HPLC-MS/MS检测急性百草枯中毒患者血浆的方法及意义

目的探讨高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测急诊百草枯中毒患者血浆中百草枯水平的可靠性和优越性。方法采用Phenomenex Kinetex mHILIC色谱柱(100.0mm×2.1mm,2.6μm),以1%甲酸铵水溶液(含甲酸铵250mmol/L)和乙腈分别为流动相A、B,建立HPLC-MS/MS(流速0.35mL/min、检测波长258nm、柱温40℃),通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆百草枯水平。结果 54.28～13 190.00ng/mL百草枯的线性关系良好(R~2=0.999 9),批内、批间RSD均10%。63例急性百草枯中毒患者血浆百草枯水平平均为2 820ng/mL,死亡组水平显著高于存活组(P0.05)。结论 HPLC-MS/MS能快速、准确、可靠检测急诊百草枯中毒患者血浆的百草枯水平,对患者的治疗具有指导意义。     

高效液相色谱-质谱联用法用于二亚油酰磷脂酰胆碱血浆浓度测定的探讨

目的研究高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定血浆中二亚油酰磷脂酰胆碱(DLPC)浓度测定的方法。方法 2010年11月-2011年1月,7例受试者,3例服用多烯磷脂酰胆碱软胶囊(试验制剂),3例服用多烯磷脂酰胆碱胶囊(参比制剂),1例未服药;采集服药者血浆,对各种检测方法、样品预处理条件进行考核;用建立的方法对6例服药者和1例未服药者血浆DLPC浓度进行测定。结果最终建立的方法为:采用API 3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,多反应离子检测模式,正离子扫描,大气压化学电离源,色谱柱为Ultimate CN分析柱(50.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇︰水︰甲酸(80︰20︰0.05,V/V/V),流速为0.5 mL/min,格列齐特作为内标。受试者口服多烯磷脂酰胆碱软胶囊试验制剂与参比制剂后,DLPC血浆浓度水平均未见明显的变化规律。未服药者血浆DLPC浓度也有较高浓度水平。结论所建立的HPLC-MS/MS法,未能用于多烯磷脂酰胆碱软胶囊生物等效性评价。     

HPLC-MS/MS法同时测定白血病患者全血环孢素A、他克莫司和西罗莫司水平

目的建立高效液相色谱质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定白血病移植患者全血中免疫抑制治疗药物环孢素A(CsA)、他克莫司和西罗莫司血药水平的方法。方法通过含有内标的甲醇对免疫抑制剂全血标本进行处理,利用HPLC-MS/MS以ESI+模式的多离子反应监测(MRM)扫描方式同时对CsA、他克莫司和西罗莫司进行监测,以2mmoL/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液(B)-0.1%甲酸甲醇溶液(A)为流动相进行梯度洗脱。结果该方法中CsA、他克莫司和西罗莫司在检测范围内线性良好,各r均大于0.99;各精密度均小于8.33%;3个水平的标本稳定性均良好(RSD≤11.9%)。结论该方法操作简便、检测效率高,稳定性好,适用于移植患者服用免疫抑制类药物的血药水平监测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定移植患者血浆泊沙康唑水平

目的建立测定血浆泊沙康唑水平的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床治疗药物监测。方法 HPLC色谱柱为Ultimate XB-C18。柱温50℃,流速0.8mL/min,流动相为含0.1%甲酸,以及2mmol/L乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为ESI正离子模式,MRM扫描,监测泊沙康唑m/z 701.5~683.4作为定量离子,内标泊沙康唑-d4m/z 705.4~687.5作为定量离子。结果泊沙康唑水平在0.1~10.0μg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.993 0),日内及日间精密度5%,平均回收率为90%~103%。结论该方法简便、准确、快速,适用于泊沙康唑的血药浓度测定。     

HPLC-MS/MS检测血浆百草枯浓度方法的建立

目的建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测血浆百草枯浓度的方法。方法选用Phenomenex Kinetex 2.6μm HILIC色谱柱(100.0 mm×2.1 mm),以1%甲酸水溶液(含250 mmol/L甲酸铵)为流动相A、乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,进样量为10μL,柱温为40℃;使用电喷雾电离(ESI)源,采用正离子条件下多离子反应监测扫描模式。百草枯和内标乙基百草枯的离子对分别为质/荷比(m/z)92.7→171.0和m/z 107.0→185.1。对建立的HPLC-MS/MS进行方法学评价(线性范围、定量下限、准确度、精密度、选择性和基质效应、稳定性),并检测75例百草枯急性中毒患者的血浆百草枯浓度,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆百草枯浓度对临床结局的判断价值。结果 HPLC-MS/MS检测百草枯浓度在54.28~13 190.00 ng/mL范围内具有良好线性关系(Y=0.000 1X+0.011 6,r2=0.998 3)。定量下限处的批内平均准确度为96.31%~120.04%,批间准确度为104.43%;高、中、低浓度批内和批间检测值与理论值的偏差均在±15%范围内;高、中、低浓度及定量下限处的批内和批间相对标准偏差(RSD)均15%。随机选择6份空白基质考察方法的选择性和基质效应,结果表明百草枯出峰位置无干扰,方法选择性好;高、低浓度处经内标归一化的基质因子的变异系数均15%,基质效应符合要求。样本室温放置可稳定1 d,2~8℃放置可稳定1周,-80℃冻存可稳定1个月,反复冻融处理3次对结果无影响。75例百草枯中毒患者的血浆百草枯浓度为2 820(0~22 200)ng/mL,死亡组血浆百草枯浓度明显高于存活组(P0.05)。ROC曲线分析显示血浆百草枯浓度判断临床结局的ROC曲线下面积为0.855,最佳临界值为2 431 ng/mL。结论建立的HPLC-MS/MS方法可用于临床血浆百草枯浓度的常规检测。     

HPLC-MS/MS法检测血浆伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的方法建立及在白血病患者用药监测中的应用

目的建立同时测定白血病患者血浆伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于此三种药物的常规治疗药物监测,为其在临床合理使用提供血药浓度依据。方法色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相:甲醇(0.1 ml/dl甲酸)和水(0.1 ml/dl甲酸和2 mmol/L乙酸铵),流速:0.8 ml/min,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测伏立康唑m/z 350.1281.2和伏立康唑-d3 m/z 353.1284.2;泊沙康唑m/z 701.4683.4和泊沙康唑-d4 m/z 705.4687.4;伊曲康唑m/z 705.3392.2和伊曲康唑-d9 m/z 714.5401.4。用含伏立康唑、泊沙康唑与伊曲康唑相应同位素内标甲醇液对白血病患者血浆样本进行蛋白沉淀处理,进行质谱检测,内标法定量,对各自检测结果作四分位分析。结果在0.1～10.0μg/ml范围内,伏立康唑峰面积/伏立康唑-d3峰面积与伏立康唑浓度线性关系良好,Y=1.58X+0.011 6(R=0.998 7);泊沙康唑峰面积/泊沙康唑-d4峰面积与泊沙康唑浓度线性关系良好,Y=1.38X+0.021 7(r=0.998 2);伊曲康唑峰面积/伊曲康唑-d9峰面积与伊曲康唑浓度线性关系良好,Y=1.42X+0.032 5(r=0.999 1)。此三种药物日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,平均回收率为95%～105%。1 000份白血病患者伏立康唑浓度四分位结果为Q1～Q3:0.3～1.7μg/ml;1 000份白血病患者泊沙康唑浓度四分位结果为Q1～Q3:0.4～1.4μg/ml。结论建立了同时测定白血病患者伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的HPLC-MS/MS法,该方法前处理简单,检测耗时短,检测结果准确度和稳定性好,可适用于临床检测。     

液质联用色谱测定聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺含量

目的探讨聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺含量的可靠测定方法。方法采用液质联用色谱(HPLC-MS/MS)和同位素稀释定量技术,以选择反应监测(SRM)方式测定医用聚丙烯酰胺样本及20例聚丙烯酰胺临床样本中的丙烯酰胺含量。以丙烯酰胺标准品为对照,样本经水溶液振荡提取,硅藻土柱净化。色谱条件:MG120 C18色谱柱(5μm粒径,150 mm×4.6 mm),柱温均26℃;流动相为甲醇∶0.1%甲酸=1∶9,流速为0.6 mL/min;进样量为10μL。结果丙烯酰胺分离良好。峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围可达3 000μg/L。加标水平在50μg/L时,回收率为103.1%,相对标准差(RSD)为6.20%。医用聚丙烯酰胺样本中丙烯酰胺含量为3.9×10-9~3.1×10-8g/L。20例聚丙烯酰胺临床样本中丙烯酰胺含量为(14.39±6.40)×10-9g/L。结论该方法样本处理简单,准确度高,灵敏度高,适合聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺含量的测定。     

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中那格列奈及其主要代谢物M1

目的 建立同时测定那格列奈及其主要代谢物M1的HPLC-MS方法。方法 血浆样品经过乙酸乙酯萃取,以非那西丁为内标。色谱采用岛津C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,流动相为0.1%甲酸溶液与乙腈,梯度洗脱,流速0.2 mL/min。质谱采用选择性离子监测(SIM)阳离子模式,检测对象[M+H]⁺为：那格列奈318.2,代谢物M1 334.1,非那西丁180.1。结果 标准曲线线性范围为0.0625～8μg/mL那格列奈,M1为0.0313～4μg/mL。日内及日间准确度和精密度变异均<10%,血浆样品稳定性良好,提取回收率均>96%,基质效应<5%。结论 本方法稳定性好、灵敏度高、重现性好,可应用于各类生物样本中那格列奈及其代谢物M1的生物等效性与药物代谢动力学研究。     

测定血液病患者血浆Venetoclax浓度的HPLC-MS/MS方法

目的建立测定血液病患者血浆Venetoclax浓度的HPLC-MS/MS法。方法患者血浆经甲醇(含内标Venetoclax-d8)沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate@XB-C18(4.6×50 mm,5μm),柱温60℃。流动相为含0.1%甲酸和2 mmol·L^-1乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,流速0.7 m L·min^-1,梯度洗脱。Venetoclax与Venetoclax-d8质谱检测方式均为电喷雾正离子模式,多反应监测(MRM),同时监测Venetoclax m/z 868.5~321.7(定量离子),Venetoclax m/z 868.5~177.6(定性离子)及Venetoclax-d8m/z 876.6~329.4(定量离子)。以Venetoclax和Venetoclax-d8峰面积比为定量依据,计算血浆Venetoclax浓度。并对该方法进行性能评价。结果Venetoclax在10~2 000 ng·mL^-1范围内线性良好,三批回归方程进行线性拟合后的标准曲线方程为Y=0.001 87 X+0.003 15,r=0.996 7;携带污染、重复性、实验室内精密度、回收率、基质效应和稳定性均符合性能验证要求。结论所建立的HPLC-MS/MS方法可准确、灵敏、快速地检测血液病患者血浆Venetoclax浓度,可应用于Venetoclax治疗药物监测及其体内药动学分析。     

HPLC-MS/MS法在骨髓移植患者他克莫司血药浓度测定中的应用

目的建立测定骨髓移植患者全血他克莫司(FK506)血药浓度的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法,探索HPLC-MS/MS法与羧基金属免疫分析(CMIA)法和化学发光微粒免疫(Elecsys)法在FK506血药浓度检测中的关系,为临床合理选用FK506血药浓度监测方法提供可靠依据。方法采用子囊霉素作内标,全血样品经合内标甲醇沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate XB-C_(18),柱温65℃,流动相为含0.1 g/dl甲酸和2 mmol/IL乙酸铵的水和含0.1ml/dl甲酸的甲醇,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测FK506 m/z 821.5~768.5,子囊霉素m/z809.4~756.4。选取部分骨髓移植患者全血FK506样本,分别用HPLC-MS/MS法,CMIA法和Elecsys法进行检测,对各种检测方法所检测的FK506浓度值进行比较。结果建立的HPLC-MS/MS法检测FK506血药浓度在0.5~50 ng/ml范围内线性关系良好,Y=0.228X-0.003 08(r=0.999 0)。HPLC-MS/MS法与CMIA法和Elecsys法检测FK506血药浓度结果相关性较好,差异无统计学意义。结论建立了检测FK506血药浓度的HPLC-MS/MS法,该法可用于临床骨髓移植患者全血FK506浓度的监测。     

HPLC-MS/MS 法在检测慢性粒细胞白血病患者帕纳替尼血药浓度中的应用

目的　建立测定慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia, CML) 患者血浆帕纳替尼浓度的高效液相色谱- 串联质谱法（HPLC-MS/MS）,并应用于帕纳替尼血药浓度日常监测,为帕纳替尼合理使用提供实验室依据。方法　采用含内标（帕纳替尼-d8）的甲醇对患者血浆进行沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇相（0.1% 甲酸）和水相（0.1% 甲酸和2 mmol/L 乙酸铵）,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM 扫描,同时监测帕纳替尼m/z 533.1>260.1 和帕纳替尼-d8 m/z 541.2>260.1。采用内标法定量,以帕纳替尼和帕纳替尼-d8 峰面积比为定量依据,计算血浆帕纳替尼浓度,并分别对其线性、专属性、精密度、准确度及稳定性进行考察。结果　帕纳替尼浓度在（1 ～ 250） ng/ml 范围内与峰面积线性关系良好,Y = 0.019 3X + 0.028 4 （r= 0.999 1）。专属性较好,血浆中的内源性物质不干扰帕纳替尼及其内标的测定;日内及日间RSD 均小于5%;相对回收率为100.91%~105.18%;室温放置稳定性及冻融稳定性RSD 均小于5%。结论　该文建立的HPLC-MS/MS 法,前处理简单,特异度及灵敏度高,能准确、快速地检测血浆帕纳替尼浓度,适合慢性粒细胞白血病患者帕纳替尼血药浓度的日常监测。     

HPLC-MS/MS法在伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼治疗CML患者血药浓度监测中的应用

目的建立测定慢性粒细胞白血病(CML)患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于临床血药浓度监测。方法血浆经甲醇沉淀蛋白处理,采用内标法定量。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇(0.1%甲酸)和水(0.1%甲酸和2mmol/L乙酸铵),梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,多反应监测模式(MRM)扫描,监测离子对:伊马替尼m/z 494.3→394.1,达沙替尼m/z 488→401,尼洛替尼m/z 530.2→289.2。结果伊马替尼浓度在50～2500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.001 17 X+0.006 17(r=0.999 5);达沙替尼浓度在1～250ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.013 7 X+0.000 435(r=0.999 2);尼洛替尼浓度在50～2 500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=1.1e+0.03 X+1.05e+0.04(r=0.998 5)。日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,相对回收率在90.0%～110.0%。结论该方法前处理简单,检测的特异性及灵敏度高,可适用于CML患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼血药浓度的快速、准确测定。     

液相色谱-串联质谱法检测人血浆中碘帕醇

目的建立一种稳定的检测人血浆碘帕醇的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),并对该方法进行性能评价。方法以氘代同位素作为内标,人血浆样品经直接沉淀法前处理后进样,用XSelect^TM HSS PFP色谱柱进行分离,用含0.1%甲酸-5mmol/L九氟戊酸-10%乙腈的水溶液等度洗脱;正离子电喷雾离子化扫描检测,多反应监测(MRM)扫描分析,建立检测血浆碘帕醇的LC-MS/MS方法。根据CLSI EP10-A和CLSI C62-A,评价该方法的线性范围、正确度、精密度、选择性、基质效应、稳定性。结果 LC-MS/MS检测血浆碘帕醇的线性范围为1～1 000μgI/mL(以含碘量计算);低、中、高浓度(3、50、800μgI/mL)血浆质控品检测结果与理论靶值的偏移为-6.1%～7.5%,重复性以不精密度表示,CV<6.6%(4.6%～6.6%),期间精密度CV<8.5%(6.6%～8.5%),方法回收率为92.5%～95.9%,基质效应为88.8%～95.2%;方法选择性良好,溶血和脂血因素均不影响检测结果。血浆样品在室温下放置最好不要超过48 h,在-80℃下反复冻融不超过2次,经前处理后的血浆样品4℃自动进样器中放置不超过72 h,碘帕醇可稳定检测。结论建立并评价了一种可靠的检测人血浆碘帕醇的LC-MS/MS方法。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中万古霉素的浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血清万古霉素浓度的方法。方法人血清样品用乙腈蛋白沉淀后,通过色谱柱Acquity UPLC~?BEH C18(1.7 μm IVD 2.1 mm×50.0 mm),以流动相(A:含0.1%甲酸的水溶液,B:含0.1%甲酸的甲醇溶液)梯度洗脱,用电喷雾离子源,正离子方式,扫描方式为多反应监测(MRM),用于监测的离子反应为m/z 725.6→144.1(万古霉素)和m/z 1 145.0→100.2(万古霉素杂质C)。考察该方法的专属性、稳定性、精密度与回收率、标准曲线与定量下限、携带污染。结果万古霉素在1.5～60.0 mg/L内线性关系良好(r~2=0.999 2),标准曲线方程为Y=2.12×10~(-1)X+2.29×10~(-3),日内精密度和日间精密度均小于10%,高、中、低3个浓度质控的回收率分别为100.30%、100.28%、95.00%,稳定性均良好。结论该方法专属性好,灵敏度高,操作便捷,可用于人血清中万古霉素血药浓度的测定。     

LC-MS/MS法快速定量人血浆中克拉霉素的浓度

目的建立液相色谱串联质谱法测定人血浆中克拉霉素的浓度。方法选用ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1×50mm,1.7μm)的色谱柱,以含0.1%的甲酸纯水,含0.1%的甲酸95%乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样本经蛋白沉淀及30%乙腈复溶后进样,选用API4000型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果克拉霉素线性范围为4.00～2 000.00ng/mL,定量下限4.00ng/mL。准确度与精密度结果显相对偏差为1.20%～2.90%,低、中、高3个浓度提取回收率平均值均大于100%,基质效应小,稳定性好。结论该方法快速、灵敏、专属性强、重现性好,可用于人体克拉霉素血药浓度的监测及人体药代动力学研究。     

高效液相紫外法测定胰腺炎患者血浆中维生素C浓度

目的建立一种反相高效液相紫外检测法来测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。方法将胰腺炎患者血浆样本经预处理后用反相高效液相色谱（HPLC）仪进行浓度测定。色谱条件为KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇和5％偏磷酸（15：85）,pH=4．0,检测波长为245nm,流速为1．0mL／min。柱温39℃。结果在上述色谱条件下,血浆中的VC得到良好分离,线性范围2．5～500μg/mL,日内差异和日间差异分别为0．22％和0．97％;回收率为98．64％。测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度平均测定值为11．31μg／mL,明显低于健康人测定值23．67μg／mL。结论该方法能更简单、快速、准确、灵敏测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。     

孕妇孕期血清维生素A、D和E的水平变化趋势研究

目的采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)定量检测孕妇孕中期维生素浓度, 探究孕妇孕期血清维生素A、D和E的水平变化趋势。方法纳入2021年10月1日至2022年10月31日武汉大学人民医院产科建档720例孕妇, 年龄(29.7±4.4)岁, 孕期12～22周。采用HPLC-MS/MS测定维生素A、D和E的含量, 统计分析各分组的浓度水平, 并计算缺乏率。结果维生素A、D和E分布范围(95%CI):0.74～2.74 μmol/L、2.88～25.37 ng/ml 和 6.18～35.08 μmol/L, 缺乏率分别为9.30%、93.76%和35.83%, 双胎组的维生素A、D和E水平分别为(1.67±0.51)μmol/L、(13.18±7.44)ng/ml和11.97(8.85, 14.60)μmol/L, 均高于单胎组(1.45±0.36)μmol/L、(10.87±5.26)ng/ml和10.46(6.99, 14.11)μmol/L, 独立样本t检验有统计学意义(P<0.001)。VitD在体重指数较低组(<22 kg/m2)浓度为(12.54±5....     

LC-MS/MS检测血清万古霉素浓度方法的建立及评价

目的建立检测人血清中万古霉素浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法,并与化学发光微粒子免疫法(CMIA)比较方法学性能。方法血清样品经过甲醇沉淀蛋白质,采用安捷伦Poroshell 120EC C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm)梯度洗脱分离,流动相为甲醇(0.1%甲酸)-水(0.1%甲酸),流速为0.5 m L/min,内标采用去甲万古霉素,质谱采用ESI正离子多反应监测扫描模式。用该方法定量检测112例临床服用万古霉素患者血清万古霉素含量,并与临床常用的CMIA所得结果进行比较。结果万古霉素在1~100μg/m L内线性关系良好(r2=0.996 4);方法日内日间精密度、准确度均满足药物定量检测要求,且无基质效应和残留效应。Wilcoxon符号秩和检验结果显示,LC-MS/MS测定结果与CMIA结果比较,差异有统计学意义(P0.05);相关性检验结果显示,两者线性相关性良好,Y=1.06X-0.37(r=0.986)。结论 LC-MS/MS法性能较好,价格优廉,与CMIA法有较好的相关性,且检测在准确度、精密度上优势明显,可用于临床检测万古霉素的血清药物浓度。     

高效液相色谱-串联质谱法检测人血浆中5-羟色胺

目的建立高效、准确的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中5-羟色胺(5-HT)的方法,并应用于临床及科研的生物样本检测。方法该方法采用奥卡西平作为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白,用初始流动相稀释后经Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱进行分离,流动相为0.2%甲酸水-乙腈,梯度洗脱。采用电喷雾离子源(ESI),正离子、多反应监测模式(MRM)进行监测,用于定量分析的离子为质荷比(m/z)177→160。结果 5-HT在10～800ng/mL范围内线性良好(r0.999),定量下限为10.0ng/mL。待测物日内、日间相对标准偏差均小于15%。符合生物样品分析要求。结论本方法适合临床及科研的生物样本中5-HT的快速检测。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度。方法血浆样品用乙腈(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后用二氯甲烷反洗后进行分析。使用Agilent C8(75 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱。流动相:A泵:5 mmol/L醋酸铵(三乙胺调pH值至7.5),B泵:乙腈。线性梯度洗脱,流速0.4 mL/min。采用电喷雾离子源,多反应离子监测。用于定量分析的离子对二甲双胍为130.2/71.1,内标吗啉胍为172.2/60.2。结果线性范围为50～2 000 ng/mL,最低定量限为50 ng/mL,预处理回收率为81.7%～98.0%,二甲双胍的基质效应<9.97%,日内和日间相对标准偏差均<5.2%。结论液相色谱-串联质谱法快速、简便、灵敏度高,是一种适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度研究的方法。