缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞STAT3表达及细胞增殖的影响

目的探讨缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)信号转导及转录活化因子3(STAT3)表达及细胞增殖的影响。方法采用组织块法原代培养PAsMCS并进行缺氧处理,半定量RT-PCR,Western blot法分别检测缺氧2、6、12和24h STAT 3mRNA和酪氨酸活性水平的变化;。H-TdR掺入法观察缺氧6、12和24h细胞增殖情况。结果缺氧2hSTAT3mRNA表达升高,6h达高峰。12h开始下降,但仍高于常氧组;Western blot定量分析示缺氧6hSTAT3酪氨酸磷酸化水平升高,12h达高峰,24h下降;^3H-TdR掺入法测定结果示PASMCs。H-TdR掺入量在缺氧6h开始增加,随着缺氧时间延长,。H-TdR掺入量逐渐增加,至缺氧24h。HTdR掺入量最高。结论缺氧诱导PASMCs中STAT3 mRNA和蛋白酪氨酸活性水平增加,提示STAT3在缺氧致PASMCs增殖过程中可能发挥重要作用。     

脱氢表雄甾酮对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道的作用

本实验应用膜片钳技术 ,研究钙激活性钾通道开放剂脱氢表雄甾酮 (DHEA)对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (SMCS)钾通道的作用 ,从离子通道水平探讨DHEA对CHPH作用机制 ;同时用右心插管法证实DHEA对CHPH的降压作用 ,并观察DHEA对体动脉压的影响 ,以期筛选有效治疗CHPH而副作用小的新药。作者选取 5 0只雄性Wistar大鼠 ,随机分为对照组(A组 ,1 0只 )和慢性缺氧组 (B组 ) ,B组又随机分为B1、B2、B3、B4组 (每组各 1 0只 ) ,B组大鼠均以常压缺氧 3周建立大鼠慢性缺氧肺动脉高压模型。采用急性酶分离法分离得到大鼠肺动脉平滑肌…     

缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的效应

本实验应用免疫组织化学染色 ,3H -TdR掺入 ,流式细胞仪检测技术探讨缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PSMC)增殖的影响。结果 :缺氧 12h其增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性反应颗粒增加 ,2 4h明显增加 ,其含量是常氧组 2 .1倍。低氧 8h可使PSMC的3H -TdR摄取量减少 (P <0 .0 5 ) ,12h则促进其摄取 ,2 4h则明显较常氧对照组增多 (P <0 .0 5 )。流式细胞仪检测显示其G2 /M期细胞比例明显增多 (P <0 .0 1) ,G0 /G1 期细胞比例明显减少 (P <0 .0 1) ,细胞内总蛋白含量有所降低 (P <0 .0 1)。结论 :缺氧早期抑制或损害PSMC增殖 ,而后促使PSMC的表型改变 ,出现增殖 ,从一侧面证实缺氧可以直接促进PSMC增生。     

不同因素对肺动脉平滑肌细胞线粒体游离钙的作用效应

目的:通过观察肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)在化学缺氧、细胞膜去极化和血管舒缩活性物质等不同因素作用下线粒体游离钙([Ca2 ]mit)的动态变化特点,探讨:[Ca2 ]mit与缺氧性肺动脉收缩(hypoxia pulmonary artery constriction,HPV)发生之间的关联。方法:分离成年Wistar大鼠PASMCs进行体外培养,负载线粒体钙荧光指示剂Rhod-5F(5μmol/L),分组施加2mmol/L连二亚硫酸钠(Na2S2O4)化学缺氧、18mmol/LKCl、10-6mol/L血管紧张素II(Ang II)和100μmol/L一氧化氮供体(SIN-1)等不同刺激因素,在激光共聚焦扫描显微镜下观察[Ca2 ]mit的动态的变化。结果:用Na2S2O4对PASMCs施加缺氧刺激,[Ca2 ]mit荧光强度在缺氧刺激后迅速增高,持续约30s后回降至低于起始值,随后开始回升,达到并逐渐高于起始值,继而于100s缓慢回升,逐渐高于起始时荧光强度;向PASMCs加入KCl后,[Ca2 ]mit迅速升高,40s后缓慢下降,于400s后恢复并维持在初始值;向PASMCs加入AngII后,[Ca2 ]mit迅速小幅度升高,于20s时开始降低,于100s时至最低,形成低谷平台,持续至400s时逐渐回升,于600s恢复接近初始水平;向PASMCs加入SIN-1后,[Ca2 ]mit迅速降低,于80s时降至最低,形成低谷平台持续至160s时开始回升,于200s时回升至平稳水平但仍低于初始值。结论:给予PASMCs缺氧、细胞膜去极化、舒缩血管活性物质等刺激,可以引起线粒体Ca2 发生相应变化,线粒体[Ca2 ]mit可能在HPV发生中也起着重要作用。     

慢性缺氧大鼠肺动脉胶原堆积与肺动脉ACE活性的相关分析

慢性缺氧大鼠肺动脉胶原堆积与肺动脉ＡＣＥ活性的相关分析５１００１０广州广州军区广州总医院蔡闯邹霞英辛达临赖日权关键词缺氧症；胶原；血管紧张素转换酶；肺动脉高压中国图书资料分类号Ｒ３６４．４研究表明，心血管肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）与高血压、主动脉血...     

缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞分泌血管活性肽的影响

用放射免疫测定和免疫组化法缺氧对培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）自分泌心钠素（ＡＮＰ）、血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）和内源性洋地黄因子（ＥＤＬＦ）的影响。无氧培养２４ｈ末，ＰＡＥＣ分泌ＡＮＰ减少４３．５％（Ｐ〈０．００１），ＡＴⅡ和ＥＤＬＦ呈明显负相关（ｒ为－０．８８和－０．７８６，Ｐ〈０．０１），细胞内ＡＮＰ阳性颗粒也显著减少（Ｐ〈０．００１）；ＰＡＳＭ分泌ＡＮＰ无显     

二氯醋酸钠对模拟高原肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1·5亚型的作用研究

本文通过研究电压门控性钾通道亚型（Kvl·5）在高原低压低氧性肺动脉高压中的作用并观察二氯醋酸钠（DCA）对高原低压低氧大鼠肺小动脉平滑肌细胞（PASMCs）Kvl·5基因表达的影响，旨在探讨DCA对高原性肺动脉高压的治疗作用。作者选取24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（N组，8只）、高原低压低氧组（HA组，8只）及DCA干预组（DCA组，8只）。     

缺氧叠加三氯化铁大鼠肺动脉高压模型肺血管内皮细胞的病理变化

目的 :观察大鼠缺氧叠加静注FeCl3 致肺动脉高压模型肺动脉内皮细胞的病理变化。方法 :常规病理组织学和透射电子显微镜及多功能显微镜观察肺动脉内皮细胞的变化。结果 :缺氧叠加静注FeCl3 2周、4周时肺动脉平滑肌肥厚 ,肺间质有大量炎细胞浸润 ,血小板聚集 ,微血栓形成 ,血管内皮剥脱 ,内膜下组织暴露 ,内膜下及弹力纤维变形 ,内皮细胞成片脱落为循环内皮细胞。结论 :缺氧叠加静注FeCl3 引起的肺动脉内皮细胞脱落 ,内膜下组织暴露 ,微血栓形成和平滑肌肥厚是肺动脉高压形成的病理学基础     

缺氧预处理对预防肢体制动大鼠骨骼肌萎缩的作用

目的:了解缺氧预处理对肢体制动大鼠骨骼肌萎缩的作用。方法:将60只健康、体重150~200g的雌性SD大鼠按体重配对原则随机分为对照组(CON)、大鼠右后肢石膏固定组(IB)、缺氧预处理+大鼠右后肢石膏固定组(HCP)三组,每组20只。HCP组大鼠连续进行1周的缺氧预处理。每天处理的方法为:氧浓度10%,每次处理30分钟,间隔5分钟,连续处理5次。缺氧预处理完成后,将IB及HCP组大鼠右后肢石膏固定3周。实验结束处死三组大鼠,取双后肢比目鱼肌,分别称重。于比目鱼肌中段切取部分肌肉组织,制作石蜡切片,HE染色后用自动图像分析仪测定肌细胞直径及截面积,取部分比目鱼肌匀浆液上清液用于超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的检测。结果:大鼠右后肢石膏固定3周后,IB组大鼠右后肢比目鱼肌湿重、肌细胞直径及肌纤维截面积明显低于CON组及HCP组。与IB组相比,HCP组比目鱼肌SOD活性明显升高,MDA水平明显降低。结论:缺氧预处理可提高大鼠骨骼肌的抗氧化能力,对肢体制动大鼠骨骼肌萎缩有预防作用。     

模拟8000m低氧对大鼠脑内环核苷酸含量的影响

利用减压舱模拟８０００ｍ低氧和放射免疫的方法，观察了大鼠脑内环—磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）和环—磷酸鸟鲁（ｃＧＭＰ）含量的变化。以西宁地区的海拔２２６０ｍ作为对照，并进行比较。结果发现，海拔８０００ｍ低氧时，大鼠脑内ｃＡＭＰ含量明显升高。同海拔高度比较，小脑ｃＡＭＰ的含量明显高于大脑皮层内的含量（Ｐ＜０．０１）。尽管小脑ｃＧＭＰ的含量在８０００ｍ组明显升高，但在同海拔高度小脑与大脑皮层ｃＧＭＰ的含量间无显著性差异。本研究结果提示脑内环核苷酸的含量是脑缺氧反应的敏感指标，而且以ｃＡＭＰ的反应更灵敏。     

脂多糖对复合培养的肺微血管内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞生长周期的影响

以脂多糖（LPS）处理复合培养的大鼠肺微血管内皮细胞（LMVEC）和肺动脉平滑肌细胞（PASMC），利用流式细胞仪检测LMVEC和PASMC细胞周期的变化。结果发现，单独培养和复合培养时，LPS均能使G1期细胞减少，S G2/M期细胞增多；LPS处理16h后，复合培养组LMVEC和PASMC较单独培养组G1期细胞增多，S G2/M细胞数减少；LPS可使单独培养的LMVEC S期细胞增多。说明LPS可促进LMVEC和PASMC分裂、增殖，二者复合培养可减轻LPS引起的LMVEC和PASMC增殖作用；LMVEC和PASMC在细胞增殖方面存在着复杂的调节关系。     

模拟高原缺氧不同时间对大鼠心肌线粒体功能的影响及其在习服—适应中的意义

目的：观察模拟高原缺氧不同时间对心肌线粒体的影响,探讨模拟高原缺氧对机体影响的细胞机制以及线粒体功能改变在机体对缺氧习服—适应中的意义,为高原缺氧性疾病的防治提供理论基础。方法：观察急性连续缺氧（模拟５ ０００ｍ 高原）３、１２、３６ 和７２ 小时以及慢性间断缺氧１４、２８ 和４２天对大鼠心肌线粒体的影响。测定了线粒体呼吸控制率、琥珀酸脱氢酶及细胞色素氧化酶活性和线粒体丙二醛含量。结果：各时间点的线粒体呼吸控制率比对照组都显著降低,急性缺氧的下降程度较慢性组为甚,其中急性缺氧３ 小时组抑制程度最显著。细胞色素氧化酶活性在急性缺氧３ 小时末显著降低,随后有所回升,而慢性缺氧则使细胞色素氧化酶活性升高。琥珀酸脱氢酶活性在急性缺氧组升高。线粒体丙二醛含量在急性与慢性缺氧各时间点均显著升高,其中以３ 小时组的丙二醛值为最高。结论：急性缺氧、尤其是在最初３ 小时心肌线粒体呼吸功能受抑制较严重,线粒体细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性升高可能有一定的代偿适应意义。     

常氧与缺氧状态下脑啡肽和吗啡对兔肺动脉平滑肌增殖的调控作用

探讨常氧与缺氧状态下脑啡肽对兔肺动脉平滑肌增殖的调控作用及机制,为解决经皮腔内冠脉成形术支架后冠脉再狭窄问题提供新的理论依据。无菌取出新西兰白兔动脉段,在常氧和缺氧条件下胺照Ｒｏｓｓ贴片培养平滑肌,和相差显微镜,透射电镜和（－肌动蛋白体鉴定平滑肌细胞,四唑盐比色法及３－ＨｄＲ参人实验检测平滑肌的生长状况。     

氧化低密度脂蛋白及辛伐他汀对平滑肌细胞信号通路蛋白激酶活性和胞浆内游离钙的影响

分别应用γ-^32P-ATP磷酸转移法和Fluo－3／Am荧光负载、流式细胞术检测氧化修饰LDL（oxLDL）及辛伐他汀对大鼠主动脉平滑肌细胞（AS MC）蛋白激酶C（PKC）和胞浆内游离钙（[Ca^2 ]i)水平的变化。结果表明,oxLDL呈剂量依赖方式促进ASMCPKC活性增加,14min时达峰值,然后缓慢下降,30min仍维持较主水平。胞浆内[(Ca^2 ]i升高分两个时相,即快速相和持续相。移去细胞外液钙,oxLDL仍引起快速相,但持续相消失,而辛伐他汀能明显抑制oxLDL引起的ASMCPKC活性增加,并显著降低持续相胞浆内钙水平,但对快速相无影响。提示oxLDL能引起ASMC内信号通路PKC及[(Ca^2 ]i的动态变化,二者密切相关。oxLDL刺激ASMC[Ca^2 ]升高的快速相是由胞浆钙池释放引起,持续相升高是由胞外钙内流引起。辛伐他汀抑制ASMCPKC活性可能是通过胞内[Ca^2 ]i变化起作用。     

慢性缺氧大鼠肺血管结构与一氧化氮的变化

目的 :观察慢性低氧环境下大鼠NOS、NO的含量 ,及肺动脉压和肺血管结构的变化 ;方法 :将Wistar大鼠从 2 2 60m的高度带到 3 780m处 ,饲养 3 0天后分别测试肺动脉压的变化 ,NOS、NO的含量 ,观察肺部血管结构的改变 ,并与同一海拔高度的适应动物高原鼠兔进行了比较 ;结果 :缺氧 3 0天的大鼠肺动脉压明显高于高原鼠兔 ,两组分别为3 .5 4kPa± 0 .1 6kPa和 1 .5 9kPa± 0 .0 8kPa,P <0 .0 1 ,NOS的活性及NO的含量低于高原鼠兔 ;两组肺小血管在直径基本相同的情况下 ,大鼠血管壁明显增厚 ,血管壁占管径的百分比为 2 8.40 % ,高原鼠兔肺小动脉壁较薄 ,血管壁占管径的百分比为 1 2 .42 % ,两组间比较P<0 .0 1。肺小动脉中膜厚度与肺动脉平均压呈正相关r=0 .68,r =0 .87;结论 :低氧环境下NOS及NO的代谢异常是缺氧性血管结构重建和肺动脉高压形成的重要因素     

梯度降压缺氧预激对小鼠心肌缺氧耐受性影响及其机制初探

目的：探讨反复缺氧预激对小鼠缺氧耐受性的影响及其可能机制。方法：用正常小鼠及经５次梯度降压缺氧预激小鼠分别制备血浆及心肌匀浆。将来自正常小鼠及预激小鼠的血浆分别注入两组正常小鼠腹腔（Ｎｏｎ－ＰＰ组和ＰＰ组），将来自正常小鼠及预激小鼠的心肌匀浆分别注入另两组正常小鼠腹腔（Ｎｏｎ－ＰＨ组和ＰＨ组）。各小鼠分别于注射后３０ｍｉｎ置于２８．７ｋＰａ低压缺氧环境下测心电活动时间（ＣＥＡＴ）。结果：ＰＨ组ＣＥＡＴ比Ｎｏｎ－ＰＨ组延长１．８０倍（Ｐ＜０．０１），ＰＰ组ＣＥＡＴ比Ｎｏｎ－ＰＰ组延长１．２９倍（Ｐ＜０．０１）。结论：反复梯度降压缺氧预激能明显增强小鼠心肌的缺氧耐受性，该作用与反复缺氧预激促使机体各组织器官产生某些具有可转移性的保护性物质有关     

创伤后活化T细胞内环核苷酸含量与T细胞功能关系的实验研究

研究了创伤小鼠活化Ｔ细胞内环磷酸泉苷、环磷酸鸟苷与Ｔ细胞功能的关系。结果显示，创伤后活化Ｔ细胞内ｃ－ＡＭＰ含量升高，ｃＧＭＰ含量下降，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值增加。