人胎肺Ⅱ型肺泡细胞中表面蛋白-B的表达及意义

目的检测肺表面蛋白-B(SP-B)及其调控因子甲状腺转录因子-1(TTF-1)在肺泡Ⅱ型细胞发育过程的表达特征,探讨两者对于人胎肺肺泡Ⅱ型细胞发育、分化和成熟的调控作用。方法取16-35周人胎肺组织,常规石蜡包埋切片,用免疫组化技术检测SP-B和TTF-1的表达特征。结果,TTF-1在胎肺16周开始表达,定位于上皮细胞核内,随支气管树的发育分化,远端位置的反应总是较近端者强。SP-B蛋白于18周开始表达,定位于肺泡Ⅱ型细胞胞浆内,阳性反应细胞于早、中期表达丰富;由呼吸道近端逐渐往远端迁移,且强度不断增强。发育末期至成肺中,TTF-1和SP-B阳性反应均在肺泡Ⅱ型细胞中稳定表达。结论TTF-1参与支气管树形态发生和肺泡的发育成熟,并调控肺泡Ⅱ型细胞中SP-B蛋白的分泌,起稳定肺泡直径的作用。因此,SP-B蛋白的分泌反映肺泡Ⅱ型细胞功能的成熟。     

Ⅱ型肺泡细胞发育中相关活性物质的表达及其调控意义

目的：检测人胎肺成纤维生长因子受体(FGFR)、骨形成蛋白-4(BMP-4)、rasp-21蛋白、甲状腺转录因子-1(TTF-1)和肺表面蛋白-B(SP-B)在Ⅱ型肺泡细胞发育过程中的表达特征，探讨它们在调节Ⅱ型肺泡细胞发育和分化过程中的生物活性作用，以及相互之间的调控意义。方法：16-35周人胎肺组织，共15例。     

胎肺发育中相关活性物质的表达及其调控意义

目的 观察表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子β(TGF-β)和甲状腺转录因子-1(TTF-1)在胎肺发育过程的表达，探讨它们的生物活性作用及相互之间的调控意义。方法 应用免疫组织化学方法，检测EGFR、TGF-β(β1、β2、β3)和TTF-1因子在小鼠胎肺组织中的表达，用TIGER图像分析系统，对TTF-1表达强度进行定量分析。结果 胎肺发育的早期，EGFR定位于近端支气管上皮，TTF-1表达于远端支气管上皮细胞核内；而TGF-β1、β2和β3的表达定位基本一致，呈区域性分布于近端支气管上皮。到发育的中、后期，EGFR和TTF-1因子定位于肺泡上皮细胞，呈强表达，TGB-β则主要存在于间质；图像分析结果显示：在胎肺发育过程，TTF-1阳性细胞的平均光密度(AA)呈逐渐增加，而体积(VOL)和体积积分光密度(VIA)却逐渐减小。结论 EGFR、TGR-β和TTF-1因子在胎肺不同发育阶段具有不同表达特征，表明可能发挥着不同的功能，它们对支气管树的构筑、呼吸道和肺泡上皮的成熟分化都有重要的调节作用。     

TTF-1在肺腺癌中的表达及其诊断意义

目的：评价甲状腺转录因子－1（TTF－1）在鉴别肺原发性腺癌与转移性腺癌中的临床病理应用价值。方法：20例肺原发性腺癌：10例高分化，包括3例乳头状、3例腺泡状、3例混合型腺癌和1例细支气管肺泡癌；10例低分化，包括4例黏液腺癌（其中1例为印戒细胞癌）和6例混合型腺癌。另选20例的胃肠道及卵巢腺癌，免疫组化应用TTF－1抗体。结果：95％的肺原发性腺癌表达TTF－1，而胃肠道及卵巢腺癌完全不表达。结论：对于确定肺原发或转移性腺癌的病理诊断。TTF－1是一个有用的特异性抗体，特别是在体积较小的肺活检标本或原发灶不明而仅有肺内转移时。     

胎肺中甲状腺转录因子-1的表达及其生物学作用

目的　检测甲状腺转录因子 1 (TTF 1 )在小鼠胎肺发育过程中的表达特征 ,探讨其对胎肺发育、分化和成熟的调控作用。方法　不同发育阶段昆明小鼠胎肺组织 ,用免疫组织化学技术观察TTF 1的表达特征 ,用Tiger图象分析系统进行定量分析。结果　小鼠胎肺 1 0d开始检测到TTF 1的表达。其主要表达于正在形成呼吸道的上皮细胞核内 ,且处于末端位置的反应总是明显较近端者强 ;出生后 ,TTF 1主要表达在Ⅱ型上皮细胞核内。在胎肺发育过程 ,TTF 1的AOD值逐渐增加 ,表明Ⅱ型肺泡上细胞TTF 1密度呈现增加趋势 ,与肺泡功能的不断分化成熟相适应。结论　TTF 1参与肺组织的发生 ,可能具有调控上皮细胞发育的重要功能 ;肺泡发育过程中 ,TTF 1在Ⅱ型细胞的丰富表达 ,提示可能与肺泡功能的成熟分化 ,适应出生后执行功能的需要密切相关。     

肺硬化性血管瘤组织中甲状腺转录因子-1的表达及其组织起源的探讨

目的：探讨肺硬化性血管瘤（SH）的组织起源、病理形态特征,甲状腺转录因子－1（TTF－1）在SH中的表达及其病理诊断价值。方法：对17例SH作回顾性研究,其中12例的SH组织标本进行TTF－1、上皮膜抗原（EMA）、细胞角蛋白（CK,pan）、波形蛋白、平滑肌肌动蛋白（SMA）、胎盘碱性磷酸酶（PLAP）、嗜铬粒素A（CgA)、突触素、CD34免疫组织化学SP法标记;6例作电镜观察。结果：SH组织结构多样,主要表现为实性区、乳头区,血管瘤样区和硬化区等四种结构,瘤细胞主要由表面立方细胞和多角形细胞二种细胞类型组成。所有肿瘤的多角形细胞和表面立方细胞同时表达TTF－1、EMA,仅1例见少数多角形细胞CgA、突触素呈弱阳性反应,电镜证实这些多角形细胞和胞质中可见少量电子致密颗粒。结论：SH可能起源于多潜能的原始呼吸道上皮细胞,它具有向肺泡上皮细胞、Clara细胞分化的能力。TTF－1及EM等免疫标记对SH的诊断具有十分重要的价值。     

bFGF、FGF受体I在HEp-2喉癌和MGE803胃癌细胞株中表达的检测

目的　通过对碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF) ,成纤维细胞生长因子受体 1(fibroblastgrowthfactorreceptor 1,FGFR 1)的检测 ,揭示两者在体内外的表达以及与肿瘤形成的关系。　方法　采用免疫组织化学的检测方法 ,检测了体外培养的HEP 2喉癌细胞和MGE80 3胃癌细胞以及由两者在裸鼠皮下形成的实体瘤组织中bFGF和FGFR 1的表达情况。　结果　在体外培养的这两种肿瘤细胞中bFGF的阳性染色存在于整个细胞。FGFR 1的染色主要存在于细胞核。在两种肿瘤细胞形成的实体瘤组织中bFGF和FGFR 1阳性染色细胞主要是围绕于坏死区的肿瘤细胞。　结论　此两种肿瘤细胞在体内外均能表达bFGF和FGFR 1。bFGF与其高亲和力受体FGFR 1结合后进入细胞核 ,并在细胞核内发挥其生物功能 ,参与了肿瘤组织的形成和发展。     

胎儿顶骨发生过程中骨形态发生蛋白的分布

目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)与人颅顶骨发生及发育的关系。方法用免疫组化技术和显微图像分析系统对第9～36w胎儿顶骨内BMP分布及含量进行了系统观察。结果第9w胎儿顶骨为一片间充质膜,呈BMP阳性反应;第10～36w胎儿顶骨内BMP阳性反应主要见于成骨细胞、新生骨细胞及骨膜中。图像分析表明:胎儿顶骨内BMP阳性的骨小梁及成骨细胞的平均灰度值(0～255,black～white)随胎龄增加而呈上升趋势。结论胎儿顶骨中BMP的含量随胎龄增加而下降,对顶骨的发生可能有启动作用。     

鸡胚肾（小管）发生中相关活性物质的表达及调控意义

目的观察表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子-β(TGF-β)和水通道蛋白-2(AQP-2)及Bax蛋白在鸡胚肾(小管)发生过程中的表达,探讨它们的生物活性作用及相互之间的调控意义。方法应用免疫组织化学染色和体视学半定量方法,检测EGFR、TGF-β(β1、β2、β3)、AQP-2及Bax蛋白在10~46期鸡胚共36例肾组织发生中的表达,用IPP专业图像分析软件对其表达强度进行定量分析。结果第26~46期鸡胚肾的近端小管上皮细胞呈EGFR免疫反应阳性;第26~37期中肾的近端小管上皮细胞和远端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阳性,第33~40期后肾的近端小管上皮细胞和远端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阳性,第44~46期近端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阳性,远端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阴性;第26~46期鸡胚肾的集合小管上皮细胞呈AQP-2免疫反应阳性;第26~37期中肾近端小管和远端小管上皮细胞呈Bax反应阳性,第33~46期后肾近端小管上皮细胞呈Bax免疫反应阳性。图像分析显示,在鸡胚肾发生过程中,EGFR、TGF-β(β1、β2、β3)和Bax蛋白的阳性反应呈现先增强后减弱的变化,AQP-2阳性反应呈持续增强的趋势。结论鸡的中肾具有排泄功能,中肾肾小管的退化可能与TGF-β和Bax蛋白的大量表达有关。EGFR、TGF-β、AQP-2和Bax蛋白的协同表达调控着后肾肾小管和集合小管的发生及分化成熟。在肾脏发育过程中AQP-2可能介导胚胎发育过程中水平衡的稳定。     

肝细胞癌组织中TTF-1胞质表达及意义

研究表明,甲状腺转录因子-1（thyroid tranacription factor-1,TTF-1）以细胞核染色摸式表达于肺、甲状腺及其肿瘤中,而在胞质中表达的报道较少。我们采用免疫组化方法观察肝细胞癌中TTF-1在胞质表达的情况,并与肝转移性、肾细胞癌、胆管细胞癌、胃结肠腺癌及卵巢腺癌进行比较,探讨TTF-1胞质染色对肝细胞癌的特异性和敏感性。[第一段]     

浆膜腔积液转移性肺腺癌细胞中TTF-1的表达

目的 探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)在浆膜腔积液肺腺癌细胞中的表达，为肺腺癌的诊断和鉴别诊断提供新的依据。方法 选用浆膜腔积液转移性腺癌共60例(胸水40例，腹水17例，心包积液3例)。经组织学或结合临床资料证实的肺腺癌36例，泌尿生殖道腺癌14例，胃肠道腺癌8例，乳腺癌2例。每例均制备HE染色的涂片和离心沉渣经琼脂和石蜡包埋而成的细胞块，并用细胞块切片作TTF-1免疫细胞化学染色。结果 36例肺腺癌中有26例表达TTF-1，24例肺外腺癌中只有2例表达TTF-1，其敏感性为72．2％，特异性为91．7％。结论 TTF-1在浆膜腔积液肺腺癌具有较高的敏感性和特异性，在排除甲状腺癌的可能性后，TTF-1阳性表达很大程度上提示腺癌原发于肺。     

肺外神经内分泌肿瘤中甲状腺转录因子-1的表达

目的探讨甲状腺转录因子-1在肺外神经内分泌肿瘤中的表达,确定TTF-1在肺内和肺外神经内分泌肿瘤中的鉴别诊断价值。方法应用免疫组化EnVision法检测71例肺外神经内分泌肿瘤中TTF-1的表达。结果18例肺外小细胞癌中TTF-1阳性表达率为44.4%,主要表达于食管小细胞癌。所有肺外类癌、恶性肿瘤伴有神经内分泌分化和Merkel细胞癌均不表达TTF-1。结论TTF-1可在肺外小细胞癌中表达,TTF-1在区分肺内与肺外小细胞癌的鉴别诊断中没有价值,但可区分Merkel癌和内脏小细胞癌转移至皮肤。TTF1在肺原发性类癌和肺外类癌的鉴别诊断中可能有一定价值。     

人肝癌及相关组织中Egr—1基因的转录表达及其意义

目的：探讨Egr-1在肝癌癌变过程中的作用。方法：采用原位杂交和免疫组化技术,检测了肝癌及相关组织中Egr-1的mRNA转录水平和蛋白表达,以人乳腺和小鼠肝及大脑组织为对照。结果：在肝癌组织和正常肝组织中,Egr-1的转录水平明显减低或无转录信号;癌旁组织如肝癌癌旁的异型增生（LCD）和“萎缩样肝索”中Egr-1的转录水平明显增高。Egr-1基因在肝癌组织的表达与mRNA检测结果基本一致。在乳腺及小鼠脑组织Egr-1的表达明显增高。结论：Egr-1在肝癌中的缺失表达可能在其癌变过程中正常生长失调方面起作用;Egr-1在正常肝、乳腺及细胞中的表达差异可能与这些细胞的增殖、分化状态及细胞类型特异性有关。     

TTF-1、SP-A在肺腺癌诊断及鉴别诊断中的价值

目的 评价甲状腺转录因子-1(TTF-1)、肺泡表面活性蛋白A (SP-A)在肺腺癌中表达的敏感性和特异性,探讨他们在肺腺癌诊断及鉴别诊断中的价值.方法 选择经组织学和临床资料证实的肺原发性腺癌40例、转移性腺癌13例,采用免疫组化EnVision法检测TTF-1及SP-A的表达情况.结果 40例肺腺癌中有32例表达TTF-1、27例表达SP-A;13例转移性腺癌中只有1例肝细胞癌胞质表达TTF-1、无SP-A表达.TTF-1和SP-A在肺腺癌中表达的敏感性分别为80%和67.5%、特异性均为100%.结论TTF-1在肺腺癌中表达有较高的敏感性和特异性,在排除甲状腺癌可能后,可作为鉴别肺原发性和转移性腺癌的可靠标记;而SP-A敏感性较低且随分化程度降低表达下降,故TTF-1对肺腺癌鉴别诊断的价值优于SP-A.     

TGFβ1对肺成纤维细胞中转录因子SP1、 AP1和Smad3-Smad4活性的影响

目的:检测转化生长因子β1(TGFβ1)对大鼠肺成纤维细胞(RLF)中转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4活性的影响并探讨其意义。方法:进行大鼠肺成纤维细胞的原代分离培养,应用10μg/L TGFβ1进行处理,通过凝胶阻滞电泳(EMSA)、免疫印迹和免疫组化染色等方法,检测照射后转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4活性的变化及Ⅰ型胶原和Ⅰ型组织纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibi-torⅠ,PAI-1)表达的变化。结果:正常RLF中AP1和Smad3-Smad4形成弱阻滞条带,SP1无阻滞条带形成。以10μg/LTGFβ1处理后,3种转录因子所形成的阻滞条带明显增强,PAI-1和Ⅰ型胶原的表达增多。结论:一定浓度的TGFβ1可促进RLF中转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4的活化,并进而增加PAI-1和Ⅰ型胶原的表达。     

重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子联合促进兔骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达及其成骨潜能

背景：了解在体外或体内环境下,应用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,能否达到既加强成骨又促进血管内皮细胞生长因子表达的双重作用。 目的：观察兔骨髓基质细胞经重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子刺激后,其血管内皮细胞生长因子表达及成骨潜能的变化。 方法：取兔双侧股骨骨髓基质细胞,采用骨髓基质细胞体外培养技术,单独或联合以重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子刺激细胞。细胞培养5 d后,进行细胞形态、增殖情况、碱性磷酸酶活性、成骨结节、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率等项目的检测。 结果与结论：联合先后应用重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子在细胞计数、碱性磷酸酶活性、矿化面积百分率、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率4个检测项目上优于同时应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子以及单独应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子。结果表明合理的联合使用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,不仅可促进骨髓基质细胞的快速增殖及向成骨细胞转化,还可促进促血管内皮细胞增生的重要介质血管内皮细胞生长因子的表达。     

Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1共转染人退变椎间盘髓核细胞对细胞外基质代谢的影响

目的探讨骨形态发生蛋白腺病毒表达载体（Ad—BMP-2）和转化生长因子-β1腺病毒表达载体（Ad—TGF—β1）共转染人退变椎间盘髓核细胞后对aggrecan和Ⅱ型胶原合成的影响。方法人退变椎间盘髓核细胞体外分离培养至第2代。为检测转入目的基因后蛋白表达情况,将其分为空白对照组、目的基因组和共转染组,细胞分别转染Ad—BMP-2（50MOI）、Ad-TGF-β1（50 MOI）及共转染（各50 MOI）,再用Western blot方法检测转染后细胞目的蛋白的表达;为探讨目的基因对细胞外基质代谢的影响,将研究对象分为空白对照组（A组）、Ad—BMP-2100 MOI（B组）、Ad-TGF—β1100 MOI（C组）、Ad-BMP-2和Ad-TGF—β1各50 MOI（D组）,用ELISA法分别检测转染第3天和第6天细胞上清液中aggrecan和Ⅱ型胶原的蛋白表达量。RT-PCR检测第6天髓核细胞内Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA的表达水平。应用方差分析比较组间差异,以P〈0．05表示差异有统计学意义。结果在转染目的基因载体后,目的蛋白表达增加。在转染后第3天和第6天各转染组细胞培养基中aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量高于对照组（P〈0．01）,与转染单个基因组相比,共转染组的aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量明显增加（P〈0．01）;并且在转染后第6天共转染组髓核细胞内aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA表达也明显增加（P〈0．01）。结论转染Ad-BMP-2、Ad-TGF-β1能促进aggrecan和Ⅱ型胶原合成,同时上调aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达;共转染Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1对细胞外基质的mRNA和蛋白合成有协同作用。     

肺腺癌中HMGB1的表达及意义

目的 探讨肺腺癌组织中HMGB1表达与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的关系.方法 采用qRT-PCR法检测20例肺腺癌及20例癌旁正常肺组织中HMGB1 mRNA的表达;应用免疫组化法检测90例肺腺癌及30例癌旁正常肺组织中EMT表型蛋白(E-cad...     

肺神经内分泌肿瘤中INSM1的表达及其临床意义

目的探讨胰岛素瘤相关蛋白1(insulinoma-associated protein 1,INSM1)在肺神经内分泌肿瘤中的表达及其在鉴别诊断中的意义。方法采用免疫组化EnVision两步法检测INSM1、Syn、CgA、CD56在肺小细胞癌(26例)、肺大细胞神经内分泌癌(23例)、肺类癌(23例)、肺腺癌(72例)及肺鳞癌(52例)中的表达。结果(1)INSM1在神经内分泌肿瘤中的总阳性率为87.5%,显著高于肺腺癌(2.8%)和肺鳞癌(1.9%)(P<0.0001)。(2)INSM1在肺小细胞癌和大细胞神经内分泌癌中的敏感性分别为88.5%和78.3%,与Syn(88.5%和82.6%)及CD56(88.5%和78.3%)相似,显著高于CgA(57.7%和39.1%)(P<0.0001);INSM1在肺类癌中的敏感性为95.6%,与传统的神经内分泌免疫组化标志物(Syn、CgA、CD56)相似(P>0.999)。(3)INSM1在肺腺癌和肺鳞癌中的阳性率分别为2.8%和1.9%,与Syn和CgA相比差异无显著性(P>0.05),显著高于CD56(P<0.05)。(4)在37℃1 h孵育一抗,INSM1在小细胞癌、大细胞神经内分泌癌和肺类癌中的阳性率分别为84.6%、52.2%和30%;在4℃孵育一抗过夜,INSM1在三者中的阳性率分别为88.5%、78.3%和95.6%;一抗在4℃孵育过夜条件下,INSM1阳性率均高于37℃1 h的孵育条件。在4℃过夜和37℃1 h两种不同孵育条件下,小细胞癌的检测结果一致性为0.8354,大细胞神经内分泌癌为0.2868,肺类癌为0.0390。结论INSM1是肺神经内分泌肿瘤比较可靠的标志物,在4℃过夜条件下孵育一抗的检测结果比较可信。