干燥保存角膜穿透移植实验与临床应用

一般认为.干燥保存角膜是无活性的组织。仅限于板层角膜移植应用。我们在临床实践中发现,干燥保存角膜有可用于穿透角膜移植的苗头。为探讨干燥保存角膜可否作为常规穿透角膜移植材料应用。我们进行了系列的动物实验。临床上。我们有选择的将干燥保存角膜。作为挽救眼球的穿透角膜移植材料使用。其综合结果报告于下。     

干燥法长期保存角膜板层移植1267例临床研究

目的：评价干燥脱水法长期保存角膜片在板层治疗性角膜移植术中的效果。方法：保存角膜片选自我院眼库干燥保存符合临床标准、复水透明的完整角膜片，临床病例选自我院角膜病组1976年8月～1999年12月期间行板层治疗性角膜移植患者1267例，从手术前后视力比较、原发病灶控制、植片存活情况进行临床效果综合分析。结果：保存角膜片复水透明合格率为94．9％，临床治愈率：感染性角膜溃疡／穿孔88．8％，血管翳性全角膜白斑98．3％。化学及热烧伤(穿孔，睑球角粘连等)92．1％，圆锥角膜及急性圆锥角膜99．5％，角膜变性(边缘性及前基质层)99．0％。其他88．9％，平均总治愈率93．5％。结论：1．对各种严重的角膜感染、药物治疗无法控制的病人，治疗性角膜移植术是唯一有效的方法。2．采用无水氯化钙一硅胶干燥脱水长期保存的供体角膜能为临床随时提供角膜材料，是一项简单易行、便于推广应用的成功率很高的保存方法。     

干燥角膜在穿透角膜移植中的应用

使用无水氯化钙将角膜片干燥保存,应用于角膜溃疡穿孔2例,取得了良好效果,报告如下:一般情况:2例均为单疱角膜炎穿孔,1例为住院病例,1例为门诊病例.病程分别为30天及16天.为保存眼球,在无新鲜角膜情况下采用干燥角膜植片替代行穿透性移植,达到暂时修复穿孔的目的.     

长期干燥保存兔角膜行穿透角膜移植的实验研究

利用保存16～30个月的兔角膜,对9只兔(9眼)行部分穿透角膜移植实验。结果有3只兔植片保持透明4个月以上,其中1兔已达1年以上。提示:长期干燥保存的免角膜内皮细胞并非完全死亡。     

干燥法长期保存角膜片板层治疗性角膜移植1267例临床研究

目的：评价干燥脱水法长期保存角膜片在板层治疗性角膜移植术中的效果。方法：保存角膜片选自我院眼库干燥保存符合临床标准、复水透明的完整角膜片，临床病例选自我院角膜病组1976年8月-1999年12月期间行板层治疗性角膜移植患1267例，从手术前后视力比较、原发病灶控制、植片存活情况进行临床效果综合分析。结果：保存角膜片复水透明合格率为94.9％，临床治愈率：感染性角膜溃疡/穿孔88.8％，血管翳性全角膜白斑98.3％，化学及热烧伤（穿孔，睑球角膜粘连等）92.1％，圆锥角膜及急性圆锥角膜99.5％，角膜变性（边缘性及前基质层）99.0％，其他88.9％，平均总治愈率93.5％；结论：①对各种严重的角膜感染、药物治疗无法控制的患，治疗性角膜移植术是唯一有效的方法。②采用无水氯化钙-硅胶干燥脱水长期保存的供体角膜能为临床随时提供角膜材料，是一项简单易行、便于推广应用的成功率很高的保存方法。     

干燥保存角膜的实验研究与临床应用

利用干燥保存７－５７日及１６－３０个月的兔角膜，行同种异体部分穿透性角膜移植后，前者３７只眼中，透明愈合８只眼；后者９只眼中，透明愈合３只眼。用保存１０－５７天的猴眼角膜移植后，观察９只猴，透明愈合３只眼，半透明２只眼。临床上，用燥保存６天至８年５个月人角膜，行治疗性和挽救眼球的各种类型穿透性角膜移植２５例，观察时间，最短１６天，最长５年９个月，植片透明愈合８只眼、半透明１２只眼。视力有不同程度改     

应用干燥保存猴角膜对猴眼部分穿透角膜移植实验研究

用干燥保存10～57d 猴角膜,对10只猴(10眼)进行同种异体部分穿透角膜移植。共观察了9眼,最短者1个月,最长11个月以上。结果透明愈合者3眼,半透明2眼。对维持透明8个月的植片,行茜素红和台盼兰联合染色,内皮细胞层呈正常形态。提示:干燥保存角膜内皮细胞,可能并非死细胞。在活体房水培育和再水合作用下,经过一段复苏过程,可以恢复其正常形态和功能。     

干燥保存角膜行部分穿透角膜移植的动物实验研究

目前角膜移植材料的主要保存方法有:1.短期保存法(4℃冰箱内湿房保存法),MK液保存法;2.中期保存即器官培养法,KSol液保存法;3.长期保存法,为脱水或冻干保存法(用于板层角膜移植)和超低温冷藏保存法。上述保存法各有利弊。为找出方便易行、既适于板层角膜移植又可行穿透角膜移植的角膜材料保存法,我们在应用干燥、脱     

甘油长期冷冻保存兔角膜用于穿透性角膜移植效果观察

目的探索不同条件下甘油长期冷冻保存的角膜应用于穿透性角膜移植的可靠性和可行性。方法25只兔眼随机分为4个保存组和1个对照组，保存组按不同方法置于无水甘油中-25℃保存2月，最终全部行同种异体PKP术，术后以裂隙灯显微镜、A超以及锥蓝-茜素红活性染色等测得各组的植片透明率、厚度及角膜内皮细胞（CEC）存活率等指标并进行比较。结果术后各组植片均可见大量活性CEC存在，植片CEC与植床CEC分界清楚，形态不同。角膜片保存组术后的植片透明率、厚度以及CEC存活率均显著好于跟球保存组，角膜片内皮面添加透明质酸钠保存又优于角膜片直接保存。结论甘油冷冻保存法可以长期保存CEC活性，其中以角膜片内皮面添加透明质酸钠后保存最为可靠，这一改良方法可以满足穿透性角膜移植术的需要。     

保存角膜行植床带周边后板层大植片PKP的临床观察

目的:评价用保存角膜行植床带周边后板层的大植片穿透性角膜移植术(PKP)的临床疗效和并发症。方法:回顾性分析2003-12/2006-12我院收治的角膜严重病变的患者108例(116眼),其中用保存角膜联合植床带周边后板层大植片穿透性角膜移植治疗63眼为改良组用传统手术方式新鲜角膜植片移植治疗53眼。比较两组术后的角膜植片、排斥反应及并发症情况。结果:改良手术组治疗的63眼中,8眼(12.7%)发生不同程度的植片排斥反应、术后浅前房2眼(3.2%)、虹膜前粘连1眼(1.6%)、继发青光眼2眼(3.2%);传统手术组治疗的53眼中,植片排斥反应15眼(28.3%)、术后浅前房11眼(20.8%)、虹膜前粘连8眼(15.1%)、继发青光眼6眼(11.3%)。两组的术后的植片排斥反应率和并发症有显著差异(P<0.05)。结论:用保存角膜联合植床带周边后板层行大植片穿透性角膜移植术是降低术后免疫排斥反应,延长植片的存活时间的有效方法。     

玻璃体视网膜手术联合穿透性角膜移植手术因素分析

目的：观察在临时人工角膜下经扁平部玻璃体视网膜手术联合穿透性角膜移植手术的疗效，探讨影响手术成功的因素。 方法：回顾总结我院1996-12／2005-06行玻璃体视网膜手术联合穿透性角膜移植患者手术18例，主要分析病吏，前后节功能恢复以及手术和手术并发症等因素。 结果：13眼视力较前提高，其中视力在0．05～0．1之间者5眼；0．1～0．3者4眼，0．5者1眼；视力与术前无变化者5眼，10眼角膜植片透明，2眼再次做角膜移植手术，6眼出现角膜植片水肿、混浊，其中3眼为角膜排斥反应，3眼为角膜内皮失代偿。 结论：尽管联合手术的视功能恢复是有限的，但至少提高了患者的生活质量。     

深低温长期保存角膜穿透性角膜移植术临床报告

目的　评价深低温长期保存角膜在穿透性角膜移植术中的应有价值。方法　应用深低温长期保存２１ ～１ ２３０ｄ 的供眼角膜行穿透性角膜移植术３４ 例（３５ 眼） 。结果　术后随访２ ～３０（ 平均７３ ±４０） ｍｏ ,角膜植片透明率达８２９ ％ ,部分患者视力改善,角膜植片内皮细胞密度达９０３ ～３ ０８３７ 个·ｍ ｍ －２（ 平均１ ６４１８ ±５９９３ 个·ｍ ｍ － ２） 。结论　深低温长期保存角膜具有较好的临床应用价值     

Long-term changes in corneal endothelium following penetrating keratoplasty. A specular microscopic study

One hundred clear corneal grafts with a minimum follow-up of 10 years and average follow-up of 17.4 years were studied with specular microscopy. Central and peripheral graft endothelial cell counts as well as central corneal thickness measurements were done and these were correlated with the following parameters: diagnostic subgroups; donor age; graft age (follow-up time); and the postoperative clinical course. The average central endothelial cell counts for the entire series was 684 cells/mm2. Peripheral cell counts were performed in 78 eyes and averaged 749 cells/mm2. Central corneal thickness was measured in 80 eyes and averaged 0.49 mm. There were no statistically significant differences in central or peripheral cell counts when analyzing donor age, graft age, or postoperative course. When cell counts were examined among the diagnostic subgroups, those in the hereditary stromal dystrophy subgroup had a significantly lower cell density when compared to those in the keratoconus subgroup.     

脱细胞角膜材料的生物相容性研究

目的研究异种脱细胞猫角膜板层角膜移植术后的组织相容性。方法24只18周龄的健康新西兰白兔随机平均分成3组：A组为脱细胞猫角膜材料→兔板层移植组,B组为猫→兔异种新鲜角膜植片板层移植组,C组为兔→兔同种异体新鲜角膜植片板层移植组。用扫描电镜观察术后不同时期术眼角膜的组织病理学改变,抽取兔血测定CD4^＋/CD8^＋T细胞百分比。结果术后1个月3个组间角膜植片炎症反应指数组间比较差异均无统计学意义;2个月A组与B组、A组与C组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。3个月A组与B组、A组与C组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。3个组间术后同期7、15、30d兔外周血CD4＋T细胞和CD8＋T细胞活化率差异均无统计学意义（P〉0.05）。组织切片显示术后3个月内,B、C两组角膜植片炎症反应轻,植片内皮细胞吸收,组织结构基本正常。A组角膜植片炎症反应显著,结构较紊乱,新生血管增生。扫描电镜可见B、C2组角膜上皮结构基本正常,细胞连接较好。A组扫描电镜可见有上皮缺损。结论脱细胞处理的异种猫角膜移植后生物相容性较新鲜角膜差,免疫反应无显著差异。     

不同种族角膜植片对穿透性角膜移植术效果的影响

目的 通过观察不同种族间穿透性角膜移植手术的效果,总结不同种族之间穿透性角膜移植的可行性。设计 回顾性病例系列。研究对象 北京同仁眼科中心2002年10月至2003年3月因角膜白斑、角膜内皮失代偿、角膜移植术后植片失败等接受穿透性角膜移植术患者10例（10眼）。方法 采用国际组织库提供的中期保存角膜植片进行穿透性角膜移植术,其中高加索人种角膜8片,西班牙人种1片,非洲人种1片。术前收集患者资料,术后进行随访和临床观察,评价角膜植片的存活情况以及疗效。主要指标 视力,角膜植片透明度,角膜新生血管分级。结果 10例患者平均随访（12.6±3.86）个月,4例患者角膜植片基本保持透明,视力平均提高1~2行。6例（60%）患者出现植片混浊、植片水肿、新生血管长入等排斥反应,视力不提高。结论 本文小样本观察显示不同种族角膜供体可以用于穿透性角膜移植治疗。（眼科, 2013, 22:98-100）     

甘油冷冻保存角膜深板层移植治疗真菌性角膜溃疡的临床研究

目的探讨甘油冷冻保存的供体角膜行深板层角膜移植术治疗浅、中层真菌性角膜溃疡的手术适应证及临床效果。方法57例（57眼）经综合抗真菌措施治疗无效的浅、中层真菌性角膜溃疡施行深板层角膜移植术,随访8～24月,观察术后复发率、视力恢复、植片透明及并发症发生情况。结果57例中,52例治愈,成功率91.23%;5例复发,复发率8.77%。矫正视力0.1～0.2者20眼,0.3～0.5者24眼,〉0.5者13眼。17例出现新生血管;13例发生排斥反应,均得到有效控制。植片全部透明。结论使用甘油冷冻保存的角膜供体行深板层角膜移植术既能及时去除病变组织,达到治疗目的,又有一定的增视效果,对药物治疗无效的浅、中层真菌性角膜溃疡是有效的手术方式。     

深板层角膜移植及穿透角膜移植治疗圆锥角膜的对比研究

目的:观察圆锥角膜患者行深板层角膜移植和穿透角膜移植术后视力、角膜曲率及角膜内皮细胞的变化。方法:将2003-01/2009-07在我院行手术治疗的42例47眼圆锥角膜患者分为两组,一组接受深板层角膜移植(27眼),另一组接受穿透角膜移植(20眼)。观察两组患者术后3,6,12,18mo的裸眼视力、最佳矫正视力、角膜地形图改变和角膜内皮细胞状态。结果:深板层角膜移植组术后裸眼视力平均提高4行,最佳矫正视力平均提高7行,无排斥反应发生。穿透角膜移植术后裸眼视力平均提高5行,最佳矫正视力平均提高8行,有5例发生排斥反应。两种术式相比,术后散光程度无明显差异,深板层角膜移植组角膜内皮细胞丢失速率低于穿透角膜移植组。结论:对于非急性期圆锥角膜患者深板层角膜移植术优于穿透角膜移植术。     

同一猴、兔眼角膜细胞成分原代培养的实验研究

目的建立从同一角膜片上分离培养角膜上皮、基质和内皮细胞的方法,为研究角膜细胞间的相互作用机制奠定基础。方法采用消化法分离培养猴眼角膜内皮细胞、上皮细胞和兔眼角膜上皮细胞．组织块培养法培养基质成纤维细胞和兔角膜内皮细胞。细胞接种于12孔培养板,并于培养不同时间行Wright染色检查细胞生长情况。结果采用消化法和组织块培养法能成功地培养猴、兔角膜上皮、基质和内皮细胞。猴、兔角膜内皮细胞培养1wk后,均能形成内皮细胞单层,细胞类似天然的六角形态．且以猴内皮细胞明显;猴角膜上皮细胞培养3～4d生长旺盛、但难以形成细胞单层,兔上皮细胞生长旺盛,1wk后已达融合状态,细胞呈膜状伸出板层伪足;猴、兔基质成纤维细胞易培养,1wk后已融合成单层细胞,细胞排列整齐,类似纤维走行样外观。结论从同一角膜材料中能分别培养出角膜3种细胞成份,消化法和组织块培养法相结合既能节省材料,又简单易行。