熊果酸对矽肺大鼠TNF-α和胶原合成的调节作用

目的观察熊果酸对矽肺大鼠TNF-α含量和胶原合成的调节作用。方法75只Wistar雄性大鼠,SPF级,随机分为对照组、模型组、熊果酸组,每组25只。模型组与熊果酸组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入SiO2悬液(250 mg/kg)复制动物矽肺模型。熊果酸组自注射SiO2第二天灌胃熊果酸40mg/kg,对照组以同样方法灌注等量生理盐水,共连续28天。动物分别在注射SiO2后第7、14、28天处死。ELISA法检测大鼠血清中TNF-α的含量,应用羟脯氨酸试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量,Western blot法检测Ⅰ/Ⅲ型胶原表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中的TNF-α含量各时间点明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。熊果酸组TNF-α含量与模型组相比均显著降低(P0.05)。模型组肺组织中总胶原蛋白含量与同期对照组比较明显增加(P0.05)。熊果酸组与模型组相比,总胶原含量明显下降(P0.05)。熊果酸组与模型组大鼠肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原表达与总胶原蛋白含量变化一致。结论熊果酸可以减少矽肺纤维化过程中TNF-α和胶原蛋白的产生。     

活血祛瘀中药对大鼠矽肺模型的干预作用

目的研究活血祛瘀中药对SiO2所致矽肺模型肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-6(IL-6)表达的影响。方法将SD大鼠随机分为6组,分别为SiO2组、强的松+SiO2组、中药+SiO2组、强的松组、中药组、生理盐水组。末次给药后4 h,苯二胺盐酸盐法测定血清铜蓝蛋白(CP)含量;取肺组织,HE染色法行组织病理观察,免疫组化法测定肺组织肺组织胶原蛋白、TGF-β、TNF-α及IL-6的表达情况。结果治疗组与NS灌胃组病理检查未见明显差别;CP检测结果,SiO2+中药组较SiO2组、SiO2+西药组略有下降,但只与SiO2组比较差异有统计学意义;免疫组化法测定中药与对照组、西药治疗组肺组织胶原蛋白、TGF-β、TNF-α及IL-6的表达差异无统计学意义。结论在矽肺较严重的情况下,该抗矽肺方剂可能不能对矽肺模型起到干预的作用。     

染矽尘大鼠肺组织纤维化及自噬相关蛋白的变化

目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大鼠随机分为溶剂对照组和SiO2模型组,模型组大鼠采用非暴露式气管滴注法一次性给予SiO2悬浮液建立矽肺模型,溶剂对照组大鼠给予等量生理盐水。造模后两组分别于1、7、14、21、28、60 d处死6只大鼠,用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察两组大鼠不同时间点肺组织常规病理变化和纤维化程度;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺组织匀浆中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;用Western blot法检测肺组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1的相对表达水平。 结果 HE染色结果显示,模型组大鼠肺组织在第1天至第60天持续存在炎性反应,炎性评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色观察结果显示,模型组大鼠肺组织从第14天开始出现少量胶原纤维增生,至第60天可见大量胶原纤维,纤维化评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠肺组织未见胶原纤维增生。ELISA法测定结果显示,模型组大鼠在染尘后各时间点肺组织匀浆中IL-1、TNF-α和TGF-β的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Beclin1蛋白表达水平在第7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肺组织LC3II/LC3I的比值在第1、7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 游离SiO2粉尘致大鼠矽肺发病过程中,自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平与矽肺的不同发展阶段有关。在大鼠染矽尘早期,肺组织以炎性变化为主;随着染矽尘大鼠纤维化程度的加重。     

手掌参醇提取物处理染矽尘大鼠肺纤维化及肿瘤坏死因子-α表达的变化

目的研究手掌参醇提起物对染矽尘大鼠肺纤维化及组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法将120只Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组和手掌参醇提取物与SiO2联合处理组(联合处理组)。采用气管暴露法给予染矽尘组和联合处理组大鼠气管内灌注矽尘,对照组大鼠气管内则给予灌注等量生理盐水。联合处理组自染尘后第1天起每日灌胃手掌参醇提取物2ml(10g/kg),对照组和染矽尘组则给予等量生理盐水每日灌胃直至大鼠处死。天狼猩红染色法结合偏振光显微镜观察肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成。制作大鼠肺组织芯片,用免疫组织化学PV法检测组织芯片TNF-α的表达。结果与染矽尘组比较,联合处理组的大鼠各时间点的肺系数明显降低(P<0.01)。与染矽尘组比较,联合处理组各时间点Ⅰ胶原低于染矽尘组(P<0.01);与染矽尘组比较,联合处理组各时间点Ⅲ胶原均低于染矽尘组,14天和21天差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。与染矽尘组比较,联合处理组各时间点肺组织TNF-α的积分光密度低于染矽尘组(P<0.01)。结论手掌参醇提取物可抑制矽尘诱导的大鼠肺纤维化和大鼠肺组织TNF-α蛋白的表达。     

NAC对矽肺大鼠炎症介质的干预作用

观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对矽肺大鼠早期炎症介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和高敏C-反应蛋白(hsCRP)的干预作用,并探讨炎症因素在矽肺发病过程中的作用。选取Wistar大鼠为研究对象,随机分为模型组、治疗组、对照组3组,每组32只。模型组以气管滴注二氧化硅混悬液建立矽肺大鼠模型。治疗组以大剂量NAC在成模前一周进行每天灌胃干预治疗。分别在染尘后的第3、7、14、28天分批处死大鼠取材。切取肺组织标本作病理切片,行苏木精-伊红(HE)染色,Masson染色,TNF-α免疫组织化学染色,观察肺组织病理变化,用酶联免疫法(ELISA)测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和IL-8的含量,用散射比浊法测定hsCRP含量。模型组大鼠血清和BALF中TNF-α、IL-8、hsCRP的浓度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比较,治疗组各时间点血清和BALF中TNF-α、IL-8和hsCRP浓度均低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结果表明,在矽肺大鼠模型中,大剂量NAC有助于减轻血清和BALF中IL-8、TNF-α、hsCRP等炎症介质的升高,提示NAC可能有助于延续肺纤维化的发生。     

安可临对二氧化硅粉尘所致大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨安可临对二氧化硅(SiO2)粉尘所致大鼠肺氧化损伤的保护作用。方法将30只雄性大鼠(体质量约为200g)随机分为阴性对照组、矽肺模型组和安可临治疗组(简称"治疗组"),每组10只。采用非暴露式气管内注入法染尘,矽肺模型组和治疗组每只大鼠注入1ml 50mg/ml SiO2混悬液,治疗组于染尘第2天开始每天灌胃给予Oncolyn进行干预。饲养28d后测定大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率,肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中的总蛋白含量、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、羟脯氨酸(HYP)含量;观察肺脏病理形态学改变。结果治疗组肺巨噬细胞凋亡率高于对照组但低于模型组;BALF和肺组织匀浆中,模型组和治疗组MDA含量和HYP含量均高于阴性对照组,而T-AOC含量低于对照组,且模型组HYP含量高于治疗组,T-AOC含量低于治疗组(P<0.05);BALF中模型组和治疗组MDA含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);而在肺组织匀浆中MDA含量模型组高于治疗组(P<0.05);病理形态学显示,治疗组比模型组肺脏纤维化程度较轻。结论安可临对于SiO2粉尘所致肺氧化损伤有一定的保护作用。     

熊果酸对矽肺大鼠的早期抗氧化作用

[目的]观察熊果酸(ursolic acid)对矽肺大鼠早期抗氧化作用. [方法]将60只SPF级Wistar雄性大鼠,随机分为对照组、模型组及熊果酸低、中、高剂量组、溶剂对照组,每组10只.除对照组外,其余各组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入二氧化硅(SiO2)悬液(250mg/kg)复制动物矽肺模型.熊果酸低、中、高剂量组自注射SiO2后每天灌胃熊果酸10、20、40 mg/kg,溶剂对照组每天灌胃0.6％羧甲基纤维素钠溶液(10mL/kg),对照组灌胃生理盐水(10 mL/kg),连续56d.检测28d各组大鼠肺脏器系数变化,检测大鼠血清一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,及肺组织核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达情况. [结果]模型组和溶剂对照组大鼠肺脏器系数、血清NO、MDA含量、NF-κB蛋白表达高于对照组,而SOD、GSH-Px含量低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组和溶剂对照组比较,熊果酸各剂量组大鼠肺脏器系数、血清NO、MDA含量、NF-κB蛋白表达降低;SOD、GSH-Px含量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),以上变化均与熊果酸呈现剂量依赖效应. [结论]熊果酸通过纠正氧化抗氧化系统失衡,抑制NF-κB的活化而减缓矽肺纤维化的发生.     

染矽尘大鼠血硅及尿硅含量与肺纤维化程度的关系

目的探讨染矽尘大鼠血、尿中硅含量与肺组织中羟脯氨酸、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量的关系。方法处理组采用气管灌注法注入矽尘混悬液建立大鼠矽肺模型,对照组采用同样处理但用生理盐水代替矽尘混悬液。两组取第28天大鼠的血液、尿液,经样品前处理后用原子吸收分光光度计检测;大鼠肺组织制作石蜡切片,采用天狼猩红染色法,用偏振光显微镜和图像分析系统对肺组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达进行分析;试剂盒检测肺组织羟脯氨酸含量。结果处理组大鼠血硅、尿硅、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原明显高于对照组(P<0.05),羟脯氨酸虽稍低于对照组,但无统计学意义(P>0.05);血硅、尿硅分别与Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原建立直线回归,有统计学意义(P<0.05),血硅、尿硅分别与羟脯氨酸建立直线回归,无统计学意义(P>0.05)。结论血硅、尿硅对早期矽肺纤维化程度可能有一定的指示意义。 更多还原     

Ac-SDKP对ROCK通路介导矽肺大鼠肌成纤维细胞分化抑制作用

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路介导的肌成纤维细胞分化的抑制作用.方法 无特定病原体级建康成年雄性Wistar大鼠120只随机分为对照组(支气管灌注1 ml灭菌生理氯化钠溶液)、矽肺模型组[支气管灌注质量浓度为50 g/L二氧化硅(SiO2)1 ml]、Ac-SDKP前处理组(支气管灌注质量浓度为50 g/L SiO2 1 ml,灌注前给予Ac-SDKP),分别于染尘后1、2、4、8周处死(每亚组10只).采用免疫组织化学法检测肺组织内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布与表达,免疫印迹法检测肺组织内转化生长因子-β1 (TGF-β1)、ROCK、血清反应因子(SRF)、α-SMA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达.结果 与对照组比较,矽肺模型组大鼠肺组织内TGF-β1、ROCK、SRF、α-SMA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增加(P＜0.05),并具有一定时间依赖性.与矽肺模型组比较,Ac-SDKP前处理4、8周组,大鼠肺组织内TGF-β1、ROCK、SRF、α-SMA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均降低(P＜0.05).结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑矽肺大鼠肌成纤维细胞的分化.     

血清硅元素水平对矽肺早期诊断意义的探讨

目的探讨血清硅元素水平对矽肺早期诊断的意义。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测矽肺模型大鼠血清中硅元素含量,同时采用免疫组织化学-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法观察转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在大鼠矽肺模型肺组织的表达。结果与对照组比较,大鼠染尘后血清硅元素水平在染尘第一天即见增高,峰值在16 h;其后的7 d、14 d、21 d和28 d,其含量水平亦显著高于对照组,差异有统计学意义。大鼠染尘后肺组织TGF-β1表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰是染尘后的第7天;TNF-α表达也显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平在染尘早期即见明显升高,且早于TGF-β1、TNF-α的表达,提示此一指标在矽肺的早期诊断中具有一定的价值和意义。 更多还原     

槲皮素对矽肺纤维化大鼠巨噬细胞和核因子-κB的影响

目的观察槲皮素对矽肺纤维化大鼠巨噬细胞(AM)和核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 90只SPF级Wistar雄性大鼠,随机分为对照组(NS组)、模型组(M组)、槲皮素组(Que组),每组30只。M组与Que组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入SiO2悬液(250mg/kg)复制动物矽肺纤维化模型;NS组以同样方法注入生理盐水0.2~0.3ml。3组分别在注射SiO2后第1、3、7、14、21、28天处死动物。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清后,应用血细胞计数板计数AM总数,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,免疫组织化学法检测肺组织中NF-κB表达。结果 M组自第1天开始BALF中AM总数均不同程度增高,于第3天达高峰,第28天降至正常NS组水平。Que组AM总数各时间点与M组对应时间点比较均降低,第1、3、7、14、21天差异有统计学意义(P0.05)。与NS组比较,M组大鼠血清中的TNF-α含量各时间点明显升高,差异有统计学意义(P0.05);Que组TNF-α含量各时间点均升高,与同时期M组、NS组比较,差异有统计学意义(P0.05)。M组大鼠肺组织中NF-κB蛋白表达高峰在第7天,各时间点均高于NS组及Que组,两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。Que组大鼠肺组织中NF-KB的表达较模型组减少,但高于NS组,各时间点两两比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论槲皮素通过抑制NF-κB通路减少大鼠炎症细胞、炎症介质TNF-α等释放,减轻炎症反应过程,缓解肺纤维化过程。     

槲皮素对矽肺大鼠转化生长因子β1 信号转导通路的调节作用

［目的］ 观察槲皮素（Quercetin）对矽肺大鼠转化生长因子β1（transforming growth factor,TGF-β1）信号转导通路的调节作用。 ［方法］ 将75 只SPF 级Wistar 雄性大鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素治疗组,每组25 只。模型组与槲皮素治疗组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入二氧化硅（SiO2）悬液（250 mg/kg）复制动物矽肺模型。槲皮素治疗组自注射SiO2 后每天腹腔注射槲皮素50 mg/kg/1.0 mL生理盐水,对照组以同样方法注入等量生理盐水,共连续处理14 d。动物分别在注射SiO2 后第3、7、14、21、28 天处死。应用羟脯氨酸试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量,免疫组织化学 法检测肺组织TGF-β1 表达,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测TGF-β1 直接底物p-Smad3/7 蛋白表达情况。 ［结果］模型组肺组织中总胶原蛋白含量与同期对照组比较明显增加,分别是对照组的6.28、13.11、11.59 倍（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组与模型组相比,总胶原蛋白含量明显下降,分别是同期模型组的43.05%、38.92%、37.40%（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组的TGF-β1 阳性表达低于模型组,而明显高于对照组,各时间点与对照组比较,差异有统计学意义（P 〈 0.01,P 〈 0.05）。模型组大鼠肺组织中p-Smad3 表达量高于对照组及槲皮素治疗组,各时间点比较,差异均有统计学意义（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组各时间点与相应模型组相比,p-Smad3 表达减少,但仍高于相应对照组（P 〈 0.01）。模型组大鼠肺组织中p-Smad7表达量低于对照组及槲皮素治疗组,各时间点比较,差异均有统计学意义（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组各时间点与对照组、模型组相比,p-Smad7 表达量升高（P 〈 0.01）。 ［结论］ 槲皮素通过减少Smad3 蛋白,增加Smad7 蛋白表达,抑制矽肺过程中胶原蛋白的产生。     

RNA干扰CD36表达对大鼠矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达的影响

为观察RNA干扰CD36基因表达对大鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达是否有抑制作用,选取健康Wistar大鼠96只,随机分为4组,即生理盐水组、SiO2模型组(10 mg SiO2/大鼠)、SiO2+Lv-shCD36(CD36 shRNA表达的重组慢病毒)组和SiO2+Lv-shCD36-NC(对照慢病毒)组。染尘后7、21、28 d处死动物,应用免疫组织化学方法测定大鼠肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,并采用图像分析系统进行定量分析。SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺组织中Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白阳性着色弱于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,SiO2+Lv-shCD36组大鼠Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白的平均积分光密度值低于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,且差异有统计学意义(P<0.05)。提示RNA干扰CD36基因表达对大鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达具有明显抑制作用。 更多还原     

汉防己甲素和乙酰半胱氨酸联合用药对实验性矽肺的疗效观察

目的 比较汉防已甲素(TD)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)单独和联合给药对大鼠矽肺的治疗效果.方法 40只大鼠分为盐水对照组、矽肺模型组、TD治疗组(50 mg/kg) 、NAC治疗组(500 mg/kg)、联合治疗组(TD 50 mg/kg +NAC 500 mg/kg),非暴露法气管内灌注石英粉尘.染尘后第2天起给药,1次/d,6次/周,第30天处死大鼠.计算各脏器系数,观察肺组织病理变化,测定肺组织羟脯氨酸(HYP),丙二醛(MDA),肿瘤坏死[大子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量.结果 各治疗组淋巴结系数、联合治疗组肺系数明显低于矽肺模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).病理观察:盐水对照组肺组织结构完好,肺间质无异常;矽肺模型组见多数矽结节,以Ⅱ～Ⅲ级细胞纤维性结节为主;TD治疗组以I级尘细胞性结节为主,NAC治疗组以I～Ⅱ级矽结节为主,联合治疗组仅见极少数细胞性结节,未出现胶原纤维和肺间质纤维组织增生.TD治疗组和联合治疗组HYP含量明显低于矽肺模型组,而NAC治疗组无明显变化.TD、NA及联合治疗组肺组织中MDA含量分别为(18.80±2.94),(20.13±4.01),(17.05±3.52)nmol/m],均低于矽肺模型组[(23.99±3.26) nmol/ml].矽肺模型组肺组织中IL-6含量为[9.57±8.78] pg/ml,TD和NAC单独治疗后IL-6下降至[(9.22-9.65)、(81.63±5.72)]pg/ml;而联合用药组用药后,IL-6下降到(74.37±3.17) pg/ml.矽肺模型组肺组织中TNF-α含量为(59.05±4.48) pg/ml,TD和NAC单独治疗后TNF-α含量下降至(50.48±2.76)和(54.28±4.30) g/ml;联合用药组用药后,TNF-α含量下降至(49.10±4.98) g/ml.与TD、NAC单纯治疗组比较,联合治疗组HYP、MDA、IL-6、TNF-α含量下降更为明显.结论TD及NAC能减轻染尘大鼠肺组织纤维化程度,降低肺组织中MDA、TNF-α和]L-6含量,抑制和延缓肺纤维化的发生,两者联合用药疗效优于单一用药.     

汉防己甲素治疗的矽肺大鼠肺内酸溶性胶原的变化

本研究比较了正常大鼠、矽肺大鼠和汉防己甲素治疗矽肺大鼠肺内酸溶性胶原在含量、羧甲基纤维素柱层析和氨基酸组成等方面的差异。矽肺大鼠肺中总胶原和酸溶性胶原的含量都增高。在酸溶性胶原中出现了与α_1(Ⅰ)不同的α_1(Ⅰ)~b峰,它随肺纤维化的程度而增高。汉甲组的酸溶性胶原中含有大量被降解的胶原片段,包括α_1链的前体。对上述结果作了初步讨论,并试图解释汉甲抑制矽肺纤维化发生的原因。矽肺组织中胶原蛋白大量增加,但人们对其组成特点却了解甚少。不久前,久保等报道了矽肺组织中胶原蛋白的类型。我们对矽肺大鼠肺中胶原的组成也做了一些观察。本文报道对矽肺大鼠,经汉防己甲素(简称汉甲)治疗的矽肺大鼠和正常大鼠肺中酸溶性胶原的含量、类型、羧甲基纤维素柱层析行为及若干组份的氨基酸组成的研究结果。酸溶性胶原是组织中可为稀酸提取的胶原,其主要成份是Ⅰ型胶原[α_1(Ⅰ)]_2α_2,为两种α肽链组成的三链螺旋。期望此项工作能为阐明二氧化矽引起肺纤维化和汉甲抑制矽肺纤维化的机理提供线索。     

白藜芦醇抑制JAK2/STAT3信号通路对矽肺大鼠纤维化的干预

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol，Res）抑制JAK2/STAT3信号通路对矽肺大鼠纤维化的干预作用。方法 将无特定病原体级的Sprague Dawley雄性大鼠24只按随机数字表法分为对照组（生理盐水）、模型组（SiO2）和Res（50、100 mg/kg）组，每组6只。模型组和Res组经气管一次灌注1 ml（50 mg/ml）SiO2混悬液，对照组灌注1 ml生理盐水。造模24 h后，每天给药1次，Res组分别经口灌胃50、100 mg/kg，对照组和模型组给予等体积的1%的羧甲基纤维素钠。28 d后处死大鼠收集肺组织，计算肺脏器系数，观察肺组织病理学变化，检测羟脯氨酸（HYP）、白介素-18（IL-18）、白介素-1β（IL-1β）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、胶原蛋白Ⅰ（Col-Ⅰ）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-Cad）、波形蛋白和JAK2/STAT3的表达水平。结果 与对照组相比，模型组的肺脏器系数、肺组织病理Szapiel评分、HYP含量和IL-18、IL-1β、TGF-β1、TNF-α水平均明显升高（P<0.05），而Res抑制了这些指标的表达（P<0.05）。蛋白免疫印迹结果显示，模型组Col-Ⅰ、α-SMA、波形蛋白和JAK2/STAT3的蛋白表达高于对照组，E-Cad的表达低于对照组（P<0.05）；Res组Col-Ⅰ，α-SMA、波形蛋白和JAK2/STAT3的蛋白表达水平降低，E-Cad的表达升高（P<0.05）。实时定量反转录聚合酶链反应实验（RT-PCR）结果显示，模型组JAK2/STAT3的mRNA表达高于对照组，Res组JAK2/STAT3的mRNA表达显著低于模型组（P<0.05）。结论 Res能有效减轻矽肺大鼠肺部炎症和纤维化，可能与其抑制了JAK2/STAT3信号通路、影响炎性因子分泌有关。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对TGF-β1介导Smad通路调节在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

[目的]观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化肺组织中胶原含量、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3和Smad 7表达的调节,探讨AcSDKP拮抗矽肺纤维化的作用机制. [方法]选用非暴露式气管灌注法制作大鼠矽肺模型,并给予AcSDKP,采用羟脯氨酸测量法和Western-blot法定量分析肺组织中胶原蛋白的含量.Western-blot法检测肺组织内TGF-31、phospho-Smad2/3及Smad7蛋白的表达. [结果]AcSDKP治疗组胶原含量和Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达低于相对应的矽肺模型组.与相应的对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内TGF-β1、phospho-Smad2/3蛋白表达均增加,而Smad7蛋白表达减弱.与相应矽肺模型组相比,给予AcSDKP后,大鼠肺组织内TGF-β1、phospho-Smad2/3蛋白表达表达均明显降低.而Smad7蛋白表达增强. [结论]AcSDKP可能是通过对TGF-β1介导Smad通路调节而发挥抗矽肺纤维化的作用.     

熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞数量和波形蛋白表达的影响

目的研究熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞(AM)数量和波形蛋白表达的影响。方法将无特定病原体级Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、矽肺组和熊果酸组,每组20只。空白对照组大鼠不予任何处理,其余3组大鼠均通过非暴露式气管滴注法一次性予剂量为250 mg/kg体质量的游离二氧化硅混悬液。其后,空白对照组和矽肺组大鼠灌胃剂量为10 m L/kg体质量的0. 9%氯化钠溶液,溶剂对照组大鼠灌胃10 m L/kg体质量为0. 6%的羧甲基纤维素钠溶液,熊果酸组大鼠灌胃剂量为40 mg/kg体质量的熊果酸,1次/d,连续56 d。在灌胃第7、14、28、56天时各组分别处死5只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测AM数量,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测肺组织中波形蛋白的表达。结果溶剂对照组和矽肺组大鼠4个时间点BALF中AM数量和肺组织中波形蛋白相对表达水平均高于同时间点空白对照组(P 0. 05)。熊果酸组大鼠BALF中AM数量在4个时间点分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P 0. 05),在第7和14天均高于同时间点空白对照组(P 0. 05),但在第28和56天分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P 0. 05)。熊果酸组大鼠4个时间点肺组织中波形蛋白相对表达水平分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P 0. 05),高于同时间点空白对照组(P 0. 05)。免疫组织化学法结果显示:建立矽肺模型后,溶剂对照组和矽肺组大鼠肺组织纤维化程度逐渐加重,波形蛋白阳性表达在各时点有不同程度增加;熊果酸组大鼠肺组织中波形蛋白表达趋势与上述2组相似,但肺组织纤维化程度和肺泡结构破坏程度均相对较轻,波形蛋白阳性表达相对减弱。结论熊果酸可减少矽肺大鼠肺泡巨噬细胞的数量,下调波形蛋白的表达。     

大鼠血清硅元素水平与转化生长因子-β1及肿瘤坏死因子-α的比较

目的探讨血清硅元素水平在矽肺发病机制中的意义和用于矽肺早期诊断的价值。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测矽肺模型大鼠血清中硅元素水平,同时采用免疫组织化学-SP法观察转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠矽肺模型肺组织的表达。结果矽肺模型大鼠染尘后血清硅元素水平明显增高,1d内增长高峰为16h;其后的7、14、21和28d,其水平亦显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠染尘后肺组织TGF-β1表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰是染尘后的第7天;TNF-α表达与对照组比较,在染尘后的7、14、21和28d显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰为染矽尘后的第21天。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平早期即明显升高且早于TGF-β1、TNF-α的表达,血清硅元素水平变化可以作为矽肺的早期诊断指标。     

抗肺纤中药颗粒对染矽尘大鼠肺组织纤维化的干预作用

将64只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和中药干预组(500、1000 mg/kg),对照组大鼠灌注1.0 ml 0.9%生理盐水造模,模型组和中药干预组灌注等量的SiO₂悬浊液,其后模型组和对照组每天灌胃0.9%生理盐水,中药干预组每天分别灌胃500、1000 mg/kg抗肺纤中药颗粒。造模后第14天和第28天处死大鼠,进行肺组织病理学观察及肺部抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、抗转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3蛋白和小鼠来源抗Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的水平检测。结果表明,中药干预可抑制SiO₂诱导大鼠的肺组织TNF-α、IL-1β和TGF-β1水平增高及Col-Ⅰ沉积,减缓大鼠肺泡炎症及矽肺纤维化进展,干预作用可能与TGF-β1/Smad通路有关。