麻疹野病毒的分离及血清学的初步分析

从１９９３年山东省和湖南省１０例麻疹急性期患者的咽拭子中，用Ｂ９５ａ细胞分离到７株麻疹野病毒，同时用 Ｖｅｒｏ细胞分离未获成功。将此 ７株病毒以 １０４ＴＣＩＤ５０／ｍｌ剂量分别接种到 Ａ－Ｖｅｒｏ细胞，只有１株出现融合病变，其它毒株未见增殖。抗麻疹血凝素（Ｈ蛋白）单克隆抗体（１２Ｅ）对分离株的中和滴度低于Ｌ４株６０倍以上。在同期收集的１３例麻疹患者血清，经ＥＬＩＳＡ法检测，３ 例ＩｇＧ抗体阴性，３例抗体滴度为１：２００～１：８００，但７例滴度在１：３２００～１：１０２　４００之间，占５４％．１３例血清中１２例ＩｇＭ抗体阳性。     

10株水痘带状疱疹病毒分离鉴定与生物学特性研究

用Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞从１２例水痘及带状疱疹病人水疱液中分离到１０株病毒，分离阳性率为８３．３％。１０株病毒均可使感染细胞圆缩融合、脱落等典型的ＶＺＶ局灶性细胞病变（ＣＰＥ）特点，ＣＰＥ随着传代次数增加而加快。用带状疱疹恢复期病人血清作间接免疫荧光染色镜检可见典型的感染细胞核内荧光块。１０株病毒感染细胞制成的抗原片检测５例带状疱疹病人急性期及恢复期血清荧光抗体滴度均有４倍以上增高。ＶＺＶ对Ｖｅｒｏ细胞敏感；对沙鼠肾，胎兔肾，胎豚鼠肾、肺、脾原代单层细胞不敏感；对乳小白鼠不敏感。毒种在－２０℃保存一周内死亡，但在３０％脱脂牛奶，２０％小牛血清及１０％山梨醇Ｅａｇｌｅ′ｓ液中，液体或真空冰冻干燥－１００℃可保存二年以上。     

一步法提取RNA反转录－多聚酶链反应检测汉坦病毒RNA

用反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测汉坦病毒（Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ）的基因ＲＮＡ，同时与细胞分离病毒的敏感性进行比较。用异硫氰酸胍－载体吸附法，一步提取汉坦病毒ＲＮＡ。将脑腔接种汉坦病毒频临死亡的乳鼠脑制成１０％的悬液，并系列稀释，从１０（－１）到１０（－１２）的１２梯度。结果表明，该引物能够扩增出汉坦病毒Ｈ８２０５株的ＲＮＡ，说明汉坦病毒Ｈ８２０５株与７６－１１８株在Ｍ片段上具有共同的保守序列。ＲＴ－ＰＣＲ可以检测出４．６４×１０（－３）ＴＣＬＤ（５０）／ｍｌ的病毒，而用Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞只能分离检测出４．６４×１０（－２）ＴＣＬＤ（５０）／ｍｌ，所以ＲＴ－ＰＣＲ检测病毒比细胞分离检测病毒敏感。     

干扰素口腔贴片浸出液体外抗病毒作用的实验研究

用流感病毒感染体外培养的Ｖｅｒｏ细胞,加入干扰素口腔贴片（含重组干扰素α—２ｂ）浸出液,研究其浸出液体外抗病毒作用,结果表明干扰素口腔贴片浸出液能有效地抑制流感病毒标准株和临床分离株在Ｖｅｒｏ细胞内复制,ＩＣ５０＝（０．８～３．３）ｕ／ｍｌ,其效果与１００μｇ／ｍｌ病毒唑相似,抑制指数为３．１～４．１。     

甲基硝基亚硝基胍诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖的研究

将培养第５天的日本血吸虫成虫培养细胞在含甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）终浓度分别为０（对照）、１、２、３、４、６、９ｕｇ／ｍｌ的附加２０％小牛血清及常量抗生素的ＲＰＭＩ－１６４０培养基中分别处理２４ｈ、３６ｈｄ、４８ｈ；随后，换用含２０％小牛血清及常量抗生素的ＲＰＭＩ－１６４０培养基培养；３ｄ后，改用含５％小牛血清及常量抗生素的ＲＰＭＩ－１６４０培养基继续培养，每天在血清及常量抗生素的ＲＰＭＩ－１６     

应用地高辛标记探针检测以Vero传代细胞制备人用狂犬疫苗中残余细胞DNA含量

用地高辛标记正常Ｖｅｒｏ细胞ＤＮＡ，制成特异探针，通过与制备人用狂犬疫苗的基质Ｖｅｒｏ细胞同源ＤＮＡ杂交，检测人用狂犬疫苗中残余Ｖｅｒｏ细胞ＤＮＡ含量，达到ＷＨＯ规程中“以传代细胞制备生物制品中残余细胞ＤＮＡ含量，每剂量ＤＮＡ须低于１００ｐｇ”的检测要求。检测灵敏度可达１ｐｇ，杂交反应特异性高，重复性好。测得以Ｖｅｒｏ细胞制备人用狂犬疫苗粗制原液中残余细胞ＤＮＡ含量为１００～１０００ｐｇ／ｍｌ，超滤浓缩后为１０４～１０６ｐｇ／ｍｌ，纯化后低于１０～１００ｐｇ／ｍｌ。这对以传代细胞为基质的生物制品中残余细胞ＤＮＡ的检测提供了一种常规可行的方法，因而具有重要的应用价值     

实验室检测脊髓灰质炎疫苗滴度应注意的问题

Ｈｅｐ－２细胞是脊髓灰质炎（脊灰）病毒的敏感细胞之一，其敏感性受多种因素制约，本文以培养Ｈｅｐ－２细胞是否使用乳蛋白水解物及小牛血清的质量差异对脊灰糖丸疫苗滴度的影响进行了分析。结果表明：乳蛋白水解物的使用可使脊灰三价糖丸疫苗总滴度平均提高０．３６ＬｏｇＣＣＩＤ５０／粒，显著高于未使用乳蛋白水解物培养的Ｈｅｐ－２细胞。另外，小中血清的影响不容忽视，本文发现有些进口小牛血清对病毒的生长产生非特异性抑制，对脊灰病毒的抑制滴度可达１．９ＬｏｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ以上。这提示我们。组织培养试剂的更换应格外慎重，实验室标准体系的建立也是非常必要的。     

柯萨奇病毒Ａ 组１６型多克隆抗体的制备及其 在检定中的应用

摘要：目的　评价ＣＶ Ａ１６ Ｋ１６８免疫血清对ＣＶ Ａ１６不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量 所需的最低血清量,为ＣＶ Ａ１６疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法　将ＣＶ Ａ１６病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰大白兔,多次免疫后取血清,采用微量细胞病 变法进行中和抗体效价检测和对１５ 株不同ＣＶ Ａ１６ 毒株的中和效价检测, 并用ＣＶ Ａ１６ ４Ｖ 和ＣＶ Ａ１６ １０Ｒ 两个毒株分析中和不同量病毒所需的抗体量。结果　浓缩抗原作为免疫原获得的兔抗ＣＶ Ａ１６血清中 和抗体效价可达１∶２０４８;该免疫血清对１５ 株ＣＶ Ａ１６ 不同毒株的几何平均滴度（ｇｅｎｏｍｉｃｍｅａｎｔｉｔｅｒ, ＧＭＴ）为１∶３１１８;完全中和７．５ｌｇＣＣＩＤ５０／ｍｌＣＶ Ａ１６病毒所需的最低血清量为１２８Ｕ,当病毒量在４．０ ～７．０ｌｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ时,完全中和所需的最低血清量为４８Ｕ,当病毒量低于４．０ｌｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ时,１Ｕ 的血 清即可完全中和本病毒。结论　ＣＶ Ａ１６ Ｋ１６８株作为免疫原可获得高效价的抗血清;用不同毒株检测得到 的抗体效价存在差异;完全中和病毒所需的最低血清量与病毒量呈正相关;病毒量与测得的血清中和效价 呈负相关。 关键词：柯萨奇病毒Ａ 组１６型;免疫血清;中和能力;疫苗检定 中图分类号：Ｒ３７８．２ ＋ Ｒ３９２ ３３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１７）０７ ０４９７ ０４     

海南省琼中地区三农场斑点热血清流行病学研究

目的：了解海南省斑点热流行状况。方法：用补体结合试验，在琼中县大丰、阳江及新进３个农场的健康人群、家畜及啮齿动物中进行斑点热血清流行病学及啮齿动物种群和带蜱情况调查。结果：共检查牛血清１８份，羊血清５０份，猪血清６３份，人血清７２份，鼠血清１２０份，西伯利亚立克次体、康氏立克次体、小蛛立克次体抗体阳性率羊血清分别为４％（２／５０）、２％（１／５０）和２％（１／５０）。猪血清分别为３．１７％（２／６３）、０％（０／６３）和３．１７％（２／６３），人血清分别为１６．６７％（１２／７２）、１１．１１％（８／７２）和２．７８％（２／７２），鼠血清分别为３０．００％（３６／１２０）、１０．８３％（１３／１２０）和７．５０％（９／１２０），牛血清中未检测出上述抗体。该地区的优势鼠种为黄毛鼠、屋顶鼠、针毛鼠，带蜱率分别为１５．９１％（７／４４）、３０％（１５／５０）、３６．３６％（８／２２）。结论：海南省琼中县存在斑点热自然疫源地。     

广西犬种布鲁氏菌毒力测定

为证实我区分离的犬种布氏菌的致病性，我们根据菌株的抗原性，药敏试验及地区分布，选出毒力较强的有代表性的广西株，同时与ＲＭ６／６６参考株接种小白鼠和做青霉素毒力测定，小白鼠经皮下接种后，第７天处死解剖，所有脏器均分离出菌。两株广西株在含１０ＩＵ／ｍｌ的青霉素培养基上仍可生长。而ＲＭ６／６６参考株能生长的最高浓度的５ＩＵ／ｍｌ，说明广西株毒力不低于参考株。     

HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及培养优化的研究

目的：研究HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及新生小牛血清对细胞生长及病毒产量质量的影响。方法：通过对HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度、细胞活力指数、活细胞密度、病毒比分泌速率和细胞比生长速率进行观察来评价其动力学；通过对抗原纯度的变化来说明不同浓度的新生小牛血清对分泌的病毒质量的影响。结果：HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度与细胞活力指数、活细胞密度呈现正相关性；病毒滴度、病毒比分泌速率与细胞比生长速率不相关，随着小牛血清浓度的增加，抗原纯度有下降趋势。结论：细胞生长对数期几乎同步出现病毒分泌对数期，小牛血清浓度为9％～12％的培养基是最佳的培养条件。     

伴君康消毒效能的实验研究

伴君康是具有消毒与去污双重功能的水溶性去污消毒剂，实验研究结果表明：伴君康１／５００作用５ｍｍ或１／２５０作用１ｍｍ对细菌繁殖体杀灭率达９９．９５％以上，可破坏ＨＢｓＡｇ（２５００ｎｇ／ｍｌ）与ＨＢｅＡｇ；在１０％小牛血清影响下，伴君康１／２００作用１ｍｉｎ对金黄色葡萄球杀灭率达９９．９９％以上；伴君康原液作用５ｍｉｎ对枯草杆菌芽胞和皮肤致病真菌杀灭率均为１００％；伴君康１／８０作用１ｍｉｎ可１００％灭活艾滋病毒（ＨＩＶＢＡ－２）。     

广西吸毒成瘾者丙型肝炎病毒的感染及其分子生物学研究

选择２８３名静脉吸毒者（ＩＶＤＡｓ）和１２１名献血员（ＢＤｓ）进行Ａｎｔｉ－ＨＣＶ、ＨＣＶ血清基因型、ＨＣＶ基因型和ＨＣＶｃＤＮＡ序列的检测。结果表明，ＩＶＤＡｓ和ＢＤｓ的Ａｎｔｉ－ＨＣＶ检出率分别为９１．１７％和０．８３％；ＩＶＤＡｓ的ＨＣＶ血清基因型为１型８１．８５％（２２１／２７０），２型１．４８％（４／２７０），ｌ＋２型０．３７％（１／２７０），不能定为１和／或２型１６．３０％（４４／２７０）；ＨＣＶ基因型为１ａ型：２８．６％（３４／１１９）；ｌｂ型：３８．７％（４６／１１９）；２ａ型１０．９％（１３／ｌ１９）；２ｂ型１４．３％（１７／ｌ１９）；３ａ型２６．９％（３２／１１９）；３ｂ型４０．３％（４８／１１９）；６ａ型８．４％（１０／１１９）；６ｂ型２６．７％（３１／１１９）；其中１４．３％的病例有４～５种不同基因亚型的混合感染现象。     

低浓度挥发性有机化合物被动式个体采样器的研究

研制了扩散式挥发性有机化合物（ＶＯＣｓ）个体采样器,适用于对环境空气中和非职业性个体接触ＶＯＣｓ的监测。在风速１０～２６０ｃｍ／ｓ,相对湿度为３０％～８０％,温度为１０～３０℃的范围内使用,采样速率分别为苯：２５．７４ｍｌ／ｍｉｎ,甲苯：２５．１６ｍｌ／ｍｉｎ,四氯乙烯：２５．８５ｍｌ／ｍｉｎ,对－二甲苯：８．１６ｍｌ／ｍｉｎ,苯乙烯：６．４７ｍｌ／ｍｉｎ。与主动式活性炭纤维（ＡＣＦ）管采样法比较,本个体采样器测定空气中靶ＶＯＣｓ的总不确定度均在±２５％以内。     

丙型肝炎病毒感染者临床表现及病毒血症的随访观察

本文报道了对１００例ＨＣＶ感染者临床表现和病毒血症２～４．５年的随访观察结果，其中输血后ＨＣＶ感染者（ＰＴＨＣ）８４例，散发性 ＨＣＶ感染者（ＳＨＣ）１６例。ＨＣＶ感染者的临床表现有多种形式：病毒携带（３例，仅病毒学指标阳性），亚临床感染（７例，无临床症状，但肝功能异常）和显性感染（９０例）。绝大多数患者（９１／１００）在随访过程中转变为慢性肝炎；６例ＰＴＨＣ患者临床痊愈（６％），其中１例病毒学指标仍为阳性；３例病毒携带者在随访过程中无变化。ＰＴＨＣ的慢性化率为９２．８６％（７８／８４），高于ＳＨＣ的８１．２５％（１３／１６）。ＳＨＣ临床表现和肝功能异常程度轻于 ＰＴＨＣ，这与 ＳＨＣ血清病毒含量（血清稀释倍数 １０～１００）明显低于ＰＴＨＣ（血清稀释倍数１００～１００００）有关．在随访过程中，ＨＣＶ病毒血症有３种表现形式：一过性病毒血症、持续性病毒血症和间歇性病毒血症。     

肾综合征出血热亚中和水平抗体增强病毒感染的实验研究

建立昆明系成鼠动物模型,对肾综合征出血热亚中和水平抗体增强病毒感染作用进行研究。用 Ｒ２２ 、 Ａ１６ 株病毒分别免疫小鼠,制备免疫血清,检测免疫血清中和抗体效价。实验组小鼠脑内感染１０５ Ｌ Ｄ５０（００３ｍｌ） 不同毒株悬液,小鼠染毒前２４ｈ 、１ｈ 或染毒后２４ｈ 、４８ｈ ,经ｉｖ 被动输入同型免疫血清,对照组小鼠输入０１０ｍｌ 的正常鼠血清。感染病毒后经腹腔注射环磷酰胺５０ｍｇ／ｋｇ 。小鼠被动输入小剂量免疫血清,病毒感染力增强,表现为潜伏期缩短,起病急,死亡迅速。输入０２０ ｍｌ 免疫血清小鼠保护率为２２２ ％ （２／９） ,输入０８０ ｍｌ 免疫血清小鼠保护率达１００ ％ （１０／１０） 。     

四氯乙烯对洗衣工人血清EB抗体含量影响的观察

本文对某洗衣厂１１０接触干洗剂四氯乙烯（Ｃ２Ｃｌ４）工人进行血清ＥＢ病毒抗体（ＩｇＡ／ＶＣ）测定。结果发现：Ｃ２Ｃｌ４接触组工人血清ＩｇＡ／ＶＣ平均滴度是１∶１３．１，对照组血清ＩｇＡ／ＶＣ平均滴度是１∶５．２，经比较两者具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。接触组检出滴度１∶１０～１∶８０者６９例，占６２．７％，其中滴度１∶８０者２例，占１．８％。ＩｇＡ／ＶＣ平均滴度具有随着接触Ｃ２Ｃｌ４工龄增加而升高的趋势，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。性别、年龄间血清ＩｇＡ／ＶＣ水平均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。Ｃ２Ｃｌ４不仅可直接损害人体的肝、肾、神经系统及鼻咽部粘膜，还可能会激发人体鼻咽部内潜伏、封闭状态的ＥＢ病毒引起ＩｇＡ／ＶＣ水平的升高。     

产Vero细胞毒素大肠杆菌

产Ｖｅｒｏ细胞毒素大肠杆菌［英］／ＮｅｉｌＭＡ．．．∥ＪＦｏｏｄＰｒｏｔ．－１９９７；６０（１１）．－１４４４～１４４６产Ｖｅｒｏ细胞毒素大肠杆菌是一组致泄的大肠杆菌，其中最重要的一个成员是血清型Ｏ１５７∶Ｈ７，它是引起出血性结肠炎（ＨＣ）与溶血性尿...     

离子对反相高效液相色谱同时测定饮品中Vpp,VB6及咖啡因含量

建立了离子对反相高效液相谱色（ＨＰＣ）同时测定饮吕中ＶＰＰ、ＶＢ６和咖啡因的方法。以庚烷磺酸钠为离子对试剂,甲醇：水２：８（１％冰乙酸）为流动相。ＶＰＰ、ＶＢ６及咖啡因的线性范围分别是４０－２００μｇ／ｍｌ、８－４０μｇ／ｍｌ及５０－２５０μｇ／ｍｌ。回收率分别为９８．５０－１０１．８％、９９．６０－１０４．０％、及９９．３０－１０２．５％。该法可用于饮品中ＶＰＰ、ＶＢ６及咖啡因的含量测定,对３批     

肾综合征出血热病毒耐雾化和冲击的稳定性观察

采用测定ＨＦＲＳＶ喷雾液和ＨＦＲＳＶ气溶胶采样液的病毒浓度方法，确定ＨＦＲＳＶ的气溶胶存活力和感染力，结果在Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞上，ＨＦＲＳＶ空斑大小均匀，乳小鼠脑腔接种ＨＦＲＳＶ，动物反应剂量基本呈线性关系（ｒ＝０．８８，Ｐ〈０．０５），ＭＩＣＬＤ５０＝５７０ｐｆｕ。研究表明，ＨＦＲＳＶ用ＴＫ发生器雾化３０ｍｉｎ，存活５０％，提示该病毒耐雾化能力强，ＡＧＩ强样器采样冲击５ｍｉｎ，存活５０％，而冲击