单细胞转录组测序在生殖发育领域应用进展

细胞是生物体结构和功能的基本单位，细胞命运的决策是单细胞层面的过程。基因组和表观遗传的重编程，以及在细胞分裂和分化过程中出现的误差造成来自同一细胞系或个体的细胞呈现出不同的基因组、转录组和表观基因组，即细胞异质性。单细胞测序允许对单个细胞进行高通量分子检测，不仅在解决生物异质性方面有着强大的功能，同时在低数量的生物材料问题上有许多优势。单细胞转录组测序（scRNA-seq）在观察哺乳动物配子发育以及早期胚胎发育方面均有重要作用，对生殖领域的发展意义重大。现对scRNA-seq在方法学和技术应用的研究进展进行阐述。     

单细胞转录组测序在毒理学机制研究中的应用

传统转录组测序（bulk RNA-seq）可以获得基因在群体细胞中的平均表达水平,但忽略了细胞反应存在差异性,很难发现敏感效应细胞,导致毒性通路识别不准确。单细胞转录组测序（scRNA-seq）解离组织单细胞并对其测序,通过细胞分群进行细胞亚群特异性转录组分析。该技术可获取化合物暴露后组织微环境中的细胞异质性反应特征,...     

微小RNA在生殖发育领域中的研究进展

微小RNA（micro RNA, miRNA）是一类新发现的非编码的调控RNA,其主要在转录水平或转录后水平上发挥调控效应,控制着生长发育、分化、代谢和疾病等许多生物过程。miRNA调控精子与卵子的减数分裂,影响配子的生长发育。参与植入前小鼠胚胎早期发育时序的调节,干预植入过程中相关基因的表达。而且涉及到干细胞的自我更新与多潜能性的维持,控制多能胚胎干细胞谱系的决定。生殖细胞miRNA的异常表达与生育能力障碍存在一定相关性。就miRNA相关机制和功能,主要检测方法及其在生殖发育领域中研究进展综述。     

微小RNA在生殖发育领域中的研究进展

微小RNA（micro RNA,miRNA）是一类新发现的非编码的调控RNA,其主要在转录水平或转录后水平上发挥调控效应,控制着生长发育、分化、代谢和疾病等许多生物过程。miRNA调控精子与卵子的减数分裂,影响配子的生长发育。参与植入前小鼠胚胎早期发育时序的调节,干预植入过程中相关基因的表达。而且涉及到干细胞的自我更新与多潜能性的维持,控制多能胚胎干细胞潜系的决定。生殖细胞miRNA的异常表达与生育能力障碍存在一定相关性。就miRNA相关机制和功能,主要检测方法及其在生殖发育领域中研究进展综述。     

单细胞测序技术原理及其应用研究进展

传统的测序技术得到的是数以万计细胞平均后的变异水平,而单细胞测序技术从单细胞层面上对细胞基因组或转录组进行分析,使生物研究达到了前所未有的分辨率和规模,为生命科学研究提供了新的视角与方法.本文简要总结了单细胞分离技术,回顾了各种单细胞技术及其在当前各领域中的应用,展望了单细胞测序技术未来发展的潜在机会.     

MSOME及IMSI技术在辅助生殖领域中的应用进展

精子形态与功能密切相关,精子形态异常是导致男性不育的重要原因之一。自1992年卵母细胞胞浆内单精子注射（ICSI）技术首次获得妊娠以来,许多男性因素不育夫妇通过该技术获得较为满意的妊娠结局。但在×400放大倍数下常规ICSI挑选的看似正常的精子仍可能存在超微结构的异常,这可能是导致ICSI周期失败的原因之一。活精子细胞器形态学检测（MSOME）技术是Bartoov在2001年创立的一项新技术,能在高放大倍数下更深入地观察精子细微结构,有助于挑选出形态正常的精子。精子形态选择性胞浆内单精子注射（IMSI）技术是在MSOME基础上结合传统ICSI技术发展而来,为卵母细胞ICSI提供了一个新方法。通过对MSOME和IMSI的文献进行综述,探讨其临床应用价值。     

高通量转录组测序技术在评价子宫内膜容受性中的应用价值

良好的子宫内膜容受性是胚胎植入的关键因素,容受期子宫内膜组织的基因表达与容受性密切相关。通过高通量转录组测序技术可以获得月经不同时期子宫内膜基因表达图谱以及调控基因表达的微小RNA（miRNA）和长链非编码RNA（lncRNA）序列,结合生物信息学分析,可以更好地了解容受期子宫内膜特异基因表达,并为其调控机制的研究提供技术支持,对于不孕症患者以及反复植入失败患者的诊治具有非常重要的临床应用价值。对高通量转录组测序在子宫内膜容受性及胚胎植入方面的相关研究进行了综述。     

单细胞凝胶电泳在放射医学中的应用进展

单细胞凝胶电泳技术(Single Cell Gel Electrophoresis Assay,SCGE),又称彗星试验(Comet Assay)或微凝胶电泳(Microgel Electrophoresis,MGE),它是在核酸沉淀法(Nucleoid Sedimentation)和晕圈分析(Holo Assay)及弱碱性条件下的单细胞凝胶电泳等检测技术基础上逐步发展起来的一种在单细胞水平检测哺乳类有核细胞DNA断裂的新技术.它主要包括Olive等(1984)建立的测定DNA双链断裂(dsb)的中性微凝胶电泳技术和Singh等(1988)建立的测定DNA单链断裂(ssb)的碱性微胶电泳技术.     

单细胞测序技术在儿童肝母细胞瘤中的应用前景

肝母细胞瘤（hepatoblastoma,HB）是儿童期最多见的肝脏恶性肿瘤之一。一般发现较晚,体积较大,切除肿瘤比较困难。目前治疗以新辅助化疗联合手术切除为主。高危患儿预后较差,尚缺乏有效的治疗靶点及免疫治疗方案。单细胞转录组测序（ScRNA-seq）技术使传统的基因靶点研究进入了单细胞层面,目前在各种实体肿瘤的研究中应用广泛,可以了解肿瘤微环境和肿瘤异质性。这项技术在HB研究中有着极大的前景,目前相关研究较少,文献支持不足。本文介绍ScRNA-seq及其在实体恶性肿瘤中的应用,ScRNA-seq应用于HB研究是可行的,有助于进一步了解HB的发生机制,为HB的治疗提供更多的靶向治疗方案。     

单细胞测序和数字空间多组学技术的研究进展

肿瘤内异质性（ITH）和肿瘤免疫微环境的异质性是肿瘤进展和耐药性的关键因素。单细胞测序技术（scRNA-seq）是在混杂样品中检测特定细胞的遗传信息,为发现肿瘤细胞内变异以及肿瘤的发展提供线索。数字空间多组学技术（DSP）将蛋白组和转录组与肿瘤微环境（TME）的空间信息结合,能够在scRNA-seq基础上保留细胞的空间信息,进而解析TME。现就scRNA-seq和DSP在常见恶性肿瘤中应用的研究进展进行综述。     

AMH在女性非辅助生殖领域的最新临床应用进展

抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）作为转化生长因子β超家族的成员之一,在女性体内随着年龄的变化而增减,并在两性分化中发挥重要作用。目前,AMH已成熟运用于辅助生殖领域,但在非辅助生殖领域的运用较少。本文就AMH在非辅助生殖领域的最新临床应用进展做简单综述,包括辅助诊断多囊卵巢综合征、预...     

全外显子组测序技术在产前胎儿超声异常中的应用进展

胎儿先天性结构异常作为出生缺陷的重要组成部分,是引起新生儿残疾甚至死亡的重要原因之一。产前诊断是预防出生缺陷的重要举措。通过染色体核型分析、拷贝数变异检测技术等产前诊断技术,部分超声异常胎儿能得到明确诊断,但仍有60%以上病因尚未明确。全外显子组测序技术能在上述检测未见异常时,进一步识别出部分致病基因变异,目前已逐步应用于胎儿多系统异常、骨骼发育异常、中枢神经系统畸形、先天性心脏发育畸形及先天性泌尿系统发育异常等的遗传学病因检测。本文对WES在产前胎儿超声异常中的应用进展作一综述。     

单细胞凝胶电泳在环境监测中的应用及其进展

近 2 0年来 ,评价ＤＮＡ损伤的方法得到了巨大发展。早在1978年Ｒｙｂｅｒｇ和Ｊｏｈａｎｓｏｎ[1] 首次对ＤＮＡ损伤进行了直接定量。他们在微碱性条件下将单个细胞包埋在琼脂糖薄层中并将它们消解以得到解开的ＤＮＡ ,而后对中和后的细胞用口丫啶橙进行荧光染色 ,并用荧光光度计对荧光率进行测定。 1984年由Ｏｓｔｌｉｎｇ和Ｊｏｈａｎｓｏｎ[2 ] 在此基础上引入了微凝胶电泳技术 ,即通常文献中所提到的慧星试验 (ｃｏｍｅｔａｓｓａｙ) ,使在分离细胞中检测ＤＮＡ损伤的敏感度提高。目前所用的慧星试验有两种方法。一种是由Ｓｉｎｇｈ等[…     

针刺在辅助生殖领域中的应用

<正>针刺是祖国传统医学的重要组成部分,针刺对女性生殖内分泌系统发挥着双向的调节作用[1]。2002年,Paulus等首先提出针刺可提高体外受精(IVF)临床妊娠率的观点[2],虽然其研究结果备受争议,但针刺却因此受到全球生殖界同行的普遍关注。至今,针刺与辅助生殖领域的相关研究和认识仍处于起步阶段,对其机理和疗效的分析也比较肤浅,本文就相关文献作一简要综述。1针刺与取卵镇痛在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中需采用超声引导下经阴道取卵术,虽然耗时通常较短,但     

生殖领域一氧化氮研究的近期进展

NO是一种具有多种生物学潜能的简单化学分子。NO由NO合成酶催化精氨酸合成,N—氮—L—精氨酸可以抑制NO合成酶的活性。NO合成受细胞因子影响,除作为免疫反应中的效应分子外,它还可能参与睾丸微循环血管运动的调节,精子的获能过程,卵巢颗粒—黄体细胞和卵泡壁细胞类固醇激素的合成调节,以及绝经期妇女心血管病的发生。     

生殖领域一氧化氮研究的近期进展

ＮＯ是一种具有多种生物学潜能的简单化学分子。ＮＯ由ＮＯ合成酶催化精氨酸合成，Ｎ－氮－Ｌ－精氨酸可以抑制ＮＯ合成酶的活性。ＮＯ合成受细胞因子影响，除作为免疫反应器的效应分子外，它还可能参与睾丸微循环血管运动的调节，精子的获能过程。卵巢颗粒一黄体细胞和卵泡壁细胞类固醇激素的合成调节，以及绝经期妇女心血管病的发生。     

单细胞高通量测序技术在胚胎植入前遗传学诊断中的应用

目的探讨单细胞高通量测序技术在胚胎植入前遗传学诊断(PGD)中的应用效果。方法选取2012年3月—2017年3月在本院生殖中心进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)并在胚胎种植前需进行遗传学诊断(PGD)的夫妇95例为研究对象,抽取这些病例冻存的第三天卵裂期胚胎细胞50枚、第五天囊胚期囊胚15枚和活检后第三天胚胎形成囊胚8枚,经过单个卵裂球细胞与囊胚期滋养外胚层细胞的活检,以及单细胞全基扩增和高通量测序,分析囊胚扩增成功率及总的扩增成功率、染色体正常检出率及异常率以及胚胎临床资料分析。结果第三天卵裂期胚胎共50枚,扩增成功率为76.0%(38/50);第五天囊胚期囊胚15枚,扩增成功率为93.3%,活检后第三天卵裂期胚胎形成囊胚8枚,扩增成功率为100.0%(8/8)。总的扩增成功率为82.2%(60/73);第三天卵裂期胚胎的总异常率为63.2%、囊胚为45.5%,总体异常率为56.7%。基因扩增成功率因为高龄、性别以及反复植入因素分别为89.0%、49.3%、40.0%;染色体异常检出率因为高龄、性别以及反复植入因素分别为73.8%、30.6%、25.0%。结论单细胞高通量测序技术在胚胎植入前遗传学诊断中的应用效果和价值较高,可以弥补囊胚形成率低无可活检的胚胎用于PGD难题,更有利于高通量测序技术的临床推广和应用。     

单细胞测序技术及其在肿瘤研究和临床诊断中的应用

肿瘤组织的异质性是肿瘤的一个重要特征。肿瘤细胞均一性的缺乏使得肿瘤靶向治疗的难度加大。因此,鉴别肿瘤细胞的异质性是一个重要工作。单细胞测序技术(single-cell sequencing,SCS)是通过下一代测序手段观察单个细胞的基因组序列信息,从而获得细胞间遗传物质和蛋白质信息的差异,因此能够更好地理解单个细胞在其微环境中的功能。通过对单个肿瘤细胞全基因组、转录组以及细胞表观遗传基因进行测序,瘤内异质性的复杂机制可被揭示,从而改善肿瘤诊断、转归预测和治疗效果的监测。本文对单细胞测序技术的发展、检测原理和检测流程、存在的问题及其在肿瘤研究中的应用以及该技术在临床上的潜在价值进行了概述。     

单细胞凝胶电泳技术及其应用进展

单细胞凝胶电泳又称彗星试验 ,是一种在单细胞水平上检测DNA单、双链断裂和碱性不稳定位点的方法 ,具有敏感、稳定、快速的优点。近些年来 ,该方法广泛应用于DNA修复、遗传毒理、环境监测和细胞凋亡的研究。本文就彗星试验结合荧光原位杂交、检测DNA碱基氧化损伤、以及在染色、玻片储存和彗星图像分析方面的进展进行了综述     

抗苗勒管激素在辅助生殖领域的临床研究进展

抗苗勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)又称苗勒管抑制物(Mullerian inhibiting substance,MIS),是由女性卵泡颗粒细胞和男性睾丸支持细胞所分泌的二聚体糖蛋白激素。AMH最初被发现参与胚胎期的生殖系统的分化。越来越多的研究表明,AMH在辅助生殖领域中,可作为卵巢储备功能、促排卵治疗过程中卵巢反应性的预测指标,同时可作为体外受精(in-vitro fertilization,IVF)受精率及临床妊娠率的预测指标。此外,AMH还可用于评估精子质量及精子冷冻保存后的活力恢复情况。AMH还可辅助诊断女性卵巢功能早衰(premature ovarian failure,POF)及多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS),辅助鉴别男性严重少、弱精子症及无精子症,指导生育期肿瘤患者选择治疗方案等。