TIF1⁃γ重组蛋白的表达及其在抗TIF1⁃γ抗体ELISA检测方法中的初步应用

目的 通过基因工程技术制备转录中介因子1?γ(TIF1?γ)重组蛋白并探讨其用于研制抗TIF1?γ抗体检测试剂的应用价值.方法 采用昆虫杆状病毒表达系统表达目的蛋白,并将重组目的蛋白作为包被抗原初步建立抗TIF1?γIgG抗体ELISA检测方法.结果 成功表达并纯化TIF1?γ重组蛋白.自建抗TIF1?γIgG抗体?E...     

抗角质层抗体的ELISA检测

用盐析法提取大鼠食管上皮组织的角质层抗原成分 ,建立抗角质层抗体 (AKA)的酶联免疫吸附方法 (ELISA) ,探讨AKA在类风湿性关节炎 (RA)、系统性红斑狼疮 (SLE)、干燥综合征 (SS)等风湿病特别是RA诊断中的意义。结果 ,RA、SLE患者中的AKA水平显著高于正常对照组 (P <0 0 1) 。RA的阳性率为 44 7% (31/ 71) ,SLE阳性率为 2 6 8% (11/41) ,RF阴性的RA患者的AKA检出率为 40 9%。     

ELISA法检测抗脑磷脂抗体及其临床意义

本文应用脑磷脂(Sigma公司)为抗原,用ELISA法检查血浆中的抗脑磷脂抗体。通过优选试验条件确定适当抗原包被浓度为10.0μg/ml,血清稀释度1:20,酶标板应用1%硫酸鱼精蛋白预处理,包被后只洗一次。用此法检查65例正常人,阳性率为3.1%,脑萎缩患者的血清阳性率为66.6%,缺血性脑血管病27.4%,脑出血20.0%,一过性脑缺血发作10.0%。表明此种抗体阳性与脑血栓形成有明显联系,阳性患者中78.6%有血流变学检查的异常。     

ELISA法检测血清抗心磷脂抗体

目的分析ELISA检测血清抗心磷脂抗体(ACA)的方法学影响因素,并对实验条件进行优化。方法用间接ELISA检测559份血清ACA水平,并以欧蒙公司标准品标定临界值,用以判定结果。结果对检测方法进行了优化,本试验特异性为96.4%(503/522),敏感性为89.2%(33/37),临床诊断符合率为96.2%(538/559)。结论优化后的ELISA法检测ACA具有敏感、特异、简便快速、重复性佳的特点,可用于血清ACA水平的常规检测。     

抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者临床特征及生存分析

目的 分析抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者的临床特征,探讨抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者经规范治疗后死亡的影响因素。方法 抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者37例,均给予标准方案(糖皮质激素+环磷酰胺)治疗,随访记录生存情况,分为生存组和死亡组。记录2组入院时血小板计数、中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、α-羟基丁酸脱氢酶、C-反应蛋白、铁蛋白、红细胞沉降率及抗MDA5抗体■比率;比较2组非特异性间质性肺炎、普通型间质性肺炎比率;多因素Cox回归分析抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者经规范治疗后死亡的影响因素。结果 随访至2021年12月,中位随访时间14.4个月,37例中26例生存,11例死亡。生存组NLR (3.643±1.869)、LDH[(306.692±115.693)u/L...     

两种方法检测RA患者血清抗CCP抗体的结果比对分析

目的 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)法和胶乳免疫比浊法检测血清抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体对RA患者的诊断价值和临床适用性。方法收集西安市风湿病研究所2014年12月～2015年2月期间住院患者的新鲜血清267份,另选陕西省血液中心健康献血员新鲜血清50例,分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和胶乳免疫比浊法检测抗CCP抗体,评价两种方法结果的相关性及其对RA诊断的临床适用性。结果 ELISA和胶乳免疫比浊法的敏感度、特异度和诊断一致性分别为77.3%,86.8%,94.3%和76.2%,80.2%,77.9%; 两种方法比较Kappa值为0.756,二者具有一致性; 对两组数据进行χ²检验,χ²=1.85,P＞0.05,方法间比较差异无统计学显著性意义; ELISA和胶乳免疫比浊法ROC曲线下面积分别是0.876和0.832。结论 血清抗CCP抗体检测对RA患者具有一定的诊断价值,ELISA法和胶乳免疫比浊法检测抗CCP抗体具有一致性。两种方法学之间无统计学差异,胶乳免疫比浊法更适合于基层医疗机构的应用。     

抗MDA5抗体阳性皮肌炎合并间质性肺病的研究进展

抗黑色素瘤分化相关基因5(melanoma differentiation-associated gene 5,MDA5)抗体是临床无肌病皮肌炎(clinically amyopathic dermatomyositis, CADM)和皮肌炎(dermatomyositis, DM)患者中一种特异性较高的抗体。相关研究表明抗MDA5抗体阳性DM患者更易发展为快速进展性肺间质病变(rapidly progressive interstitial lung disease, RPILD),尤其是在亚裔人群中,这类患者病情较重,死亡率极高。目前对这种疾病的发病机制仍不明确,治疗在很大程度上仍然是经验性的。我们将在这篇综述中总结MDA5+DM-ILD近年的研究进展,期望能对临床医生有所帮助。     

抗瓜氨酸化蛋白抗体特异性免疫复合物ELISA法的建立与临床初步应用

目的建立检测血清抗瓜氨酸化蛋白抗体特异性免疫复合物(ACPA-IC)的ELISA技术,探讨ACPA-IC对类风湿关节炎(RA)的临床意义。方法建立检测血清ACPA-IC的ELISA技术,并对方法的特异性、稳定性和重复性进行评估。采用PEG6000沉淀法自RA患者血清中提取IC。用建立的ACPA-IC ELISA法对92例RA患者包括46例ACPA阳性(ACPA+)患者和46例ACPA阴性(ACPA-)患者、46例SLE患者及47例健康献血员血清ACPA-IC水平进行检测。并分析RA患者血清ACPA-IC水平与ACPA和类风湿因子(RF)的相关性。结果经方法学评估,建立的ACPA-IC ELISA法在特异性、稳定性和可重复性方面均达到检测要求。ACPA+患者ACPA-IC水平高于ACPA-患者、SLE患者及健康对照组(P0.01)。当cut off值设为0.9时,该法测得RA患者血清ACPA-IC的阳性率为45.65%(42/92),显著高于SLE(6/46,13.04%)及健康对照组(2/47,4.26%),χ2分别为14.376和24.632,P均0.01。46例ACPA+RA患者ACPA-IC阳性者36例(78.26%),而ACPARA患者ACPA-IC阳性者仅6例(13.04%),差异有统计学意义(χ2=39.429,P0.01)。ACPA-IC与ACPA和RF的Spearman相关分析结果表明,RA患者血清ACPA-IC水平分别与血清ACPA(r=0.708,P=0.000)、RF(r=0.571,P=0.000)呈正相关。结论成功建立检测血清ACPA-IC水平的ELISA技术。RA患者尤其是ACPA+患者血清ACPA-IC水平显著升高。ACPA-IC在RA患者血清中出现可能具有重要的致病意义。     

两种方法测定抗核抗体的比对研究

目的观察酶联免疫吸附测定（ELISA）法和免疫斑点法测定抗核抗体（ANA）结果的差异性.方法 选取美国GenBio公司生产的自身抗体检测试剂盒（免疫斑点法）和美国宙斯公司生产的ANA试剂盒（ELISA法）,同时检测356例样本中的ANA,结果采用McNemar检验,比较这两种方法的差异性.以间接免疫荧光法为标准,比较这两种方法的灵敏度、特异度.结果 （1）成组χ2检验：免疫斑点法和ELISA法检测结果有相关性（P=0.000）.（2）McNemar检验：两种方法检测结果的差异有统计学意义（P=0.001）.（3）Kappa检验：两种方法检测结果的一致性有统计学意义,但一致性一般（Kappa=0.686,P=0.000）.（4）免疫斑点法的灵敏度为61.5%,特异度为99.0%;ELISA法的灵敏度为78.5%,特异度为96.6%.结论 两种方法检测ANA,其中一种为阳性时,另一种方法也多为阳性,但两种方法检测的一致性程度一般.ELISA法的灵敏度要高于免疫斑点法,免疫斑点法的阳性预测值要高于ELISA法.     

抗MDA5抗体对成年及幼年型皮肌炎合并间质性肺病诊断效能的meta分析

目的通过meta分析探究抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体对不同类型皮肌炎(DM)并发快速进展型间质性肺病(RPILD)及慢性间质性肺病(ILD)的诊断效能。方法检索Pub Med、Embase、Cochrane library、中国知网、万方、维普和中国生物医学文献数据库,时间起止为建库至2017年5月。运用Meta-disc1.4行异质性检验,计算汇总敏感度、特异度、诊断比值比、阳性阴性似然比和SROC曲线。采用QUADAS-2和stata 12.0进行质量评价和发表偏倚。结果共纳入32篇研究,文献质量较高,各部分不存在高偏倚风险,为中等异质性。抗MDA5抗体对成年DM合并RPILD的诊断效能(AUC=0.927,Q*=0.862)优于对成年DM合并慢性ILD(AUC=0.717,Q*=0.667)、幼年型皮肌炎(JDM)合并RPILD(AUC=0.836,Q*=0.768)的诊断效能。抗MDA5抗体对DM合并RPILD诊断准确性:临床无肌病型皮肌炎(CADM)(AUC=0.942,Q*=0.880)高于DM(AUC=0.926,Q*=0.860),亚洲(AUC=0.960,Q*=0.891)优于中国(AUC=0.925,Q*=0.859)及欧美人群(AUC=0.928,Q*=0.863),ELISA法(AUC=0.929,Q*=0.864)不劣于免疫沉淀法(AUC=0.927,Q*=0.859)。Deek's漏斗图提示不存在发表偏倚。结论抗MDA5抗体诊断成年及幼年型DM合并ILD有较高敏感性和特异性。     

数种检测抗核抗体、抗盐水可提取核抗原抗体方法的对比分析

目的：评价检测抗核抗体和抗盐水可提取核抗原（ENA）抗体的酶联免疫吸附试验（ELISA）的性能。方法：将相关纯化抗原包被的ELISA试剂和间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）试验、免疫印迹法（IBT）和对流免疫电泳地（CIE）等用于20份系统性红斑狼疮（SLE）、10份干燥综合征（SS）患者以及30份健康对照血清中自身抗体的检测。结果：ELISA和IFANA抗核抗体筛选试验对结缔组织病诊断的敏感性和特异性差异无显著性（P＞0．05），但5例IFANA阴性ELISA阳性的患者血清经鉴定为抗SS－A和／或dsDNA抗体阳性；1例ELISA阳性则IFANA阴性的正常人血清经证实为ELISA试验假阳性，ELISA、CIE、IBT3种方法检测抗Sm抗体对诊断SLE的特异性均达到100％，敏感性差异无显著性（P值均＞0．05）。ELISA与IBT相比，在抗SS－A抗检检测上更为敏感（P＜0．01）。ELEISA与CIE法相比对抗SS－B抗体的检测也更敏感（P＜0．05）。结论：本研究中所用的ELISA抗核抗体检测试剂敏感性，特异性较好。     

间接免疫荧光法与酶联免疫吸附试验检测抗核抗体对比分析

目的:应用间接免疫荧光法(indirect immunofluoreseent assay,IF)与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 检测临床疑似自身免疫疾病患者血清抗核抗体并进行相关性及对比分析.方法:IF法按说明书操作,在荧光显微镜下观察到特异的荧光核型为阳性;ELISA法按说明书操作,浓度≥18 U/mL为阳性,12 ～ 18U/mL为可疑,≤12 U/mL为阴性.结果:检测临床疑似自身免疫患者血清138份,IF法阳性50份,阴性88份,阳性率36.23%,ELISA法阳性78份,阴性60份,阳性率56.52%.经卡方检验 P ＜ 0.01.其中IF法样本血清稀释倍数与ELISA法检测浓度的Spearman相关系数为0.499.结论:两种方法检测抗核抗体差异有显著性,ELISA法敏感度明显高于IF法.同时,IF法样本血清抗核抗体血清稀释倍数与ELISA法的浓度呈一定相关性.     

ELISA与LIA检测血清抗核抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的:探讨酶联免疫吸附法(enzyme linked immunoSorbent assay,ELISA)联合线性免疫印迹法(linea immunoassay,LIA)检测血清抗核抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值.方法:选取2018年1月～2019年10月我院接诊的80例系统性红斑狼疮患者为研究对象,所有患者均接受EL...     

ELISA、GICA与MEIA法检测新生儿TORCH-IgM抗体的比较

目的比较ELISA、GICA与MEIA法对新生儿TORCH-IgM抗体的检测效果。方法选择120例疑似TORCH感染的新生儿作为研究对象,分别采用ELISA、GICA与MEIA三种方法检测血清TORCH-IgM抗体,比较三种方法对新生儿TORCH-IgM抗体检测的阳性率、符合率、灵敏度以及特异性。结果以MEIA法为金标准,ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体的灵敏度和特异性比较,ELISA法检测中的RV-IgM、HSV-IgM以及CMV-IgM检测的灵敏度均高于GICA法(P<0.01),两组的TOX-IgM检测比较无显著性差异(P>0.05);ELISA法检测中的CMV-IgM检测的特异性高于GICA法(P<0.01);ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体阳性预测值和阴性预测值比较,ELISA法中CMV-IgM检测的阳性预测值和阴性预测值均高于GICA法(P<0.05),尤其是阴性预测值(P<0.01);与MEIA法检测总符合率均在90%以上。结论 ELISA法检测新生儿TORCH-IgM抗体,具有特异性强、敏感性高、可信度高、简单易行等优点,是一种比较可靠的新生儿TORCH感染筛查的检测方法。     

ELISA 与胶体金免疫层析法检测血清抗 CCP 抗体在 RA 诊断中的比较

目的：比较胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附试验（ELISA ）检测血清抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体结果差异性。方法采用胶体金免疫层析法和 ELISA 法同步检测110例 RA 患者和110例健康体检者的抗 CCP 抗体。结果2种方法经配对χ2检验,差异有统计学意义（χ2＝174．354,P＜0．01）;K ap pa值评价（K ＝0．890,P ＜0．01）显示2种检测方法具有高度一致性。 ELISA 法灵敏度和特异度分别为83．64％和92．73％,均优于胶体金免疫层析法。结论2种方法检测血清抗 CCP 抗体存在差异,ELISA 法的灵敏度和特异度均较高,优于胶体金免疫层析法。     

斑点金免疫渗滤试验检测不育者血清抗精子抗体

目的：研究一种快速鉴定抗精子抗体的新方法的临床意义。方法：用化学试剂提纯精子抗原,将其结合于硝酸纤维素膜上;以胶体金颗粒结合的羊抗人lgG作为标记抗体,以斑点金免疫汉滤试验（Dot-immunogold filtration assay,DIGFA)检测人血清抗精子抗体。结果：抗原抗体通过渗滤在膜上进行反应,10min内即可用肉眼观察结果,在289例临床血清标本的检测中,阳性率为21％,与酶联免疫吸附试验（ELISA）的结果基本相符。结论：斑点金免疫渗滤试验可快速测定抗精子抗体,具有推广使用的价值。     

间接免疫荧光法与酶联免疫吸附试验对比检测抗核抗体

50年来,人们对抗核抗体(ANA)的认识不断加深.ANA的现代定义是指细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称,ANA特异性靶抗原逐一被发现并得到纯化.从1957年Holbborow等首先以啮齿动物组织冰冻切片为抗原底物,应用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA以来,许多研究者对ANA检测方法进行了大量研究.目前除了IIF以外,还有酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹法、快速胶乳颗粒试剂法等.用IIF检测ANA敏感性高、特异性强,以往临床常规检测ANA一般用免疫荧光法作为筛选试验,但采用的底物不同则结果有差异.常用的两种底物有人喉癌上皮细胞(Hep-2)与鼠肝细胞,目前国内外大多以Hep-2为底物的IIF检测ANA[1].该方法被称为“金标准“,但该方法操作较复杂,读片人要有一定经验.因此,有些单位采用以提取抗原和基因重组抗原为底物的ELISA检测ANA.但是,根据2003年我国48家医院自身抗体检测的质控总结,ANA正确率仅为47%[2],专家提出,自身抗体检测的质控势在必行[3].为比较IIF与ELISA检测ANA的异同,作者对本院80例血清标本同时进行这两种方法检测,报告如下.……     

双抗体夹心ELISA检测血小板相关抗体的临床应用

用双抗体夹心酶免疫法对４０例原发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者治疗前联合测定了ＰＡＩｇＧ、ＰＡＩｇＭ、ＰＡＩｇＡ，并与正常组（３０例）测定值比较，结果表明：三次免疫指标均高于正常测定值，其敏感性达９３％，联合检测可提高ＩＴＰ的阳性率至８９％～１００％，该法特异性强，阳性检出率高，重复性好，快速简便，不需要特殊仪器设备，适于基层单位推广应用。     

3种检测抗双链DNA抗体方法的结果比对分析

摘要：目的：评价ELISA、绿蝇短膜虫间接荧光法（CLIFT)和免疫印迹法（IBT)检测抗双链DNA（dsDNA）抗体的结果差异。 方法：用三种方法分别检测85例SLE患者、60例非SLE的自身免疫病患者和200例体检健康者血清抗dsDNA抗体,以临床诊断为金标准,评价各法对SLE的诊断性能。 结果：ELISA、CLIFT和IBT 3种方法诊断SLE的敏感性分别为76.47%、68.24%、61.18%,特异性分别为94.62%、98.85%、97.69%;Youden指数分别为0.710 9、0.670 9和0.588 7,差异无统计学意义（u=0.53、1.70和1.03,P>0.05）。3种方法kappa值为0.65~0.71。 结论：3种方法结果一致性较好,CLIFT法有较高的特异性而ELISA法有较高的敏感性。单独使用一种方法易漏检,可两法或三法联合应用。