蝙蝠葛碱对阿尔茨海默病转基因细胞模型氧化应激损伤保护作用的研究

目的探讨蝙蝠葛碱对阿尔茨海默病(AD)转基因细胞模型氧化应激损伤的保护作用。方法将质粒APPswe转染入SH-SY5Y细胞中,构建过表达APP的AD细胞模型,检测不同蝙蝠葛碱浓度下细胞存活率、丙二醛(MDA)含量及COX-2蛋白表达的差异。结果随着给药浓度的增加,细胞存活率逐步增加,MDA含量逐步降低,其中空白对照组、20或10倍稀释蝙蝠葛碱预处理组与模型组差异有统计学意义(P0.05或P0.01),10倍稀释蝙蝠葛碱预处理组与100、50倍稀释蝙蝠葛碱预处理组差异有统计学意义(P0.05或P0.01);COX-2蛋白表达量随着给药浓度增加而逐渐下降。结论蝙蝠葛碱对AD转基因细胞模型的氧化应激损伤具有一定的抑制作用,且呈现出剂量效应。     

蝙蝠葛酚性碱对家兔心脑缺血-再灌注损伤保护作用的研究

目的　探讨蝙蝠葛酚性碱 (PAMd)抗心、脑同时缺血再灌注损伤的机制。方法　采用结扎家兔左冠状动脉前降支及双侧颈总动脉 30 m in后再灌注造成心、脑缺血再灌注模型 ,观察 PAMd对缺血前后及再灌注后不同时间血清、左心室、海马、皮质及小脑中丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。结果　家兔心、脑缺血再灌注 10 min后血清 MDA含量显著升高 ,SOD活性显著降低 (P均 <0 .0 5 )。PAMd3.5 mg/ kg显著降低心、脑缺血再灌注后血清及组织 MDA含量 ,升高 SOD活性 (P均 <0 .0 5 )。结论PAMd通过减轻脂质过氧化所造成的损伤 ,提高 SOD活性 ,对心、脑缺血再灌注损伤具有一定保护作用。     

蝙蝠葛碱对人食管癌细胞Eca-109的增殖和凋亡影响的实验研究

目的研究蝙蝠葛碱对人食管癌细胞Eca-109的增殖和凋亡的影响。方法 12 h、24 h、48 h采用MMT实验检测0μM、20μM、40μM、80μM的蝙蝠葛碱作用于人食管癌细胞Eca-109增殖的抑制率,并经流式细胞仪对人食管癌细胞Eca-109凋亡周期、早期凋亡率进行检测,同时应用Western blot法对细胞凋亡基因Caspase-3、Bax、Bcl-2表达进行检测。结果与0μM蝙蝠葛碱比较,20～80μM蝙蝠葛碱均能对Eca-109细胞的增殖进行抑制,并细胞生长抑制率随着蝙蝠葛碱浓度增加、作用时间延长而增高,差异有统计学意义(P 0. 05);相较于0μM蝙蝠葛碱,20μM、40μM、80μM蝙蝠葛碱的G1期细胞均增加,并G1期细胞随着蝙蝠葛碱浓度的逐渐增加而不断增多,差异有统计学意义(P 0. 05); G2M期细胞随着蝙蝠葛碱的浓度增加而呈增多趋势; 20～80μM蝙蝠葛碱对人食管癌Eca-109细胞凋亡均具有促进作用,且细胞凋亡率随着蝙蝠葛碱应用浓度增加而不断升高,差异有统计学意义(P 0. 05); 20～80μM蝙蝠葛碱作用24 h后Caspase-3蛋白活性、Bax蛋白的表达均增强,而Bcl-2蛋白的表达减少,差异有统计学意义(P0. 05)。结论 20～80μM蝙蝠葛碱能对人食管癌细胞Eca-109增殖进行抑制,促进Eca-109细胞凋亡,并呈剂量、时间依赖性,分析原因可能与上调Caspase-3、Bax蛋白表达、下调Bcl-2表达有关。     

脑源性神经营养因子对缺氧胚脑皮质神经元发挥保护作用的细胞内信号传导机制

目的:通过胚脑皮质神经元的体外培养,探讨遭受缺氧刺激时,脑源性神经营养因子(Brain derivedneurotrophic factor,BDNF)对神经元发挥保护作用时所启动的细胞内信号传导通路。方法:对胚鼠皮质神经元进行体外培养,提取不同缺氧时间点单纯缺氧的对照组及BDNF干预组的细胞蛋白,采用免疫印记(western blotting)方法检测两组神经元在细胞外信号调节激酶(extracellular signal-related kinase,ERK1/2)/磷酸化ERK1/2、蛋白激酶Akt/磷酸化Akt、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 Mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)/磷酸化P38MAPK表达上的差别。结果:与单纯缺氧组比较,加入BDNF可引起磷酸化ERK1/2和磷酸化AKT表达的增强,而磷酸化的P38MAPK在两组均没有表达。结论:BDNF引起磷酸化ERK1/2及磷酸化AKT表达的上调可能为BDNF发挥对缺氧神经元保护作用的机理之一。     

大鼠缺血再灌注后早期运动干预通过诱导内皮型一氧化氮合酶活化发挥神经保护作用的机制研究

摘要 目的：探讨早期跑步运动是否通过激活内皮型一氧化氮合酶（activating endothelial nitric oxide synthase, eNOS）在大鼠缺血/再灌注（ischemia /reperfusion, I/R）损伤中发挥保护作用。 方法：50只雄性SD大鼠随机分为5组：Sham组（n=10）、I/R组（n=10）、运动+I/R组（n=10）、eNOS抑制剂（L-NIO）+I/R组（n=10）和运动+L-NIO+I/R组（n=10）。I/R大鼠行大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）60mins,再灌2天后,运动+I/R组和运动+L-NIO+I/R组大鼠在跑步机上连续跑5天,每次30mins。再灌7天后,评估各组大鼠神经功能、脑梗死体积,以及梗死周围区和脑血管P-eNOS和P-AMPK蛋白表达。 结果：运动+I/R组神经行为学评分及脑梗死体积明显低于I/R组、L-NIO+I/R组和运动+L-NIO+I/R组（所有P<0.05）。与I/R组、L-NIO+I/R组和运动+L-NIO+I/R组相比,运动+I/R组梗死周围区和脑血管P-eNOS和P-AMPK蛋白水平较高（所有P<0.05）。 结论：早期跑步运动可能通过激活eNOS减轻I/R大鼠神经血管损伤,改善功能预后。     

利福平通过抑制蛋白激酶R活化调节鱼藤酮诱导的小胶质细胞炎症而发挥神经保护作用

目的:探讨利福平通过抑制蛋白激酶R(protein kinase R,PKR)活化对小胶质细胞炎症及其介导神经元凋亡的影响.方法:用鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞构建PD炎症细胞模型,经利福平或者PKR抑制剂(C16)预先孵育2小时,Western blot检测p?PKR、PKR、NLRP3、Caspase?1、IL?1β...