P物质对幼年大鼠背根神经节神经元胞体膜的去极化作用

实验在大鼠离体背根神经节上进行细胞记录。浴槽滴加10^-7～3×10^-4mol/L P物质,在受检的47个细胞中大多数均可引起明显的膜去极化反应(40/47)。P物质去极化反应具有明显的浓度依赖性，在滴加10^-4mol／L P物质后膜电导由平均2．72×10^-8mho增大约24．63％(n=3)。并随P物质浓度的增加，去极化期向膜电导改变增大。     

GABA激活背根神经节神经元膜电流的去敏感特性

实验应用全细胞膜片钳技术在大鼠新鲜分离的背根神经节神经元胞体膜上观察了ＧＡＢＡ激活电流的去敏感现象。证实ＧＡＢＡ激活电流的去敏感由快，慢两个成份组成，时间常数分别为２．０５秒和５９．９０秒。     

背根神经节神经元GABA A型受体对痛觉调制的研究进展

γ-氨基丁酸（GABA）是神经系统中经典的抑制性神经递质,其合成系统和受体系统在动物和人类的背根神经节（DRG）神经元中均已被检测到。在DRG中,GABA系统参与对痛觉信息传入的初级调制,已成为现今痛觉调制研究中的热点,但至今其参与病理性疼痛的机制尚未阐明。GABA的A型受体（GABA_A R）是离子通道型受体,介导快速性抑制反应,在病理性疼痛产生过程中其表达和功能发生改变,很可能成为临床治疗病理性疼痛的重要靶点。GABA_A R有众多亚基,不同亚基组合成的受体功能不同。本文系统地总结了国内外相关文献,就GABA_A R在DRG神经元中的分布、在痛觉信息传递中的作用以及在病理性疼痛发生发展中表达和功能的变化进行综述。     

一氧化氮在背根神经节神经元中的作用

一氧化氮(nitric oxide,NO)在体内参与了很多的生理和病理过程,并在很多疾病的发生、发展、预后及临床治疗中发挥着重要作用.背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)是感觉信息由外周传向中枢的第一站,也可对感觉信息进行初级调制.已有研究表明合成一氧化氮的关键酶-氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)在DRG上有分布.故本文就NO在DRG神经元生理、药理和病理生理过程中的作用作一综述.     

去极化刺激强度对小鼠大脑皮层γ氨基丁酸能神经元内在特性和编码能力的影响

目的研究小鼠大脑皮层γ氨基丁酸(GABA)能神经元活动的内在特性和编码能力随去极化刺激强度的增加而发生的动态变化。方法出生后15～22 d的FVB-Tg(Gad GFP)45704 Swn/J小鼠断头取脑,将脑片进行体外培养,运用Axoclamp-2B放大器全细胞记录方法记录内在特性和编码参数。观察随去极化刺激强度的增加(分为阈刺激强度×0.7、×0.85、×1、×1.25组),小鼠大脑皮层GABA能神经元绝对不应期(ARP)、动作电位间距(ISI)和动作电位发放峰时程标准差(SDST)的变化;分析大脑皮层GABA能神经元ARP与ISI和SDST间的关系。结果随着去极化刺激强度的增加,小鼠大脑皮层GABA能神经元群集发放动作电位的发放容量增加,ARP、ISI和SDST均显著缩短(P0.01)。阈刺激强度×0.7、×0.85、×1、×1.25各组ARP与ISI之间均呈线性关系(r2分别为0.9、0.91、0.82和0.84,均P0.05),ARP与SDST之间也均呈线性关系(r2分别为0.97、0.98、0.93和0.89,均P0.05)。结论随着去极化刺激强度的增加,大脑皮层GABA能神经元发放动作电位的ARP缩短,使其发放群集动作电位和编码神经信息的能力增强。加强对大脑皮层GABA能神经元刺激程度更有利于神经系统功能保持稳态。     

鼓岬电刺激中的面肌反应

对２０３例正常中耳和１７１例病变中耳的鼓岬电刺激中，声感出现正常中耳组为９４．６％，病变中耳组为１００％，二者接近；面肌收缩反应率正常中耳组为１４．８％，病变中耳组为５２．０％，相差２．５倍，对２５０、５００和１５００ＨＺ的测试结果进行统计，正常听力组的两种反应阈值均略高于病变中耳组，其中声感阈值的差异和５００ＨＺ两个频率上有显著意义，面肌反应阈值的差异在几个频率上都没有显著意义。手术探查４５例面     

刺激穴位对“对错”判断正确率和反应时影响的观察

目的探讨经皮电刺激穴位对脑力劳动恢复的作用。方法青年受试者18人，电刺激穴位组7人，对照组11人；采用心算（按难度分为难、中、易三类）-短时记忆-匹配-反应的模式，观察电刺激对反应时、反应正确率的影响。结果经统计学处理表明，在电刺激穴位组，刺激穴位后受试者对容易题、中等难度题的反应时明显降低（P＜0．05），在对照组则未发现这种变化；在整个实验过程中，反应正确率没有明显变化。结论刺激穴位是一种较好的脑力劳动恢复方法。     

电刺激黑质网状部抑制大鼠丘脑腹内侧核神经元的自发放电

本文用细胞单位记录方法观察了电刺激大鼠黑质网状部（ＳＮＲ）对丘脑腹内侧核（ＶＭ）神经元放电活动的影响，结果显示电刺激ＳＮＲ抑制大多数ＶＭ神经元的自发放电；反应分为单纯抑制和先抑制兴奋两种不同形式，结果提示，在大鼠，ＳＮＲ－ＶＭ传入投射主要通过抑制ＶＭ神经元的放电活动，参与对躯体运动的调节。     

刺激穴位对“位错”判断正确率和反应时影响的观察

目的 探讨经皮电刺激穴位对脑力劳动恢复的作用。方法 青年受试者１８人，电刺激穴位组７人，对照组１１人；采用心算（按难度分为难、中、易三类）－短时记忆－匹配－反应的模式，观察电刺激对反应时、反应正确率的影响。结果 经统计学处理表明，在电刺激穴位组，刺激穴位后受试者对容易题、中等难度题的反应时明显降低（Ｐ〈０．０５），在对照组则未发现这种变化；在整个实验过程中，反应正确率没有明显变化。结论 刺激穴位是     

Bukatoxin对大鼠背根神经节神经元河豚毒素不敏感型钠离子通道电流的影响

目的:研究东亚钳蝎毒素Bukatoxin对大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元河豚毒素不敏感型(tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠离子通道电流(INa)的影响.方法:在急性分离的大鼠DRG神经元上,应用全细胞膜片钳技术,观察Bukatoxin对DRG神经元TTX-R INa的影响.结果:Bukatoxin浓度依赖性地抑制TTX-R INa.在刺激电压为-10 mV时,20、40、80 μg/ml的Bukatoxin对TTX-R INa峰值的抑制率分别为(18.72±1.27)%、(27.40±4.97)%和(59.02±4.71)%.半数抑制浓度(IC50)为66.28 μg/ml,Hill系数(h)为1.48;80 μg/ml的Bukatoxin可以使TTX-R INa激活曲线向去极化方向移动约3 mV,稳态失活曲线向超极化方向移动6 mV.结论:Bukatoxin可以浓度依赖性的抑制DRG神经元上TTX-R INa,并改变TTX-R INa的激活和稳态失活特性,这可能是其降低外周伤害性信息传人,参与伤害性信息调制的机制之一.     

背根节初级感觉神经元的温度敏感性

目的:观察大鼠背根节 (DRG) 中型神经元的温度敏感性. 方法:在新鲜分散的大鼠背根节中型神经元运用全细胞膜片钳技术,观察给予不同温度梯度刺激下引起细胞放电的特征. 结果:根据大鼠背根节中型神经元在不同温度梯度刺激下的放电特征可将它们区分为两类温度敏感神经元. Ⅰ类神经元的温度敏感性与冷温度变化密切相关,随着温度的升高而引发的逐渐增强的膜电位超级化可引发频率由高到低的动作电位. 随着温度的降低神经元又表现出频率由低到高的动作电位变化. 动作电位的幅值一致,符合"全或无"定律. 该类神经元具有电压依赖性. Ⅱ类神经元的兴奋性与温度变化的关系不明显,随着温度升高或降低,神经元只出现一个动作电位,其频率没有变化,仅仅表现在随温度升高,动作电位的幅值降低,温度降低后,其幅值又恢复. 结论:大鼠DRG两类神经元在温度变化一致的情况下各具不同的冷温度敏感性.     

SiRNA抑制大鼠背根神经节神经元电压依赖型钠通道Nav1.8表达的实验研究

目的 应用小片段干扰RNA(SiRNA)转染原代培养背根神经节(DRG)神经元,观察SiRNA干扰DRG神经元基因Nav1.8表达的有效性.方法 根据RNA干扰的原理及SiRNA的设计原则,设计2个长度为21 bp的以Nav1.8基因为靶点的SiRNA(SiRNAa和SiRNAb),另选择相同长度的无义双链RNA作为阴性对照RNA.T7 RNA聚合酶的作用下体外转录合成SiRNA,阳离子脂质体转染试剂将SiRNA导人体外培养DRG神经元,于转染后48 h提取RNA,采用RT-PCR和荧光定量PCR检测Nav1.8基因的表达情况.结果 在靶向Nav 1.8的两个SiRNA序列中,SiRNAa转染神经元后导致Nav1.8基因表达显著降低(48.32±6.84)％,SiRNAb使Nav1.8表达降低(23.32±3.19)％,P均＜0.01,阴性对照SiRNA对Nav1.8的表达不产生影响.结论 利用体外转录合成的SiRNA成功转染原代培养的DRG神经元,并诱导产生内源性Nav1.8基因的特异性表达抑制.具有较高干扰效应的SiRNA片段可应用于抑制Nav1.8基因表达,进而研究Nav1.8的功能及在疼痛治疗中的作用.     

Noradrenaline depolarization and hyperpolarization mediated by alpha-adrenergic receptors in the soma of dorsal root ganglion neurons

Summary Intracellular recordings were made on perfused preparation isolated from toad dorsal root ganglion (DRG). Of the 51 neurones examined, 46 were of type A, and the remaining 5 of type C cell. The resting membrane potential of these two types of cells was ™60.06±1.30 mV ( ±SE). When the preparations were superfused with noradrenaline (NA; 10⁻⁴ ™ 10⁻³M), the changes of Rp were as follows: 1) hyperpolarization, with amplitude of 8.38 ± 1.42mV ( ±SE; 20/48); 2) depolarization, with amplitude of 9.39±1.24mv ( ±SE; 23/48); 3) no effect (5/48). The alteration in membrane potential mentioned above could be neither mimicked by application of isoproterenol, nor blocked by propranolol. Therefore, the possibility of the effect being mediated by β-adrenoceptor could be excluded. Application of phenylephrine and clonidine induced depolarization and hyperpolarization of membrane potential respectively, while application of prazosin eand yohimbine blocked depolarization and hyperpolarization response induced by NA, respectively. From the results mentioned above, it may be concluded that depolarization and hyperpolarization induced by NA are mediated by α₁- and α₂-adrenoceptors on the soma of DRG neurones respectively.     

大鼠背根神经节神经元P2Y嘌呤受体的表达

目的探讨P2Y1和P2Y4亚基在大鼠背根神经节(DRG)神经元的表达.方法应用组织水平和多细胞水平RT-PCR方法从不同角度检测了P2Y1受体的表达情况.结果两种RT-PCR扩增结果均显示:P2Y1亚型有特异性表达阳性条带出现,而P2Y4亚型则无特异性表达条带出现.结论大鼠DRG的大、中、小细胞中均有P2Y1亚型表达,而无P2Y4亚型的表达.     

地昔帕明对大鼠背根神经节神经元钠电流的影响

目的:研究地昔帕明(desipramine,DMI)对大鼠背根神经节神经元电压依赖性钠电流的影响。方法:分离单个大鼠背根神经节,应用全细胞膜片钳技术观察地昔帕明对内向钠电流(INa)的影响。结果:地昔帕明浓度依赖性地抑制INa,即分别加入10,50,100μmol/L的DMI可使钠电流的抑制率达(5.56±0.62)%,(54.67±13.39)%和(86.63±16.08)%,并且,50μmol/L的DMI可使INa稳态失活曲线左移,V1/2分别由对照组的-(43.71±0.79)mV降低至-(47.91±1.14)mV,k值无明显变化。结论:DMI浓度依赖性地抑制背根神经节神经元Na+通道,并改变通道的失活,这可能是其影响痛觉传导通路,产生镇痛作用的机制之一。     

17beta-estradiol attenuates alpha, beta-meATP-induced currents in rat dorsal root ganglion neurons

The effects of 17beta-estradioI on the alpha,beta-me ATP-induced currents were studied on dorsal root ganglion （DRG） neurons using whole-cell recording technique. Three types of currents （transient, sustained or biphasic） were evoked by alpha,beta-me ATP in acutely dissociated DRG neurons. When neurons were pre-incubated with 17beta-estradiol （10-1000 nM） for 4 min,     

17beta-estradioi attenuates alpha, beta-meATP-induced currents in rat dorsal root ganglion neurons

The effects of 17beta-estradiol on the alpha,beta-me ATP-induced currents were studied on dorsal root ganglion （DRG） neurons using whole-cell recording technique. Three types of currents （transient, sustained or biphasic） were evoked by alpha,beta-me ATP in acutely dissociated DRG neurons. When neurons were pre-incubated with 17beta-estradiol （10-1000 nM） for 4 rain, an inhibition of the transient current and the transient component of the biphasic current was observed. In contrast, 17beta-estradiol did not have any significant effect on the sustained current evoked by alpha,beta-meATP. The inhibitory effects were concentration-dependent, reversible and could be blocked by the estradiol receptor inhibitor, ICI 182,780 （1 microM）. However, bovine serum albumin-conjugated 17beta-estradiol （17beta-estradiol-BSA, 10 nM） failed to mimic the effects of 17beta-estradiol. 17alpha-estradiol, the inactive isoform, did not have significant effects on alphabeta-meATP-induced currents, either. Sustained currents induced by ATP （100 microM） in nodose ganglion （NG）, superior cervical ganglion （SCG） and otic ganglion （OTG） neurons were not affected by 17beta-estradiol. These results suggest that the female gonadal hormone, 17betaestradiol, might participate in control of pain by modulating P2X3 receptor-mediated events in sensory neurons.     

乙酰胆碱对大鼠慢性压迫背根节神经元放电的影响

目的研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响。方法采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响。结果受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DRG神经元对ACh有反应,其中反应类型有单纯兴奋和先兴奋后抑制两种形式,而且反应的幅度随ACh浓度的延长而逐渐增大。结论在慢性压迫DRG神经元有大量的自发放电,ACh可明显影响受损DRG神经元的自发放电。     

芍药苷对大鼠背根神经元细胞内Ca2+的影响

摘要：目的：建立一种评价中药活性成分对大鼠背根神经节(DRG)神经元细胞内游离Ca2 浓度影响的方法。方法：显微解剖获取大鼠背根神经节，通过胰蛋白酶消化，过筛，用DF-12和抗有丝分裂培养液交替培养纯化，获得原代大鼠DRG神经元细胞，并采用细胞免疫荧光技术测定DRG神经元细胞纯度；采用激光共聚焦显微成像技术（LSCM），观察细胞内Ca2 荧光强度的变化，并对Ca2 荧光强度变化率进行分析，探讨芍药苷对DRG细胞内游离钙离子浓度及辣椒素受体的影响。结果：采用上述方法分离得到的DRG细胞纯度可高达95%以上，辣椒平可通过阻断辣椒素激活的瞬时受体电位通道（TRPV1）的作用而抑制细胞内Ca2 的增加。芍药苷表现出与CAP类似的作用，可以阻断细胞外Ca2 内流。结论：芍药苷可能是通过作用于TRPV1通道，而抑制DRG细胞内Ca2 大量增加，本方法可以用于评价药物对大鼠DRG细胞内Ca2 浓度的影响。