AECOPD患者外周血单个核细胞中miR-128-3p和TLR4表达的相关性及临床意义

目的:研究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA(miR)-128-3p、Toll样受体4(TLR4)表达的相关性及临床意义。方法:选择2020年1月-2022年2月期间在我科住院治疗的122例AECOPD患者作为AECOPD组,在我科门诊就诊的140例稳定期COPD患者作为稳定期COPD组,在我院体检的110例志愿者作为对照组。检测PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平及实验室指标白细胞计数(WBC)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血沉(ESR),评价AECOPD患者的短期预后、结局包括存活和死亡。结果:AECOPD组PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平及WBC、hs-CRP、ESR水平均高于稳定期COPD组和对照组(P<0.05);AECOPD组PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平呈正相关,miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平与WBC、hs-CRP、ESR水平呈正相关;AECOPD组中死亡患者PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA...     

hsa-miR-144在结核性胸膜肥厚患者外周血中的表达及其与炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6的关系

目的探讨结核性胸膜肥厚患者外周血单个核细胞(PBMC)中hsa-miR-144的表达及其与炎性因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6 (IL-6)的关系。方法抽取80例结核性胸膜肥厚患者、80例健康对照者外周血标本,使用Ficoll淋巴细胞分离液提取外周血标本中的PBMC,采用RT-PCR法测定PBMC中的hsa-miR-144表达水平,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血浆中炎性因子IFN-γ、TNF-α、 IL-6表达水平,分析结核性胸膜肥厚患者hsamiR-144与炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6的相关性。结果 RT-PCR检测结果显示,结核性胸膜肥厚组PBMC中的hsamiR-144水平明显高于健康对照组(P<0.01)。ELISA法检测结果显示,结核性胸膜肥厚组血浆炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6均明显高于健康对照组(P<0.05)。spearman相关性分析显示,结核性胸膜肥厚患者外周血PBMC中hsa-miR-144与血浆炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6水平存在相关性(r=0.384,P<0.05;r=0.396,P<0.05;r=0.361,P<0.05)。结论 hsa-miR-144在结核性胸膜肥厚患者外周血中呈高水平表达,且与血浆中炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6呈正相关性,提示该hsa-miR-144可能参与了结核性胸膜肥厚的发生与进展。     

miR-99a对类风湿性关节炎及TH17/Treg细胞的影响

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-99a的表达与辅助性T细胞17(T helper cell 17,T_H17)、调节性T细胞(regulatory cells, Treg)比率失衡的关系。方法收集于我院就诊的RA患者80例,分为活动期RA组(42例)和稳定期RA组(38例),以体检健康者42例作为健康人对照组。流式细胞术测定各组外周血PBMC中T_H17、Treg细胞数;ELISA法检测各组血清IL-17、IL-6、TFN-α、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定T_H17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和FoxP3 mRNA以及RA患者PBMC中miR-99a的表达水平;western blot检测各组RORγt和FoxP3蛋白的表达水平。结果与健康人对照组相比,活动期和稳定期RA患者的T_H17细胞数、RORγt mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高,Treg细胞数及FoxP3 mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低(P均0.01)。活动期RA患者血清IL-17、IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平均显著升高,而IL-4和IL-10的表达水平均显著降低(P均0.01)。此外,活动期RA患者T_H17细胞中miR-99a的表达水平显著升高,Treg细胞中miR-99a的表达水平显著降低(P均0.01)。Pearson相关分析结果显示,RA患者T_H17细胞中miR-99a与RORγt mRNA的表达水平呈正相关(r=0.721,P0.01),Treg细胞中miR-99a与FoxP3 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.815,P0.01)。结论 RA患者T_H17和Treg细胞中miR-99a的表达与T_H17、Treg细胞发育分化关键转录因子RORγt、FoxP3密切相关,miR-99a可能通过影响RORγt和FoxP3,参与RA患者T_H17/Treg细胞比率失衡。     

抑郁症患者血浆miR-155表达和致炎性细胞因子相关性分析

目的探讨抑郁症患者血浆中miR-155的表达水平及IL-2、IL-6、IFN-γ的浓度变化及意义。方法用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)法检测52例抑郁症患者治疗前和治疗8周后血浆miR-155的水平;用ELISA法检测血浆IL-2、IL-6、INF-γ浓度,以40例体检健康者为健康对照。结果抑郁症患者治疗前血浆miR-155水平及IL-2、IL-6、INF-γ浓度明显高于治疗后和健康人对照组(P均<0.01)。治疗前血浆miR-155水平与IL-2、IL-6、INF-γ浓度呈正相关(r分别为0.753,0.639,0.671,P均<0.01)。结论抑郁症患者血浆miR-155的水平较高,且与炎性细胞因子浓度呈正相关,miR-155在抑郁症免疫失衡机制中发挥一定的作用。     

miR-223与脓毒症炎性反应的相关性

目的探讨miR-223与脓毒症炎性反应的相关性及临床意义。方法 187例脓毒症患者,根据28 d生存情况分为生存组132例和死亡组55例,采用实时荧光定量PCR法检测2组患者血浆miR-223相对表达量,采用ELISA法检测2组患者血清C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α、白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平;采用Spearman相关分析脓毒症患者血浆miR-223相对表达量与急性生理学和慢性健康(Acute Physiology and Chronic Health Evaluation Scoring System, APACHE)Ⅱ评分及血清CRP、TNF-α、IL-1β、-6、-8、-10水平的相关性;绘制ROC曲线,评估血浆miR-223相对表达量预测脓毒症患者存活的效能。结果死亡组患者血浆miR-223相对表达量[4.898(2.591,7.327)]明显高于生存组[2.727(1.043,4.017)](P0.05);死亡组患者血清CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平高于生存组(P0.05);脓毒症患者血浆miR-223相对表达量与APCHEⅡ评分(r=0.459,P0.001)、CRP(r=0.326,P0.001)、TNF-α(r=0.325,P0.001)、IL-1β(r=0.165,P=0.024)、IL-6(r=0.229,P=0.002)和IL-8(r=0.154,P=0.035)均呈正相关,与IL-10呈负相关(r=-0.289,P0.001);血浆miR-223相对表达量最佳截断值为3.975时,预测脓毒症患者存活的AUC为0.600(95%CI:0.505～0.695),灵敏度为83.5%,特异度为38.9%。结论血浆miR-223相对表达量与脓毒症患者病情严重程度及炎性反应明显相关,可作为判断脓毒症预后的生物标志物之一。     

隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中microRNA-31表达及相关免疫分子水平研究

目的 探讨隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中micorRNA-31表达情况及与疾病的相关性.方法 收集2007年9月-2012年8月期间,在上海长海医院和上海长征医院确诊的隐球菌脑膜炎患者和同期健康对照各30例,使用密度梯度离心法,分离30例隐球菌脑膜炎患者和30例健康对照外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,采用实时荧光定量PCR检测microRNA-31（miR-31）的表达,并分析其与患者临床特征（血清中IgG,IgA,IgM）和细胞因子（IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-α）的相关性.结果 与健康对照相比,隐球菌脑膜炎患者PBMCs中miR-31表达（0.856±0.231 vs 0.470±0.242）增高,差异有统计学意义（t=6.320,P＜0.001）且与血清IL-4水平正相关（r=0.644,P＜0.001）,与IgG,IFN-γ负相关（r=0.645, 0.671;P值均＜0.001）.结论 提示miR-31可能通过调节炎症性细胞因子的产生,参与了隐球菌脑膜炎的发病机制,这为进一步研究隐球菌脑膜炎患者的表观遗传学调控提供了新的线索.     

隐球菌脑膜炎患者外周血CD200表达水平及其临床意义

目的 分析隐球菌脑膜炎患者外周血CD200的表达水平及其与其他炎性因子水平的关系。方法 选取2009年6月～2013年11月期间上海长海医院和长征医院收治的25例隐球菌脑膜炎患者为研究对象,归为观察组,同时选取同期来体检的30名健康成人作为对照组。收集受试者的外周抗凝血,分离外周单个核细胞(PBMC),采用反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)方法检测PBMC中CD200的mRNA水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测其血浆CD200蛋白水平以及TNF-α,IFN-γ和IL-17的水平,并采用Pearson相关分析探讨CD200与这些炎性因子的相关性。结果 观察组和对照组PBMC的CD200mRNA水平分别为1.73±0.51和1.69±0.47,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组血浆CD200蛋白水平为212.3±70.5 pg/ml,显著高于对照组的90.5±32.2 pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血浆TNF-α,IFN-γ水平显著低于对照组,IL-17水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果提示血浆CD200水平与IFN-γ呈负相关(r=-0.635,P<0.001),与IL-17水平呈正相关(r=0.668,P<0.001)。结论隐球菌脑膜炎患者血浆CD200水平显著升高,其可能通过调节IFN-γ和IL-17等炎性因子水平来影响患者的免疫功能,参与其发病,提示CD200有望成为隐球菌脑病免疫治疗的一个新的靶点。     

早期脓毒症患者NOD样受体1表达与病情严重程度相关研究

目的 通过前瞻性研究探讨早期脓毒症患者外周血单个核细胞中NLRP1炎性体和NLRP3炎性体相关组分的表达和血浆中相关炎症因子的水平,以及各指标的临床价值.方法 脓毒症患者21例,年龄(67.71±17.17)岁;非感染性SIRS患者20例,年龄(61.35±11.82)岁;健康者20例,年龄(60.38 ±5.61)岁.Real-time PCR检测炎性体复合物各组分以及相关炎症因子mRNA表达水平,ELISA检测血浆IL-1β和IL-18质量浓度.统计方法使用单因素方差分析和Spearman相关性分析.结果 ①NLRP1在早期脓毒症患者和非感染性SIRS患者外周血单个核细胞(PBMC)中的mRNA表达均较健康对照组明显降低(P＜0.01),NLRP3在脓毒症患者PBMC中表达与健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05),但其在非感染性SIRS组的表达较脓毒症组和健康对照组明显升高(P ＜0.01);IL-1β在3组人群PBMC中的mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05),IL-18在脓毒症组和非感染性SIRS组中的表达均较健康对照组增高(P＜0.01),其中非感染性SIRS组IL-18表达水平最高.②脓毒症患者血浆中IL-1β的蛋白水平较健康对照组低(P＜0.05),IL-18水平较健康对照组和非感染性SIRS组显著升高(P＜0.01);③NLRP1与SOFA评分呈负相关性(r=-0.44,P＜0.05);与APACHEⅡ评分也具有负相关性(r=-0.52,P＜0.05).结论 NLRP1在早期脓毒症患者PBMC中表达明显降低,且其水平与患者病情严重程度呈负相关,NLRP1水平越低病情越严重.     

慢性乙肝患者外周血PBMC凋亡相关因子和Th1/Th2型细胞因子的水平变化及意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡相关因子和Th1/Th2型细胞因子水平变化及意义。方法前瞻性选取2017年1月至2017年12月在航空工业三六三医院治疗的慢性乙型肝炎患者102例,其中轻度32例,中度40例,重度30例,健康志愿者40例作为对照组。检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、Caspase-8、Caspase-3、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-10和干扰素-γ(IFN-γ)水平。记录慢性乙型肝炎患者HBV DNA定量检测结果,分析HBV DNA与各指标相关性。结果轻度组、中度组和重度组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3水平明显高于对照组(P 0. 05),其中轻度组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3明显高于中度组和重度组(P 0. 05);轻度组、中度组和重度组IL-2和IFN-γ水平明显低于对照组(P 0. 05),而IL-4和IL-10明显高于对照组(P 0. 05),其中轻度组IL-2和IFN-γ也明显高于中度组和重度组(P 0. 05),而IL-4和IL-10则明显低于中度组和重度组(P 0. 05);病毒载量与Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、IL-2和IFN-γ呈正相关(r=0. 370,r=0. 364,r=0. 355,r=0. 341和r=0. 360,P 0. 05),与IL-4、IL-10呈负相关(r=-0. 411,r=-0. 403,P 0. 05)。结论慢性乙肝患者外周血PBMC凋亡增强,Th1/Th2免疫调节紊乱,可能在疾病发生发展中起一定作用,且与病毒载量有一定相关性。     

新生儿缺氧缺血性脑病患儿血液中血管内皮生长因子和miR-125b表达水平及相关性研究

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和miR-125b在新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)患儿和正常新生儿血液中表达水平及相关性。方法:收集20例正常新生儿和20例HIE患儿血液标本,分离血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),利用real-time PCR检测PBMC中miR-125b表达,ELISA方法检测血浆中VEGF含量。结果:与正常对照组相比,HIE患儿PBMC中miR-125b表达显著降低(P=0.00002),而血浆中VEGF水平显著升高(P=6.26×10–8);同时在正常组中,miR-125b表达与VEGF水平无相关性(r=0.016,P=0.946,n=20),但在HIE组(r=–0.505,P=0.023,n=20)二者却呈显著负相关。结论:新生儿脑缺血缺氧时可能通过降低miR-125b表达从而升高VEGF表达。     

稳定期COPD患者血清miR-181a与炎性因子的关系及对急性加重和死亡的预测价值

目的:研究稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清miR-181a与炎性因子的关系及对急性加重和死亡的预测价值。方法:选择2016-09—2018-06期间在我院就诊的120例稳定期COPD患者作为研究的稳定期COPD组,同期体检且一般资料匹配的80例健康志愿者作为研究的对照组。检测血清miR-181a的表达量及炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-8)的含量,随访患者急性加重及死亡情况。采用ROC曲线分析miR-181a对急性加重及死亡的预测价值,采用Kaplan-Meier曲线分析miR-181a低表达及高表达患者急性加重及死亡的差异。结果:稳定期COPD组患者血清miR-181a的表达量明显低于对照组,血清TNF-α、IL-6、IL-8的含量明显高于对照组(P0.05);稳定期COPD患者血清miR-181a表达量与TNF-α、IL-6、IL-8含量均呈负相关,相关系数分别为-0.726、-0.413、-0.323(P0.05);与miR-181高表达稳定期COPD患者比较,miR-181低表达稳定期COPD患者第一次急性加重的中位时间、生存的中位时间均明显缩短(P0.05);miR-181a预测稳定期COPD患者急性加重的最佳截点为0.575,预测稳定期COPD患者死亡的最佳截点为0.480。结论:稳定期COPD患者血清miR-181a减少与炎性因子释放增多有关且对急性加重和死亡均具有一定的预测价值。     

慢性阻塞性肺疾病患者miR-21表达与IL-12水平关系探讨

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞miR-21表达和血清IL-12水平的关系。方法 选取COPD患者共80例,对照组50例为健康人群,通过实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞miR-21表达,酶联免疫吸附法检测血清IL-12水平。结果 COPD稳定期组、急性期组和对照组间血糖、胆固醇和三酰甘油水平差异均无统计学意义(F=0.341～1.542,均P>0.05),而miR-21表达和IL-12水平比较差异有统计学意义(F=8.951～15.017,均P<0.05)。COPD稳定期组和急性期组miR-21表达和IL-12水平均比对照组高,差异有统计学意义(t=10.501～25.612,均P<0.05)。COPD急性期组比稳定期组miR-21表达和IL-12水平高,且差异有统计学意义(t=13.298～36.415,均P<0.05)。IL-12和miR-21存在显著的正相关(r=0.381～0.496,均P<0.05)。结论 miR-21可能参与调控IL-12的水平,miR-21表达与COPD的发病机制相关。     

CD36在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达升高及其临床意义

目的探究CD36在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达水平及其临床意义。方法以2013年9月~2017年2月于上海长海医院和长征医院确诊的36例隐球菌脑膜炎患者外周血为实验组,以同期体检的36例健康者外周血作为对照组,采用密度梯度离心法进行PBMCs的分离,以qRT-PCR法检测PBMCs中CD36,TLR4的相对mRNA表达水平,以ELISA法检测血浆中TNF-α等细胞因子的表达水平,实验组与对照组检测值的比较采用两独立样本t检验,对实验组PBMCs中CD36的mRNA相对表达水平与TNF-α等细胞因子进行Pearson相关性分析。结果实验组PBMCs中CD36的mRNA相对表达水平为2.01±0.63,对照组为1.49±0.47,两组比较差异具有统计学意义(t=3.969,P=0.000 2)。Pearson分析结果显示实验组CD36与血浆中IFN-γ蛋白表达水平呈正相关(r=0.384,P0.05),与TGF-β呈负相关(r=-0.487,P0.005)。结论 CD36可能通过影响IFN-γ,TGF-β等因子的表达参与隐球菌脑膜炎的免疫病理过程,是该病监测和治疗潜在的靶点。     

血浆HMGB1、IFN-γ、IL-4和CD4~+T细胞表面TLR4的表达在免疫性血小板减少症患者中的意义

目的:探讨血浆HMGB1、IFN-γ、IL-4和CD4~+T细胞表面TLR4的表达对免疫性血小板减少症(ITP)的影响。方法:选取我院2014年10月至2015年10月确诊为ITP的患者25例,同时选取健康人20例为对照组;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组血浆HMGB1、IFN-γ和IL-4的水平;流式细胞术检测CD4~+T细胞表面TLR4的表达水平;分析不同参数之间的关系。结果:ITP组治疗前血浆HMGB1水平显著高于对照组(t=4.259,P0.01),治疗后降低至接近对照组(t=1.267,P0.05);ITP组治疗前、后血浆IFN-γ检测值与对照组差异均无统计学意义(P0.05,P0.05);ITP组治疗前血浆IL-4水平非常显著低于对照组(t=5.708,P0.01),治疗后明显高于对照组(t=2.107,P=0.01);ITP组治疗前血浆IFN-γ/IL-4比值非常显著高于对照组(t=5.436,P0.01),治疗后显著降低且略低于对照组;ITP组治疗前后TLR4表达均非常显著低于正常对照组(P0.01);ITP患者HMGB1水平与CD3~+的含量呈正比(r=0.824,P0.01),与CD4~+的含量无明显关系(r=0.074,P0.05),与CD8~+的含量呈正比(r=0.844,P0.01),与IL-4的含量呈正比(r=0.784,P0.01),与IFN-γ的含量呈反比(r=-0.814,P0.01),与IFN-γ/IL-4比值呈反比(r=-0.887,P0.01),与TLR4表达水平呈正比(r=0.772,P0.01)。结论:ITP患者HMGB1和TLR4的表达水平较高,临床治疗可以通过靶向控制其表达,以缓解病情并达到治疗目的。     

老年AECOPD患者痰培养结果与外周血单个核细胞miR-125b、miR-133、miR-146a的相关性研究

目的 观察老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者痰培养结果与外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-125b、miR-133、miR-146a的相关性。方法 回顾性选取2021年1月至12月在江苏东南大学附属南京同仁医院收治的79例老年AECOPD患者为AECOPD组,根据痰培养结果分为阳性组(n=39)和阴性组(n=40);另选取同期在该院收治的43例老年COPD稳定期患者作为COPD稳定组。检测PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a相对表达量与血清中炎症相关指标[降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,分析各组间指标差异,并采用Spearman相关性分析AECOPD患者PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a与血清炎症指标的相关性。结果 AECOPD组患者PBMC中miR-125b相对表达量、血清PCT、TNF-α、IL-6水平为0.87、0.38 ng/mL、41.98μg/L、250.01 pg/mL,高于COPD稳定组(0.49、0.05 ng/mL、21.16μg/...     

老年慢性阻塞性肺疾病患者血浆白细胞介素与干扰素-γ水平的相关性

目的:探讨老年慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydis-ease,COPD)患者血浆白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、IL-16,IL-4与干扰素-γ水平的相关性。方法:老年COPD患者共73例(重度21例,中度21例,轻度31例),正常对照31例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验。检测其血浆IL-18,IL-16,IL-4,干扰素-γ水平。结果:①COPD患者(重、中、轻)急性期血浆IL-18水平(ng/L)分别为409.35±80.30,243.08±81.16,237.29±89.23,均明显高于对照组(139.40±43.74),差异有显著性意义(t=3.91,3.03,2.88,P均<0.01);IL-4水平分别为1.75±0.73,2.03±1.23,2.01±0.99,均明显低于对照组(3.08±1.25),差异有显著性意义(t=-4.78,-2.99,-3.68,P均<0.01);重度、中度组IL-16水平犤(270.60±90.78),(235.48±90.17)犦、干扰素-γ水平(ng/L)犤(11.05±4.55),(2.11±1.33)犦分别显著高于对照组犤(126.73±57.64),(1.03±0.51)犦,差异有显著性意义(t=6.95,6.17,10.05,3.71,P均<0.01)。②治疗后,各组(重、中、轻)缓解期血浆IL-18,IL-16、干扰素-γ水平均明显减低,差异有显著性意义(t=2.03～10.29,P均<0.01);重、轻度患者IL-4水平明显升高,差异有显著性意义(t=-5.86,-3.52,P均<0.01)。③急性期血浆中IL-18,IL-16,干扰素-γ水平之     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

慢性心力衰竭患者外周血单个核细胞miR-590表达与左心室重构和炎性反应的关系

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血单个核细胞(PBMC)miR-590相对表达水平与左心室重构和炎性反应的关系。方法选取2018年4月至2019年1月于该院就诊的CHF患者134例作为研究组,另选取同期该院的69例健康志愿者作为对照组,比较两组PBMC miR-590相对表达水平,以及不同纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级的CHF患者的炎症指标[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)]、左心室重构指标[左室舒张末期容积(EDV)、左室收缩末期容积(ESV)、平均室壁应力(MWS)、左室质量指数(LVMI)]的差异。结果研究组患者PBMC中miR-590相对表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);研究组NYHA心功能分级Ⅳ级的患者PBMC中miR-590相对表达水平低于Ⅱ～Ⅲ级患者(P0.05)。经Pearson相关分析,研究组患者PBMC中miR-590相对表达水平与血清IL-6、TNF-α、hs-CRP、EDV、ESV、LVMI、MWS呈负相关(P0.05)。经多元线性回归分析,PBMC中miR-590相对表达水平与EDV、ESV、LVMI、MWS均呈独立负相关(P0.05)。结论对于CHF患者,PBMC中miR-590相对表达水平降低在一定程度上可以反映不良左心室重构,这可能与miR-590参与炎性反应调节有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞IFN-γ、IL-6水平变化与拉米夫定疗效的关系

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者拉米夫定治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)产生干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)水平与血清乙型肝炎病毒(HBV)载量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测拉米夫定治疗前后的CHB患者HBV DNA和PBMC经植物血凝素(PHA)刺激后分泌IFN-γ和IL-6的水平。结果CHB患者治疗前PBMC分泌IFN-γ水平显著低于正常对照组(P<0.01),分泌IL-6水平显著高于正常对照组(P<0.01);拉米夫定治疗后HBV高、中载量组分泌IFN-γ较治疗前显著升高(分别为P<0.01和P<0.05),分泌IL-6水平较治疗前显著降低(分别为P<0.01和P<0.05),治疗后中、低载量组分泌IFN-γ水平仍低于正常对照组(P<0.01),中、低载量组分泌IL-6的水平高于正常对照组(P<0.01);患者INF-γ水平变化与HBV DNA载量呈负相关(r=0.89,P<0.001),IL-6水平变化与HBV DNA载量和ALT呈正相关(分别为r=0.92,P<0.001;r=0.74,P<0.001)。结论CHB患者PBMC分泌IFNγ-、IL-6水平可作为判断拉米夫定治疗效果的参考指标。     

子宫颈癌患者Treg及Th细胞因子测定的临床意义

目的研究调节性T细胞(Treg)与Th细胞因子IFN-γ、IL-4在子宫颈癌患者外周血中的表达水平,探讨其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的宫颈疾病之间的关联。方法应用流式细胞及酶联免疫吸附技术检测40例子宫颈癌、35例宫颈上皮内瘤变(CIN)、20例宫颈炎患者及20例健康对照组外周血中Treg及IFN-γ、IL-4的水平;统计观察Treg与IFN-γ及IL-4水平的相关性。结果子宫颈癌组Treg的水平显著高于健康对照组、宫颈炎组及CIN组,差异有统计学意义(P0.05)。子宫颈癌患者血清中IFN-γ水平明显低于健康对照组及宫颈炎组(P0.05)。子宫颈癌患者血清中IL-4水平明显高于健康对照组、宫颈炎组及CIN组(P0.05)。Treg的水平与IFN-γ的水平呈负相关关系(r=-0.291,P0.05);而与IL-4水平呈正相关关系(r=0.383,P0.05)。结论 Treg的高水平以及Th细胞因子失衡可能在子宫颈癌患者免疫耐受以及子宫颈癌前病变进展至子宫颈癌的过程中发挥重要的作用;Treg与IFN-γ及IL-4存在相关性,Treg与Th细胞因子IFN-γ及IL-4可能共同参与了子宫颈癌的发病机制。