人胃癌完整组织块裸鼠原位种植转移模型的建立

目的:建立人胃癌完整组织块裸鼠原位种植高转移模型.方法:人胃腺癌SGC-7901细胞株,裸鼠皮下注射(2×106/L细胞悬液),成瘤后反复传代形成实体瘤,以第6代瘤源为组织材料,打开腹腔,通过"生物胶粘贴法"用OB医用生物胶将瘤块粘贴在裸鼠胃壁胃大弯血管分布稠密处;待荷瘤鼠出现衰竭体征濒临死亡时处死解剖检查.结果:术后3～4周左右,上腹可触及0.1～0.4 cm结节,5～6周时逐渐增大.8～10周时肿块明显增大,局部包块透壁可见,直径约1.0～1.9 cm.此后动物极度消瘦,部分动物腹水形成,活动受限,逐渐衰竭,濒临死亡.解剖见原位肿瘤成瘤率100%,病理学检查胃周淋巴结转移率100%,肝脏转移率72.7%,部分动物腹膜、胰腺转移.结论:人胃癌完整组织块通过"生物胶粘贴法"原位种植于裸鼠胃壁,能较好地重现胃癌的临床转移过程,为人类胃癌生长、转移机制及抗转移治疗方面的研究提供了一种较理想的动物模型.     

人大肠癌HT29细胞株裸鼠移植及转移模型的建立

本研究利用人大肠癌HT29细胞株在建立裸鼠皮下移植瘤模型的基础上,再建立大肠癌由尾静脉至肺,由脾至肝的转移模型,从而为建立高转移癌细胞系打下基础。我们发现肝转移灶的分化程度低于移植瘤,P53表达也与移植瘤有差异。我们认为这表明了肿瘤细胞的异质性。说明癌细胞在宿主体内是朝着有利于存活、发展、转移的方向生长。这样就可以在将来利用这个转移模型来筛选具有高转移能力的癌细胞亚群。     

人鼻窦癌裸鼠移植瘤模型建立

裸鼠移植瘤因保留人癌生物学特征和抗癌治疗的敏感性，广泛用于肿瘤基础和临床实验研究。近年，国内也将若干耳鼻喉科肿瘤成功移植于裸鼠(1—4)。但关于鼻窦癌的报道甚少，且仅限于上颌窦癌。为开展其基础研究和实验治疗，1990年3月起，我们将筛窦癌和上颌窦癌手术标本移植于裸鼠，14个月，成功地建立了二个生长稳定的移植瘤模型。     

裸鼠盲肠黏膜下注射HCT116细胞建立结肠癌原位种植及转移模型的研究

目的建立一种简便、可行、稳定的裸鼠盲肠黏膜原位种植癌及转移模型。方法将人结肠癌细胞株HCT116细胞注射接种于裸鼠盲肠黏膜下,HE染色及人癌胚抗原(CEA)免疫组化检测接种后不同时期的盲肠原位瘤,腹腔淋巴结、肝、肺组织转移情况。结果盲肠接种HCT116细胞后2周,90%裸鼠均长出直径2~5 mm的盲肠原位瘤;接种后4周开始有腹腔淋巴结转移,12周时淋巴结转移率100%;接种10周时见肝、肺有转移,12周时肝、肺转移率分别为60%、39%。结论利用盲肠黏膜下原位接种HCT116细胞法建立裸鼠结肠癌模型,可模拟结肠癌临床原位发生、发展演变过程,方法简便且成瘤率高,为深入研究结肠癌转移机制的基础研究提供理想、稳定的动物模型。     

裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立

目的：建立裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型。方法：BLBA/c裸鼠颈背部皮下注射人肝癌SMMC-7721细胞悬液5×10^6个/（0.2ml·只）,观察肿瘤生长情况,10周处死。瘤组织作病理及电镜检查;取种植裸鼠周围血作甲胎蛋白（AFP）的检测,随机抽出10只未行处理的BLBA/c雄性裸鼠作对照;用免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）,取正常非瘤组织作对照。结果：种植裸鼠周围血甲胎蛋白（AFP）为（528.35±12.48）ng/ml,对照组为（135.37±9.27）ng/ml,两组比较,有显著性差异（P〈0.05）;种植裸鼠平均每中倍视野中的微血管数为（32.45±2.38）个。对照组为（9.16±1.21）个,两组比较,有显著性差异（P〈0.05）。该模型具有类似人原发性肝癌的形态学特征。结论：成功建立了人肝癌裸鼠皮下种植瘤模型。     

人肾上腺皮质腺癌细胞株裸鼠移植瘤模型的建立及其意义

目的 建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,为研究肾上腺皮质腺癌提供实验平台.方法 选取4～6周龄裸鼠5只,将体外培养的人肾上腺皮质腺癌细胞株(SW-13)注射至其双侧腋窝皮下,建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤模型.结果 6周后5只裸鼠双侧腋窝皮下均长出肿瘤,肿瘤胞膜完整,HE染色可见大量肿瘤细胞.结论 成功建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,可以为肾上腺皮质腺癌的研究提供有效的动物模型平台.     

人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植模型的建立

将１９９６年１月获得的１例乳腺浸润性导管癌患者的原发肿瘤和转移淋巴结,移植于ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕ裸小鼠胸部乳垫下,３１天后在局部出现肿瘤结节,并逐渐长大,以后进行鼠间传代移植,现已１５代,移植成功率１００％,肿瘤保持了原先的生物学特性。经医学文献检索证实,该模型在国内属首次建立,为乳腺癌的深入研究建立了一个很有价值的模型。     

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的：建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法：用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层，观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果：肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点，人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100％(20／20)，肝脏转移率为45％(9／20)。结论：人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似，为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。     

人卵巢癌顺铂耐药细胞裸鼠腹腔转移模型的建立

目的　探讨建立人卵巢癌顺铂耐药细胞裸鼠腹腔转移模型的方法。方法　人卵巢癌细胞株 3AO和顺铂耐药细胞株 3AO/cDDP细胞体外培养。 4× 10 6个 3AO、3AO/cDDP分别接种于裸鼠腹腔 96h后 ,各随机分为 2组 ,分别腹腔内注射生理盐水和顺铂 (cDDP) ,观察各组裸鼠的致瘤率、生存期和生存延长率。采用流式细胞技术观察转移瘤LRP、MRP基因的表达情况。转移瘤瘤体行病理学检查。结果　 3AO、3AO/cDDP细胞的裸鼠致瘤率差异无显著性 ,P >0 .0 5 ;cDDP能提高 3AO荷瘤鼠的生存期及生存延长率 ,与 3AO/cDDP荷鼠相比 ,差异有显著性 ,P <0 .0 5 ;3AO/cDDP转移瘤的LRP、MRP基因的表达水平显著高于 3AO转移瘤 ,P <0 .0 5 ;病理学检查提示裸鼠腹腔转移瘤细胞具人恶性特征。结论　该方法建立裸鼠卵巢癌腹腔转移模型具有成瘤率高的特点 ,并能保持顺铂耐药特征。     

裸鼠体内高转移人肺癌模型的筛选

将人肺巨细胞癌ＰＬＡ－８０１Ｄ裸鼠皮下移植瘤作为瘤源，建立了ＰＬＡ－８０１Ｄ－ＡＳ裸鼠腹水鼠模型，其转移率及转移程度明显增高；以ＰＬＡ－８０１Ｄ－ＡＳ腹水瘤模型的肺转移灶细胞进行裸鼠皮下连续传代，建立了肺转移率及程度高于ＰＬＡ－８０１Ｄ的ＰＬＡ－８０１ＤＬ皮下移植瘤株。本文从肿瘤的异质性以及肿瘤与宿主相互作用的角度讨论了其肺转移提高的原因。     

人胰腺癌裸鼠移植瘤系JF305的建立及生物学特性的研究

采用手术切除人胰腺癌标本进行裸鼠皮下移植,建立了人胰晾癌裸鼠移植瘤系JF305,该瘤系具有移植成功率高、生长速度快的特点。其组织学和生物学研完基本保持了较好的稳定性。染色体分析以超二倍体为主,核型显示为人类染色体核型。因此,JF305是胰腺癌定位诊断和导向治疗研究的较好实验模型系统。     

人肝癌移植裸鼠后基膜成分分布的变化

15例人肝癌手术标本移植裸鼠后,3例获成功。作者对移植前后的肝癌组织进行了石蜡切片的Ⅳ型胶原(CollⅣ)、层粘连蛋白(LAM)和纤维连接蛋白(FN)的免疫组化染色。结果显示:①人肝癌移植裸鼠后,癌组织形态结构基本保持不变,但基膜成分的分布变得不规则,量减少。②原肝癌与周围肝组织交界处无发现连续性的基膜成分阳性染色,而移植瘤与宿主组织交界处可见连续性的基膜成分分布。③肝癌裸鼠移植瘤中细胞周围COllⅣ和FN阳性,提示肝癌组织中部分CollⅣ和FN可能是由肝癌细胞产生。     

人结肠腺癌裸鼠移植瘤模型的建立和生物学特性及放射免疫显象的研究

我院自1989年2月建立的人结肠癌裸鼠移植瘤模型(CTNM),至今已传27代,传代裸鼠共80只,移植成功率100％。对移植瘤和瘤源作系统的生物学特性的研究,测定其肿瘤组织与宿主血液中的癌胚抗原(CEA)值。并应用免疫组化法观察肿瘤组织中CEA分布。结果显示,移植瘤的形态和功能特性与瘤源基本一致。对荷瘤裸鼠放射免疫显象结果表明:经腹腔内注射~(131)I-CEA-McAb 72h后,肿瘤显象满意,瘤/肠(T/NT)值为4.3,标记抗体能在肿瘤组织中浓聚。     

人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株的建立及其生物学特性

目的建立人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株,为开展子宫内膜癌的实验性研究奠定基础。方法将3例子宫内膜癌手术标本移植于裸鼠皮下,生长后行鼠间连续传代,对移植瘤进行相关的生物学检测。结果3例标本1例获得生长并行鼠间传代,历时24个月建成人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株EnCa-95V,瘤株生长稳定,已传21代,移植成瘤率100％,光镜、电镜、免疫纽化、流式细胞术检测移植瘤与患者原始肿瘤特征基本一致;染色体分析显示人类肿瘤染色体核型,众数为43～92条。结论EnCa-95V是一株新的子宫内膜癌裸鼠移植瘤株,为进一步开展子宫内膜癌的实验性研究提供理想的动物模型。     

人大肠癌NSY42129肺高转移株建立及其生物学特性

NSY 42129细胞株是从大肠癌患者肝转移灶瘤细胞建立起来的。该细胞株经皮下接种,在5只裸鼠体内肿瘤形成率为100%,并全部发生肺转移。该细胞株在体外呈贴壁和多复层克隆样生长,在10%NBSRPMI 1640培养液和塑料或玻璃瓶皿中的克隆(集落)形成率为50%,在半固体培养基(双层琼脂)中为15%。在抗肿瘤的药敏实验或筛选抗肿瘤药物中、该细胞株可以代替双层琼脂人癌细胞集落实验。     

ESTABLISHMENT AND BEHAVIOR OF A TRANSPLANTED HUMAN PRIMARY GASTRIC CANCER IN NUDE MICE

A human primary gastric cancer tissue (adenocarcinoma Ⅱ—Ⅲ) was transplanted into nude mice (SWISS/DF, nu/nu). It has been transfered for 8 generations at 56 sites in 28 nude mice with transplanting rate of 100%. The transplanted tumor is designated as transplanted human primary gastric cancer-1 in nude mice (THPGC-1). The growth rate of THPGC-1 is rather rapid and the size of transplanted tumor reaches 1cm~2 in 4—5 weeks after transfer. The morphology and histochemistry of the original tumor were retained well in the initial and serial transplanted tumors. THPGC-1 could secrete carcinoembryonic antigen (CEA). After intravenous or intraperitoneal injection of ~(131)Ⅰ-antiCEA monoclonal antibody into the THPGC-1 bearing nude mice, the radiolabeled antibody was concentrated and localized in the tumor as shown by γ-camera analysis. Similar pattern of lactate dehydrogenase isoenzyme was observed both in primary gastric cancer tissue and THPGC-1 tissue. Chromosomal examination revealed that THPGC-1 was human aneuploid ones. Southern blot analysis showed that the pattern of repetitive DNA bands and the structure of 28S rDNA, c-H-ras and c-myc genes in THPGC-1 were identical to the original primary gastric cancer DNA. The results suggest that THPGC-1 be a reliable model for the research of the molecular biology of cancer cells and experimantal gastric cancer diagnosis and treatment.     

抗卵巢癌细胞膜抗体对卵巢癌细胞体外细胞毒性试验及荷瘤小鼠的体内聚集性的实验研究

目的：探讨抗卵巢癌细胞膜抗体作为放射免疫治疗载体的可能性,及对靶细胞体外裸鼠体内杀伤的相对特异性。方法：采用补体介导细胞毒性试验(MTT法)测定抗卵巢癌细胞膜抗体对靶、非靶细胞比毒性;建立BALB／C—mu裸鼠荷人卵巢癌模型,用SPECT显像及病理检查分析^131I标记抗卵巢癌细胞膜抗体在荷人卵巢癌裸鼠的聚集性。结果：抗卵巢癌细胞膜纯化抗体比抗血清对卵巢癌靶细胞显示了更强的细胞毒作用,并且都显示了浓度梯度依赖性。抗卵巢癌细胞膜抗体对靶、非靶细胞比毒性显示了相对特异性,对卵巢癌细胞杀伤率高于非靶细胞(宫颈癌、肝癌、胃癌、O型白细胞)。并且呈时间依赖关系。^131I标记抗卵巢癌细胞膜抗体对荷人卵巢癌裸鼠腹腔注射3d后,肿瘤区即有明显聚集,一直持续至第8天。注射后第8天,行病理检查,肉眼见有局部坏死淤血区;镜下见癌区组织大片状坏死,坏死区可见淋巴细胞浸润。结论：抗卵巢癌细胞膜抗体对体内、体外卵巢癌细胞有相对特异性靶向性,具有作为放射免疫治疗载体的能力。     

尼美舒利对人食管癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的观察选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂尼美舒利对食管癌Eca-109细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其毒副作用,以探讨其抗肿瘤效应及可能的机制。方法培养人食管癌Eca-109细胞,建立食管癌裸鼠移植瘤模型,灌胃给予尼美舒利,观察移植瘤的生长情况,逆转录-聚合酶链反应法检测COX-2 mRNA表达,免疫组织化学技术检测COX-2及Ki-67的表达变化。结果尼美舒利对裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用。尼美舒利组,尼美舒利作用4周后,移植瘤体积及瘤质量分别为(807.68±217.76)mm3及(0.81±0.21)g,较对照组的(2 116.77±362.47)mm3及(1.45±0.39)g明显减小,两组间差异有显著性(P<0.05)。两组裸鼠的体质量增加无显著性差异(P>0.05)。尼美舒利组COX-2 mRNA、蛋白及Ki-67的表达均较对照组明显减弱。结论尼美舒利对食管癌Eca-109细胞移植瘤的生长有明显抑制作用,其机制可能与抑制COX-2及Ki-67表达、抑制肿瘤细胞的生长及增殖有关。     

INHIBITION OF ANGIOSTATIN TO THE GROWTH AND METASTASIS OF GASTRIC CANCER IN NUDE MICE

Objective To study the inhibition effect on tumor angiogenesis and metastasis of angionstatin, which generated from human plasminogen. Methods Plasminogen was isolated metastasis of angio-from human plasma by Sepharose chromatography arm then catalyzed by elastase. Angiostatin was isolated by Sepharose 4B-Lysine chromatography. Nude mice model of metastatic gastric cancer was set up by intact tumor tissue implantation orthotopically. From the day of operation, mice received daily intraperitoneal injections of human angiostatin,intact plasminogen, or saline, respectively. 24μg ( 1.2mg/kg) of angiostatin or plasminogen was given on the day of operation, followed by a daily dose of 12μg( 0. 6mg /kg ) via intraperitoneal injection for three weeks.Ten weeks after implantation, mice were sacrificed and autopsied. Microvascular density was measured by im.munohistochemistry. Results Molecular weight of plasminogen isolated from plasma was 94KD. Plaanino-gen was catalyzed into two fragment peptides by elastase , which were 41～43KD and 51～53KD in molecular weight. Growth of the orthotopically implanted tumor was significantly reduced in size in the mice treated with angiostastin with an inhibition rate of 54.0%. Tumor metastasis to the liver and peritoneum was also signifi-cantly inhibited by angiostatin with inhibition rate of 61.9% and 55.6% respectively. The microvascular den-sity was also decreased significantly in the angiostatin treated mice. Conclusion Angiostatin may be generat-ed from plasma, and has inhibitory effect both on tumor growth and metastasis in nude mice model of human gastric cancer.     

三氧化二砷对肝癌裸鼠移植瘤模型作用的实验研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡以及对骨髓抑制等作用.方法建立肝癌裸鼠移植瘤模型,应用TUNEL法观察不同浓度的As2O3对裸鼠移植瘤凋亡指数(AI)的影响;应用免疫组化SABC法检测不同浓度的As2O3对增殖细胞核抗原阳性细胞指数(PI)的影响;检测移植瘤裸鼠的WBC并进行骨髓涂片检查.结果经As2O3治疗的移植瘤裸鼠的骨髓有核细胞增生活跃,粒红比例正常,巨核细胞多见;低、中浓度As2O3治疗裸鼠移植瘤的AI高于对照组(P<0.01和P<0.05);高浓度组AI与对照组比较,无显著性差异(P>0.05).低、中浓度组PI低于对照组(P<0.01);高浓度组PI与对照组比较,无显著性差异(P>0.05).结论As2O3通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡而达到其抗肝癌的效果,As2O3对移植瘤裸鼠骨髓无抑制作用.