铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的:了解本院2010年1-12月铜绿假单胞菌的分离情况及耐药特点.方法:从2010年1-12月老年住院患者的痰液、分泌物等标本中分离出102株铜绿假单胞菌,统计其样本来源、科室分布、对不同抗菌药物的敏感性.结果:在检出的102株铜绿假单胞菌中58株来自呼吸内科,占56.86%;其次为神经外科,占13.73%,比较敏感的抗菌药物依次是多粘菌素(100%)、亚胺培南(82.36%)、哌拉西林/他唑巴坦(74.51%).结论:铜绿假单胞菌为非发酵菌中的假单胞菌属,很容易造成机会性感染,临床应合理选用抗菌药物,从而减少耐药菌株的产生,有效抑制铜绿假单胞菌耐药率过快增长,同时应不断检测抗菌药物的敏感性,为临床合理用药提供科学依据.     

铜绿假单胞菌的治疗策略

近年来铜绿假单胞菌感染明显增多,且治疗困难,已成为临床医师十分棘手的问题。本文以作者的经验为主,结合国内外近期文献进行综述,提出治疗的策略。     

铜绿假单胞菌的耐药性特点

近年来下呼吸道铜绿假单胞菌(Pseudomnoas aeruginosa,PA)感染呈上升趋势,尤是慢性阻塞性肺病晚期和颅脑等重度创伤行机械通气后的病人,常在痰培养时发现PA感染。在所有院内感染致病菌中,PA已列入首位。为了解PA对常用抗生素的耐药性情况,本文参阅近年文献作一综述。     

外科病房铜绿假单胞菌耐药性分析

目的:了解我院外科病房铜绿假单胞菌对多种抗菌药物的耐药性,为临床抗感染提供依据。方法:采用回顾性分析方法统计256株铜绿假单胞菌的药敏结果。结果:铜绿假单胞菌耐药率较低的抗菌药物有头孢吡肟、头孢他啶、亚胺培南、环丙沙星、美洛培南。结论:根据体外药敏结果选择合适的抗生素,加强机体自身免疫力,是治疗铜绿假单胞菌的关键。     

铜绿假单胞菌临床耐药性分析

由于激素和免疫抑制剂的长期应用,特别是广谱抗生素的大量使用和滥用,导致世界性细菌耐药性日趋严重[1].铜绿假单胞菌在医院感染中占有越来越大的比重.铜绿假单胞菌对多种类型的抗生素耐药,是临床治疗过程中抗生素的选择受到很大的限制.铜绿假单胞菌的耐药质粒不仅可以在同种细菌中传播,而且可以在异种细菌中引起耐药传播,使临床治疗更为复杂.我们对本院住院病人临床标本中分离的铜绿假单胞菌分布及耐药特点进行回顾性分析,结果如下.     

铜绿假单胞菌耐药分析

【目的】分析本院铜绿假单胞菌的耐药情况，为医院合理使用抗菌药提供可靠的实验依据。【方法】收集本院2001年3月-2004年2月间各种临床标本分离的铜绿假单胞菌214株，应用API细菌鉴定系统进行鉴定，并用K-B法进行药敏实验。【结果】铜绿假单胞菌对亚胺培南、哌啦西林／三唑巴坦、哌啦西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢他啶、头孢哌酮、头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星的耐药率分别为1．0％、18．5％、20．3％、92．1％、90．6％、12．7％、15．1％、8．2％、32．3％、9．4％、8．9％。【结论】临床应根据药敏实验合理使用抗生素，以减少耐药菌株的产生。     

铜绿假单胞菌的耐药性

近年来,铜绿假单胞菌(PA)感染有逐年增多的趋势,已成为医院感染的常见致病菌,为了解PA医院感染及耐药现状,我们采用回顾性研究的方法,收集了2003年1月～2004年12月在我院临床分离检出的106株PA,并对药敏结果进行分析,总结其耐药特点及其耐药机制,为临床合理使用抗生素提供依据.     

铜绿假单胞菌耐药性监测研究

目的:观察和监测铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药变化,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:连续检测2002年至2004年本院铜绿假单胞菌的耐药状况。药敏试验采用K-B纸片法,判定标准依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准。结果:铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药率有逐年升高趋势;对铜绿假单胞菌保持较高活性且耐药率<20%的抗生素有阿米卡星、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、环丙沙星。结论:铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率较高,对铜绿假单胞菌感染的治疗,可首选阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、头孢吡肟、环丙沙星等。     

铜绿假单胞菌的治疗策略

近年来铜绿假单胞菌感染明显增多,且治疗困难,已成为让临床医师十分棘手的问题。本文以作者的经验为主,结合国内外近期文献进行综述,提出治疗的策略。     

霍乱肠毒素基因DNA疫苗的构建和体外表达

目的构建霍乱弧菌ctxAB融合基因分子佐剂DNA疫苗,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法用限制性核酸内切酶从原核表达重组质粒pET32a-ctxAB上切下ctxAB基因,导入真核表达载体pcDNA3.1（＋）,重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-ctxAB。用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxAB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Western blot对pcDNA3.1-ctxAB的瞬时表达产物和稳定表达产物进行鉴定。结果真核表达重组质粒pcDNA3.1-ctxAB成功转入NIH3T3细胞,利用免疫荧光技术检测到其在细胞膜和细胞浆中获得瞬时表达,对稳定转染细胞用Western blot分析,发现在约40.5kDa处有阳性杂交信号。结论成功构建霍乱弧菌ctxAB基因分子佐剂DNA疫苗,并在NIH3T3细胞中获得表达。     

牡荆素对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响

目的 探讨牡荆素与抗生素联用对铜绿假单胞菌生物膜的影响。方法 通过微量肉汤稀释法检测 铜绿假单胞菌对应各抗生素的最低抑菌浓度;利用96 孔细胞培养板结合结晶紫染色法探讨牡荆素单独使用 及与抗生素联用对铜绿假单胞菌生物膜的影响。结果 当牡荆素的浓度≥ 31.25 μg/ml 时,能抑制PAO1 生物 膜的形成,使生物膜的总量从100% 减少到（80.00±4.62）%,且随着牡荆素的浓度增高,其抑制能力越强;4 种 抗生素头孢他啶（CAZ）、环丙沙星（CIP）、庆大霉素（GEN）和左旋氧氟沙星（OFLX）的最低抑菌浓度（MIC） 分别为0.5、0.5、2.0 和8.0 μg/ml ;亚抑菌浓度的CAZ、CIP、GEN 和OFLX 与牡荆素联用时能协同抑制 PAO1 生物膜的形成,分别使生物膜的总量从100% 下降至（39.38±5.32）%、（40.31±2.95）%、（23.31±3.95） % 和（50.23±3.14）%。结论 牡荆素能抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成,且与抗生素联用时有协同作用。     

霍乱弧菌O139和El Tor菌株毒力岛区域分子特征比较

目的:比较O139霍乱弧菌(VC O139)菌株MO45基因组与O1群El Tor霍乱弧菌(EVC)菌株N16961基因组中毒力岛(VPI)区域分子特征.方法:制备霍乱弧菌VPI上游VC0815基因探针.从VC O139菌株MO45基因组文库中筛选一个既含有VC0815基因又含有tcpA基因的克隆,命名为pCOSVC081545,绘制pCOSVC081545 VPI上游片段的限制性酶切图谱,并与N16961同段序列的限制性酶切图谱进行比较.结果与结论:pCOSVC081545和N16961中VPI上游约1 500 bp片段的限制性酶切图谱基本相同,支持O139霍乱弧菌是EVC O抗原突变而来的观点.     

霍乱弧菌不同群体菌株的群体遗传特征比较

应用ＭＥＥ法对５９２株霍乱弧菌的１５个酶基因位点进行检测，分析和比较霍乱弧菌不同群体的群体遗传特征。结果：古典型菌株（ＣＶＣ）、埃尔托流行株（ＥＳＥＶＣ）和Ｏ１３９菌株（Ｏ１３９）的群体平均遗传多态值和平均杂合度都很低，ＨＣＶＣ＝０．１０６、ｈＣＶＣ＝１．５，ＨＥＳＥＶＣ＝０．０５６、ｈＥＳＥＶＣ＝２．３（Ｏ１３９包含在ＥＳＥＶＣ之中），被检测的基因位点多为非多态位点；而同为Ｏ１群菌的埃尔托非流行株（ＮＳＥＶＣ）的平均遗传多态值和平均杂合度要高得多，接近非Ｏ１群菌株（ＮＯ１）的群体遗传学指标，分别为ＨＮＳＥＶＣ＝０．４２５、ｈＮＳＥＶＣ＝５，ＨＮＯ１＝０．６２７、ｈＮＯ１＝６．５，被检测的基因位点几乎全是遗传多态位点。结果表明：ＥＳＥＶＣ和ＮＳＥＶＣ虽然都是Ｏ１群菌，但在群体遗传学特征上存在巨大差异；ＣＶＣ、ＥＳＥＶＣ和Ｏ１３９为遗传学性状稳定、群体遗传结构紧密的群体，而ＮＳＥＶＣ和ＮｏｎＯ１的群体遗传关系离散     

铜绿假单胞菌生物被膜形成的调控及治疗对策研究进展

铜绿假单胞菌是医院内感染重要的致病菌.该菌易形成生物被膜,常给临床治疗带来很多困难.在生物被膜形成的细菌早期定植、蘑菇状结构形成以及细胞外基质生成的各个阶段均受多种分子及基因的调控,而密度感知信号系统整体调控生物被膜的形成.根据生物被膜的形成过程及调控机制,多种针对生物被膜的治疗对策已应用于临床,一些新药物和新方法也在研究之中.     

霍乱弧菌HutX蛋白的晶体结构

目的 获取纯化的霍乱弧菌HutX蛋白晶体和衍射数据.方法 通过基因克隆和蛋白表达得到HutX蛋白,通过镍柱亲和层析、Source Q阴离子交换柱层析和Superdex 200分子筛柱层析等纯化所得蛋白,并用蛋白质印迹法进行验证.将所获蛋白进行结晶条件筛选及悬滴优化,X线衍射分析所得晶体的结构.结果 蛋白质印迹分析间接证明所得到的蛋白为HutX蛋白,并得到HutX蛋白的晶体及衍射数据.结论 为进一步研究HutX的蛋白结构及其在霍乱弧菌亚铁血红素利用机制中发挥的作用提供了参考.     

绿脓杆菌外毒素A对兔角膜基质细胞的毒性作用

目的：探讨绿脓杆菌外毒素A兔对角膜基质细胞的毒性作用。方法：含兔角膜基质细胞（1×10⁵•mL^-1）三维胶原凝胶表面添加提纯的不同浓度绿脓杆菌外毒素A（0.1、1.0和10 mg•L^-1）后，放入无血清MEM培养液中37℃培养24 h，采用光学显微镜观察培养的兔角膜基质细胞形态学变化，采用酶联免疫吸附法检测损伤的兔角膜基质细胞释放的乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果：添加不同浓度绿脓杆菌外毒素A（0.1、1.0和10 mg•L^-1）各组兔角膜基质细胞释放的LDH，与不添加绿脓杆菌外毒素A组比较，差异均有显著性(P<0.01）。添加不同浓度绿脓杆菌外毒素A各组较不添加绿脓杆菌外毒素A组，角膜基质细胞形态发生变化，细胞由长纺锤形变为圆形，细胞伪足减少。结论：绿脓杆菌外毒素A，破坏角膜基质细胞,对兔角膜基质细胞毒性作用有剂量依赖性。     

治疗铜绿假单胞菌药物的敏感度及其后效应比较

目的　比较治疗铜绿假单胞菌感染的药物敏感度及其后效应。　方法　应用Sceptor系统和纸片法进行药敏测定 ,抗生素后效应通过菌落平板计数方法测定。　结果　 5 2株铜绿假单胞菌对 5种常用治疗抗生素敏感度依次为美洛培南 (倍能 ) 92 3 % ,泰能 86 5 % ,头孢吡肟 (马斯平 ) 75 0 % ,头孢他定 62 9% ,哌拉西林 46 2 % ,抗生素后效应以美洛培南、泰能明显 ,2MIC时分别为 ( 1 4667± 0 8199)h和 ( 1 3 667± 0 80 2 8)h ,8MIC时为 ( 1 5 3 3 3± 0 9675 )h和( 1 73 3 2± 0 990 2 )h。　结论　铜绿假单胞菌对多种抗生素的耐药率较高 ,严重的铜绿假单胞菌感染应足量使用美洛培南或泰能 ,发挥其迅速杀菌活力和延长其后效应     

Structural variation of the superintegron in the toxigenic Vibrio cholerae O1 El Tor

Objective To understand the genetic structures and variations of the superintegron(SI)in Vibrio cholerae isolated in the seventh cholera pandemic.Methods Polymerase chain reaction scanning and fragment sequencing were used.Sixty toxigenic V.cholerae O1 El Tor strains isolated between 1961 and 2008 were analyzed.Results Some variations were found,including insertions,replacements,and deletions.Most of the deletions were probably the result of recombination between V.cholerae repeat sequences.The majority of ...     

霍乱弧菌毒力强弱及菌株同源性的快速检测

目的建立一套快速检测霍乱弧菌毒力强弱及不同菌株同源性的实验方法。方法设计4对引物进行多重PCR检测菌株毒力基因特征;采用随机扩增多态性DNA(RAPD)结合SPSS软件分析不同菌株的同源性。结果通过多重PCR同时检测菌株CtxA、TcpA、Ace、Zot4种主要的毒力基因,并快速判定其毒力强弱;RAPD产生的指纹图谱条带清晰、数目较多、片段大小分布均匀,结合SPSS软件分析可判断菌株间的同源性关系。结论多重PCR和RAPD结合SPSS软件分析可在4h内完成对霍乱弧菌毒力强弱及不同菌株间同源性的检测,有助于在疫情处理中判断病菌来源和及时采取适当的处理措施。