首次复治肺结核病结核分枝杆菌对利福平耐药性与rpoB基因RRDR突变的研究

目的：研究分离自首次复治肺结核病患者的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, Mtb）临床菌株对利福平的耐药性, 及其与rpoB基因利福霉素耐药决定区（rifampicin resistance determining regions, RRDR）位点突变间的相关性。方法：收集2013年2月至2013年12月国内19家医院的首次复治肺结核患者的Mtb, 进行利福平药敏检测;使用PCR技术检测Mtb的rpoB基因RRDR位点突变。结果：来自全国12个省19家医院共141例患者的141株临床菌株获得药敏结果, 而RRDR位点测序分析显示首次复治结核患者中有53%（75/141）对利福平耐药。RRDR DNA测序共检测到72株Mtb存在rpoB耐药突变区突变, 其中71株的突变发生在RRDR, 主要突变位点分别为531位（42株）、526位（11株）和516位（10株）。有75株Mtb对利福平耐药, 其中70株（93.3%）检测到rpoB突变, 69株的突变发生在RRDR;除了2株L511P、H526N突变的Mtb对利福平敏感, 70株rpoB突变株均对利福平耐药。对于复治结核患者, 检测RRDR突变判断利福平耐药有较高的特异度。结论：首次复治肺结核病患者对利福平耐药率较高, Mtb耐利福平与rpoB基因RRDR突变密切相关, RRDR突变检测可以用于快速鉴定复治肺结核病患者的Mtb利福平耐药。     

Xpert MTB/RIF与改良罗氏比例法药敏试验检测利福平药敏的临床价值

目的 对比Xpert MTB/RIF与改良罗氏比例法药敏试验检测利福的平药敏结果。方法 选取2019年7月—2022年4月淮安市第四人民医院住院或者门诊中同时进行Xpert MTB/RIF和改良罗氏比例法药敏试验检测利福平药敏的246例肺结核患者为研究对象,比较两种方法检测利福平的药敏情况。结果 Xpert MTB/RIF和改良罗氏比例法药敏试验检测利福平的耐药率比较,差异无统计学意义(χ²=1.15,P>0.05)。比例法药敏试验检测敏感,Xpert MTB/RIF耐药有8例;比例法药敏试验检测耐药,Xpert MTB/RIF敏感0例。246份标本经Xpert MTB/RIF检测出利福平耐药有36例,在结核杆菌RRDR设计ProbeA、ProbeB、ProbeC、ProbeD、ProbeE 5条探针中,Xpert MTB/RIF系统检测利福平耐药位点以ProbeE最高63.9%。以改良罗氏比例法药敏试验为金标准Kappa=0.86。结论 Xpert MTB/RIF检测利福平的药物敏感性用时短,高通量,灵敏度高,特异度高。     

结核分枝杆菌临床分离株利福平耐药表型及rpoB基因型分析

目的分析结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株利福平(rifampin,RFP)耐药表型及rpoB基因突变关系,阐明MTB RFP耐药株rpoB基因突变特征。方法采用改良罗氏培养基比例法检测387株MTB临床分离株对RFP敏感性,并进行rpoB基因测序。对经测序rpoB基因511位和533位密码子突变株进行RFP最小抑菌浓度(MIC)检测。结果比例法检测387株MTB临床分离株中1,98株RFP耐药株,189株RFP敏感株。rpoB基因测序结果表明1,98株比例法RFP耐药株中1,92株(96.97%)发生rpoB基因突变,涉及16种单位点和24种双位点密码子联合突变类型,单位点和双位点密码子联合突变率分别为84.34%(167/198)和12.63%(25/198),其中发现1种单位点和21种双位点密码子联合突变新类型。最常见的突变位点为531位(51.01%)、526位(21.21%)和516位(7.07%)密码子。6株(3.03%)耐药株在rpoB测序范围内未见突变。189株比例法RFP敏感株中,174株(92.06%)在rpoB基因测序范围内未见突变1,5株(7.94%)发生突变,其中7株CTG511CCG(Leu→Pro)突变和6株CTG533CCG(Leu→Pro)突变。511位和533位密码子突变株MIC检测结果提示其突变与低度耐RFP相关。结论所得数据及一些新的发现为进一步研究MTB RFP耐药机制、研制快速新型分子药敏试验方法提供理论和实际应用依据。     

实时荧光PCR分子信标检测耐利福平结核分枝杆菌印rpoB基因

目的 应用实时荧光PCR分子信标技术,建立快速检测临床标本中结核分枝杆菌利福平rpoB相关耐药突变点方法,探讨其缩短耐药实验报告时间的临床应用价值.方法 以分枝杆菌药物敏感性实验绝对浓度法为标准,12株非结核分枝杆菌、4株非分枝杆菌作对照,对174例结核患者临床分离株应用实时荧光PCR分子信标方法,检测利福平rpoB核心区域的耐药突变点并将结果与直接测序进行比较.结果 (1)实时荧光PCR分子信标方法:82例结核分枝杆菌利福平敏感菌株中,3例发生rpoB基因突变,特异度为96.3%;92例结核分枝杆菌利福平耐药菌株中,82例检出耐药突变,敏感度为89.1%;准确性为92.5%.(2)DNA直接测序分析:82例结核分枝杆菌利福平敏感株中,1例发生rpoB基因突变,特异度为98.8%;92例结核分枝杆菌利福平耐药菌株中,83例发生:rpoB基因突变,敏感度为90.2%;准确性为94.2%.检测174株结核分枝杆菌临床分离菌株,与实时荧光PCR分子信标方法检测一致性为98.3%(171/174).结论 实时荧光PCR分子信标方法检测耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变点可作为结核患者快速耐药检测的初筛方法之一.     

Xpert MTB/RIF在快速诊断肺结核及利福平耐药中的临床应用

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)在肺结核诊断及其耐药性检测中的临床应用价值。方法收集408例结核患者标本,同时采用抗酸染色法、固体培养法及Xpert MTB/RIF检测,并对其结果进行分析比较。结果 408例标本抗酸染色法、固体培养法和Xpert MTB/RIF检测出结核分枝杆菌的阳性率分别为25.00%(102/408)、42.16%(172/408)和58.09%(237/408)。经统计学分析,Xpert MTB/RIF阳性率高于抗酸染色法和固体培养法,差异均有统计学意义(P0.05)。其中,固体培养法和Xpert MTB/RIF检测均为阳性的标本共168例,经比例法药物敏感试验与Xpert MTB/RIF检测利福平耐药率分别为26.19%(44/168)和27.38%(46/168),2种方法耐药率比较,差异无统计学意义(P0.05),以比例法药敏试验作为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为97.73%(43/44),特异性为97.58%(121/124)。结论 Xpert MTB/RIF可快速、准确检测结核分枝杆菌及利福平耐药性,具有重要的临床应用价值。     

线性探针法检测云南地区结核分枝杆菌耐药的应用评价

目的评价线性探针法的检测效能,探讨云南地区耐药结核分枝杆菌的基因突变规律。方法采集云南地区肺结核患者的407份涂阳痰标本,采用线性探针法进行耐药性检测,同时采用比例法药敏试验作为对照。结果线性探针法检测异烟肼(INH)耐药的敏感性为71.84%,特异性为97.29%;检测利福平(RFP)耐药的敏感性为88.36%,特异性为94.38%;检测耐多药(MDR)的敏感性为67.46%,特异性为94.54%,阳性预测值为87.63%,阴性预测值为86.24%。传统药敏试验与线性探针法均显示INH耐药的125株菌中kat G 315位点发生突变的有116株(92.80%),inh A发生突变的有14株(11.20%),同时发生kat G 315和inh A突变的有5株(4.00%)。RFP耐药菌株中,rpo B基因突变频率从高到低依次是531或533位(59.69%)、526位(25.58%)、516位(8.53%)。结论云南地区耐药结核分枝杆菌的基因突变有自己的特点。线性探针法对结核分枝杆菌进行耐药性检测具有较高的敏感性、特异性。在耐药率较高的定点医院和耐药高危人群中,线性探针法检测MDR具有较高的阳性预测值和阴性预测值,其结果具有较好的参考价值。     

结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变快速检测方法的建立

目的建立结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变的快速检测方法。方法根据结核分枝杆菌标准株H37Rv序列，自行设计覆盖rpoB、katG、inhA基因突变区的系列寡核苷酸探针，并检测临床样品中结核分枝杆菌的基因突变情况，以此来判断耐药结果。结果在56个利福平耐药菌株中，有50个菌株都在rpoB基因上榆出有突变，利福平耐药突变检出率为89．3％（50／56）；有30个利福平敏感菌株rpoB基因上都未检出突变。有58个异烟肼培养的耐药菌株中有47个在katG或inhA基因上检出有突变，异烟肼耐药突变检出率为81．0％（47／58）；有30个异烟肼敏感菌株katG或inhA基因上未检出突变。结论用膜芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性，具有较高的特异性和敏感性，可用于临床结核分枝杆菌耐药性的检测。     

河南省尉氏县结核病的病原学调查及结核分枝杆菌耐药性分析

目的 调查河南省结核病的分枝杆菌菌种类型、分布特征及耐药状况。 方法 对研究现场所有疑似结核病患者进行痰涂片和痰菌培养;用鉴别培养基和双重聚合酶链反应(PCR)方法对分离的菌株进行菌种鉴定,用比例法进行药物敏感性检测。 结果 共收集患者2661份痰标本,应用痰涂片、痰培养和双重PCR三种方法联合应用进行病原学分析,发现涂片阳性者179份(占6.5%);培养阳性菌株245份,阳性率为9.2%,其中225株为结核分枝杆菌,占91.8%,结核分枝杆菌复合群6株,占2.4%,13株为非结核分枝杆菌(NTM),占5.3%,1株为结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染,占0.4%。药敏检测显示结核分枝杆菌总体耐药率为24.0%(54/225),4种药物的耐药率链霉素16.9%(38/225),异烟肼 16.0%(36/225),利福平 9.8%(22/225),乙胺丁醇8.4%(19/225)。耐单药菌株20株,占8.9% ,耐2种药以上的多药耐药为15.1%(34/225),其中,同时耐异烟肼和利福平及2种以上抗生素菌株即耐多药株(MDR-TB)菌株19株,占8.4%(19/225)%。男、女性结核病患者耐药率差异无统计学意义(2=2.8214,P0.05),耐药与年龄的相关性差异有统计学意义(2=8.3868,P0.05),复治病例耐药率与初治病例耐药率差异有统计学意义(2=13.7193,P0.05);复治病例MDR-TB耐药率与初治病例MDR-TB耐药率差异有统计学意义(211.1361,P0.05)。 结论 河南省尉氏县的结核病病原菌包括结核分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群及非结核分枝杆菌,耐药情况较为严重,尤其对复治病例、较年轻病例应引起重视。     

两种分枝杆菌鉴定及耐药检测方法在肺泡灌洗液中的应用价值

目的运用荧光聚合酶链反应(PCR)溶解曲线法和Gene Xpert MTB/RIF法快速检测支气管肺泡灌洗液中的分枝杆菌及利福平耐药突变,并将两种方法进行比较,评价两种方法的灵敏度、特异度及临床应用价值。方法收集该院2018年10月至2019年8月收治的门诊和住院患者支气管肺泡灌洗液标本102例,运用荧光PCR溶解曲线法和Gene Xpert MTB/RIF法分别检测分枝杆菌及利福平耐药突变,评价两种方法的检测能力。结果在102例灌洗液标本中荧光PCR溶解曲线法检出结核分枝杆菌57例,非结核分枝杆菌2例,其检出分枝杆菌的灵敏度为100.00%,特异度为100.00%,检出利福平耐药15例,检出率为26.32%。Gene Xpert MTB/RIF法检出结核分枝杆菌57例,其检出分枝杆菌的灵敏度为96.61%,特异度为100.00%,检出利福平耐药13例,检出率为22.81%,两种方法的符合率为96.61%。与荧光PCR溶解曲线法比较,Gene Xpert MTB/RIF法耗时更短,操作方法更为简便,但荧光PCR溶解曲线法在分枝杆菌鉴定,尤其是非结核分枝杆菌的鉴定与分型方面更有优势。结论荧光PCR溶解曲线法和Gene Xpert MTB/RIF法在分枝杆菌检测和利福平耐药突变检测方面均有较高的灵敏度和特异度,两种方法有较高的符合率。临床医师可根据病原学诊断的具体要求选择合适的实验方法,为临床诊断和早期治疗提供较好的实验室支撑。     

浙江省杭州市结核分枝杆菌氧氟沙星耐药研究

目的 了解杭州市结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐药情况及耐药菌株gyrA基因的突变特点。 方法 收集2010年4月至2012年6月杭州市各结核病定点医院分离培养的临床菌株,进行一线抗结核药物、氧氟沙星和卡那霉素敏感性检测,测定氧氟沙星耐药菌株gyrA基因的喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)序列。 结果 收集的1242株临床菌株中, 67株(5.39%)对氧氟沙星耐药,其中32株(47.76%)对氧氟沙星单耐药,23株为耐多药结核病(MDR-TB)菌株,占MDR-TB菌株的22.77%。选取55株耐药株进行gyrA序列分析,其中33株(60%)携带gyrA基因突变位点。突变位点包括第90和94位密码子,突变率分别为27.27%和32.73%。 结论 杭州市氧氟沙星单耐药患者的比例较高,MDR-TB患者中氧氟沙星耐药情况较严重,需加强结核患者的早期发现和用药管理。     

基因芯片法用于检测长沙地区结核分枝杆菌耐药性研究

目的了解长沙市中心医院2013年1月1日至2014年9月30日临床分离的1 031株结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性。方法将结核分枝杆菌培养阳性,并经鉴定为结核分枝杆菌的1 031株菌株,采用绝对浓度法进行常规药敏检测,同时应用基因芯片技术检测利福平和异烟肼耐药相关的rpoB、katG和inhA基因上的位点突变,并对2种结果进行比较。结果基因芯片法检测利福平耐药性中,其敏感株896株,耐药株135株;检测异烟肼耐药性为敏感株901株,耐药株130株。与绝对浓度法比较,基因芯片检测利福平耐药结果与其一致的菌株共1 011株(包含敏感株894株,耐药株117株),符合率为98.00%;基因芯片检测异烟肼耐药结果与其一致的菌株共1 005株(包含敏感株890株,耐药株115株),符合率为97.48%。与利福平耐药相关的rpoB基因的突变位点最常见的为531TCG→TTG突变,占耐药株的51.11%;其次为526CAC→TAC突变耐药株的10.37%;526CAC→GAC共11株菌株突变,占耐药菌株的8.15%。异烟肼耐药主要是由katG315AGC→ACC位突变引起,占耐药株的83.85%,inhA-15C→T突变仅占12.30%。结论基因芯片法与绝对浓度法结果高度一致,可成为筛查利福平和异烟肼耐药性的快速有效方法,长沙地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药以rpoB531,526及katG315突变位点为主。     

线性探针技术在耐多药结核病诊断中的应用评价

目的评价线性探针技术诊断临床耐多药结核病(MDR-TB)的价值。方法收集临床分离的结核分枝杆菌菌株268例,采用比例法药敏试验和线性探针技术检测利福平和异烟肼的耐药性,以比例法药敏试验为金标准,分析线性探针方法检测的敏感度、特异度。结果与比例法药敏试验相比,线性探针技术检测耐利福平敏感度为88.89%,特异度为98.05%,耐药检出率差异无统计学意义(χ~2=0.82,P0.05);耐异烟肼敏感度为84.61%,特异度为97.69%,耐药检出率差异无统计学意义(χ~2=0.69,P0.05);诊断MDR-TB的敏感度为78.26%,特异度为96.85%,耐多药检出率差异无统计学意义(χ~2=0.53,P0.05)。结论线性探针技术敏感度和特异度高,可用于MDR-TB的早期诊断。     

探针熔解曲线法快速检测结核分枝杆菌利福平、异烟肼、乙胺丁醇及链霉素耐药突变

目的评价探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平(RIF)、异烟肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)及链霉素(SM)耐药突变的方法学应用价值。方法用PCR探针熔解曲线法检测110株结核分枝杆菌临床分离株RIF、INH、EMB及SM耐药突变情况,以传统的比例法药物敏感性试验检测结果为标准,评价探针熔解曲线法的敏感性、特异性和一致率,并应用测序方法分析结果不一致菌株的耐药突变位点。结果以比例法检测结果为标准,熔解曲线法检测RIF耐药的敏感性为98.51%,特异性为95.35%,诊断符合率为97.27%;检测INH耐药的敏感性为94.12%,特异性为95.24%,诊断符合率为94.55%;检测EMB耐药的敏感性为88.64%(39/44),特异性为75.76%(50/66),诊断符合率为80.91%(89/110);检测SM耐药的敏感性为82.98%,特异性为80.95%,诊断符合率为81.82%。两种检测方法结果不符菌株的测序结果大部分与熔解曲线法的检测结果一致。结论探针熔解曲线分析法检测速度快,敏感性高,特异性强,可用于结核分枝杆菌耐药突变的快速检测。     

Xpert MTB/RIF检测痰标本结核分枝杆菌与利福平耐受性的临床应用研究

目的分析Xpert MTB/RIF方法用于临床快速检测结核分枝杆菌(MTB)与利福平耐受性的临床意义。方法收集2015年1-12月在惠州市结核病防治研究所及5个县区医院结核科就诊的肺结核患者痰标本552例,进行涂片镜检、Xpert MTB/RIF核酸检测和改良罗氏培养,并对培养阳性者进行药敏实验。评价各种方法 MTB检测灵敏度与特异度,对比传统药敏方法和Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性的结果并分析。结果 Xpert MTB/RIF与改良罗氏培养法对MTB检测结果相比,敏感度95.3%、特异度93.1%;耐药性对比结果中,所有阳性标本中利福平耐药的敏感度82.1%,特异度97.8%;Xpert MTB/RIF检测MTB分级与改良罗氏培养分级一致性分析中,kappa=0.688,提示两者结果具有良好的一致性。结论 Xpert MTB/RIF可用于临床早期快速检测结核分枝杆菌与利福平耐药检测的筛查,有利于临床快速决策。     

Xpert MTB/RIF系统在结核分枝杆菌和利福平耐药性快速检测中的应用

目的探讨Xpert MTB/RIF系统在结核分枝杆菌(MTB)及利福平耐药性快速检测中的应用。方法收集2015年4-12月在安徽省胸科医院住院的616例肺结核和可疑患者痰液或肺泡灌洗液(BALF)样本,同时进行Xpert MTB/RIF系统、液体培养法和直接涂片法3种方法检测,以临床诊断为金标准进行统计分析。结果 Xpert MTB/RIF系统、液体培养法和直接涂片法检测MTB的敏感性分别为39.61%(225/568)、36.44%(207/568)和17.78%(101/568),Xpert MTB/RIF系统检测的敏感性与液体培养法有较好的一致性(χ~2=1.21,P0.05),显著高于直接涂片法(χ~2=66.15,P0.05)。在对利福平耐药性的检测中,Xpert MTB/RIF系统检出菌株对利福平的耐药率为19.40%(39/201),Xpert MTB/RIF系统的敏感性和特异性分别为94.59%(35/37)和97.56%(160/164),与液体培养法药物敏感性试验相比,差异无统计学意义(χ~2=0.167,P0.05)。对所有培养阳性物进行利福平耐药基因分析,以测序法作为金标准进行rpo B耐药基因检测,Xpert MTB/RIF系统检测利福平耐药位点以Probe E(58.98%,23/39)为主,测序法以S531L和L533P(62.16%,23/37)为主,2种方法突变位点基本一致(χ~2=0.081,P0.05)。结论 Xpert MTB/RIF系统检测MTB及利福平耐药性具有较高的临床应用价值。     

焦磷酸测序技术检测耐多药结核分枝杆菌

目的利用焦磷酸测序技术,建立结核分枝杆菌菌株耐多药检测方法,并与Bactec MGIT 960药敏法进行比较。方法设计rpoB、katG基因PCR扩增引物和焦磷酸测序引物,建立结核分枝杆菌菌株焦磷酸测序检测方法。利用新确立的焦磷酸测序法检测202株临床分离的耐多药结核分枝杆菌的利福平、异烟肼耐药性。结果与BACTEC MGIT 960法检测药物耐药性结果比较,焦磷酸测序检测多耐药结核分枝杆菌临床分离株的敏感性与特异性为72.8%[95%可信区间(confidence in-terval,CI):66.3%~78.4%]及90.0%(95%CI:80.1%~95.1%)。结论新确立的焦磷酸测序技术可快速检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼的耐药性,其可作为耐多药结核分枝杆菌药敏有效的检测工具。     

Geno-typeMTBDRplus分子线性探针杂交技术在结核病诊断与耐药性检测中的应用价值

目的　评价Geno-type MTBDRplus 分子线性探针杂交技术显色法（以下简称杂交酶显色法）在结核病快速诊断及检测异烟肼（INH）和利福平（RIF）药物敏感中的应用。方法　选取2016 年1 月~2019 年12 月的临床确诊结核病患者的临床标本413 例,同时采用BD 960 液体培养法和杂交酶显色法进行结核分枝杆菌检测,并对其中108 株菌株进行异烟肼和利福平药敏检测,比较两种方法的一致性。结果　杂交酶显色法测得结核分枝杆菌358 例（86.68%）,BD 960 液体培养法测得结核分枝杆菌376 例（91.04%）;两种方法结果相符349 例（84.50%）。108 株菌株中杂交酶显色法和BD 960 液体培养法分别检出异烟肼敏感87 株（80.56%）和88 株（81.48%）,检出利福平敏感96 株（88.89%）和94 株（87.04%）。两种方法对结核分枝杆菌的鉴定及异烟肼、利福平药物敏感检测具有高度一致性。结论　与BD960 液体培养法相比,杂交酶显色法检测结核分枝杆菌及异烟肼和利福平药敏更为快速有效。     

肺结核与结核性脑膜炎病例中结核分枝杆菌耐利福平相关基因突变分布分析

目的分析结核性脑膜炎与肺结核病例中,导致结核分枝杆菌利福平耐药的rpoB基因突变分布规律及差异。方法对包含利福平耐药决定区81bp的102株结核分枝杆菌临床分离株的PCR产物进行测序分析。结果 102株利福平耐药的结核分枝杆菌的rpoB基因测序发现,63株导致肺结核的结核分枝杆菌的rpoB基因突变常见位点为:531(53.97%),526(20.63%),516(6.45%)。39株导致结核性脑脑膜炎的rpoB基因突变最常见位点为:531(61.54%),526(20.51%),533(7.69%)。结论导致结核性脑膜炎与导致肺结核的结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的最常见两个突变位点(531和526)无显著差异。其中531位密码子的Ser-Leu突变率占明显优势。     

应用多重PCR-单链构象多态性分析同时检测耐异烟肼和利福平的结核分枝杆菌

目的 探讨应用多重PCR-单链构象多态性分析(multiplexpulymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,multi-PCR-SSCP)方法快速、特异地同时快速检测结核分枝杆菌对异烟肼和利福平耐药性的效能.方法 根据结核分枝杆菌的inhA序列、katG序列、rpoB序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物.采用multi-PCR-SSCP技术,一次性检出耐异烟肼和利福平的结核分枝杆菌.新方法的有效性通过116株临床分离株(70株耐异烟肼,66株耐利福平)的验证.结果 名 Multi-PCR-SSCP方法检测临床分离株基因突变的有效性,以细菌培养和药敏试验结果为金标准.116株临床分离株和H37Rv标准株中除了4株katG缺失突变,其余菌株3个基因katG、inhA和rpoB在单基因PCR中都扩增成功.与H37Rv标准株相比,46株katG基因突变,14株inhA基因突变,58株rpoB基因突变.38株katG和rpoB,4株inhA和rpoB,4株inhA和katG同时突变,还有2株3个基因都有突变.multi-PCR-SSCP对于耐异烟肼和利福平的结核分枝杆菌检出的敏感度分别为80%、82%,特异度分别为100%和92%.结论 multi-PCR-SSCP方法敏感、特异,能同时快速有效地检测耐多药结核分枝杆菌,有望成为临床指导用药的好方法,为深入研究耐药基凶检测奠定了良好的基础.     

噬菌体法与比例法在结核分枝杆菌药敏检测的比较研究

目的 探讨噬菌体检测技术(PhaB)同时快速检测4种一线抗结核药物耐药性的可能性,分析其临床应用价值.方法 应用PhaB同时测定53株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性,并与比例法的药敏结果比较,对2种方法检测结果不符的菌株进行Bactec-960药敏测定.结果 PhaB检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法药敏结果符合率分别为94.3%、90.6%、96.2%和88.7%.共有7株菌株16个药敏结果PhaB与比例法检测结果不符.Bactec-960检测结果有5株12个药敏结果支持PhaB结果,2株4个药敏结果支持比例法结果.结论 PhaB同时检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法检测结果有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速筛选方法.