[阳性细胞百分比分别为(18.7±2.5)%和(15.2±2.6)%].结论 hnRNP E2 decoy RNA能够诱导K562细胞向粒系分化,G-CSF对其分化过程有促进作用,其作用机制可能与decoy RNA靶向阻断hnRNP E2,调节C/EBPαmRNA翻译,恢复42kD-C/EBPα表达,上调42kD-C/EBPα下游分化基因G-CSFR的表达有关.     

C/EBPα在肝病中的研究进展

正C/EBP蛋白因其与启动子CCAAT区及多种病毒增强子相结合而命名,目前为止已发现6种C/EBP家族成员,分别命名为C/EBPα,C/EBPβ,C/EBPγ,C/EBPδ,C/EBPε和C/EBPζ。C/EBPs调控基因转录起始、转录后修饰及蛋白间的相互作用,在细胞增殖和分化、代谢和凋亡、炎症和转化、致癌基因引起的细胞老化及肿瘤发生等方面发挥重要作用[1-2]。C/EBPα是C/EBPs家族中最早被发现克隆和研究的基因,在肝脏组织中丰富表达。近年来研究表明,C/EBPα参与肝细胞的     

人表皮发生的机制研究:C/EBP在调控体内外角质形成细胞分化中的作用

目的:探讨CCAAT/增强子结合蛋白(CCAAT/enhancerbindingprotein,C/EBP)参与表皮角质形成细胞分化调控的作用。方法:①应用免疫组化的方法检测胚胎表皮中C/EBP的表达情况;②通过调节培养的鼠表皮角质形成细胞培养基中钙离子浓度,在不同时间段应用免疫细胞化学检测C/EBPα和C/EBPβ的表达情况。结果:C/EBPα和C/EBPβ主要表达在胚胎期表皮棘层、颗粒层和角质层细胞的胞核内。在培养的角质形成细胞胞核中随分化进行表达增强。结论:说明C/EBP参与表皮角质形成细胞分化调控。     

急性髓系白血病预后相关的分子标志

众多的无法被细胞遗传学方法检测出来的基因异常（如基因突变及表达异常等）已越来越多的被发现。这使得对不同预后的急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）的分析进入分子水平。例如：存在转录因子C／EBPα（CCAAT enhancer binding factor alpha,CCAAT增强结合因子α亚单位）或核磷蛋白（nucleophosmin-1,NPM）基因突变的AML往往提示有较好的预后,而有着MLL基因（mixed—lineage leukemia,混合系白血病基因）部分串联重复突变（MLL—PTD）,FLT3（FLM样酪氨酸激酶3）基因串联重复突变（FLT3-ITD）以及WT—1（Wilms’Tumor1,肾母细胞瘤1）基因突变的AML却提示不良预后。本文将探讨这些异常基因分子的特点,联系及其对AML预后的影响。     

C/EBP_α基因对维吾尔族宫颈鳞癌组织细胞增殖的影响

目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα）在宫颈癌组织中的表达水平及其对子宫颈鳞癌组织细胞增殖的影响。方法 7例宫颈鳞癌患者的新鲜标本（宫颈鳞癌1组）与5例正常妇女的新鲜标本（对照组）,采用RT-PCR检测C/EBPαmRNA与Ki-67mRNA表达情况;35例宫颈鳞癌患者的石蜡标本（宫颈鳞癌2组）与35例慢性宫颈炎患者石蜡标本（宫颈炎组）,采用免疫组织化学方法检测C/EBPα与Ki-67蛋白表达情况。结果对照组C/EBPαmRNA表达水平高于宫颈鳞癌1组;Ki-67mRNA低于宫颈鳞癌1组;宫颈炎组C/EBPα蛋白表达水平高于宫颈鳞癌2组（P〈0.01）,Ki-67蛋白表达水平低于宫颈鳞癌2组（P〈0.05）;宫颈鳞癌2组C/EBPα蛋白与Ki-67蛋白表达呈负相关（r=-0.259,P〈0.05）。结论宫颈鳞癌组织中C/EBPα基因mRNA和蛋白表达均降低;C/EBPα基因对子宫颈鳞癌组织细胞的增殖起抑制作用。     

DNA片段长度分析检测急性髓性白血病CEBPA基因突变

目的建立检测急性髓性白血病(AML)髓系转录因子CCAAT增强子结合蛋白-A(CEBPA)基因突变的快速筛查方法。方法采用聚合酶链式反应(PCR)扩增产物片段长度分析及序列分析方法检测107例初治AML患者CEBPA基因全部编码区突变情况。来自同种基因移植供者的38例正常人作为对照。结果同时用测序及片段长度分析的方法检测了107例AML患者及38例正常人CEBPA突变的情况,在排除了已知的多态位点以后,在107例AML患者中筛查出22例患者存在CEBPA突变,其中4例患者存在2种CEBPA突变,18例患者存在1种CEBPA突变,而在38例正常人中没有发现CEBPA突变。与测序结果比较,片段长度分析检测CEBPA突变是敏感和有效的。结论片段长度分析是一种快速、敏感地筛查CEBPA基因突变的方法,适合常规的AML诊断。     

C/EBPα转录因子与急性髓系白血病

转录因子C/EBPα调控髓系细胞的正常分化和增殖,体内实验证实C/EBPα功能的丢失将阻断髓系细胞的正常分化,并向急性髓系白血病(AML)的恶性细胞转化.在AML患者中发现C/EBPα功能下调与病变的发展之间有直接的关系.自2001年以来,对于转录因子C/EBPα与AML的发病、发展及预后等的研究已深入到一定程度,我们就近年来的相关研究进行综述.     

shRNA干扰CIAPIN1基因表达促进K562细胞粒系分化

目的探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病（CML）细胞系K562粒系分化的影响。方法针对CIAPIN1基因设计并构建短发卡RNA（shRNA）真核表达载体,转染K562细胞并作为干扰组,以无关序列shRNA处理的K562细胞作为对照组。采用Real-time PCR及Western blot技术鉴定干扰效率;采用瑞氏染色和电镜分别观测K562细胞形态学和超微结构的改变;采用Real-time PCR方法检测粒系分化标志基因中性粒细胞胞浆因子1（NCF1）、血清黏蛋白1（ORM1）以及粒系分化转录因子CCAAT/增强子结合蛋白（C/EBPα）、低氧诱导因子1α（HIF1α）mRNA水平的改变;流式细胞术检测K562细胞表面分化抗原CD11b表达的改变;Western blot技术检测ERK1/2、JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平的改变。结果与对照组相比,干扰组的CIAPIN1基因表达被有效抑制（P〈0.05）;K562细胞的形态和超微结构趋向成熟粒细胞阶段;NCF1、ORM1、C/EBPα及HIF1αmRNA表达水平升高（P〈0.05）;CD11b表达升高（P〈0.01）;ERK1/2磷酸化水平升高（P〈0.05）,而JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平未见明显改变。结论抑制CIAPIN1基因表达能促进K562细胞向成熟的粒细胞阶段分化,ERK1/2磷酸化水平的升高可能参与了该分化过程。     

融合蛋白AML1-ETO对C/EBPα基因表达的影

背景:已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞.目的:观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用.方法:应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U937-MOCK和U937-A/E1细胞表面抗原CD11b、CD14 的表达;荧光实时定量PCR检测C/EBPα mRNA的表达;免疫印迹法检测C/EBPα蛋白的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与C/EBPα基因启动子之间直接的相互作用情况.结果与结论:AML1-ETO转染细胞的细胞表面分化抗原CD11b 和CD14的表达明显下降,且转染了AML1-ETO的U937细胞系中,C/EBPα的mRNA与蛋白水平均下调,转染细胞沉淀富集的DNA中含有C/EBPα基因的启动子序列.结果提示C/EBPα是AML1-ETO 的直接靶基因,AML1-ETO能下调C/EBPα的表达.     

融合蛋白AML1-ETO对C/EBPα基因表达的影响

背景:已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞。目的:观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。方法:应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U937-MOCK和U937-A/E1细胞表面抗原CD11b、CD14的表达;荧光实时定量PCR检测C/EBPαmRNA的表达;免疫印迹法检测C/EBPα蛋白的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与C/EBPα基因启动子之间直接的相互作用情况。结果与结论:AML1-ETO转染细胞的细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达明显下降,且转染了AML1-ETO的U937细胞系中,C/EBPα的mRNA与蛋白水平均下调,转染细胞沉淀富集的DNA中含有C/EBPα基因的启动子序列。结果提示C/EBPα是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调C/EBPα的表达。     

融合蛋白AML1-ETO对C/EBPα基因表达的影响

背景：已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞。目的：观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。方法：应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U937-MOCK和U937-A/E1细胞表面抗原CD11b、CD14的表达;荧光实时定量PCR检测C/EBPαmRNA的表达;免疫印迹法检测C/EBPα蛋白的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与C/EBPα基因启动子之间直接的相互作用情况。结果与结论：AML1-ETO转染细胞的细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达明显下降,且转染了AML1-ETO的U937细胞系中,C/EBPα的mRNA与蛋白水平均下调,转染细胞沉淀富集的DNA中含有C/EBPα基因的启动子序列。结果提示C/EBPα是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调C/EBPα的表达。