视网膜母细胞瘤组织芯片的制作和验证

目的探讨组织芯片技术用于视网膜母细胞瘤研究中的可靠性。方法本研究将16例视网膜母细胞瘤组织和5例正常视网膜组织做成组织芯片，并对组织芯片上细胞形态和BAG-1蛋白表达情况与常规组织切片作比较。结果组织芯片上细胞形态和BAG-1蛋白表达情况与相应的常规切片上的情况表现出高度一致性（K〉0．75）。结论组织芯片用于视网膜母细胞瘤和正常视网膜组织的研究是可靠的。[眼科新进展2007；27（3）：196．197]     

组织型谷氨酰胺转移酶在开角型青光眼患者房角组织的表达

目的探讨组织型谷氨酰胺转移酶(tissue transglu-taminase,tTG)在原发性开角型青光眼患者房角组织中的表达情况及其与闭角型青光眼患者和正常人眼房角组织中表达情况的比较。方法术中取青光眼患者房角组织,采用免疫组织化学染色方法观察开角型、闭角型青光眼患者及正常人房角组织内tTG的表达情况,用RT-PCR方法分析组织内tTG的表达水平。结果免疫组织化学及RT-PCR结果均显示,正常组与闭角型青光眼组房角tTG的表达差异并无显著性(分别为0.180±0.032,0.212±0.019,P>0.05),而正常组与开角型青光眼组、闭角型青光眼组与开角型青光眼组房角组织tTG的表达差异有极显著性(分别为0.180±0.032,0.325±0.052;0.212±0.019,0.325±0.052,P<0.01)。结论开角型青光眼房角组织tTG的表达增加,tTG的增加可能与开角型青光眼的发病有关。     

108例真菌性角膜炎的临床和组织病理学研究

目的 研究真菌性角膜炎的临床特征与相应的组织病理学特点。方法 １０８例真菌性角膜炎行穿透性角膜移植术的临床体征与术后角膜组织病理学对比观察。结果 不同真菌致角膜炎的临床表现各异,角膜组织病理学改变也可能不同。真菌对角膜组织的破坏,以凝固性坏死为主。结论真菌的菌株不同,对角膜组织的感染方式,生长方式均可能不相同。     

人工晶体植入眼的组织病理学

人工晶体植入眼内后与眼组织相互作用,产生一系列眼组织改变,包括眼组织的萎缩、炎症反应、黄斑囊性水肿、人工晶体对眼组织的侵蚀及对角膜内皮的损害、人工晶体表面细胞沉积及膜状物形成等。研究人工晶体植入后的眼病理学改变能帮助我们认识人工晶体与眼组织间相互作用的机理,对于进一步研究人工晶体的材料、设计及手术技术等都有重要意义。     

组织工程技术构建兔角膜基质组织的实验研究

目的 探讨应用组织工程技术构建兔角膜基质层组织的可行性。方法 新西兰大白免40只,即母兔及其亲生子兔共20对。分离获取新生子兔角膜基质细胞,扩增、培养,汇合后,接种于聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,移植于对应的母兔角膜基质层。绿色荧光蛋白(GFP)标记角膜基质细胞,示踪角膜基质构建过程。同时,对侧角膜仅行PGA移植,作为材料对照组。8周后取材,行组织学切片,Western blot检测Ⅰ型胶原及电镜下测定胶原纤维直径分布。结果术后8周,实验侧角膜逐渐恢复透明,形成新生角膜基质样组织,胶原与角膜表面平行,排列较整齐,组织学结构接近正常基质组织。实验组Western blot检测提示新生组织中基质细胞表达Ⅰ型胶原;电镜下胶原纤维直径[(29.0±4.7)nm]与正常角膜基质组织比较[(28.5±3.5)nm],差异无显著意义(P>0.05)。对照组正常角膜无新生基质组织形成。GFP标记角膜基质细胞,示踪角膜基质第8周时,荧光显微镜下可见新生组织呈绿色,提示GFP表达。结论 应用组织工程技术可以在兔受体角膜内构建角膜基质层组织。(中华眼科杂志,2004,40:517-521)     

壳聚糖胶原复合膜在兔角膜基质层间的组织相容性

目的探讨壳聚糖胶原复合膜植入兔角膜基质层的组织相容性,以评价其作为人组织工程角膜修复支架材料的可行性。方法选用8只新西兰白兔,根据角膜基质层间植入膜片材料的不同平均分为A、B两组,A组植入壳聚糖胶原复合膜（实验组）、B组植入壳聚糖膜（对照组）。术后观察并记录术眼球结膜充血、角膜水肿、前房闪辉、角膜新生血管、材料的变化等情况,术后第8周取术眼角膜组织制作病理学切片进行HE染色观察,比较两组材料对角膜组织的不同影响。结果术后8周内,实验组炎症反应轻于对照组,且无角膜新生血管发生,对照组有2例发生角膜新生血管,两组膜片均于术后第2周开始降解,但在相同观察时间点,实验组膜片降解程度小于对照组。HE染色显示实验组膜片周围炎性细胞浸润轻于对照组,膜片降解程度小于对照组,降解物与角膜基质纤维融合。结论壳聚糖胶原复合膜与活体兔角膜基质组织的相容性比壳聚糖膜更优,其作为角膜损伤修复材料具有广阔前景。     

急性心肌缺血对视网膜的影响及其机制

目的 探讨SD大鼠心肌缺血急性期视网膜组织形态学改变及发生机制。方法 将34只大鼠68眼分2组：(1)对照组：冠状动脉左对角支下穿线，不结扎；(2)结扎组：结扎冠状动脉左对角支。2组大鼠于结扎冠脉或冠脉下穿线后30min和3h取视网膜，进行组织病理学检查、5-羟色胺和去甲肾上素免疫组织化学实验。结果与对照组比较，光镜及电镜下可见结扎组大鼠视网膜组织损伤明显。结扎组结扎冠状动脉30min时，光镜下见视网膜组织水肿增厚，细胞空泡变性。结扎冠状动脉3h，视网膜组织萎缩、变薄。电镜下见视网膜组织细胞线粒体嵴断裂明显，呈空泡变性；视细胞膜盘排列紊乱；外核层细胞变小、变形．细胞核固缩。免疫组织化学实验结果显示，结扎冠状动脉30min，视网膜5-羟色胺和去甲肾上腺素阳性染色显著增多。结论 心肌缺血急性期可引起视网膜组织病理学改变。视网膜组织内5-羟色胺、去甲肾上腺素于缺血后增多，可能与心肌缺血时机体内伤害性刺激的作用以及机体的反应有关。     

拟眼组织胞浆菌病

随着对外层视网膜病变认识的深入，越来越多的眼科医师关注到拟眼组织胞浆菌病。组织胞浆菌可致组织胞浆菌病，拟眼组织胞浆菌病可能是组织胞浆菌病在眼部的表现。拟眼组织胞浆菌病的发病机理尚不清楚，临床表现为三联征：黄斑区或中周部孤立分散的萎缩性脉络膜视网膜瘢痕（组织斑或穿凿样病变）、视盘旁脉络膜视网膜萎缩、脉络膜新生血管或遗留的盘状瘢痕，以及一项阴性体征：不伴玻璃体和房水的炎性反应。需与其他的白点综合征疾病（多灶性脉络膜炎伴全葡萄膜炎、点状内层脉络膜病变、多发性一过性白点综合征、急性后极部多发性鳞状色素上皮病变、鸟枪弹样视网膜脉络膜病变、弥漫性视网膜下纤维化和匐行性脉络膜病变等）鉴别。治疗主要是针对脉络膜新生血管。（眼科， 2019， 28： 386-391）     

眼组织AgNOR染色及其意义

目的　探讨眼组织银染核仁组成区 (Ag NOR)染色的效果和意义。方法　对部分正常眼组织、激光屈光性角膜切削术后角膜组织及小梁切除术滤过泡区组织进行 Ag NOR染色 ,光镜下观察组织结构和银染颗粒。结果　 Ag NOR染色可清晰地显示出眼组织结构和细胞核中银染颗粒。增殖旺盛的细胞核中银染颗粒数增多。结论　 Ag NOR染色为从基因调控水平研究眼组织细胞增殖活性提供了可选用的方法     

关注组织工程角膜基础研究的挑战

近20年来,应用组织工程技术构建角膜组织的研究取得了显著进展,对角膜种子细胞、载体材料、构建方法等有了越来越深入的认识.然而,组织工程角膜的基础研究仍面临艰巨挑战,如合适的载体与种子细胞的选择,构建方法的优化和标准化,以及远期效果的评估等.后续研究有待于解决这些问题,并将组织工程全角膜真正带入临床使用阶段.     

Graves眼病眼眶组织病理与IgA、IgE表达的研究

目的 观察Ｇｒａｖｅｓ眼病患者眼部组织免疫球蛋白的表达及组织病理学的改变。方法 收集Ｇｒａｖｅｓ眼病患者眼餐肌及眶脂肪１９例,采用免疫组化、ＨＥ及特殊染色方法观察眼眶组织中ＩｇＡ和ＩｇＥ的表达,粘多糖的堆积及眼外肌受损情况。结果 Ｇｒａｖｅｓ眼病外肌肌内膜、肌外膜有ＩｇＡ阳性染色,其表达程度与治疗有关,差异有显著性;肌细胞、浸润的浆细胞及多形核白细胞ＩｇＥ染色阳改天人表达程度与病程和治疗均有关,差     

圆锥角膜组织结构和酸性粘多糖分布的研究

目的 观察圆锥角膜的组织病理、超微结构的改变，观察铁质和酸性粘多糖在圆锥角膜与正常角膜中分布的变化，探讨这些变化与圆锥角膜的关系。方法 22例标本经苏木精—伊红染色观察组织变化；普鲁士蓝染色观察角膜铁质染色；阿尔新蓝染色观察角膜中的酸性粘多糖的分布。电镜标本经醋酸铀和柠檬酸铅双重染色后于透射电镜下观察。结果 圆锥角膜各层组织结构均发生变化，铁质分布异常，酸性粘多糖随病情加重而降低。结论 在圆锥角膜病变的发生过程中，组织结构异常、基质变薄及酸性粘多糖的水平下降，导致角膜的稳固性下降，这与圆锥角膜形成有关。     

组织工程角膜和人工角膜材料研究进展

理想的材料是构建组织工程角膜和人工角膜的重要条件。组织工程角膜材料包括生物材料、合成材料、复合材料。胶原、羊膜、脱细胞角膜基质等生物材料的生物相容性较好,但可塑性欠佳;PGA等合成材料可塑性较好,但会产生酸性降解产物;将生物材料和合成材料复合,可以取长补短,成为组织工程角膜支架材料的研究方向之一。聚异丙基丙烯酰胺是一种新型合成材料,利用其温度依赖特性,不需酶消化即可获得完整的细胞层,克服了组织工程受到生物可降解支架限制的问题,具有良好的应用前景。人工角膜包括AlphaCor、Dohlman—Doane和Osteo-Odonto人工角膜等,主要由中央光学镜柱和周边支架组成,前者材料多采用聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）或聚甲基丙烯酸羟乙酯（PHEMA）,后者材料包括陶瓷、聚四氟乙烯、PMMA、PHEMA等,这些人工角膜已用于临床,但由于晚期并发症,仅适用于常规角膜移植失败的双眼角膜混浊性失明患者。改善人工角膜周边支架与受体角膜组织的整合仍是人工角膜材料研究的重点。     

重视我国角膜病的基础研究

角膜病是我国主要的致盲眼病之一,其临床诊疗水平的提高有赖于基础与应用基础研究的深度与广度。我国在角膜病的基础与应用基础研究的某些领域已处于国际先进水平。但是总体来说,目前我国角膜病的基础研究与发达国家仍存在较大差距,具体体现在缺乏系统性研究、研究经费有限、从事研究人员的素质与数量均不够等方面。今后我国的角膜病基础研究应主要集中在感染性角膜病的发病机制、角膜营养不良的致病基因、角膜的组织工程、干眼的发病机制、严重眼表化学伤的组织重建、眼表新生血管的发病机制与预防、移植排斥反应的治疗药物开发等方面。争取研究经费、培养高素质人才及加强国内外和不同学科间的合作是提高我国角膜病基础研究的重要工作。（中华眼科杂志,2006．42：673-675）     

组织因子与年龄相关性黄斑变性

组织因子(即凝血因子Ⅲ)是外源性凝血途径的启动因子.近年来发现在新生血管形成、炎症发生和细胞凋亡过程中均有组织因子的参与,而年龄相关性黄斑变性(AMD)有与之相似的病理过程,组织因子广泛表达于黄斑区具有玻璃膜疣及脉络膜新生血管的视网膜组织与细胞、炎症细胞、成熟血管和新生血管区.本文就近年来有关组织因子的生物学特性及其在AMD中表达情况及意义的研究作一回顾,并分析其在AMD病理过程中的可能作用机制,为寻找新的安全有效的治疗方法奠定基础.     

在慢性眼组织胞浆菌病综合征损害中探测荚膜组织胞浆菌DNA

目的：在慢性组织胞浆菌病综合征患除眼组织切片的脉络膜病损中，评估荚膜组织胞浆菌DNA的存在。     

人眼组织中共刺激分子、Fas/FasL及主要组织相溶性复合体II类分子的免疫组织化学研究

目的 探讨正常人眼组织(虹膜睫状体、脉络膜、视网膜)中共刺激分子B7-1和B7-2、与凋亡相关的分子Fas/FasL、人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)DR及CD68(抗巨噬细胞抗体)分子的表达及意义。 方法 12只正常供体人眼(死后16～24 h)均来自中山眼科中心眼库，将6只供体眼组织(虹膜睫状体、脉络膜、视网膜)行常规冰冻切片，另6只做视网膜平片，分别于各部分眼组织切片及视网膜平片进行免疫组织化学研究，探讨正常人眼组织中B7-1、B7-2、HLA-DR、CD68、Fas/FasL分子的表达。 结果 人虹膜睫状体中有B7-2、FasL、CD68、HLA-DR分子的表达；脉络膜中有B7-1、FasL、CD68、HLA-DR分子的表达；视网膜中可见HLA-DR、CD68、FasL分子的表达，而无B7-1、B7-2、Fas分子的表达。 结论 共刺激分子B7-1和B7-2、Fas/FasL及主要组织相溶性复合体(major histocompatibility complex, MHC-II)类分子在不同人眼组织中的表达不同，这些分子的表达可能对维持人眼组织免疫环境的稳定性起着重要作用。 （中华眼底病杂志，2003，19：109-112）     

组织工程角膜治疗兔无菌性角膜溃疡

目的:探讨利用组织工程技术制备角膜基质进行板层角膜移植治疗无菌性角膜溃疡的可行性和疗效。方法:用去垢剂联合胰酶、DNA-RNA酶去除猪角膜基质细胞后制备成组织工程角膜基质;将16只兔的角膜基质内植入壳聚糖膜使之形成角膜溃疡,随机从16只兔中选8只行组织工程角膜基质板层移植;另外8只作为对照组,行新鲜的同种异体板层角膜移植。术后对角膜进行裂隙灯、HE染色光学显微镜检查。结果:组织工程角膜基质移植后无免疫排斥发生,术后8～10wk角膜溃疡完全修复,角膜恢复透明性,与对照组疗效相同。结论:组织工程角膜基质具有良好的生物相容性和治疗作用。     

组织工程材料在眼表重建中的应用

组织工程近年来已成为眼表重建研究的热点。组织工程材料在眼表重建的应用包括胶原及复合材料、羊膜复合体、壳聚糖复合材料及人工合成可降解材料(聚乳酸、聚羟基乙酸)等诸多材料。本文将介绍上述组织工程材料在眼表重建实验和临床应用的研究现状及进展。     

视网膜母细胞瘤组织浸润程度临床相关危险因素研究

目的探讨视网膜母细胞瘤(Rb)对眼球组织浸润侵犯程度的相关临床危险因素。设计回顾性病例系列。研究对象经组织病理学确诊的Rb患者394例。方法收集1990-2005年北京同仁医院较完整的394例Rb患者的临床病理资料,术前观察主要临床体征,术后光镜下判读Rb眼球各组织浸润程度,通过logistic多元回归分析Rb眼球组织浸润程度的临床危险因素。主要指标Rb各临床体征与眼球组织浸润程度及两者之间的相关性。结果394例Rb中侵犯视盘315例(79．7％),侵犯筛板纤维203例(51．4％),肿瘤穿过筛板至球后视神经内102例(25．8％),侵犯脉络膜102例(25．8％),视神经切除断端受累者26例(6．6％)。统计分析显示:脉络膜组织受累与病程(P=0．032)、结膜充血(P=0．023)、眼球突出(P=0．026)及继发青光眼(P=0．027)有关;视神经切除断端浸润与结膜充血(P=0．008)、虹膜新生血管形成(P=0．033)、眼球突出(P=0．000)有关。结论本组Rb视神经侵犯率较高。病程长、结膜充血、眼球突出是眼球组织侵犯的主要因素。