阴沟肠杆菌等细菌超广谱β—内酰胺酶检测的探讨

目的：检测肠直菌科细菌中除肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯菌，大肠埃希菌以外的其它细菌超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)，以了解其检出情况和耐药性。方法：采用VITEK ESBLs检测系统和双纸片协同试验同时进行ESBLs的实验。结果：280株细菌中，用VITEK506卡检出ESBLs菌96株，其中大肠埃希菌34．5％，肺炎克雷伯菌43．1％，阴沟肠杆菌35．4％，产气肠杆菌25％，费劳地枸橼酸杆菌37．5％，用双纸片协同实验检出91株，检出率略低，在沙雷菌，变形杆菌，摩根菌中未检出ESBLs菌，对头孢西丁药敏试验中，产ESBLs的大肠埃希菌，肺炎克菌伯菌高度敏感，耐其余细菌表现耐药。结论：对大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌可以用VITEK系统和双纸片协同试验作常规ESBLs的试验，而对肠杆菌中中其余的细菌是否可参照应用尚需研究。     

双纸片协同法与GNS-506卡法检测超广谱β-内酰胺酶比较

目的比较双纸片协同法与法国生物梅里埃公司VITEK GNS-506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰酶(Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs)的实用性.方法以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS-506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs产生情况.结果从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS-506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌)中检出38株ESBLs阳性.两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果x2检验,P＞0.05,结果无显著差异.结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS-506卡法的监测和补充.在一般的实验室适合常规应用.     

双纸片协同法与GNS—506卡法检测超广谱β—内酰胺酶比较

目的：比较双纸片协同法与法国生物酶里埃公司VTEK GNS－506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰胺酶（Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs）的实用性。方法：以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS－506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs的产生情况。结果：从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS－506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克轩伯菌与产酸克雷伯菌）中检出38株ESBLs阳性,两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果X^2检验,P＞0．05,结果无显著差异,结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS－506卡法的监测和补充,在一般的实验室适合常规应用。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱.方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌,用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株;用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs;采用K-B法进行药敏试验.结果符合CTX筛选标准的有158株,符合CAZ筛选标准的有94株,两者都符合的有76株,共176株产ESBLs可疑株.CTX和CTV/CA双纸片检出115株阳性,CAZ和CAZ/CA双纸片检出62株阳性,两种双纸片法都为阳性的有51株,共检出126株产ESBLs菌株.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%(50/167)、34%(52/156)和36%(24/67).产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100%,对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低,除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外,其余均为敏感.结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高,耐药性严重.筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX,表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX/CA.阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌.     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶的结果评价

目的：评价VITEK－AMS专用药敏卡检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的可靠性。同时比较纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测ESBLs的临床应用价值。方法：以纸片扩散确证法为标准,用VITEK－AMS、纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测大肠埃希 肺炎克雷伯菌产ESBLs情况。结果：仪器检测为阳性的73株大肠矣希菌和24株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法、纸片协同法、纸片扩散筛选法检测也均为阳性。仪器检测为阴性的131株大肠埃希菌和46株肺炎克雷伯菌,用三种方法分别检出一定数量的阳性株。结论：仪器检测ESBLs易造成假阴性,纸片扩散筛法会造成假阳性,而双纸片协同法由于同时用四种底物检测,其敏感性、特异性均较理想、适合临床应用。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱。方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌，用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株；用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs；采用K-B法进行药敏试验。结果符合CTX筛选标准的有158株，符合CAZ筛选标准的有94株，两者都符合的有76株，共176株产ESBLs可疑株。CTX和CTV／CA双纸片检出115株阳性，CAZ和CAZ／CA双纸片检出62株阳性，两种双纸片法都为阳性的有51株，共检出126株产ESBLs菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%（50／167）、34％（52／156）和36％（24／67）。产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100％，对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低，除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外，其余均为敏感。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高，耐药性严重。筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX，表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX／CA，阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌。     

VITEK—自动微生物鉴定仪检测超广谱β—内酰胺酶的结果评价

目的 评价VITEK－自动微生物鉴定仪（AMS）专用药敏卡检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的可靠性。方法 同时用纸片扩散确证法和VITEK－AMS专用药敏卡GNS－506对临床分离的204株大埃希菌和70株肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测。结果 纸片扩散确证法检测为ESBLs阳性的97株大肠埃希菌和28株肺炎克雷伯菌,用VITEK－AMS检测分别检出ESBLs阳性株73株和24株。确证为ESBLs阴性107株大肠埃希菌和42株肺炎克雷伯菌,用VITEK－AMS检测也均为阴性。结论 VITEK－AMS检测ESBLs虽然特异性好,但灵敏度低,易造成漏检。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药特性,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用法国生物梅里埃ATB细菌鉴定仪对218株大肠埃希菌和235株肺炎克雷伯菌进行检测,用纸片扩散法(K-B)及美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的双纸片协同试验确认,并对药敏结果进行分析。结果 218株大肠埃希菌中检出产ESBLs大肠埃希菌97株,检出率为44.5%;235株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs肺炎克雷伯菌75株,检出率为31.9%。结论产ESBLs菌株是目前县级医院临床常见致病菌,成为主要耐药菌株,而且耐药谱广。应加强临床合理使用抗菌药物的管理,严防耐药菌株引起医院感染和流行。     

临床分离16株耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌耐药机制初步研究

目的了解佛山市第一人民医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药情况和耐药机制。方法 2013年1月至2015年12月收集16株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌4株,产酸克雷伯菌1株。利用VITEK2-compact微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验。采用改良Hodges和MEM(美罗培南)-EDTA(乙二胺四乙酸)-Na2双纸片协同试验进行耐药表型筛选。采用PCR法检测耐药基因blaIMP、blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaOXA-48。结果 16株细菌对亚胺培南、美罗培南均耐药。16株细菌Hodges均阳性,15株双纸片协同试验阳性。在11株大肠埃希菌,9株携带blaNDM-5,2株携带blaNDM-1。4株肺炎克雷伯菌携带blaNDM-5,1株产酸克雷伯菌携带blaKPC-2。结论我院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药机制以产blaNDM-5碳青霉烯酶为主。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性研究

目的 了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBIs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,为临床治疗和控制ESBLs菌的感染提供依据.方法 采用VITEK全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,KB纸片法测定11种抗菌药物的药敏,双纸片协同法检测ESBLs.结果 从2005年1月-2005年12月住院患者送检的标本中分离出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌704株,其中大肠埃希菌282株,肺炎克雷伯菌422株.产ESBLs菌357株,非产ESBLs菌347株,总检出率为50.7%(357/704),其中产ESBLs肺炎克雷伯杆菌211株,检出率为50.0%(211/422),产ESBLs大肠埃希菌146株,检出率为51.77%(146/282).产ESBLs菌与非产ESBLs菌对亚胺培南100%敏感,除大肠埃希菌对哌拉西林胞唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦外,产ESBLs细菌对其他9种抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs细菌(P＜0.0236-P＜0.005之间).结论 产ESBLs菌对常用抗菌药物耐药率较高,碳烯霉烯类是治疗产ESBLs菌严重感染的首选药物.     

三种方法检测超广谱β-内酰胺酶的结果评价

目的评价VITEK-AMS专用药敏卡检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的可靠性.同时比较纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测ESBLs的临床应用价值.方法以纸片扩散确证法为标准,用VITEK-AMS、纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs情况.结果仪器检测为阳性的73株大肠埃希菌和24株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法、纸片协同法、纸片扩散筛选法检测也均为阳性.仪器检测为阴性的131株大肠埃希菌和46株肺炎克雷伯菌,用三种方法分别检出一定数量的阳性株.结论仪器检测ESBLs易造成假阴性,纸片扩散筛选法会造成假阳性.而双纸片协同法由于同时用四种底物检测,其敏感性、特异性均较理想,适合临床应用.     

安徽淮北地区超广谱β-内酰胺酶细菌表型检测的底物选择

目的了解淮北地区产超广谱β-内酰胺酶细菌的表型分布及检测的最佳底物选择。方法用1999年NCCLS推荐的标准,采用纸片扩散法从147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认。结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中共检出69株产ESBLs细菌(46.9%),将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法进行确证试验,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株。结论淮北地区进行ESBLs细菌检测时,应选择头孢噻肟和头孢曲松作为初筛试验的底物,选择头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定作为确证试验的底物。     

下呼吸道标本肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶情况及耐药监测

目的 :了解下呼吸道标本肺炎克雷伯菌 ,大肠埃希菌产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的情况及耐药监测 ,供临床用药借鉴。方法 :对 1999年 7月～ 2 0 0 0年 7月期间我院临床下呼吸道标本分离的 92 0株肺炎克雷伯菌 ,186株大肠埃希菌 ,用双纸片协同扩散检测ESBLs,用Kirby -Bauer琼脂扩散法作药敏试验。结果 :92 0株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌 2 39株 ,检出率为 2 5 .98% ,186株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌 31株 ,检出率为 16 .6 7% ;除亚胺培南外 ,产ESBLs菌对其它 9种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌 (P <0 .0 1) ;亚胺培南对产ESBLs菌全部敏感。结论 :肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中产ES BLs菌检出率高 ,且为多重耐药 ,亚胺培南是治疗由ESBLs菌引起感染的有效抗生素     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的院内分布及耐药性状况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:用VITEK-60鉴定细菌,药敏用K-B法,用双纸片法检测ESBLs。结果:2002-2004年3年间共分离出1183株大肠埃希菌,产酶株占27%;肺炎克雷伯菌661株,产酶株占25.4%。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对美罗培南和亚胺培南的敏感率最高,敏感率均在97%以上。产ESBLs大肠埃希菌对阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率较高分别为81.1%和71.2%,而产ESBLs肺炎克雷伯菌对其余抗生素的敏感率均不佳。结论:产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药严重,应控制三代头孢抗生素的使用以遏止ESBLS菌株不断上升的势头。     

改良的纸片表型筛选法用于AmpC酶的检测

目的 建立并评价一种检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶的新方法.方法 采用改良的纸片表型筛选法,以头孢西丁三维试验和多重PCR法作为对照,对临床分离的耐第三代头孢菌素的164株大肠埃希菌和40株肺炎克雷伯菌进行AmpC酶的检测.结果 164株大肠埃希菌中,改良的纸片表型筛选法检出8株产AmpC酶的阳性菌株（8/164,4.88%）,其中有2株同时产ESBLs酶;40株肺炎克雷伯菌中未检出产AmpC酶菌株,但检出2株（2/40,5.00%）诱导产AmpC酶菌株.头孢西丁三维试验在大肠埃希菌中检出AmpC酶阳性菌株8株（8/164,4.88%）,在肺炎克雷伯菌中未检出产AmpC酶株.多重PCR法检出大肠埃希菌AmpC酶耐药基因阳性9株（9/164,5.49%）,肺炎克雷伯菌阳性2株（2/40,5.00%）.结论 改良的纸片表型筛选法可用于检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和诱导产酶株,并可同时检测产ESBLs酶菌株,该法操作简便、结果可靠、无需特殊仪器,可在普通临床实验室应用.     

纸片双抑制剂平行抑制试验有效分析阴沟肠杆菌产超广谱β内酰胺酶

目的 建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌是否产生超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的方法。方法 质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、阴沟肠杆菌029、阴沟肠杆菌029M和阴沟肠杆菌1194E。用纸片双抑制剂平行抑制试验（DDIST）、临床和实验标准协A／美国临床实验标准化委员会（CLSI／NCCLS）推荐的用于检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs的纸片法和E-试验MIC法对本院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行ESBLs分析，用一系列ESBLs特异引物对其中27株耐头孢他啶或头孢噻肟的菌株进行扩增，以验证上述各种方法的准确性。结果PCR法从20／27株阴沟肠杆菌中扩增到ESBLs基因，DDIST法检出20株ESBLs产株，CISI／NCCIS法仅检出4株，E-试验MIC法检出0株。结论纸片双抑制剂平行抑制试验是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌超广谱β内酰胺酶的方法。     

四种筛选超广谱β-内酰胺酶方法的比较

目的:评价4种超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)筛选方法检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的可靠性.方法:以头孢哌酮、头孢他啶和氨曲南为指示底物,用双纸片协同试验、三维试验、双纸片增效试验和E-test法4种方法检测32株ESBLs阳性和45株ESBLs阴性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生情况.结果:4种方法的敏感性分别为93.75%、96.87%、87.50%和96.87%,特异性分别为97.78%、95.56%、100%和100%.头孢他啶和头孢哌酮为本院检测ESBLs最适指示底物.结论:三维试验和E-test法是4种检测方法中检测产ESBLs最可靠的方法,三维试验检测产ESBLs菌株适合小型医院,双纸片协同试验和双纸片增效试验在所有医院都适合应用.     

重症监护病房(ICU)两种产超广谱B-内酰胺酶细菌耐药性动态分析

目的对医院ICU(重症监护病房)两种常见产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率及耐药性进行动态观察,为指导临床合理使用抗生素提供依据。方法对我室2006至2009年从ICU标本分离的479株肺炎克雷伯菌和491株大肠埃希菌采用纸片协同试验和双纸片确证试验检测其ESBLs,并用纸片扩散法进行药敏试验。结果四年来大肠埃希菌产ESBLs阳性率从41.6%上升至58.4%;肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率从29.0%上升至35.3%。产ESBLs株对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,但对碳青霉烯类抗菌药物都敏感。结论 4年来,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率逐年升高,对产ESBLs菌株的治疗应首选含酶抑制剂的抗生素、非B内酰胺类敏感的抗生素或碳青霉烯类抗菌药物。     

三种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的研究

目的:用纸片协同试验、纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并调查了医院感染这两种菌产ESBLs的流行现状.方法:采用头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟和氨曲南为底物,用上述三种试验对临床分离的99株大肠埃希菌和48株肺炎克雷伯菌检测ESBLs的产生.结果:纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测结果没有显著差异,总检出率在大肠埃希菌中为35.4%,在肺炎克雷伯菌中为43.8%.其中以头孢噻肟和头孢曲松为底物效果较好.结论:克拉维酸纸片叠加试验是一种方便,敏感性和准确性较好的试验,可作临床实验室常规测定.     

老年人下呼吸道感染肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶检测及相关因素分析

目的分析产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的老年人下呼吸道感染的常见肠杆菌科细菌的耐药性及特点。方法对老年人下呼吸道感染的肠杆菌科细菌用梅里埃ATB152微生物分析仪进行鉴定,检测ESBLs表型和药物敏感试验。结果在检测的肠杆菌科细菌中,ESBLs总阳性率为41.3%,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产酶率分别为41.9%、51.9%和35.1%,261株产ESBLs的肠杆菌科细菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达96%~100%,但是对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低,为18.4%~61.2%;对阿米卡星的耐药率为51.2%~88.6%。261株产ESBLs的肠杆菌科细菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达96%~100%,但是对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为18.4%~61.2%;对阿米卡星的耐药率为51.2%~88.6%。结论老年人下呼吸道感染产ESBLs的菌株对除碳青酶烯类之外的抗菌药物耐药率明显高于非产酶株。其治疗应选用亚胺培南或β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂。