Etest方法与微量肉汤稀释法检测念珠菌属对唑类抗真菌药物的敏感性评价

目的比较分析Etest法检测临床常见念珠菌对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑敏感性与微量肉汤稀释法的一致率。方法针对220株临床常见的5种念珠菌,分别采用CLSI M27微量肉汤稀释法和Etest法进行药物敏感性检测。分别统计Etest法与微量肉汤稀释法检测三种唑类药物的基本一致率(EA)和分类一致率(CA)。结果 Etest方法和微量肉汤稀释法的EA分别为氟康唑(96.8%)、伏立康唑(97.3%)和伊曲康唑(81.8%)。对于氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑,白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌和克柔念珠菌中两种检测方法的CA分别为96.2%,97.5%和—;92.5%,82.5%和97.5%;92.5%,97.5%和—;97.5%,—和70%;—,100%和90%。结论 Etest法检测念珠菌对唑类药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌唑类药物敏感性测定简便并且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规使用。     

评价3种体外敏感试验方法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的敏感性

目的 评价3种实验室常用念珠菌体外药敏试验方法在测定氟康唑和伏立康唑对念珠菌的体外活性上的可靠性及实用性.方法 应用美国临床实验室标准化委员会微量肉汤稀释法(NCCLS M27-A2),NCCLS念珠菌纸片扩散法(M44-A),丹麦ROSCO纸片扩散法、法国生物梅里埃公司ATBFUNGUS3药敏试验板条法检测氟康唑和伏立康唑对85株临床分离念珠菌及2株质控菌株的体外抗菌活性.采用SPSS 13.0软件分析结果,比较3种实验室常用药敏试验方法与NCCLS M27-A2微量肉汤稀释法的相关性.结果 3种体外药敏试验方法所得结果分别与M27-A2肉汤微量稀释法进行比较,氟康唑药敏试验结果比对,NCCLS M44-A纸片扩散法一致率为83.5%,ROSCO纸片扩散法一致率为76.4%,ATB FUNGUS 3药敏试验板条法一致率为72.9%;伏立康唑药敏试验结果比对,3种药敏试验方法一致率均为85.9%.结论 在检测氟康唑和伏立康唑对常见念珠菌体外抗菌活性的3种方法所得结果与肉汤稀释法存在一定的差异.对部分菌株(尤其是剂量依赖敏感株)需要进一步应用M27-A2肉汤微量稀释法确定其MIC值.各种体外药敏试验结果与临床体内疗效还需进一步研究.     

恶性肿瘤患者念珠菌临床分离株的药物敏感性分析

目的 以美国临床实验室标准化委员会（NCCLS） M27-A方案的微量肉汤稀释法为金标准,评价丹麦ROSCO公司的纸片扩散法在检测念珠菌耐药性方面的应用价值,为临床实验室寻找一种简便的念珠菌药敏试验方法.方法 分别采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片和法国生物梅里埃公司ATBFUNGUR2念珠菌药敏板条来检测78株常见念珠菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑等4种抗真菌药物的敏感性,以NCCLS的微量稀释法作为金标准,评价纸片扩散法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 纸片扩散法检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的药敏结果,其Kappa值达到了0.89,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对78株念珠菌的药敏结果进行分析,5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感性高,分别为88.20％和89.17％,氟康唑和伊曲康唑敏感性较低,分别为56.34％和52.12％.白色念珠菌和热带念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性较高,分别为90.95％、85.71％,而光滑念珠菌和克柔念珠菌的敏感性低,分别为67.50％、41.67％.结论 纸片扩散法与微量稀释法一致性高,在临床实验室可以替代微量稀释法进行念珠菌的药敏分析.我院念珠菌对两性霉素B的敏感性最高,对伊曲康唑的敏感性最低;抗真菌药物对白色念珠菌的抑菌率最高,对克柔念珠菌的抑菌率最低.     

氟康唑体外抗菌活性及五种体外敏感试验方法的比较

目的 对比研究五种酵母菌体外药敏试验方法在测定氟康唑对酵母菌的体外活性检测上的可靠性及实用性。方法 分别应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）M27-A常量肉汤稀释法、微量肉汤稀释法，NCCLS及ROSCO纸片扩散法、浓度梯度法测定氟康唑对155株临床分离的酵母菌及4株质控菌株的体外活性。采用WHONET-5软件及SPSS软件对结果进行分析，比较各种药敏试验方法与M27-A常量肉汤稀释法的相关性。结果 4种体外药敏试验方法所得结果分别同M27-A常量肉汤稀释法进行比较，浓度梯度法一致率为83．9％，NCCLSM44-P纸片扩散法一致率83．1％，ROSCO纸片扩散法一致率为78．1％，微量肉汤稀释法一致率为93．5％。结论 5种酵母菌体外药敏试验方法在检测氟康唑对临床常见酵母菌的体外活性检测上存在一定的差异，本次试验结果表明，微量肉汤稀释法与NCCLSM27-A常量肉汤稀释法的一致性最佳，其方法结果准确可靠、重复件好．活用于常规下作。     

酵母菌对氟康唑的敏感性及三种药敏试验方法的比较

目的了解酵母菌对氟康唑的敏感性，并对３种抗真菌药敏试验方法进行比较。方法利用纸片扩散法，微量稀释法及浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ法）测定９２株临床分离酵母菌对氟康唑的敏感性。结果Ｅｔｅｓｔ法和微量稀释法所测酵母菌对氟康唑的总敏感率分别是７３．９％和８１．５％。纸片扩散法所测敏感菌，微量稀释法全部敏感，Ｅｔｅｓｔ法敏感率为９１％；纸片扩散法所测耐药菌，其余两种方法检测多数仍为敏感。从不同菌种来看，白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、葡萄牙念珠菌、白吉利丝孢酵母菌及酿酒酵母菌对氟康唑全部敏感；氟康唑对克柔念珠菌及光滑念珠菌的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）值均较高；近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、异常汉逊酵母菌及新型隐球菌中的部分菌株对氟康唑敏感，部分菌株为剂量依赖性敏感，未发现耐药菌株。结论氟康唑对除克柔念珠菌及光滑念珠菌的ＭＩＣ值较高外，其余酵母菌对氟康唑敏感性好。纸片扩散法虽简便，但仅可用于初筛敏感菌，对抑菌环直径≤１４ｍｍ者应进一步用微量稀释法或Ｅｔｅｓｔ法测定其ＭＩＣ值     

3种药敏检测方法对洋葱伯克霍尔德菌体外抗菌药物药敏结果分析

目的评估微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测洋葱伯克霍尔德菌体外抗菌药物药敏试验的结果。方法采用微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测31株洋葱伯克霍尔德菌对复方磺胺甲噁唑、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素、左氧氟沙星和美罗培南这6种抗菌药物的药敏性。以微量肉汤稀释法为参考方法,计算50%最低抑菌浓度(MIC_(50))、敏感率和误差率,分析基本一致率和分类一致率。结果复方磺胺甲噁唑的MIC_(50)为1.00μg/mL,敏感率为100.0%,体外活性最好。头孢哌酮/舒巴坦的MIC_(50)为16.00μg/mL,敏感率只有61.3%,体外活性最差。以微量肉汤稀释法为参考方法,E-test法检测头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦和左氧氟沙星的基本一致率和分类一致率均90.0%,且存在一定的误差率,其中左氧氟沙星的非常重大误差为6.5%,头孢哌酮/舒巴的重大误差为12.9%;纸片扩散法检测头孢他啶和头孢哌酮/舒巴坦的分类一致率90.0%,且存在一定的误差率,其中米诺环素的非常重大误差为6.5%,头孢哌酮/舒巴坦的重大误差为12.9%;E-test法和纸片扩散法检测复方磺胺甲噁唑和美罗培南敏感率均90.0%,分类一致率均90.0%。结论微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测洋葱伯克霍尔德菌可能存在不同的误差,应合理选择药敏检测方法,以确保结果的准确性。     

上海地区临床分离念珠菌的耐药性监测

目的了解上海地区临床分离念珠菌的菌株分布以及对常用抗真菌药物的敏感性和耐药性。方法对上海地区27所医院临床分离念珠菌采用微量液基稀释法按统一方案进行抗真菌药物敏感性试验。按CLSI M60(2017年)判断结果。结果收集2017年8月1日-2018年4月30日上述医院临床分离念珠菌共354株,其中白念珠菌占41.81%(148/354),近平滑念珠菌占23.73%(84/354),热带念珠菌占15.54%(55/354),光滑念珠菌占9.32%(33/354),其他念珠菌占9.60%(34/354)。白念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌耐药率与以往报道比较偏低或基本持平,无增长趋势,主要是对唑类抗真菌药物具有一定的耐药性。白念珠菌对氟康唑耐药率为1.45%、剂量依赖性敏感(SDD)率为4.35%,对伏立康唑耐药率和中介率均为2.17%;近平滑念珠菌对氟康唑呈现1.20%的SDD率,对伏立康唑呈现1.20%的中介率;光滑念珠菌对氟康唑表现出6.06%的耐药率和93.94%的SDD率;热带念珠菌耐药率呈增长趋势,对氟康唑表现出41.82%的耐药率和12.73%的SDD率,对伏立康唑表现出40.00%的耐药率和12.73%的中介率。白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌对棘白菌素类药物尚未出现耐药菌株,仅1株光滑念珠菌对卡泊芬净耐药。结论上海地区临床念珠菌的分离率及菌株分布与国内外报道基本一致,临床分离菌株对常用抗菌药物的耐药率基本稳定,热带念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药率呈上升趋势,应该引起临床医师重视。同时应进一步加强医院感染防控措施,继续做好真菌耐药性监测工作。     

3种方法检测白假丝酵母菌对氟康唑、伏立康唑的敏感性对比

目的比较抗真菌药敏试验纸片扩散法、ATB FUNGUS3(ATB F3)微量稀释法和E-试验(Epsilometer test)检测白假丝酵母菌对氟康唑、伏立康唑的结果,探讨3种方法的可比性和一致性。方法使用纸片扩散法和ATB F3法对中山市古镇人民医院住院患者分离的58株白假丝酵母菌进行药敏试验,同时用E-试验作为对照。结果纸片扩散法与E-试验的符合率在氟康唑为69.0%(40/58),在伏立康唑为98.2%(57/58);ATB F3法与E-试验的符合率在:氟康唑为89.7%(52/58),在伏立康唑为96.6%(56/58)。结论纸片扩散法检测白假丝酵母菌对氟康唑敏感性与E-试验符合率不甚理想,ATB F3法比较理想;而伏立康唑无论纸片法还是ATB F3法与E-试验结果符合率非常一致。ATB F3法检测白假丝酵母菌敏感性操作简便,使用成本低,大多数医院特别是基层医院应该推广普及。     

三种方法检测酵母菌对氟康唑药敏试验一致性的研究

目的:对比研究3种酵母菌体外药敏试验在测定酵母菌对氟康唑药物敏感的可靠性及实用性。方法:以美国实验室标准协会(CLSI)酵母菌纸片扩散法药敏试验(M44-A)为参照,采用丹麦ROSCO纸片扩散法、法国梅里埃ATB FUNGUS3药敏试验,检测82株临床分离的酵母菌对氟康唑的药物敏感度。采用WHONET-5.4和SPSS13.0软件对结果进行分析,比较ROSCO纸片扩散法、ATB FUNGUS3与M44-A结果间的一致性。结果:ROSCO纸片扩散法检测82株临床分离酵母菌对氟康唑的药敏结果与CLSI M44-A检测结果间差异无统计学意义(P>0.05),一致率为80.5%;ATBFUNGUS3检测的药敏结果与CLSIM44-A检测结果间差异有统计学意义(P<0.01),一致率为74.4%,其中光滑假丝酵母菌和白假丝酵母菌的检测结果与参照差异较大。结论:在检测酵母菌对氟康唑体外药物敏感度方面,ROSCO纸片扩散法与M44-A的一致性较好;对部分菌株,则需进一步应用微量肉汤稀释法M27-A2检测,以确定其最低抑菌浓度(MIC)。     

EUCAST和CLSI微量肉汤稀释法白念珠菌体外药物敏感性试验结果比较

目的 比较欧洲抗菌药物敏感性试验委员会（EUCAST）和美国临床实验室标准化协会（CLSI）微量肉汤稀释法白念珠菌体外药物敏感性试验结果的差异。方法 分别用EUCAST方法和CLSI方法检测42株白念珠菌对两性霉素B、阿尼芬净、卡泊芬净、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑和米卡芬净的敏感性,比较2种方法的基本一致性（EA）、分类一致性（CA）、极重大误差率（VME）和重大误差率（ME）。结果 EUCAST方法和CLSI方法总体EA为95.2%～100.0%,CA为95.2%～100.0%,ME为0%～4.8%,VME为0%～2.4%;氟康唑的ME为4.8%,泊沙康唑的VME为2.4%。结论 EUCAST方法和CLSI方法白念珠菌体外药物敏感性试验结果具有可比性,但部分药物之间需要额外的协调步骤。     

氟康唑和伏立康唑对酵母菌抗菌活性的研究

目的 :研究氟康唑和伏立康唑对 2 14株酵母菌的体外抗菌活性。方法 :酵母菌收集自 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 1年 12月住院患者提供的标本。采用酵母菌纸片扩散法敏感试验 ,Mueller Hinton琼脂中补充 2 %葡萄糖和 0 .5mg/L美蓝 ,其他类似于美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)M2 A6细菌药敏试验法。采用BIOMIC仪自动读取平皿抑菌环直径、解释和记录试验结果及核对质控数据。结果 :白念珠菌最常见 ,占 5 4 .7% ,其次为热带念珠菌占 18.7% ,光滑念珠菌占 12 .1% ,近平滑念珠菌占 4 .7% ,克柔念珠菌占 3.7%和新型隐球菌占 3.7%。白念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑的敏感率为 92 .5 %～10 0 .0 % ,MIC90 均在敏感范围内 (<3～ 8mg/L) ,伏立康唑对白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌的MIC90 为 0 .0 6 4～ 1.5mg/L。结论 :氟康唑对白念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌有较好的抗菌活性 ,伏立康唑比氟康唑对白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌有更高的抗菌活性 ,有较低的MIC值     

流式细胞术快速检测白色念珠菌药物敏感性与CLSI M27-A2法、ATB-FUNGUS 3法符合性的比较

目的比较评价流式细胞术快速药敏试验(FCST)和CLSI M27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUNGUS3(ATBF3)半固体培养基法检测白色念珠菌对常用抗真菌药物敏感性符合率。方法用FCST法和CLSIM27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUNGUS3(ATBF3)同时测定46株临床分离的白色念珠菌对氟康唑(FLC)、酮康唑(KEC)、伊曲康唑(ITC)、伏立康唑(VRC)等药物的敏感性并进行比较分析。结果 FCST法与M27-A2比较,FLC、KEC、ITC和VRC的符合率分别为91.3%、100%、80.4%和93.5%;FCST法与ATBF3比较,FLC、ITC和VRC的符合率分别为91.3%、91.3%、和93.5%。结论 FCST法具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点;FCST法与M27-A2、ATBF3法测定对白色念珠菌FLC、KEC、ITC和VRC的敏感性有较高的符合率,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景。     

酵母菌对氟康唑的敏感性及三种药敏试验方法的比较

目的 了解母菌对氟康唑的敏感性，并地３种抗真菌药敏试验方法进行比较。方法 利用纸片扩散法，微量稀释法及浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ法）测定９２株临床分离酵母菌对氟康唑的敏感性。结果 Ｅｔｅｓｔ法和微量稀释法所测酵母菌对氟康唑的总敏感率分别是７３．９％和８１．５％。纸片扩散法所测敏感菌，微量稀释法全部敏感，Ｅｔｅｓｔ法敏感率普９１％；纸片扩散法所测而药菌，其余两种方法检测多数仍为敏感。从不同菌种来看，白念     

真菌药敏纸片扩散法实验与应用研究

目的评价氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、酮康唑4种抗真菌药物在萄萄糖美蓝M-H琼脂培养基上进行K-B纸片扩散法药敏试验的可行性。方法应用NCCLS认可的氟康唑纸片扩散法和NCCLS M27-A肉汤稀释法检测氟康唑(FLC)、两性霉素B(AMB)、伊曲康唑(ITC)、酮康唑(KTC)对131株假丝酵母菌的敏感性;用纸片扩散法同时检测2种氟康唑(FLC1:25μg/片;FLC2:15μg/片)纸片的敏感性,对其结果进行比较。结果纸片扩散法中:FLC1与肉汤稀释法符合率为97.71%(128/131);FLC2与肉汤稀释法符合率为96.95%(127/131);AMB、ITC、KTC分别与肉汤稀释法符合率为98.47%(129/131)、98.47%(129/131)、97.71%(128/131)。经Kappa检验,K值分别为:0.8952、0.8681、0.8118、0.8509、0.7190;FLC1、FLC2、AMB、ITC 2种方法一致性优,KTC 2种方法一致性良好。结论葡萄糖美蓝M-H琼脂可代替Shadomy琼脂,适用于常规纸片扩散法真菌药敏试验。     

不同方法检测黏液型铜绿假单胞菌药物敏感性结果准确性探讨

目的探讨黏液型铜绿假单胞菌(PA)药物敏感性检测方法准确性,以找出适合临床开展的、准确的药物敏感性检测方法。方法分别用药物敏感性纸片琼脂扩散法(K-B法)、假单胞菌和非发酵菌药物敏感性试剂盒(ATB PSE5)、仪器法(MicroScan WalkAway 96 plus和VITEK 2)和微量肉汤稀释法同时检测66株黏液型PA,以微量肉汤稀释法作为参考方法,其余方法作为测试方法进行对照分析。结果 K-B法与微量肉汤稀释法的完全符合率(CA)为92.63%,严重错误(VME)为0.30%,重大错误(ME)为3.13%,一般错误(MIE)为3.94%;ATB PSE5与与微量肉汤稀释法的CA为88.89%,VME为0.83%,ME为5.83%,MIE为4.44%;MicroScan仪器法与微量肉汤稀释法的CA为89.38%,VME为0.34%,ME为5.19%,MIE为5.07%。VITEK 2因结果缺失严重未进行比较。结论临床常用检测PA药物敏感性的方法中,以K-B法检测黏液型PA最为可靠,但应延长孵育时间至48 h或放至CO2孵箱24 h后读取结果更为直观、准确。     

用纸片扩散法和微量稀释法进行药物敏感性测定的比较

目的：探讨纸片扩散法和微量稀释法用于临床常见葡萄球菌和肠杆菌的药物敏感性测定的相关性和一致性,为抗菌药物的选用提供参考依据。方法收集2011年3月至2012年2月临床分离的97株葡萄球菌和86株肠杆菌,用纸片扩散法与微量稀释法对以上临床分离的菌株进行药物敏感性测定,分析两种方法的差异。结果纸片扩散法和微量稀释法对葡萄球菌和肠杆菌药物敏感性测定结果比较,差异均无统计学意义（P＜0．05）;但个别药物敏感性测定结果不在可接受范围内。结论纸片扩散法和微量稀释法用于微生物药物敏感性测定的一致性较好,应注意个别药物敏感性测定结果不在可接受范围内。     

中国5所医院念珠菌属对氟康唑和伏立康唑的耐药性监测

目的了解临床分离念珠菌属和其他酵母对氟康唑和伏立康唑的耐药性及耐药性变迁。方法按CLSI/NCCLS M44-A推荐的纸片扩散法对2001年至2005年8 000株念珠菌属和其他酵母临床分离株进行氟康唑和伏立康唑的药敏试验;并通过BIOMIC软件换算出相应的MIC(mg/L)。结果白念珠菌及非白念珠菌如光滑念珠菌等在临床分离真菌中的分布自2001—2005年未见有明显的上升趋势。2001—2005年白念珠菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率变化不大,但光滑念珠菌等非白念珠菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率有不同程度的上升。结论伏立康唑较氟康唑具有更广的抗菌谱和更强的抗菌活性;光滑念珠菌等非白念珠菌的耐药率正在逐年上升;提示对念珠菌属开展耐药性监测的重要性。     

评价纸片扩散法检测念珠菌对氟康唑的敏感性及临床应用

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)于1997年公布了酵母菌肉汤稀释法抗真菌药物敏感性试验参考方法(NC-CLS M27-A),并于2002年进行了修订(NCCLS M27-A2)[1],但该类方法操作繁琐,难以在常规工作中开展.2003年NC-CLS公布了酵母菌纸片扩散法抗真菌药物敏感性试验方案(NCCLS M44-P)[2].我们应用此方案检测了临床标本中分离的136株念珠菌对氟康唑的敏感性,并与微量肉汤稀释法测定结果进行了比较,以评价其结果和临床应用可靠性,报告如下.     

鲍曼不动杆菌替加环素不同药敏检测方法敏感性对比分析

目的比较采用不同药敏检测方法检测替加环素对鲍曼不动杆菌敏感性的差异。方法 2013年临床分离碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌60株,采用微量肉汤稀释法、MTS测试条法、Vitek2仪器检测法、纸片扩散法分别检测替加环素对鲍曼不动杆菌的敏感性。结果微量肉汤稀释法替加环素敏感性为100.00%,未检测到中介和耐药菌株;MTS测试条法敏感性为81.67%,中介率为18.33%,未检测到耐药菌株;Vitek2仪器法敏感性为50.00%,中介率为43.33%,耐药率为6.67%;纸片扩散法敏感性为45.00%,中介率为45.00%,耐药率为10.00%。结论替加环素对碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌具有较好的抗菌活性,但检测方法的局限性对结果的报告影响较大,以微量肉汤法为标准,MTS测试条法的符合率最高,Vitek2仪器法和纸片扩散法的敏感性显著降低。     

Rosco纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑药敏试验的评价

目的　Rosco纸片扩散法在酵母样真菌药敏试验中的临床应用评价。方法　应用Rosco纸片扩散法和美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)M 2 7 A大量肉汤稀释法测定临床分离的 76株不同酵母样真菌菌株对氟康唑的药敏状况 ,并以 3株标准菌株作质量控制。结果　两种方法完全符合率是 90 8%未出现一种方法测得的敏感或耐药菌株 ,在用另一种方法检测中为耐药或敏感的严重错误。结论　Rosco纸片扩散法可以代替NCCLSM 2 7 A大量肉汤稀释法在临床推广使用。